PLANTEL SALAMANCA

MANUAL DE PRCTICAS

BIOQUMICA

SEXTO SEMESTRE
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NDICE DE PRCTICAS

I. Determinacin de pH.

II. Propiedades Qumicas de los Carbohidratos.

III. Prueba con anilina.

IV. Solubilidad de lpidos.

V. Obtencin de los lquidos a partir del aguacate.

VI. Hidrlisis Enzimtica de lpidos.

VII. Acidez de lpidos.

VIII. Propiedades qumicas de las protenas.

IX. Desnaturalizacin de protenas de huevo.

X. Protenas de la leche.

XI. Aislamiento de una protena.

XII. Catalasa (Enzima del hgado).

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PRACTICA 1: DETERMINACIN DE pH

OBJETIVO

Conocer el pH de ciertas sustancias conocidas.

Aprender el uso del papel indicador de pH y el pontecimetro.

INTRODUCION

El pH es la medida de acidez y la alcalinidad de una solucin en una escala de 0 a 14. Una solucin neutra es
igual al pH fisiolgico de 7. El pH cido es de 0.0 a 6.9, el alcalino es de 7.1 a 14.

MATERIAL REACTIVOS
5 Vasos de precipitados de 100 ml X Fruta (naranja, limn, mandarina, pltano, etc.)
1 Mortero con pistilo X Leche
1 Espatula X Caf
1 Agitador X Agua
1 Pizeta X Verduras (jitomate, tomate, calabaza, etc.)
Papel indicador universal X Huevo
X 1 Estilete (Lanceta) X Refresco
EQUIPO
Potenciometro

PROCEDIMIENTO

1. Lavar el material.
2. Exprime y/o muele en un mortero las diversas sustancias.
3. Mide el pH con el papel indicador; a los lquidos con el medidor de pH
4. Realiza un cuadro comparativo de pH, indicando del menor al mayor.

OBSERVACIONES Y RESULTADOS

I. Realiza un cuadro comparativo

CUESTIONARIO

1. Qu entiendes por pH?

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2. Qu utilidad le encuentras al pH?

3. Qu relacin tiene el pH con el cuerpo humano?

4. Por qu el pH del huevo es diferente en la yema de y en la clara?

5. Qu importancia tienen las soluciones amortiguadoras en los seres vivos?

CONCLUSIONES

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PRACTICA 2: PROPIEDADES QUMICAS DE LOS CARBOHIDRATOS

OBJETIVO

Comparar las diversas propiedades qumicas de distintos carbohidratos por medio de pruebas sencillas.

INTRODUCCIN

Los Carbohidratos existen en abundancia en los reinos animal y vegetal como azcares, almidones y celulosa;
a estas sustancias se les conoce con el nombre de Hidratos de Carbono o Carbohidratos. De a cuerdo con su
composicin, tienen en la formula general CnH2nOn.

Se clasifican como monosacridos, disacridos y polisacridos en trminos generales. Los monosacridos,

atendiendo a la funcin qumica caracterstica de cada compuesto, se dividen en polihroxialdehdos y
polihidroxicetonas. Los disacridos y polisacridos, por hidrlisis, producen monosacridos.

MATERIAL REACTIVOS
20 Tubos de ensayo 21 ml de NaOH (Hidrxido de Sodio 10%)
1 Gradilla 5 ml de H2SO4 (cido Sulfrico concentrado)
1 Pinzas para tubo de ensayo 10 ml de AgNO3 (Nitrato de Plata 5%)
1 Pipeta de 5 ml 5 ml de NH4OH (Hidrxido de Amonio)
1 Perilla 5 ml de Reactivo de Fehling A y 6 ml de Fehling B
1 Vaso de precipitados de 100 ml 5 ml del Reactivo de Benedict
1 Pizeta Carbohidratos: Lactosa, Dextrosa, Maltosa,
1 Esptula X Almidn y Azcar
1 Agitador EQUIPO
Bao Mara

PROCEDIMIENTO

Prueba 1:

En un tubo de ensayo haga una mezcla de 0.5 gramos (aproximado) del carbohidrato y 4 ml de NaOH al 10%,
llevar a ebullicin observando que ocurre desde el principio. Realizar el procedimiento para cada carbohidrato.

