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UNIVERSIDAD JOS CARLOS

MARITEGUI
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE ODONTOLOGA

DIAGNSTICO SITUACIONAL

CURSO : Voluntariado Estomatolgico Social


Preventivo
DOCENTE : Cd. Jos Aguirre
ALUMNO : Roggers Dallas Ccora Flores
SEMESTRE : I
CICLO : V

MOQUEGUA PER
2016 II
INDICE

I. Introduccin03
II. Marco Terico04
III. Cuerpo del trabajo.....05
CAPTULO I
1.1. Teora y prctica del crecimiento microbiano.06
1.1.1. Crecimiento celular y fisin binaria..06
1.1.2. Sntesis del peptidoglicano y divisin celular...07
1.1.3. Crecimiento de poblaciones..08
1.1.4. Curva de crecimiento10
1.1.5. Medidas directas del crecimiento microbiano..13
1.1.6. Medidas indirectas del crecimiento microbiano...15
1.1.7. Cultivo continuo : el quimiostato.16

CAPTULO II

2.1. Efectos ambientales sobre el crecimiento microbiano19


2.1.1. Efecto de la temperatura sobre el crecimiento..19
2.1.2. Crecimiento microbiano a bajas temperaturas..21
2.1.3. Crecimiento microbiano a altas temperaturas...22
2.1.4. Crecimiento microbiano a pH alto y a pH bajo22
2.1.5. Efectos del O2 sobre el crecimiento microbiano..23
2.1.6. Oxgeno y crecimiento microbiano..24

IV. CONCLUSIONES..27
V. ANEXOS28
VI. BIBLIOGRAFA32

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I. INTRODUCCIN

En microbiologa, la palabra crecimiento se define como un aumento en el


nmero de clulas. El crecimiento es un componente esencial de la funcin
microbiana, ya que en la naturaleza cualquier clula tiene un periodo de vida
finito y la especie se mantiene como resultado continuo de la poblacin.
Adems de la compresin de los aspectos bsicos del crecimiento microbiano,
muchas situaciones prcticas hacen necesario el control del crecimiento
microbiano. El conocimiento de cmo las poblaciones bacterianas se
amplifican rpidamente es muy til para el diseo de mtodos de control del
crecimiento microbiano.

Entonces, el crecimiento bacteriano es la divisin de una bacteria en


dos clulas hijas en un proceso llamado fisin binaria. Suponiendo que no se
produzca ningn caso de mutacin las clulas hijas resultantes sern
genticamente idnticas a la clula original. De este modo tiene lugar la
"duplicacin local" de la poblacin bacteriana. Las dos clulas hijas creadas
tras la divisin no sobreviven necesariamente. Sin embargo, si el nmero de
supervivientes supera la unidad, en promedio, la poblacin bacteriana
experimenta un crecimiento exponencial. La medicin de una curva del
crecimiento exponencial de las bacterias en un cultivo ha sido
tradicionalmente una parte de la formacin de todos los microbilogos. Los
procesos fundamentales empleados para ello son la enumeracin bacteriana
(conteo bacteriano) por mtodos directos e individuales
(microscopa, citometra de flujo), por mtodos directos y masivos (biomasa),
por mtodos indirectos e individuales (conteo de colonias), o por mtodos
indirectos y en bloque (nmero ms probable, turbidez, absorcin de
nutrientes). Los modelos permiten conciliar la teora con las mediciones.

II. MARCO TERICO

Fisin Binaria: O biparticin es la divisin celular que sigue al aumentar


una clula dos veces su tamao mnimo.

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Extremfilo: Es un organismo que cree de modo ptimo en una o ms
condiciones fsicas o qumicas extremas, como por ejemplo a alta o baja
temperatura o Ph.
Crecimiento exponencial: Crecimiento de un microorganismo cuyo
nmero de clulas se duplica en un periodo constante de tiempo.
Fase estacionaria: Es el periodo que sigue al crecimiento exponencial
cuando la velocidad de crecimiento de la poblacin es cero.
Fase lag: Es el periodo anterior a la fase de crecimiento exponencial
cuando las clulas pueden mantener un metabolismo activo pero an no
crecen.
Acidfilo: Organismo que crece mejor a pH bajo.
Aerobio: Organismo que puede usar el O2 en la respiracin; algunos
requieren O2 para el crecimiento.
Alcalfilo: Organismo que crece mejor a Ph alto.
Ph: Valor negativo del logaritmo de la concentracin de iones de
hidrgeno en una solucin.
Soluto compatible: Es una molcula que se acumula en el citoplasma para
ajustar la actividad de agua y que no inhibe los procesos qumicos.
Temperaturas cardinales: Son las temperaturas mnima, ptima y
mxima que permiten el crecimiento de un organismo determinado.
Termfilo: Organismo cuya temperatura ptima de crecimiento est entre
los 45C y 80C.
Mesfilo: Organismo que crece mejor a temperaturas entre 20C y 45C.
Tiempo de generacin: Es el tiempo necesario para que una poblacin de
clulas microbianas duplique su nmero.
Halfilo: Es un microorganismo que requiere sal (NaCl) para crecer.
Halfilo extremo: Es un microorganismo que requiere para crecer grandes
cantidades de sal (NaCl), por lo general superiores al 10% y a veces
prximas a la saturacin.

