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CICLO CELULAR Y DUPLICACIN DEL ADN

Silvia Mrquez- Sergio Daniel Ifrn- Enrique Zabala

Ciclo celular
Las clulas de los distintos organismos pasan durante su vida por distintos perodos, cada uno de ellos
caracterstico y claramente diferenciado.

Cada tipo celular cumple con sus funciones especficas durante la mayor parte de su vida, creciendo
gracias a la asimilacin de materiales provenientes de su ambiente y con ellos sintetiza nuevas
molculas por medio de complejos procesos regulados por su material gentico.

Cuando una clula aumenta hasta llegar a un determinado tamao, su eficiencia metablica se torna
crtica, entonces se divide. En los organismos pluricelulares, se produce un crecimiento a partir de una
clula (huevo o cigoto) como as tambin se aumenta la masa tisular y se reparan los tejidos lesionados
o desgastados, por aumento del nmero de clulas.

Las nuevas clulas originadas en esta divisin poseen una estructura y funcin similares a las clulas
progenitoras, o bien derivadas de ellas.

Fig. 12.1 - Ciclo de Divisin Celular

En parte son similares porque cada clula nueva, recibe aproximadamente la mitad de organoides y
citoplasma de la clula madre, pero en trminos de capacidades estructurales y funcionales lo
importante es que cada clula hija, reciba una rplica exacta del material gentico de la clula madre.

Durante la vida celular, las clulas pasan por un ciclo regular de crecimiento y divisin. A esta
secuencia de fases se la denomina ciclo celular y en general consta de un perodo donde ocurre un
importante crecimiento y aumento de la cantidad de organoides (interfase) y un perodo de divisin
celular (mitosis o meiosis).

La interfase involucra perodos donde la clula realiza los procesos vitales propios de su funcin.
Durante ella, se producen tambin fenmenos a nivel nuclear imprescindibles para la divisin posterior.
Cronolgicamente podemos dividir la interfase en tres etapas G1, S y G2.
Haciendo un esquema del ciclo celular, el tiempo en que transcurre cada una de las etapas se
representa en la Fig. 12.2.

Es necesario sealar que existen excepciones a este ciclo, ya que no en todas las clulas los perodos
tienen la misma duracin. Incluso si consideramos una poblacin celular homognea (clulas del mismo
tipo), existen variaciones particulares. Siempre que se habla de tiempos determinados, se hace
considerando los promedios de cada tipo celular.

Tambin existen clulas que dejan de dividirse por largos perodos o bien permanentemente. Por
ejemplo, las neuronas permanecen luego de la maduracin del tejido nervioso en una etapa especial
denominada G0, donde las clulas entraran como alternativa a G1. En la actualidad es frecuente
referirse a este tipo de clulas como "no cclicas" o detenidas en G1, ya que no es seguro que las
clulas que no se dividen pasen por un solo estado.

Fig. 12.2 - Fases del Ciclo Celular

ETAPAS Y CARACTERSTICAS

Como ya se mencion, una clula tipo pasa a lo largo de su vida por etapas (G1, S y G2) antes de
dividirse. Las caractersticas ms relevantes de cada una de las mismas son:

Etapa G1: Esta etapa que sucede a la divisin celular es la ms variable en duracin. Las clulas hijas
recientemente originadas presentan una gran actividad metablica producindose un aumento
acelerado del tamao celular. Los organoides de la clula precursora han sido repartidos de manera
ms o menos equitativa entre las clulas hijas, deben entonces aumentar de tamao y tambin en
nmero para mantener las caractersticas de su tipo celular. Se sintetizan as ribosomas y
microtbulos a partir de las protenas y otras molculas que la conforman. Los organoides del sistema
de endomembranas, aumentan considerablemente de tamao, ya que ambas clulas hijas han recibido
parte de estos organoides. Sin embargo, pueden ser sintetizados de nuevo en caso de no existir
precursores. Esto no ocurre con mitocondrias y cloroplastos que se originan por divisin de estas
estructuras preexistentes. Como se recordar ambos organoides contienen ADN y ribosomas que les
permite dividirse de forma relativamente independiente del ncleo celular.

Todos los procesos de sntesis de nuevos organoides o aumento de tamao de los existentes, son
regulados mediante activacin de complejos enzimticos en un momento determinado.

En este perodo se observa, a su vez, una gran sntesis de ARNm como as tambin ARNt y ARNr.
Estos cidos sern utilizados para la sntesis de protenas estructurales, para la construccin y o
aumento de los organoides, como as tambin la produccin de enzimas necesarias para dicha sntesis.
Cabe destacar que durante este perodo tambin se sintetizan las enzimas que sern utilizadas en la
etapa siguiente, es decir en la duplicacin del ADN, como as tambin molculas precursoras de los
cidos nucleicos.