Prueba 2:

En un tubo de ensayo introduzca 0.5 g del carbohidrato y agregar 1 ml de H2SO4 concentrado; espere unos
minutos. A veces es necesario calentar un poco (sin llegar a ebullicin). Anote los cambios que se producen,
as mismo los gases que se desprenden. Realizar el procedimiento para cada carbohidrato.

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Prueba 3:

En un tubo colocar 0.5 gramos del carbohidrato. Aadir 2 ml de AgNO3 y 2 gotas (aproximado) de NaOH,
observar. A continuacin agrega, gota a gota, NH4OH hasta disolucin del precipitado, colocar a Bao Mara a
60C durante 5 minutos aproximadamente. RESULTADO POSITIVO: cuando aparece un espejo en el fondo
del tubo con la solucin.

Prueba 4:

En 5 tubos de ensayo colocar 0.5 gramos de los carbohidratos y aade 1 ml de solucin de Benedict a cada
tubo. Agitar y colocar los tubos al mismo tiempo en Bao Mara durante 3 minutos. Enfra la solucin y haz
comparaciones. Obsrvese el precipitado formado. Un cambio de color no indica reaccin positiva, slo la
formacin del precipitado.

Prueba 5:

Colocar en un tubo de ensayo 0.5 gramos de carbohidratos. Aade 1ml del reactivo de Fehling A y 1 ml del
reactivo Fehling B. Mezcle bien y ponlo a bao Mara durante cierto tiempo. Si cambia a marrn o rojo, la
prueba es positiva. Esta prueba es una reaccin de xido- reduccin; los alcoholes del azcar se oxidan a
aldehdos y cidos, el cobre se reduce a de cprico a cuproso. Por eso cambia de color la solucin y se forma
el precipitado. Realizar el procedimiento para cada carbohidrato.

CUESTIONARIO

1.- Qu caractersticas se observa en los carbohidratos en la prueba 2?

2.- Cul de los carbohidratos presenta el espejo en la prueba 3?

3.- Cul es el azcar reductor?

4.- Cules son las diferencias que existen entre los diferentes carbohidratos?

________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES

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PRACTICA 3: PRUEBA CON ANILINA

OBJETIVO

Conocer la reaccin de los carbohidratos con anilina.

INTRODUCCIN

Est prueba sirve para diferenciar las pentosas y las hexosas de los cidos urnicos. Por deshidratacin, las
pentosas forman furfural, que reaccionan primero con una molcula de anilina dando un compuesto que es
una base de Schiff de poco color. Con otra molcula de anilina, se parte el ciclo del furano dando un
compuesto que por tener doble enlace conjugado, tiene un color rojizo intenso. Dando tambin la prueba
positiva los poliscaridos que por hidrlisis dan pentosas.

MATERIAL REACTIVOS
5 Tubos de ensayo 1 Pizeta 15 ml de cido actico glacial
1 gradilla 1 Agitador 3 ml de Anilina
X Carbohidratos (Sacarosa,
1 pipeta de 10ml 1 Esptula Dextrosa, Maltosa, lactosa y
Fructosa)
1 perilla Bao Mara

PROCEDIMIENTO

1. Coloca 0.5 gramos (aproximadamente) del carbohidrato en el tubo de ensayo y agrega 2 partes de
agua destilada. Repite la operacin con los otros carbohidratos.
2. Colocar 1 ml de cido actico glacial a cada tubo y agitar.
3. Aade 2 ml ms de cido actico glacial y 3 gotas de anilina. Agitar.
4. Calienta a Bao Mara por 1 minuto a 105C. La coloracin roja es positiva.
5. Esta prueba la dan positiva las pentosas, puede servir para diferenciar la pentosa de cidos urnicos.

OBSERVACIONES Y RESULTADOS

CUESTIONARIO

1. Para qu sirve la anilina?

________________________________________________________________________________________
2. Qu entiendes por deshidratacin?

3.- Qu entiendes por enlace doble conjugado?

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PRCTICA 4: SOLUBILIDAD DE LPIDOS

OBJETIVO

Conocer la solubilidad de algunos lpidos.