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CAPTULO I

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III. CAPTULO I
1.1. Teora y prctica del crecimiento microbiano

El crecimiento microbiano supone un incremento en el nmero de clulas ms que en


el tamao de las clulas individuales. El crecimiento de la mayora de los
microorganismos ocurre por fisin binaria. La divisin celular y la replicacin del
cromosoma estn reguladas de modo coordinado, y las proteinas Fts son claves para
estos procesos.

1.1.1. Crecimiento celular y fisin binaria

La clula es una mquina sinttica capaz de duplicarse a s misma. Los procesos


bioqumicos del crecimiento celular bacteriano suponen no menos de 2000
reacciones de una gran variedad de tipos. Algunas de estas reacciones son
transformaciones de la energa. Otras suponen la biosntesis de pequeas
molculas, las unidades bsicas de las macromolculas, as como los diversos
cofactores y coenzimas necesarios para las reacciones enzimticas. Sin
embargo, las principales reacciones celulares sintticas consisten en reacciones
de polimerizacin, por las que los polmeros (macromolculas) se forman a
partir de los monmeros. Una vez que se fabrican los polmeros, est dispuesta
el escenario para os procesos finales del crecimiento: el ensamblaje de las
macromolculas y la formacin de las estructuras celulares como pared celular,
membrana citoplasmtica, flagelos, ribosomas, cuerpos de inclusin,
complejos enzimticos, etc.

Fisin binaria

En la mayora de los procariotas, el crecimiento de una clula individual


contina hasta que se divide en dos clulas nuevas, un proceso que se denomina
fisin binaria (binaria expresa el hecho de que se forman dos clulas a partir
de uno). En un cultivo en crecimiento un bacilo como por ejemplo Escherichia
coli, se observa que las clulas se alargan hasta aproximadamente el doble de
la longitud de la clula ms pequea y luego forma un tabique que acaba por
separar la clula en dos clulas hijas. Este tabique se conoce como septo y es
el resultado del crecimiento hacia dentro de la membrana citoplasmtica y la
pared celular desde direcciones opuestas hasta que las dos clulas hijas se
separan.

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Durante el ciclo de crecimiento, todos los constituyentes celulares aumentan,
de modo que cada clula hija recibe un cromosoma completo y suficientes
copias de todas las macromolculas, monmeros e iones inorgnicos, como
para existir como clula independiente. El reparto del DNA replicado entre las
dos clulas hijas depende de la unin del DNA a la membrana durante la
divisin, y la segregacin real de dos copias es facilitada por la formacin del
septo.

El tiempo necesario para completar un ciclo de crecimiento celular en las


bacterias es muy variable y depende de varios factores, tanto nutricionales
como genticos. Bajo las menores condiciones nutritivas, la bacteria
Escherichia coli puede completar el ciclo en 20 minutos; unas cuantas bateras
pueden crecer incluso ms rpidamente, pero la mayora lo hacen ms
lentamente. El control de divisin celular es un proceso complejo y parece estar
ntimamente relacionado con sucesos que ocurren durante la replicacin del
cromosoma.

Protenas FTS y el plano de la divisin celular

Se han identificado varias protenas importantes en el proceso de la divisin


celular de las procariotas. Estas protenas son esenciales para la divisin la
divisin celular normal y se han llamado protenas Fts. En Escherichia coli y
otras bacterias se ha estudiado con detalle una protena clave del grupo FtsZ.
Las protenas Fts estn distribuidas universalmente entre procariotas,
incluyendo Archaea, estas protenas forman en la clula un aparato de divisin
que se llama divisoma.

1.1.2. Sntesis del peptidoglicano y divisin celular

Durante el crecimiento celular la nueva pared celular se sintetiza insertando


nuevas unidades de glicano en el preexistente. Un alcohol de cadena larga
llamado bactoprenol facilita el transporte de las nuevas unidades a travs de la
membrana para incorporarse a la pared celular en crecimiento.

Cuando una clula se alarga antes de la divisin celular, se sintetiza una nueva
pared celular. Este nuevo material debe aadirse a la pared celular preexistente
sin prdida de la intergridad estructural. Es esencial que el nuevo

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peptidoglicano se incorpore dentro del preexistente, si esto no tiene lugar
correctamente, puede ocurrir un proceso llamado autolisis.

Biosntesis del peptidoglicano

Durante el crecimiento celular la sntesis del nuevo peptidoglicano supone el


corte controlado del peptidoglicano preexistente por las autolisinas y la
insercin simultanea de los precursores.