Cuando las clulas dejan de crecer (si se agotan los nutrientes o por inhibicin por contacto) lo hacen
en G1. Esto implica que tambin se sintetizan las sustancias que estimulan o inhiben distintas fases del
ciclo celular.

Etapa S: el perodo S o de sntesis de ADN tiene como caracterstica fundamental la sntesis de

nuevo material gentico, para que las clulas hijas tengan la misma dotacin. Sin embargo persisten los
altos ndices de sntesis de ARN para obtener enzimas requeridas en la sntesis de histonas que
formarn parte de la macroestructura del ADN y tubulinas relacionadas con el proceso de divisin
celular.

Etapa G2: En esta fase, ya con el ADN duplicado, la clula ensambla las estructuras necesarias para la
separacin de las clulas hijas durante la divisin celular y la citocinesis (separacin del citoplasma).

Etapa M: Durante M, la envoltura nuclear se desintegra, la cromatina se condensa en forma creciente

hasta ser visible los cromosomas al microscopio ptico. Estos cromosomas formados cada uno por dos
cromtidas (cromosomas duplicados) pasaran por cada una de las fases de la divisin celular (mitosis o
meiosis) para concluir con la formacin de las clulas hijas, cada una con una nica copia de su ADN
(cromosomas sin replicar) , que marcan el inicio de un nuevo ciclo.

SISTEMA DE CONTROL DEL CICLO CELULAR

El sistema de control del ciclo celular es un dispositivo bioqumico compuesto por un conjunto de
protenas reguladoras interactivas: las ciclinas y las quinasas dependientes de ciclinas que inducen y
coordinan los procesos bsicos del ciclo, como la duplicacin de ADN y la divisin celular, a los que
denominamos procesos subordinados.

Durante un ciclo tpico, el sistema de control est regulado por factores de retraso que pueden
frenar el ciclo en puntos determinados denominados puntos de control. En estos puntos, las seales de
retroalimentacin que contienen informacin sobre los procesos subordinados pueden detener
momentneamente el avance del ciclo, evitando el inicio del proceso siguiente antes que el precedente
haya terminado. Sobre dichos factores tambin actan seales del entorno como puede ser una
hormona o un factor de crecimiento.

Una analoga que puede ayudarnos a comprender este mecanismo es comparar al sistema de control del
ciclo celular con el funcionamiento de una lavadora automtica (1. Alberts y col -pg929-930), el
programador de la lavadora slo avanza a travs de los diferentes pasos del ciclo de lavado (etapas del
ciclo celular), si recibe determinadas seales. Adentro de la lavadora hay sensores que miden el nivel
de agua o jabn que ingresan. Estos sensores envan seales que pueden provocar el retraso o la
interrupcin del ciclo de lavado. De igual manera en la clula, las seales generadas en los procesos
subordinados (por ej. la sntesis de ADN) o por el entorno, detienen el ciclo.

A continuacin pasaremos a describir las protenas reguladoras, el mecanismo de regulacin y los

puntos de control del ciclo celular.
PROTENAS REGULADORAS DEL CICLO CELULAR

El pasaje de una clula a travs del ciclo es controlado por protenas citoplasmticas. Los principales
reguladores del ciclo en clulas animales son:

1. Las ciclinas, protenas que controlan la actividad de sus proteinquinasas dependientes. La

concentracin de ciclinas vara en forma cclica, aumentando o disminuyendo durante el transcurso del
ciclo celular. Esto se debe a variaciones en la velocidad de degradacin de la ciclina, dado que la
velocidad de sntesis es casi constante durante todo el ciclo. En los mamferos existen 6 ciclinas como
mnimo, denominadas A, B, C, D, E y F (Fig. 12.4b), pero nosotros las clasificaremos como ciclinas de G1
y ciclinas mitticas. Las ciclinas G1 se unen a sus quinasas dependientes de ciclinas (Cdk2) durante G1
siendo necesarias para superar el punto de control G1 y pasar a la fase S. Las ciclinas mitticas se
fijan a la quinasa Cdk1 durante G2, siendo necesaria su presencia para que el ciclo supere el punto de
control G2 y se inicie la mitosis. (Fig. 12.3 )

2. Las quinasas dependientes de ciclinas (CDK), enzimas que mediante la fosforilacin de

determinadas protenas desencadenan los procesos subordinados del ciclo celular. En los mamferos se
conocen 5 CDK las cuales forman tres grupos principales:

Fig. 12.3 - Complejo ciclina-quinasa dependiente de ciclina activo (ciclina-CDK)

CDK de G1 (Cdk2)

CDK de fase S (Cdk2)

CDK de fase M (Cdk1)

A diferencia de la concentracin de ciclinas, la concentracin de CDK se mantiene durante todo el ciclo

celular, por permanecer constantes tanto la velocidad de sntesis como la de degradacin (Fig. 12.4 y
12.5)

Las CDK se activan slo cuando se unen a las ciclinas para formar complejos, por lo que requieren un
nivel umbral para desencadenar la transicin a la fase siguiente del ciclo celular.

3. El Complejo Promotor de la Anafase (APC) y otras enzimas proteolticas. El APC

desencadena los eventos que conducen a la destruccin de las cohesinas [1] permitiendo a las
cromtidas hermanas separarse e iniciando la degradacin de las ciclinas mitticas.
Fig. 12.4 -Generalizacin del sistema de control del ciclo celular en eucariotas

Fig. 12. 5 - Ciclinas y CDK en un ciclo celular de vertebrados

MECANISMO DE REGULACIN DEL CICLO CELULAR

Al finalizar la mitosis aumenta la expresin de la ciclina G1 (E), esta ciclina se unir a la su quinasa
(Cdk2) formando un complejo activo conocido como factor promotor de Fase S (FPS ). Este FPS slo
puede actuar sobre cromosomas en estado Pre-Replicativo. As se denominan por poseer sobre cada
origen de replicacin un complejo multiproteico llamado Pre-Replicativo.

Los orgenes de replicacin (ORI) se presentan en nmero de 20 a 80 sobre cada lazo de cromatina y
se caracterizan por poseer una secuencia comn denominada secuencia de replicacin autnoma
(ARS) formada por dos secuencias "GAGGC" sobre las que se halla unido a lo largo de todo el ciclo
celular, el complejo de reconocimiento del origen de replicacin (ORC), uno de los complejos
protecos que forma parte del complejo Pre-Replicativo (PreR). El segundo componente del complejo
PreR es la protena Cdc6p (cell division cycle protein), que se sintetiza en G1 e inserta sobre los
orgenes de replicacin al ltimo componente, las protenas de mantenimiento de los minimicrosomas
(MCM). (Fig. 12.6)

El nivel creciente de FPS al inicio de la fase S induce la apertura de los orgenes de replicacin,
activando a las molculas responsables de la sntesis de ADN e induciendo la separacin del complejo
Pre-R del componente Cdc6p y MCM. Separados estos componentes, se inicia la sntesis, y por lo tanto
el FPS no se requiere ms, siendo su componente lbil, la ciclina de G1, degradada en los proteosomas.

Los cromosomas a partir de este momento se denominarn cromosomas Post-Replicativos (slo

presentan asociado a los orgenes de replicacin el ORC). Los cromosomas se mantendrn en estado
Post-R hasta el inicio de la anafase.

Degradadas las ciclinas G1, el nivel de ciclinas mitticas aumenta.

Un nuevo participante entra al ciclo, el complejo promotor de la mitosis, FPM, formado por las
ciclinas mitticas ms las quinasas dependientes de ciclinas de M (Cdk1). ste inicia el ensamblado del
huso mittico, la desintegracin de la envoltura nuclear y la condensacin de los cromosomas, al inducir
la fosforilacin de diferentes sustratos como las lminas nucleares, conduciendo a la clula a la
metafase.

A esta altura del ciclo, el FPM activa el complejo promotor de la Anafase, APC, que permite la
separacin de las cromtides hermanas y su migracin a los polos (anafase). As se completa la mitosis,
se destruyen las ciclinas de fase M y se activan las ciclinas de G1 para el prximo ciclo celular.
 Fig. 12.6 - Modelo simplificado propuesto para la replicacin de cromosomas eucariotas

CONTROL DE CALIDAD DEL CICLO CELULAR (Fig. 12.7)

Durante el ciclo celular, la clula pasa al menos tres puntos de control (checkpoints):

Punto de control G1, en este punto el sistema de control de la clula pondr en marcha el
proceso que inicia la fase S. El sistema evaluar la integridad del ADN (que no este daado), la
presencia de nutrientes en el entorno y el tamao celular. Aqu es donde generalmente actan las
seales que detienen el ciclo (arresto celular) .