INTRODUCCIN

Los lpidos se caracterizan por ser solubles en agua y solubles en solventes orgnicos, con altas temperaturas
en bao mara.
MATERIAL REACTIVOS
9 Tubos de ensayo 6 ml de Alcohol etlico
1 Pipeta de 5 ml 6 ml de Cloroformo
1 Perilla de 3 vas 6 ml de Alcohol isoproplico
1 Gradilla X 3 distintas muestras de grasas
1 Agitador EQUIPOS
1 Esptula 1 Bao Mara
NOTA: Se puede sustituir por amoniaco si no existe algn reactivo.

PROCEDIMIENTO

1. Etiqueta los tubos de 1 al 3. Te deben quedar 3 series.

2. Coloca en los diferentes tubos de ensayo 0.5 ml de aceite o grasa de cada una de las muestras que
trajiste.
3. Aade a cada tubo 1 ml de cada solvente de los indicados arriba.
4. Coloca los tubos de ensayo en el bao Mara. NOTA. Los solventes son altamente inflamables, por lo que
debes de tener cuidado de nunca acercarlos al fuego.
5. Repite el paso 2 y 3 en fro.

OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES

CUESTIONARIO

1. Cul solvente result mejor?

2. Qu es un solvente?

3. Qu importancia tiene sta prctica en bioqumica?

CONCLUSIONES

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PRACTICA 5: OBTENCIN DE LOS LPIDOS A PARTIR DE

DEL AGUACATE

OBJETIVO

Obtener lpidos a partir de la yema de huevo.

INTRODUCCIN

Los lpidos son sustancias que contienen en su estructura un cido graso y se encuentran en animales
vegetales y animales principalmente; en la yema de huevo se encuentran presentes en pequeas cantidades.

MATERIAL: REACTIVOS:
3 Vasos de precipitado de 100 ml 5 ml de Alcohol etlico
1 Varilla de vidrio 5 ml de ter etlico
1 embudo 5 ml de ter - alcohol (3:1)
1 Papel Filtro X Aguacate
1 Esptula
1 Pipeta de 5ml
1 Perilla

PROCEDIMIENTO

1. Coloqu el contenido de un aguacate sin cscara en un vaso de precipitados y agite hasta su

homogeneizacin.
2. Coloca 2 g del aguacate en un vaso de precipitado.
3. Aade 5 ml de alcohol etlico y 5 ml de ter.
4. Agitar aproximadamente 1 minuto.
5. Dejar reposar la mezcla 10 minutos y filtrar.
6. Lava con 5 ml de ter-alcohol.

OBSERVACIONES Y RESULTADOS

CUESTIONARIO

1. Qu lpidos contiene la yema de huevo?

________________________________________________________________________________________

2. Investiga la estructura del colesterol, qu tipo de lpido es, las funciones que tiene el organismo, los
problemas de salud que ocasiona y de qu alimentos se obtiene?
________________________________________________________________________________________

3. Importancia de la prctica en Bioqumica.

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PRACTICA 6: HIDRLISIS ENZIMTICA DE LPIDOS

OBJETIVO

Seguir la secuencia de hidrlisis de una grasa a travs de una titulacin.

INTRODUCCIN

Las lipasas y las esterasas catalizan la hidrlisis de los enlaces ster que se encuentran en gran nmero de
lpidos saponificables.

Estas enzimas estn ampliamente distribuidas en la naturaleza y son especialmente importantes en el tracto
digestivo donde ellas funcionan en la digestin y absorcin de grasas. Debido a que las grasas no son
solubles en agua las enzimas deben actuar en la interfase del lquido y agua.

MATERIAL REACTIVOS
4 Matraces Erlenmeyer 125 ml 5 ml de pancreatina al 1%
1 Bureta de 25 ml 50 ml de KOH 0.05N (Hidrxido de potasio)
1 Pinzas para bureta 1 ml de Fenolftalena
1 Soporte universal X 25 ml de alcohol al 96%
1 Pipeta de 5 ml y perilla X Leche homogenizada
1 Vaso de precipitados 100 ml
1 Vidrio de reloj EQUIPOS
1 Agitador Bao mara
1 Esptula
1 Pizeta
1 Termmetro (inmersin parcial)
1 Matraz vol. De 50 ml.