1.1.3. Crecimiento de poblaciones

Como ya se ha mencionado, el crecimiento se define como un aumento en el


nmero de clulas microbianas de una poblacin; tambin puede medirse como
un incremento de la masa celular. La velocidad de crecimiento es el cambio
en el nmero de clulas o en la masa celular experimentando por unidad de
tiempo. Durante el ciclo de divisin todos los componentes estructurales de la
clula se duplican. El intervalo para la formacin de dos clulas a partir de una
supone una generacin, y el tiempo transcurrido para que esto ocurra se llama
tiempo de generacin. Por tanto el tiempo de generacin es el tiempo que se
requiere para que la poblacin se duplique, razn por la cual a veces el tiempo
de generacin se llama tiempo de duplicacin. Durante cada generacin, tanto
el nmero de clulas como la masa celular se duplican. Los tiempos de
generacin varan ampliamente entre los distintos microorganismo. Muchas
bacterias tienen tiempos de generacin comprendidos entre 1-3 horas, pero
unas cuantas crecen rpidamente y se dividen en tan solo 10 minutos mientras
que otras tardan varios das. Adems, el tiempo de generacin de un
microorganismo determinado tambin es funcin del medio de cultivo utilizado
y de las condiciones de incubacin empleadas.

Crecimiento exponencial

En el siguiente cuadro se representa un experimento de crecimiento iniciado


con una sola clula que tiene un tiempo de generacin de 30 minutos. Este
modelo de incremento de la poblacin, en el que en cada periodo fijo de tiempo
se duplica el nmero de clulas, se denomina crecimiento exponencial.

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Tiempo (h) Nmero total de clulas
0 1
0,5 2
1 4
1.5 8
2 16
2,5 32
3 64
3,5 128
4 256
4,5 512
5 1024
5,5 2048
6 4046

10 1048576

Una caracterstica del crecimiento exponencial es que la velocidad del aumento


del nmero de clulas es inicialmente lenta pero incrementa cada vez ms con
el tiempo. Esto determina que en las ltimas etapas el aumento del nmero de

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clulas sea realmente explosivo. Por ejemplo, en el experimento anterior,
durante los primeros 30 minutos de crecimiento la velocidad de produccin de
clulas es de una clula cada 30 minutos. Sin embargo, entre las 4 y 4,5 horas
de crecimiento, la velocidad de produccin de clulas es considerablemente
mayor, 256 clulas cada 30 minutos. Una consecuencia prctica del
crecimiento exponencial es que cuando un productos no estril, como la leche,
se deja en condiciones que permiten el crecimiento microbiano unas cuantas
horas, durante las primeras fases del crecimiento exponencial el efecto no es
muy relevante, mientras que si se deja durante el mismo tiempo en fase
exponencial tarda es resultado es desastroso para el producto.

1.1.4. Curva de crecimiento

Los datos presentados anteriormente reflejan solo parte del ciclo de


crecimiento de una poblacin microbiana, la fase llamada de crecimiento
exponencial. En un sistema cerrado o cultivo en medio no renovado, tambin
no conocido como cultivo monofsico se obtiene una curva de crecimiento
tpica como la que se indica anteriormente. Esta curva de crecimiento puede
dividirse en distintas fases llamadas:

Fase de latencia
Fase exponencial
Fase estacionaria
Fase de muerte

Fase de latencia

Cuando se inocula una poblacin microbiana en un medio fresco, por lo general


el crecimiento no comienza inmediatamente sino solo tras un periodo de tiempo
que constituye la fase de latencia, la cual puede ser breve o larga dependiendo
de la procedencia del cultivo y de las condiciones de crecimiento. Si un cultivo
exponencial se inocula en el mismo medio y en las mismas condiciones de
cultivo, no se observa un retraso y el crecimiento exponencial se inicia
inmediatamente. Sin embargo, si el inculo se toma de un cultivo viejo (fase
estacionaria) y se inocula en el medio, se observa normalmente un retraso
aunque todas la clulas del inculo sean viales, es decir, sean capaces de
reproducirse. Esto se debe con frecuencia a que las clulas carecen de varios

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componentes esenciales para dividirse y se requiere tiempo para su sntesis.
Tambin se aprecia un retraso cuando las clulas del inculo han sido daadas
parcialmente con calor, radiaciones o compuestos txicos, debido al tiempo
requerido para recuperarse y reparar los daos.

La fase de latencia tambin ocurre cuando se transfiere una poblacin de un


medio rico a otro medio ms pobre. Para que ocurra crecimiento en un medio
de cultivo particular, las clulas deben tener un equipo enzimtico completo,
que permita la sntesis de los metabolitos esenciales ausentes en el medio. Al
pasar a otro medio, se necesita tiempo para la sntesis de las nuevas enzimas.

Fase exponencial

La fase exponencial de crecimiento ya ha sido comentada. Es una consecuencia


del hecho de que cada clula se divide para formar dos, cada una de las cuales
va a formar otras dos, y as sucesivamente. En general, las clulas en
crecimiento exponencial estn en el estado fisiolgico ms sano y, por ello, las
clulas tomadas en el punto medio del crecimiento exponencial son a menudo
las ms indicadas para los estudios enzimticos y estructurales.

La mayora de los microorganismos unicelulares crecen exponencialmente


pero las velocidades del crecimiento exponencial son muy variables. La
velocidad de crecimiento est influenciada por las condiciones ambientales
(temperatura, composicin del medio de cultivo, etc.) as como por las
caractersticas genticas del organismo. Por lo general, los microorganismos
procariticos crecen ms rpido que los eucariticos; y los eucariotas de
pequeo tamao lo hacen ms rpido que los de mayor tamao.

