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diagnóstico de la Tuberculosis
El bacilo tiene predilección por los segmentos posteriores apicales de los lóbulos
superiores y los segmentos superiores de los lóbulos inferiores. La enfermedad varía
desde infiltrados mínimos que no producen enfermedad clínica y difícilmente se ven en
los rayos X de tórax, hasta infecciones masivas con cavitación extensa y síntomas
respiratorios y generales debilitantes. Existen periodos de estabilidad prolongados, con
bienestar relativo pero que van seguidos de episodios en los que se afecta cada vez
más el parénquima pulmonar. Conforme progresan las lesiones pulmonares, se
produce necrosis central con caseificación, llamada así porque el material necrótico
adquiere un aspecto cremoso que se licúa parcialmente en ausencia de enzimas
proteolíticas, comunes en otras formas de supuración. El material necrótico puede
vaciarse hacia los bronquios provocando cavitación de la enfermedad. En algunos
pacientes se desarrolla una neumonía tuberculosa. Al progresar la enfermedad se
pierde la arquitectura normal y es tipico observar fibrosis, disminución de volumen y
contracción hacia arriba.
La patogenia se produce en el siguiente orden
b) Una vez dentro del macrófago la bacteria se replica dentro del fagosoma
bloqueando la unión del lisosoma que venía a degradarlo, esto está dado porque
las micobacterias vivas bloquean la formación del fagolisosoma inhibiendo las
señales de calcio y las proteínas que median la unión fagosoma-lisosoma. Así
pues el estadio más temprano de la tuberculosis en un individuo no sensibilizado
está caracterizado por la proliferación bacteriana dentro de los macrófagos
alveolares (en el caso TBC pulmonar) y en lo espacio aéreos.
7) Biopsia del tejido afectado (poco común). Es una técnica a nivel pleural relativamente
para extirpar y examinar el tejido afectado.
8) Prueba cutánea con tuberculina: También llamada Mantoux, se usa mediante una
sustancia llamada PPD, si se forma una mancha roja alrededor de el área de inyección,
la persona puede estar infectada, pero no necesariamente de forma activa.
Diagnósticos diferenciales
Prueba de Mantoux
Esta prueba puede identificar los bacilos de Koch.
Se inyecta en la piel del antebrazo una sustancia
llamada PPD la cual lleva proteínas del bacilo
tuberculoso, al cabo de 4 horas se examina para
ver la hipersensibilidad del cuerpo ante esta
proteina. Si se presenta una roncha roja alrededor
del área el paciente puede estar infectado con Mycobacterium tuberculosis
Baciloscopía de esputo
La Baciloscopía, es la técnica fundamental en la
investigación bacteriológica de la tuberculosis, en la
detección de casos y control de tratamiento en el área de
morfofisiopatología, la Baciloscopía es una técnica que
permite identificar un alto porcentaje de casos positivos.
El diagnóstico de la tuberculosis extrapulmonar depende de
la probabilidad de encontrar los bacilos en los sitios de
infección, los cuales se encuentran en cantidades muy
pequeñas por lo que es difícil su localización en sitios del
organismo de acceso complicado, además el carácter serio
de esta forma de tuberculosis se debe frecuentemente a su
diagnóstico tardío.
Para realizar la Baciloscopía es necesario tomar una muestra del material esta se
coloca junto a un portaobjetos. Una vez seleccionada la parte de la muestra, se aplica
centrifugación por 15 minutos a 3 000 RPM, si se trata de biopsias, estas se maceran
en mortero estéril con unos pocos mililitros de agua destilada y de aquí se toma para el
frotis y el resto para el cultivo.
La técnica es la de Ziehl-Neelsen tradicional. Cuando se examina muestras de esputo u
otras lesiones en donde estas bacterias se encuentran, al microscopio, previa
coloración de los extendidos, su característica principal es su ácido-alcohol resistencia
(AAR) ya que son difíciles de teñir con fucsina pero una vez teñidos resisten a la
decoloración con alcohol- ácido.
La tinción de Ziehl-Neelsen se deben seguir los
siguientes pasos:
-se fija la Baciloscopía con calor.
-se colocan los frotis sobre varillas
separados por un centímetro
-se cubren con fucsina previamente
filtrada.
-se calientan los frotis flameándolas
con una varilla provista en un extremo con
torunda embebida en alcohol, hasta que empiece la emisión de vapores.
-se deja de calentar y se repite la operación dos veces más.
-Se elimina el colorante con agua corriente suave.
-Se agrega alcohol-ácido por 2 minutos. Se enjuaga con agua corriente.
-se aplica el colorante de contraste azul de metileno por 5 minutos.
-se enjuaga con agua corriente y se deja escurrir en forma vertical sobre papel
absorbente hasta que se seque.
Una vez ya realizado estos procedimientos es posible observar el resultado bajo
microscópico, para esto es necesario utilizar constantemente el tornillo micrométrico
para lograr visualizar los bacilos que aparecen como bastoncillos delgados de color rojo
y con gránulos en su interior, aislados, en pares o agrupados sobre un fondo azul claro
de la tinción de contraste.