PROCEDIMIENTO

1. Colocar 5 ml de leche en cada uno de los 3 matraces. Adiciona a cada matraz 1.5 ml de pancreatina al 1%
y coloca a bao mara a 37C.
2. Despus de 15 minutos quita el primer matraz del bao mara y adicinele 12.5 ml de alcohol. Titula
enseguida con KOH 0.05N y 3 gotas de fenolftalena.
3. Agitar vigorosamente durante la titulacin, ya que la protena precipitada puede enmascarar los cidos
grasos al titular.
4. Debido a que la digestin por la lipasa contina durante la titulacin, una vez que se ha titulado el matraz a
los 15 minutos, haz lo mismo con los otros matraces siguiendo los tiempos siguientes; 30 y 45 minutos.
5. Prepara un testigo de la siguiente manera: Coloca en un matraz 5 ml de leche ms 1.5 ml de pancreatina
hervida previamente durante 3 minutos. Agregar enseguida 12.5 ml de alcohol, 3 gotas de fenolftalena y

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titular, inmediatamente con KOH 0.05N. Restar el valor del gasto en este blanco o las correspondientes
muestras.

OBSERVACIONES

RESULTADOS

Construir una grfica, usando el tiempo de hidrlisis en las abscisas contra gasto corregido de KOH en las
ordenadas.

CUESTIONARIO

1. Qu efecto tuvo la pancreatina sobre lpidos?

________________________________________________________________________________________

2. Por qu los lpidos se pueden titular?

3. Por qu es necesario que la temperatura se regule?

CONCLUSIONES

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PRACTICA 7: ACIDEZ EN LPIDOS

OBJETIVO

Comparar un aceite nuevo con otro rancio, esto de acuerdo a los cidos grasos presentes.

INTRODUCCIN

Se define como el nmero de miligramos de hidrxido de potasio necesario para neutralizar los cidos libres
de un gramo de grasa o lpido. Viene dado por la frmula:
I.A. = n X 28
P
Donde: n= No. de ml de solucin 0.5N de KOH.
P= Peso de la muestra
I.A. = ndice de acidez

En las grasas, la acidez se debe a la hidrlisis que tuvo lugar por distintos mecanismos. Este factor permite
una medicin cuantitativa de la rancidez de una grasa.
MATERIAL: REACTIVOS:
1 Probeta de100 ml 50 ml de KOH (Hidrxido de potasio)
1 Bureta de 25 ml 1 ml de fenolftalena
2 Matraz Erlenmeyer de 250 ml X 100 ml de alcohol etlico
1 Soporte universal X Aceite de olivo
1 pinzas para bureta X Aceite Rancio
1 Matraz aforado de 25ml
1 Vidrio de reloj EQUIPOS
1 Esptula Bao mara
1 Pizeta
1 Agitador
1 Vaso de precipitados de 100ml
1 Pipeta de 5 ml y perilla

PROCEDIMIENTO
1. Colocar 5 ml de aceite de olivo en buen estado en un matraz erlenmeyer.
2. Aadir 80 ml de alcohol etlico al 95%, caliente y neutralizarlo.
3. Mezclar perfectamente a que grasa se disuelva y aadir 10 gotas de fenolftalena.
4. Titular con solucin acuosa de KOH 0.5N, hasta que el color rosa persista 30 segundos.

OBSERVACIONES Y RESULTADOS

CUESTIONARIO

1.- Por qu hay ms cidos grasos en una muestra rancia que en una muestra normal?
________________________________________________________________________________________
2.- Reportar la diferencia encontrada en el aceite de olivo nuevo y en el rancio.

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PRACTICA 8: PROPIEDADES QUMICAS DE LAS PROTENAS

OBJETIVO

Observar detalladamente la formacin de precipitados y el cambio de color de diferentes soluciones proteicas

con la presencia de diferentes reactivos.

INTRODUCCIN

Las protenas son componentes indispensables de las clulas tanto animales como vegetales. Qumicamente
estn conformadas por C, H, O Y N adems pueden contener S, P y otros elementos. Son de peso molecular
alto y por hidrlisis dan aminocidos.