Fase estacionaria

En un sistema de cultivo cerrado, en medio o renovado o monofsico, como


por ejemplo un tubo o un matraz, el crecimiento exponencial no se puede
prolongar de modo indefinido. Se puede calcular que una sola bacteria con un
tiempo de generacin de 20 minutos producira en tan solo 48 horas de
crecimiento exponencial continuado una poblacin que pesara unos 4000
veces el peso de la tierra. Esto resulta impresionante porque una sola clula
bacteriana pesa alrededor de diez a la menos doce gramos. Es obvio que algo

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debe pasar mucho antes de ese tiempo que limite el crecimiento de la poblacin.
Lo que generalmente sucede es que (1) un nutriente esencial del medio de
cultivo se usa y llega a ser un factor limitante del crecimiento; o bien (2) se
acumula en el medio algunos productos de desecho hasta niveles inhibitorios
que hacen que cese el crecimiento exponencial. Frecuentemente ocurren ambas
cosas. Al producirse esto, la poblacin alcanza la fase estacionaria. En la fase
estacionaria no hay aumento ni descenso neto en el nmero de clulas. Aunque
no suele haber crecimiento en la fase estacionaria muchas funciones celulares
continan, como el metabolismo energtico y algunos procesos biosintticos.
En algunos casos puede ocurrir un lento crecimiento durante la fase
estacionaria; algunas clulas de la poblacin crecen, pero otras mueren y los
dos procesos se equilibran de modo que no hay aumento ni disminucin en el
nmero de clulas (este fenmeno se llama crecimiento crptico).

Fase muerte

Si la incubacin continua despus de que la poblacin haya alcanzado la fase


estacionaria, las clulas pueden continuar vivas y metablicamente activas,
pero tambin pueden morir. Si ocurre esto ltimo, se dice que la poblacin est
en fase muerte. En algunos casos la muerte se acompaa de una lisis celular
real, en la mayora de los casos la velocidad de muerte celular es mucho ms
lenta que la de crecimiento exponencial. En la siguiente imagen indica que la
fase de muerte de la curva de crecimiento tambin es exponencial.

En resumen, se insiste que en las fases de la curva de crecimiento mostradas en


la figura anterior corresponden a sucesos que ocurren en una poblacin de
clulas, no en clulas individuales. Los trminos de fase latencia, fase

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exponencial, fase estacionaria y fase de muerte no se aplican a las clulas
aisladas sino a poblaciones de clulas.

1.1.5. Medidas directas del crecimiento microbiano: recuento de clulas totales


y viables

El crecimiento de poblaciones se mide estimando los cambios en el nmero de


clulas, en la cantidad de algn componente de las mismas (por ejemplo,
protena) o en el peso total seco de las clulas. Existen varios mtodos de contar
el nmero de clulas o de determinar la masa celular, adecuados para diferentes
organismo o diferentes situaciones.

Recuento de clulas totales

El nmero de clulas de una poblacin se puede determinar contando una


muestra con el microscopio mediante el mtodo de recuentro directo. El
recuento directo se puede hacer de dos formas, en muestras secas sobre porta o
en muestras lquidas. Con muestras lquidas se emplea cmaras de recuento
especiales que, en esencia son excavados modificados, sobre cuya superficie
de vidrio est marcada una rejilla con pequeos cuadrados de rea conocida.

Cada cuadrado de la parrilla puede contener un pequeo volumen conocido,


muy pequeo pero determinado con precisin. En el microscopio se puede
contar el nmero de clulas por cada unidad de rea de la parrilla, o que permite
conocer el nmero de clulas por el volumen que determina cada rea. La
conversin de ese valor a nmero de clulas por milmetro de la suspensin

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original se hace fcilmente multiplicando por un factor de conversin que
depende del volumen del tipo de cmara.

El recuento directo por microscopia es un mtodo rpido para conocer el


nmero de clulas. Sin embargo, presenta ciertas limitaciones:

No se distingue las clulas vivas de las muertas.


Las clulas pequeas son difciles de ver con el microscopio as algunas
perdindose en el recuento.
En ocasiones la precisin es difcil.
Se requiere un microscopio de contraste de fases cuando las muestras
no se tien.
El mtodo no suele ser adecuado para suspensiones con baja densidad
celular.
Las clulas mviles se deben inmovilizar antes del recuento.

Recuento de clulas viables

En el recuento microscpico directo se cuentan tanto clulas vivas como


muertas. En muchos casos interesa contar slo las clulas vivas, y con este fin
se han desarrollado mtodos de recuento de clulas viables. Una clula viable
se define como aquella que es capaz de dividirse y dar lugar a una
descendencia; y el mtodo usual para realizar una determinacin de clulas
viables se basa en contar el nmero de clulas de la muestra que es capaz de
formar colonias sobre un medio slido adecuado. Por esta razn, el recuento de
clulas viables tambin se llama recuento en placa o recuento de colonias.
En este procedimiento se supone que cada clula viable puede formar una
colonia.