Inmunocitoquímica
La mayoría de las técnicas utilizadas en el diagnóstico de la tuberculosis son muy poco
específicas, con lo cual no se puede discriminar el tipo de enfermedad y el patógeno
causante. La inmunocitoquímica o inmunohistoquímica (IHQ) es un método específico
utilizado para ver la reacción antígeno-anticuerpo producido en los tejidos que tienen un
patógeno en especial. Los anticuerpos son muy específicos para cada antígeno, por lo
cual se puede agregar marcadores fluorescentes o enzimáticos a la parte no antigénica
no-determinante o epitope y nos dirán exactamente qué o quién es el patógeno que
está afectando el tejido.
El fluorocromado de los bacilos de Koch mediante la auramina presenta ventajas sobre
la coloración de Ziehl-Neelsen, pues la luminosidad propia del bacilo sobre un fondo
oscuro facilita su observación en menos tiempo y basta para examinar la preparación
mediante objetivos de pequeño aumento.
Técnica
1) se cubre el frotis durante 10 minutos con una solución de fenol-auramina
2) se lava con agua corriente
3) se decolora con solución de alcohol-ácido durante cuatro minutos
4) se lava con agua corriente
5) se cubre con la solución de contraste, durante 30 segundos
6) se lava con agua corriente y se seca al aire a temperatura ambiente (no se
use papel de filtro).
Observación microscópica.
Los frotis se observan con la luz ultravioleta (filtros B G 12 y U G l), aumento de
400x y Las desventajas de este espectacular método de diagnostico es que es
demasiado caro, los reactivos (tanto fluorocromos como los antígenos tiene un
tiempo de caducidad muy pequeño, por sólo es viable utilizarlos en laboratorios
donde se utilice todos los días este método como mínimo para cuarenta
preparados a analizar
Por otro lado pero igualmente convergente y de conocimiento público es la nueva
técnica en el diagnostico del bacilo tuberculoso, en la cual se ha descubierto que
posee propiedades autofluorescentes con lo cual no es necesario tener que
hacer uso de técnicas histológicas para teñir al bacilo. Pero al igual que en el
método antes mencionado, se utiliza un microscopio de fluorescencia o bien un
flurímetro.
Los bacilos auto emiten luz celeste (foto 1), pero con las técnicas de
inmunohistoquímica con antígenos fluorocromados se tiñen de color verde bajo el
microscopio de fluorescencia
Foto 1 Foto 2
Es importante señalar que en esta técnica la etapa de mayor riesgo por la producción
de aerosoles es el extendido por el sistema de batido, por lo tanto es indispensable que
se cumplan todas las medidas de bioseguridad aquí señaladas.
Diagnóstico Anatomopatológico
1) J.A. Kiernan: “Histological & Histochemical Method theory and practice”. Editorial
Arnold, Great Britain, 1999 p390- 398
http://abdonguerra.blogspot.com/2007_02_01_archive.html
9) Dr. Hugo Lisboa C., EU. Julieta Araneda B., Dr. Alfredo Nuñez D., Dr. Felipe Jurado
D. “Tuberculosis Amigdaliana: seguimiento a dos años plazo.” Revista ANACEM. vol1
(2007) http://revista.anacem.cl/AC%204.pdf
b)-http://alumnatbiogeo.blogspot.com/2009/02/nueva-tecnica-para-el-diagnostico-
de-la.html
Toma de exámenes
Para obtener un orden en la toma de exámenes a la hora de tener un posible enfermo
de tuberculosis, se siguen pasos en exámenes específicos tanto diferenciales y no
diferenciales hasta tener un resultado tanto verdadero positivo como verdadero
negativo (esquema 1).
Esquema 1
Conclusión
El trabajo del Tecnólogo Medico en el área de la salud requiere la integración de
actividades de investigación, análisis, síntesis y los resultados exactos de las diferentes
evaluaciones, hoy en día el avance de las ciencias a cambiado siendo esto un gran
desafío para el grupo de tecnólogos médicos incorporando nuevas tecnologías para
realizar nuevos diagnósticos en la especialidad dando como resultado
transformaciones de los patrones de practicas medicas, creando al tecnólogo medico
en un pilar fundamental para el equipo médico.
en la enfermedad que nos toco tratar logramos reconocer la capacidad diagnostica de
las diversas técnicas histológicas empleadas para reconocer alguna patología tisular
(considerando diagnósticos diferenciales y no diferenciales) concluyendo que la
inmunohistoquímica es las técnica más específica para reconocer la enfermedad,
donde el personal técnico y medico debe estar específicamente entrenado en el
manejo y evaluación de los distintos anticuerpos y disponer de información apropiada
acerca de su sensibilidad y especificidad, del método de evaluación de resultados y de
su posible trascendencia clínica. La interpretación debe efectuarse siempre
conjuntamente con el contexto clínico y los hallazgos morfológicos. Un aspecto
elemental, pero esencial, es la preservación del tejido desde el momento de su
obtención. La inmensa mayoría de técnicas de IHQ (inmunohistoquímica) pueden
aplicarse a tejido fijado e incluido en parafina con buenos resultados, siempre que la
fijación tisular, su procesado e inclusión se realicen correctamente. La utilización de
métodos o reactivos inapropiados en el tratamiento tisular previo a la IHQ determina
pérdidas de antigenicidad que limitarán o impedirán la obtención de resultados fiables.