Las protenas dan reacciones coloridas con algunos reactivos; stos colores no son especficos de las
protenas sino de algunos aminocidos que las constituyen. Forman precipitados con las sales de los metales
pesados, con la formacin de complejos y en parte a las propiedades de las protenas. Las protenas son
sustancias anfteras por combinarse tanto con cidos como con bases. Algunas son coagulables por el calor,
presencia de cidos o etanol.

MATERIAL REACTIVOS
20 Tubos de ensayo 20 ml HNO3 (cido Ntrico concentrado)
1 gradilla Reactivos proteicos:
1 vaso de precipitados de 100 ml 5 g de Peptona
1 Pipeta 10 ml 5 g de polipeptona
1 Pinzas para tubo 5 g de albmina de huevo
1 vidrio de reloj X 5 g de harina de pescado
1 Esptula 50 ml de sol. NaOH al 25%
1 Pizeta 10 ml de sol. De Biuret
1 Perilla 5 g de Sulfato de amonio (NH4)2SO4
X 50 ml de alcohol etlico
10 ml de Reactivo de milln
EQUIPOS
Bao Mara

PROCEDIMIENTO

1. REACCION XANTOPROTEICA. Es positiva para aminocidos aromticos como fenilalanina, tirosina,

triptfano, etc. En un tubo para cada muestra colocar 0.5 g de reactivo proteico, aadir 1 ml de cido
ntrico concentrado lentamente, despus agregue gota a gota la solucin de hidrxido de sodio al 25%
hasta que quede alcalino. Deje reposar la mezcla y observar los cambios ocurridos.

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2. REACCION DE BIURET. Est prueba es especfica para los enlaces de los peptdicos. En un tubo para
cada muestra coloca 0.5 g de reactivo proteico, aada 5 gotas de biuret y agite. Dejar reposar y observar
los cambios.

3. REACCION DE MILLON. En un tubo para cada muestra colocar 0.5 g de reactivo proteico y aadir 1 ml
del reactivo de milln y caliente a ebullicin. Anote los cambios. (El reactivo se prepara poniendo 2 ml de
Mercurio metlico a disolver con 50 ml de cido ntrico durante 8 horas. Se debe tener cuidado con los
vapores desprendidos, ya que son txicos).

4. REACCIN DE COAGULACIN (POR CALOR). En un tubo para cada muestra colocar 0.5 g de reactivo
proteico y calentarla, agregue 8 a 10 ml de alcohol. Anota los cambios ocurridos.

5. SALIFICACIN. Sature 0.5 g de reactivo proteico con el sulfato de amonio en la forma siguiente: Agregue
un poco sulfato de amonio y agite hasta que se disuelva, aada poco a poco y agite hasta que quede un
poco de sulfato sin disolver. Filtre la solucin al final.

a) Al precipitado, aplicar la reaccin de Milln.

b) Al filtrado, aplicar la reaccin de Biuret.

OBSERVACIONES

El maestro indicara al alumno que tipo de aminocidos dan las coloraciones observadas en cada prueba, lo
que hace que sean positivas o negativas.

RESULTADOS

CUESTIONARIO

1. En la prueba 1: Quin obtiene ms precipitado: la peptona o la polipeptona?

2. Comparativamente, Cul de las soluciones presenta mayor precipitado en la prueba de Biuret?

3. Quin presenta mayor temperatura de coagulacin?

________________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES

Discute las posibilidades de los aminocidos presentes.

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PRACTICA 9: DESNATURALIZACIN DE PROTENAS DE HUEVO

OBJETIVO

Comprobar las temperaturas de desnaturalizacin de las protenas del huevo, aplicando varias condiciones.

INTRODUCCIN

La desnaturalizacin de una protena es una modificacin de las estructura interna y da lugar a cambios en las
protenas qumicas, fsicas y biolgicas. Esto puede ocurrir por accin del calor, fuerzas mecnicas,
congelacin entre otras.