Hay dos maneras de realizar un recuento en placa para viables:

el mtodo de extensin en placa


el mtodo de vertido en placa

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En el mtodo de extensin en placa un cierto volumen de cultivo diluido, que
no suele ser superior a 0,1 ml, se extiende sobre la superficie de una placa con
medio slido utilizando un asa estril de extensin. La placa se incuba despus
hasta que aparecen las colonias y se cuentan su nmero. Es importante que la
superficie del medio est seca de modo que el lquido de la muestra se absorba.
No se suelen usar volmenes mayores de 0,1 ml porque el exceso de lquido
no se absorbe, y origina problemas en el recuento al favorecer la extensin y
mezcla de las colonias. En el mtodo del vertido en placa se pipetea un
volumen conocido de cultivo (normalmente 0,1-1,0ml) en una placa de Petri
estril sobre la que se aade el medio con agar fundido y se mezcla todo bien
con suaves movimientos de la placa sobre la superficie de la mesa antes de
dejar que se solidifique. Como la muestra se mezcla con el medio fundido, se
pueden usar volmenes de inculos mayores que en el mtodo de recuentro por
extensin; sin embargo, con este mtodo el organismo que se cuenta deber
capaz de resistir la temperatura del agar fundido a 45C.

El crecimiento se mide por el cambio en el nmero de clulas a lo largo del


tiempo. El recuento de clulas al microscopio mide el nmero total de clulas
de la poblacin, mientras que el recuento de viables (recuento de colonias)
mide solo la poblacin viva.

1.1.6. Medidas indirectas del crecimiento microbiano: turbidez

Un mtodo muy rpido y til de obtener estimaciones del nmero de clulas


son las medidas de turbidez. Una suspensin celular aparece turbia a la vista

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porque las clulas dispersan la luz que atraviesa la suspensin. Cuantas ms
clulas estn presente mayor ser la luz dispersada y, por tanto, mayor turbidez.
La turbidez puede medirse con aparatos como el fotmetro o espectrofotmetro
que hacen pasar la luz a travs de suspensiones celulares y detectan la cantidad
de luz emergente no dispersada. La principal diferencia entre estos dos
instrumentos es que un fotmetro emplea un filtro simple para generar luz
incidente de longitud de onda relativamente corta, mientras que un
espectofotmetro emplea un prisma o red de difraccin para generar luz
incidente en una banda muy estrecha de longitudes de onda.

Las medidas de la turbidez son un mtodo indirecto muy til y rpido de medir
el crecimiento bacteriano. Sin embargo, para relacionar un recuento de clulas
directo con un valor de la turbidez, se requiere establecer primero una curva
estndar de calibracin, esta est relacionado con alguna medida del nmero
de clulas.

1.1.7. Cultivo continuo: el quimiostato

Hasta ahora nos hemos referido al crecimiento microbiano en cultivos en


sistemas cerrados o en medio no renovado, es decir, cuando el crecimiento
ocurre en un volumen fijo de medio de cultivo que est siendo continuamente
modificado por la accin de los microorganismos que crecen hasta que ya no
es adecuado para permitir ms crecimiento. En los cultivos en medio no
renovado o sistemas cerrados, las condiciones pueden ser relativamente
constantes al principio de la fase exponencial de crecimiento, pero despus,
cuando el nmero de clulas llega a ser muy elevado, ocurren cambios drsticos
en la composicin qumica del medio.

El quimiostato

El tipo ms comn de aparato que se utiliza para obtener un cultivo continuo


es el quimiostato, que controla tanto la densidad de la poblacin celular como
la velocidad de crecimiento del cultivo. Para lograr ese control en un
quimiostato son importantes dos factores: la velocidad de dilucin y la
concentracin de un nutriente que acta como factor limitante.

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Los sistemas de cultivo continuo o en medio renovado (quimiostatos) permiten
mantener poblaciones de clulas en crecimiento exponencial durante largos
periodos de tiempo. En una quimiostato, la velocidad de dilucin del cultivo
determina la velocidad de crecimiento mientras que el tamao de la poblacin
est determinado por la concentracin de nutriente limitante que entra en el
recipiente.

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CAPTULO II

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3.1.Efectos ambientales sobre el crecimiento microbiano

Hasta ahora se ha descrito el crecimiento de los microorganismos considerando


esencialmente las condiciones ideales del laboratorio. Sin embargo, las actividades de
los microorganismos se ven muy afectadas por las condiciones qumicas y fsicas del
medio. El conocimiento de los efectos ambientales nos permite explicar la
distribucin de los microorganismos en la naturaleza y hace posible disear mtodos
que controlen o potencien las actividades microbianas. A este respecto se pueden
considerar muchos factores ambientales, pero hay cuatro factores que tienen una
funcin destacada, el pH, la disponibilidad de agua y oxgeno. Se considera cada uno
estos con detalle.

La temperatura es uno de los factores ms importantes que afectan al crecimiento y a


la supervivencia de los microorganismos. A temperaturas muy fras o muy calientes
los microorganismos no crecern. Pero los valores absolutos de estas temperaturas
mnimas o mximas veran mucho entre microorganismo diferentes y, por lo general,
reflejan el rango de temperatura de la de sus hbitat naturales. A continuacin,
examinaremos el efecto de la temperatura en el crecimiento microbiano.

