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PRUEBA CON NINHIDRINA.

Al agregar 2 gotas de ninhidrina a cada uno de los tubos de ensayo que


contenían 0,5mL de la solución de proteína, se pudo observar que cada una de
ellas reaccionó de forma diferente al entrar en contacto con la ninhidrina y produjo
una variación de color en cada una de estas como se puede observar en la tabla
1(Resultados de las pruebas de coloración). Debido a que la ninhidrina y el
NaNO3 son reactivos que por medio de calorimetría reaccionan con las proteínas y
los aminoácidos formando soluciones de tonalidades violetas.
Todas aquellas sustancias que presentan al menos un grupo amino y uno
carboxilo libre, reaccionaran con la ninhidrina. La ninhidrina reacciona rápidamente
con el grupo amino, lo oxida y libera amonio el cual se condensa con la ninhidrina
reducida, y con otra molécula de ninhidrina libre, para producir un aducto
(producto formado por la unión de dos moléculas) púrpura de Ruhemann.
Al observar los resultados obtenidos se puede notar que las pruebas que en este
caso dieron positivas ante la presencia de aminoácidos libres fueron la albúmina
de huevo, gelatina y la histidina ya que estas se tornaron de color azul con
tendencia a morado y violeta respectivamente. Esto se debe a que la albúmina
huevo es rica en sisteína, metionina y presenta grupos sulfihidrilo, la cual está
constituida por alrededor de 585 aminoácidos con 17 puentes disulfuro, la
concentración de estos aminoácidos en la albúmina de huevo hace que al
encontrarse en presencia de ninhidrina se torne de un color azul con tendencia a
morado además de que en su estructura presenta más de un grupo amino y
carboxilo libre.

Estructura química de la albúmina.


Además de la albúmina de huevo, otra sustancia que presentó positividad en el
momento de entrar en contacto con la ninhidrina fue la gelatina, esto se debe a
que al ser una proteína compleja con gran presencia de aminoácidos y poseer un
carácter anfótero, asociado con la presencia de los grupos amino y carboxílicos en
los aminoácidos hace que la reacción con la ninhidrina sea positiva. Otra de las
sustancias que dio una respuesta positiva al estar en presencia de ninhidrina fue
la histidina, esto se debe a que su cadena lateral está cargada positivamente, este
aminoácido esencial presenta una gran concentración de aminoácidos libres y
como se puede observar en su estructura contiene un grupo amino y carboxilo lo
cual permite la reacción positiva con la ninhidrina dando así un color violeta fuerte
más que la presentada en la gelatina y el huevo, esto quiere decir que es este el
que contiene mayor presencia de aminoácidos libres.

ESTRUCTURA HISTIDINA.

Siguiendo con las observaciones se puede detallar que la urea y el agua no


presentan ningún aminoácido libre ya que estos dos compuestos no cambiaron de
color en el momento de entrar en contacto con la ninhidrina. Además la
fenilalanina, asparagina, glicina, muestra problema y el triptófano tampoco
reaccionaron positivamente ante la presencia de ninhidrina ya que presentaron un
cambio a color a café en diferentes tonalidades, esto indica la poca concentración
de los aminoácidos libres en las estructuras moleculares de estos compuestos.

Finalmente se puede decir que la reacción con ninhidrina identifica compuestos


que contengan grupo alfa amino libres y es una de las reacciones más sensibles
para identificar aminoacidos en general, ya que detecta una parte de aminoacido
en 500 000 partes de agua.

BIBLIOGRAFÍA.

 Armstrong, F Bioquímica. Editorial Reverte, S.A. Barcelona España. 1982.


 Feeney, R.E. Egg Proteins, en "Symposium on Foods: Proteins and Their
Reactions". Ed. Schultz, H.D.; Anglemeier, A.F (1964).
 Aspinall, Gerald O. (2004). The polysaccharides. Academic Press.
 LEHNINGER: PRINCIPIOS DE BIOQUÍMICA / David L. Nelson y Michael
M. Cox - 5ª edición - Barcelona: Ediciones Omega 2009. Traducido por: Claudi M.
Cuchillo
  E. Kaiser, R. L. Colescott, C. D. Bossinger, P. I. Cook, Analytical
Biochemistry 34 595 (1970)

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