Esta desnaturalizacin se debe a que en las molculas plegadas y en hlice se rompen enlaces por puente de
hidrgeno y disulfuro, por lo que se dice que se desdoblan. En la forma desdoblada puede tener lugar la
coagulacin (agregacin) de las molculas y formar entonces un gel, por calentamiento prolongado, etc. La
protena puede separarse completamente del lquido donde se encuentra disuelta.

MATERIAL REACTIVOS
8 Tubos de ensayo 100 ml de agua destilada
1 Gradilla 5 gr de cido ctrico
1 Tapa de caja petri 5 gr de Bicarbonato de sodio
1 Pinzas para tubo X 2 Huevos
2 Vasos de precipitados de 100 ml X Azcar
1 Vasos de precipitados de 250 ml
1 Termmetro de inmersin parcial EQUIPOS
1 esptula Balanza analtica
1 Vidrio de reloj Bao Mara
1 Agitador
1 Pipeta de 10 ml
1 Pizeta

PROCEDIMIENTO

1. ESTRUCTURA DEL HUEVO.

Romper el huevo cuidando que todo quede sobre la tapa de la caja de petri (sin romper la yema); quitar
los fragmentos del cascarn. Comparar la estructura con el dibujo que se expone abajo y reconocer cada
una de las partes que integran el huevo.

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2. TEMPERATURAS DE COAGULACIN DE LAS PROTENAS DEL HUEVO.

Separa de un huevo la clara y la yema en un vaso de precipitados, colocar una pequea cantidad de clara
en un tubo y calentar suavemente a bao Mara en un vaso de precipitado. Sujeta el termmetro dentro
del un tubo de ensayo; anotar la temperatura en la cual la albmina se coagula (se pone opaca). Repita el
paso anterior con la yema. Diferenciar la temperatura de ambas.

3. EFECTO DE LA PRESENCIA DE DIVERSOS FACTORES SOBRE LA TEMPERATURA DE

COAGULACIN.

a) Dilucin. Diluya la mitad (1:1) las muestras de clara y de yema en dos tubos de ensaye. Mezclar
suavemente, repetir la prueba 2y observar el cambio de la temperatura de coagulacin.
b) Adicin de Azcar. Hacer una solucin con 5 g de azcar en 10 ml de agua, agregar en un tubo clara
ms 5 0 6 ml de la solucin de azcar por agua destilada. Anota las temperaturas de coagulacin de
ambos tubos.
c) Adicin de cidos y bases (influencia de pH). Anotar la temperatura de coagulacin de acuerdo al pH
indicado por el maestro, el cual se logra con la adicin de solucin, ya sea cido ctrico o bicarbonato
de sodio, segn se requiera para obtener el pH deseado.

CUESTIONARIO

1 Define las temperaturas de coagulacin de acuerdo a las condiciones.

2 Explica por qu se tiene este comportamiento.

3 Grfica los datos de la parte c) de todo grupo y explica el comportamiento de dicha grfica.

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PRACTICA 10: PROTENAS DE LA LECHE

OBJETIVO

Conocer la cantidad en gramos de protenas que contiene la leche.

INTRODUCCIN

Las protenas son molculas orgnicas de estructura y funcin muy variadas; funcionan como catalizadores o
controladores de reacciones, son responsables del movimiento, transportan materiales, defensa, forman parte
de la estructura de las clulas, etc.

MATERIAL: REACTIVOS:
1 Gradilla X10 ml de vinagre
2 tubos de ensayo X 50 ml de leche
1 embudo Papel filtro
1 agitador
1 mechero EQUIPOS:
1 pinzas p/ tubo de ensayo Balanza analtica
1 Vidrio de reloj
1 Pipeta de 10 ml
1 Perilla de 3 vas

PROCEDIMIENTO

1 En uno de los tubos de ensayo coloca la leche, hasta tres cuartas partes de su capacidad.
2 Caliente ligeramente la muestra de leche.
3 Agregue 10 gotas de vinagre, agita y deja reposar.
4 Anote e ilustra lo que sucede en la leche.
5 Filtre el contenido del tubo, desecha la parte lquida, que contiene agua, sales y carbohidratos.
6 La parte slida que queda en el papel filtro, virtela sobre un trozo de papel de estraza para eliminar las
grasas y el exceso de grasa y el exceso de agua.
7 Cuando este mojado el papel estraza, cmbialo a otro. Repite.
8 Deja secar completamente el residuo,
9 Cuando este completamente seco, pselo y antelo a continuacin.