Temperaturas cardinales

La temperatura ejerce dos tipos de efectos opuestos sobre los organismos vivos. A
medida que se eleva la temperatura, las reacciones qumicas y enzimticas de la clula
son ms rpidas y el crecimiento se acelera. Sin embargo, por encima de una cierta
temperatura algunas protenas particulares pueden sufrir daos irreversibles. En
consecuencia, dentro de un cierto margen, un aumento de temperatura supone un
aumento en el crecimiento y en el metabolismo hasta un punto en que tienen lugar las
reacciones de inactivacin. Por encima de tal punto, las reacciones celulares caen
rpidamente a cero. As, para cada organismo existe una temperatura mnima por
debajo de la cuales no es posible el crecimiento, una temperatura optima a la que se
produce el crecimiento ms rpido, una temperatura mxima por encima de la cual
no es posible el crecimiento. La temperatura ptima esta siempre ms cerca de a
mxima que de la mnima. Estas tres temperaturas, que se llaman temperaturas
cardinales o fundamentales, fundamentalmente son caractersticas de cada tipo de
organismo, pero no son completamente fijas, pues pueden ser ligeramente

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modificadas por otros factores del ambiente, en particular por la composicin del
medio.

La temperatura mxima de crecimiento de un organismo determinado refleja


probablemente la inactivacin de una o ms protenas en a clulas. Sin embargo, los
factores que determinan la temperatura mnima de crecimiento de un organismo no
son tan claros. La membrana citoplasmtica debe estar en un estado fluido para su
correcto funcionamiento y tal vez la temperatura mnima de crecimiento sea resultado
de la congelacin de esas funciones de la membrana en cuanto al transporte de
nutrientes o la formacin del gradiente de protones.

Clases de microorganismo segn la temperatura

Aunque existe todo un espectro continuo entre los microorganismos, desde los que
tienen su temperatura ptima a temperaturas muy bajas hasta los que la tienen a
temperaturas muy altas, se pueden distinguir cuatro grupos de microorganismo con
relacin a su temperatura ptima:

Psicrfilos: Con temperaturas ptimas bajas.


Mesfilos: Con temperaturas ptimas moderadas.
Termfilos: Con altas temperaturas ptimas.
Hipertermfilos: Con temperaturas ptimas muy elevadas.

Los mesfilos se encuentran en animales de sangre caliente y en medios acuticos y


terrestres de latitudes templadas y tropicales. Los psicrfilos y los termfilos se
encuentran en ambientes muy fros o calientes, respectivamente. Los hipertermfilos
son tpicos de ambientes concretos extremadamente calientes como fuentes termales,
gisers y fuentes hidrotermales submarinas.

En Escherichia coli, un tipo mesfilo, se ha estudiado con detalle el crecimiento en


funcin de la temperatura y se han definido con precisin las temperaturas cardinales
o fundamentales. La temperatura ptima para E.coli en un medio complejo es 39C,
la mxima 48C y la mnima 8C. Estos valores son susceptibles de pequeas
variaciones debidas a diferentes cepas y, en general, las temperaturas mxima y
mnima suelen ser respectivamente mayores y menores cuando se usan medio
complejos en vez de medios definidos.

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La temperatura es un factor ambiental importante en el control del crecimiento
microbiano. Las temperaturas cardinales o fundamentales definen las temperaturas
mnima, ptima y mxima a las que crece cada organismo. Los microorganismos
pueden agruparse segn los mrgenes de temperatura que requieren.

3.1.1. Crecimiento microbiano a bajas temperaturas

Como los seres humanos vivimos y trabajamos en la superficie de nuestro


planeta en lugares donde las temperaturas son generalmente moderadas,
consideramos que los ambientes muy calientes y muy fros son extremos. Son
extremos para los humanos porque moriran rpidamente si se les metiera en
agua hirviendo o en agua congelada. Sin embargo, los hbitats normales de
muchos microorganismos pueden ser extremadamente calientes o
extremadamente fros. Tales microrganismos se conocen como extremfilos
y han evolucionado hasta crecer de modo ptimo en esas condiciones.
Considerares aqu organismo que crecen a bajas temperaturas.

Ambientes fros

Gran parte de la superficie terrestre experimenta bajas temperaturas. Los


ocanos, que representan ms de la mitad de la superficie terrestre, tienen una
temperatura madia de 5C y las profundidades marinas tienen temperaturas
constantes de 1-3C. En el rtico y en el Antrtico hay vastas reas
permanentemente congeladas o que se descongelan slo algunas semanas del
ao, estos ambientes fros son estriles, solo se encuentran microorganismo
vivos creciendo a cualquier temperaturas donde el agua sea lquida.

Microorganismos pscrfilos y psicrotelorantes

Como ya se indic antes, los organismos con temperatura ptima baja se


llaman psicrofilos. Un psicrfilo puede definirse como un organismo que
tiene una temperatura optima de crecimiento de 15C o inferior, una
temperatura mnima de crecimiento por debajo de 20C y una temperatura
mnima de crecimiento de 0C o ms baja. Los organismos que crecen a 0C
pero tienen temperaturas ptimas de 20-40C se llaman psicrotolerantes.