Punto de control G2, en l se pone en marcha el proceso que inicia la fase M. En este punto,
el sistema de control verificar que la duplicacin del ADN se halla completado (que no este daado),
si es favorable el entorno y si la clula es lo suficientemente grande para dividirse.

Punto de control de la Metafase o del Huso, verifica si los cromosomas estn alineados
apropiadamente en el plano metafsico antes de entrar en anafase. Este punto protege contra
prdidas o ganancias de cromosomas, siendo controlado por la activacin del APC.


Fig. 12.7 - Puntos de Control e Ingreso de la informacin Reguladora al Sistema de Control del Ciclo Celular

Protena p53, el guardin del genoma

Como hemos mencionado en los prrafos precedentes, tanto en el punto de control G1 como G2 se
verifica la integridad del ADN. Ante la presencia de ADN daado se genera una seal que retrasa la
entrada en fase M. El mecanismo depende de una protena llamada p53, que se acumula en la clula en
respuesta a las alteraciones de ADN, deteniendo el sistema de control en G1 y por lo tanto impidiendo
la posterior entrada en mitosis. El gen p53 es uno de los genes supresores de tumores ms
conocidos, que no slo detiene el ciclo (arresto celular), sino tambin participa en la apoptosis (muerte
celular programada) forzando a las clulas al suicidio cuando el dao en el ADN es irreparable.

Las clulas que presentan los dos alelos del gen p53 mutados, tendrn protena p53 no activa y por lo
tanto continuarn dividindose a pesar del dao en su genoma, por lo tanto desarrollarn cncer. Las
mutaciones del gen p53 presenta una alta incidencia en la mayora de los cnceres humanos.

Cmo acta la p53?

Cuando el ADN presenta un dao "limitado", aumentan los niveles de protena p53. Dicha protena
activa la transcripcin del gen p21, que codifica a la protena p21. Esta ltima protena ejerce su
efecto inhibidor unindose al complejo ciclina-Cdk2 y deteniendo el ciclo. Cuando el ADN es reparado,
la protena p53 se libera del promotor del gen p21, provocando el descenso en los niveles de p21. Esto
permite restaurar la actividad del complejo ciclina-Cdk2.


Fig. 12.8 - Accin de la Protena p53 en el Control del Ciclo Celular

ONCOGENES Y CNCER

Los genes supresores de tumores, codifican para productos celulares que inhiben la proliferacin
celular. Para impedir el efecto protector que ejercen sobre el genoma, se requiere la mutacin de sus
dos alelos.

Los genes conocidos como protooncogenes codifican protenas que estimulan la divisin celular, por
ejemplo, factores del crecimiento o receptores de factores del crecimiento.

La mutacin de uno de los dos alelos que codifican para un protooncogen, lo transforma en un oncogen
capaz de originar productos celulares que estimulan la divisin celular de forma incontrolada
conduciendo al cncer, con alteracin de los mecanismos de control del ciclo celular.

En la siguiente tabla se mencionan a titulo informativo los oncogenes y genes supresores de tumores
mejor conocidos por su expresin durante el ciclo celular.

Tabla 12.1 - ALGUNOS GENES RELACIONADOS CON CNCERES EN HUMANOS

Genes para factores de crecimiento o sus receptores
PDGF Codifica el Factor de crecimiento derivado de las plaquetas.
Responsable de glioma (un cncer del cerebro)
erb-B Codifica al Factor de crecimiento epidrmico. Relacionado con
ONCOGENES gliobastoma (cncer del cerebro) y cncer de mama.
erb-B2 Codifica receptor de factor de crecimiento. Relacionado con cncer
de mama, glndulas salivales y ovario.
RET Codifica receptor de Factor del crecimiento. Relacionado con cncer
de tiroides.
Genes para transductores citoplasmticos en vas estimuladoras
Ki-ras Responsable de cncer de pulmn, ovario, colon y pncreas.
N-ras Relacionado con leucemias.
Genes para factores de transcripcin que activan genes promotores del
crecimiento
c-myc Relacionado con leucemias y cnceres de estmago, pulmn y mamas
N-myc Relacionado con neuroblastoma (cncer de clulas nerviosas) y
 ONCOGENES glioblastoma
L-myc Relacionado con cncer de pulmn.
Genes para otros tipos de molculas
Bcl-2 Codifica para una protena que normalmente bloquea la apoptosis.
Relacionado con linfoma de clulas foliculares B.
Bcl-1 Tambin llamado PRADI. Codifica la ciclina D1, un ciclina reguladora
del ciclo celular. Relacionada con cncer de mama, cabeza y cuello.
MDM2 Codifica un antagonista de la protena p53. Participa en sarcomas y
otros cnceres.
Genes de protenas citoplasmticas
APC Relacionada con cncer de coln y estmago.
DPC4 Codifica para una molcula transductora en una va que inhibe la
divisin celular. Relacionada con cncer pancretico.
NF-1 Codifica para una protena que inhibe a la protena Ras. Relacionada
con neurofibroma y feocromocitoma (cncer del sistema nervioso
perifrico) y leucemia mieloide.
NF-2 Relacionado con meningioma y ependinoma (encfalo) y
schwanoma (nervios perifricos)
Genes de protenas nucleares
GENES SUPRESORES MTS1 Codifica para la protena p16, uno de los frenos del sistema de
DE TUMORES control del ciclo celular. Relacionada con muchos cnceres.
RB Codifica para la protena RB (retinoblastoma). Esta protena es uno
de los principales frenos en el ciclo celular.
p53 Codifica para la protena p53, la cual detiene la divisin celular e
induce a las clulas anormales al suicidio (apoptosis). Relacionado con
la mayora de los cnceres .
WT1 Relacionado con el Tumor de Wilms del rin.
Genes que codifican protenas de ubicacin an no determinada
BRCA1 Relacionado en cnceres de mama y ovario.
BRCA2 Relacionado con cncer de mama.
VHL Relacionado con cncer de clulas renales.