PESO = _____________ gramos

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OBSERVACIONES

Compara tus resultados con el de otros equipos.

RESULTADOS

CUESTIONARIO

1 Qu marcas de leche hubo en el saln de clase?

2 Cul marca tubo el mayor peso de protenas y cual menos?

3 Qu importancia tiene la prctica en bioqumica?

CONCLUSIONES

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PRACTICA 11: AISLAMIENTO DE UNA PROTENA

OBJETIVO

Aislar e identificar una protena de la leche.

INTRODUCCIN

Las protenas se pueden aislar con diferentes tcnicas. Una de las ms usadas es la centrifugacin, que
separa las sustancias por su densidad. La protena precipitar; y el lquido sobrenadante contendr agua y
grasas, decantar para obtener la protena.

MATERIAL REACTIVOS
1 matraz volumtrico de 100 ml 100 ml de agua destilada
2 vasos de precipitados de 250 ml 100 ml de HCl al 20% (Acido Clorhdrico)
1 probeta de 100 ml X Leche en polvo
2 tubos para centrifuga
1 agitador EQUIPOS
1 pizeta Potencimetro

PROCEDIMIENTO

1 Pesa 15 g d leche y suspenderla en 5 ml de agua destilada. Cuando la suspencin est homognea,

colcala en matraz volumtrico y afora a 100 ml con agua destilada.
2 Coloca la suspencin en un vaso de precipitados d 250 ml y dilyela a 1:1 con agua destilada.
3 Precipita la protena con la solucin de HCl al 20%. Adicionndolo poco a poco hasta un pH de 4.8, para lo
cual es necesario el uso del potencimetro.
4 Dejar reposar el precipitado de 10 a 15 minutos a temperatura ambiente.
5 Homogeneiza la suspencin y distribuye en los tubos para centrifuga.
6 Equilibre los tubos por parejas y centrifugue a 1500 r.p.m. durante 26 minutos.

OBSERVACIONES Y RESULTADOS

CUESTIONARIO
1 Para que sirve la centrifuga?

2 Para qu se utiliza el potencimetro?

3 Cul es el propsito de agregar cido?

4 Qu importancia tiene est prctica en Bioqumica?

CONCLUSIONES
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PRACTICA 12: CATALASA (ENZIMA DEL HGADO).

OBJETIVO

Comprobar que la catalasa se encuentre en el hgado y sta ayuda a acelerar la velocidad de reaccin

INTRODUCCIN

Las clulas poseen compuestos qumicos que controlan las reacciones que se llevan a cabo en el interior;
dichas sustancias son las enzimas. Controlan la velocidad de reaccin qumica y permite que la energa se
libere lentamente.
.
MATERIAL REACTIVOS

2 vasos de precipitados de 100 X Algodn o papel

ml
X Hgado fresco de pollo en trozos
X 200ml de perxido de hidrgeno (Agua
oxigenada)

PROCEDIMIENTO

1 vierte en partes iguales el perxido de hidrgeno en los vasos.

2 En uno de los vasos coloca un trozo de hgado.
3 Observa y dibuja lo que sucede.
4 En el otro vaso coloca una bolita de algodn o de papel y observa.

NOTA. El hgado contiene una enzima catalasa, la cual transforma el perxido de hidrgeno (desecho
celular), en hidrogeno, oxgeno y agua.

OBSERVACIONES Y RESULTADOS

Coloca una gota de perxido de hidrgeno en tu piel y compara los resultados obtenidos con el resultado de la
prctica. Explica lo que sucede.

CUESTIONARIO

1 Qu es una enzima y cmo funciona?

2 Describe la funcin que desempea el hgado del organismo.

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3 A qu biomolculas pertenecen las enzimas?

4 Porque el hgado tiene que ser fresco?

5 Qu importancia tiene est prctica en bioqumica?

BIBLIOGRAFA

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Bioqumica
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HORTON
Bioqumica
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