Los organismos con temperaturas ptimas bajas se llaman psicrfilos y los


ejemplos ms extremos habitan ambientes permanentemente fros, estos

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poseen molculas biolgicas que funcionan mejor a baja temperatura, pero
anormalmente sensibles a temperaturas templadas

3.1.2. Crecimiento microbiano a altas temperaturas

La vida microbiana crece bien en ambientes con elevada temperatura, incluso


en el agua hirviendo. Por encima de 65C slo viven las procariotas de vida,
pero en esas condiciones existe en enorme diversidad de microorganismos
pertenecientes a bacteris y Archaea.

Ambientes con temperaturas altas

Los microorganismos cuya temperatura ptima est por encima de 45C se


llaman termfilos; y que aquellos cuya temperatura ptima est por encima
de 80C sin hipertermfilos. En la naturaleza, temperaturas tan altas solo se
encuentran en algunas reas muy restringidas.

3.1.3. Crecimiento microbiano a pH alto y a pH bajo

Es un parmetro crtico en el crecimiento de microorganismos ya que cada


tipo de microorganismo tiene un rango de pH en el que puede vivir
adecuadamente, fuera de este rango muere. El pH intracelular es ligeramente
superior al del medio que rodea las clulas ya que, en muchos casos, la
obtencin de energa metablica depende de la existencia de una diferencia
en la concentracin de protones a ambos lados de la membrana citoplsmica.
El pH interno en la mayora de los microorganismos est en el rango de 6,0 a
8,0.

Los rangos de pH tolerables por diferentes tipos de microorganismos


distintos. Hay microorganismos acidfilos que pueden vivir a pH=1.0 y otros
alcalfilos que toleran pH=10.0 Hay que considerar que, como consecuencia
del metabolismo, el pH del medio de crecimiento suele tender a bajar durante
el cultivo. Por otra parte, la bajada del pH del medio que producen ciertos

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microorganismos les confiere una ventaja selectiva frente a otros
competidores. As, por ejemplo, las bacterias lcticas que producen grandes
cantidades de cido lctico como consecuencia de su metabolismo primario
reducen el pH del medio a valores inferiores a los soportables por otras
bacterias competidoras (llegan a bajar el pH del medio hasta 4.5). De esta
forma, las bacterias competidoras mueren y las lcticas se convierten en la
poblacin dominante. La bajada del pH se puede deber a varios factores, uno
de los cuales es la liberacin de cidos orgnicos de cadena corta (frmico,
actico, lctico) por ciertas bacterias. En este sentido, hay que tener en cuenta
que la accin bactericida de estos cidos orgnicos de cadena corta es ms
potente que la debida nicamente a la bajada del pH que producen. Esto es,
los cidos orgnicos de cadena corta son txicos para algunas bacterias por s
mismos. El efecto letal del pH cido sobre los microorganismos tiene
aplicacin en la conservacin de alimentos acidificndolos. De esta forma, la
adicin de cido actico en forma de vinagre permite la conservacin de
alimentos perecederos (escabeches, por ejemplo) y la produccin de cidos
en el curso de fermentaciones naturales permite alargar la vida de los
alimentos (coles fermentadas, por ejemplo).

3.1.4. Efecto osmtico sobre el crecimiento microbiano

Se denomina actividad de agua a la relacin entre la presin de vapor de agua


del substrato de cultivo (P) y la presin de vapor de agua del agua pura (P0).
El valor de la actividad de agua est relacionado con el de la humedad relativa
(HR). El valor de la actividad de agua nos da una idea de la cantidad de agua
disponible metablicamente. Por ejemplo: comparemos el agua pura donde
todas las molculas de agua estn libremente disponibles para reacciones
qumicas con el agua presente en una disolucin saturada de sal comn (NaCl)
donde una parte importante de las molculas de agua participa en la
solvatacin de los iones de la sal disuelta. En este ltimo caso, la actividad de
agua mucho menor que en el primero. conforme aumenta la cantidad de
solutos en el medio, disminuye su actividad de agua. El agua es un substrato
en muchas reacciones bioqumicas (proteasas y lipasas, por ejemplo). Cuando
no hay agua disponible, estas reacciones se detienen y el metabolismo se para.

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Esta falta de agua tambin detiene muchas de las enzimas que podran
degradar las estructuras biolgicas. Por ello, las clulas que no crecen por
falta de agua no mueren rpidamente: los sistemas de degradacin tampoco
funcionan y no las degradan. Es decir: cuando un microorganismo se
encuentra en un substrato con actividad de agua menor que la que necesita,
su crecimiento se detiene. Esta detencin del crecimiento no suele llevar
asociada la muerte del microorganismo, sino que ste se mantiene en
condiciones de resistencia durante un tiempo ms o menos largo. En el caso
de las esporas, la fase de resistencia puede ser considerada prcticamente
ilimitada. La gran mayora de los microorganismos requiere valores de
actividad de agua muy altos para poder crecer. Los valores mnimos de
actividad para diferentes tipos de microorganismos son, a ttulo orientativo,
los siguientes: bacterias aw>0.90, levaduras aw>0.85, hongos filamentosos
aw>0.80. Como puede verse, los hongos filamentosos son capaces de crecer
en substratos con actividad de agua menor (ms secos) de la que permite el
crecimiento de bacterias o de levaduras. Por esta razn se puede producir la
colonizacin de substratos con baja actividad de agua (por ejemplo, alimentos
como el queso o almbares o la piel) por mohos (hongos filamentosos) mejor
que por bacterias. En funcin de su tolerancia a ambientes con baja aw, los
microorganismos que pueden crecer en estas condiciones se clasifican en
halotolerantes, halfilos y xerfilos segn toleren o requieran condiciones
salinas o hipersalinas, respectivamente. La reduccin de la actividad de agua
para limitar el crecimiento bacteriano tiene importancia aplicada en industria
alimentaria. La utilizacin de almbares, salmueras y salazones reduce la
actividad de agua del alimento para evitar su deterioro bacteriano.

3.1.5. Oxgeno y crecimiento microbiano

Potencial redox:

Nos indica la capacidad del substrato para aceptar o donar electrones, esto es:
sus caractersticas oxidantes o reductoras. Uno de los factores que intervienen
en el potencial redox, aunque no el nico, es la concentracin de oxgeno
[O2]. Hay microorganismos que requieren ambientes oxidantes para crecer,
mientras que otros necesitan ambientes reductores. El metabolismo de ambos
tipos de microorganismos presenta diferencias notables. El requerimiento de

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condiciones oxidantes o reductoras no debe confundirse con la necesidad de
presencia o ausencia de oxgeno para que se produzca el crecimiento. En
general, cuando un microorganismo requiere un ambiente oxidante se dice
que desarrolla un metabolismo oxidativo (o respirativo) mientras que los
microorganismos que requieren ambientes reductores (o menos oxidantes)
realizan un metabolismo fermentativo. Un microorganismo es aerobio cuando
necesita oxgeno para vivir y es anaerobio cuando o bien no lo necesita
(anaerobios facultativos como las bacterias entricas, o como Saccharomyces
cerevisiae; o anaerobios aerotolerantes como las bacterias lcticas) o cuando
muere en presencia de oxgeno (anaerobios estrictos como los clostridios).

Hay microorganismos que, aunque viven en presencia de oxgeno, no son


capaces de utilizarlo como aceptor final de electrones y deben desarrollar un
metabolismo fermentativo (los estreptococos, por ejemplo.) Por otra parte,
hay microorganismos que pueden desarrollar ambos tipos de metabolismo.
Esto es: en presencia de oxgeno desarrollan un metabolismo oxidativo y en
su ausencia, fermentativo. El rendimiento de los procesos fermentativos es
menor que el de los respirativos: las bacterias y las levaduras crecen menos
cuando lo hacen fermentando que cuando lo hacen respirando. En el curso de
ciertas reacciones metablicas redox se forman compuestos altamente
reactivos (radicales libres, formas superxido) que pueden daar las
protenas, membranas y cidos nucleicos produciendo la muerte de las
clulas. Las clulas se defienden de estos compuestos reactivos mediante las
enzimas siguientes: Superxido dismutasa (SOD) y catalasa. Los anaerobios
estrictos carecen de SOD y de catalasa o tienen niveles muy bajos de estas
enzimas de forma que no pueden sobrevivir en presencia de oxgeno. La
deteccin de estas enzimas tiene valor taxonmico.

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CONCLUSIONES

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IV. CONCLUSIONES

El crecimiento microbiano supone un incremento en el nmero de clulas


ms que en el tamao de clulas individuales.
El crecimiento de poblaciones se mide estimando los cambios en el
nmero de clulas, en la cantidad de algn componente de las mismas o en
el peso seco de las clulas.
Existen varios mtodos de contar el nmero de clulas o de determinar la
masa celular, adecuados para diferentes organismos o diferentes
situaciones.
El recuentro de clulas al microscopio mide el nmero total de clulas de
la poblacin, mientras que el recuento de viables (recuento de colonias)
mide solo la poblacin viva.
Los hbitats normales de muchos microorganismos pueden ser
extremadamente calientes o extremadamente fros siempre y cuando haya
agua lquida.
Las temperaturas calientes pueden hacer que la reproduccin de los
microorganismos se acelere siempre y cuando no pase la temperatura
mxima ya establecida para el organismo.

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ANEXOS

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V. ANEXOS

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BIBLIOGRAFA

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VI. BIBLIOGRAFA

Michael T. Madigan, John M. Martinko y Jack Parker (2009). Biologa

de los Microorganismo. 10ma Ed. Brock.

http://www.unavarra.es/genmic/microclinica/tema02.pdf

http://www.uprm.edu/biology/profs/massol/crecimmicrob.pdf

http://repository.lasallista.edu.co/dspace/bitstream/10567/512/1/pl_v

1n2_87-98_compost.pdf

http://www.diversidadmicrobiana.com/index.php?option=com_conte

nt&id=182&Itemid=225

http://webcd.usal.es/Web/educativo/micro2/tema07.html

https://es.wikipedia.org/wiki/Crecimiento_bacteriano

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