DUPLICACIN DEL ADN

CARACTERSTICAS DE LA DUPLICACIN DEL ADN

Aunque los principios generales de la duplicacin o replicacin del ADN son sencillos y pueden
considerarse como consecuencia directa de su estructura, el proceso requiere una maquinaria compleja
que contiene una gran cantidad de enzimas y protenas que actan en conjunto.
 Fig. 12.9 - La duplicacin del ADN se produce previo desenrollamiento de las dos cadenas de la doble
hlice, usando cada una como molde para sintetizar las nuevas cadenas.

1.MLTIPLES PUNTOS DE ORIGEN

Los cromosomas eucariontes tienen una gran cantidad de ADN, el cual se halla contenido en dos
molculas lineales, una para cada cromtide. Si estas molculas se replicasen a partir de un sitio nico
de origen, la etapa S de la Interfase sera extremadamente larga. Las clulas eucariontes resuelven
este problema disponiendo de mltiples sitios de origen de la replicacin en cada cromosoma. En ellos,
el ADN presenta secuencias especiales de nucletidos. Adems todos los orgenes tienen en comn
secuencias conservadas de aproximadamente doce pares de nucletidos, llamados ARS (autonomus
replication secuence).

Fig. 12.10 - La replicacin siempre comienza en los sitios de origen en cada cromosoma. En ellos el ADN
presenta secuencias especiales de nucletidos

2.DESENROLLAMIENTO DE LAS CADENAS DE ADN

En cada cromosoma, las dos cadenas del ADN se encuentran arrolladas una a la otra como los hilos de
una soga. Si tratamos de separarlas, la soga debe apretarse ms en las vueltas restantes o girar. Algo
similar ocurre en el ADN, cuando las cadenas complementarias se separan para iniciar la duplicacin.
En ese momento aumenta la tensin torsional en el sector no duplicado de la doble hlice.
Fig. 12. 11 - Separacin progresiva de las dos cadenas de ADN a nivel de la horquilla de replicacin y su
posible consecuencia biolgica.

El desenrollamiento es realizado por las enzimas ADN-helicasas, las cuales recorren la hlice
desenrollando las hebras del ADN a medida que avanzan. Una vez separadas, las cadenas se combinan
con las protenas SSB, llamadas tambin protenas desestabilizadoras, que evitan el autoapareamiento
entre las bases complementarias libremente expuestas.

Fig. 12.12 - Cadenas adelantada y retrasada del ADN durante la replicacin. La helicasa separa a las
dos cadenas del ADN y las protenas SSB evitan autoapareamientos entre las bases complementarias
libremente expuestas en la cadena atrasada.

A medida que la enzima helicasa abre la doble hlice, dos enzimas complementarias: la topoisomerasa
I y la topoisomerasa II o girasa, van disminuyendo la tensin torsional acumulada por el
superenrollamiento en el sector no replicado de la doble hlice.

La topoisomerasa I primero corta una de las cadenas del ADN, luego la cadena cortada gira una
vuelta en torno a su propio eje y finalmente vuelve a unir los extremos cortados.

La topoisomerasa II corta las dos cadenas, las cuales luego de girar una vuelta alrededor del eje de
la doble hlice, restablecen sus uniones.

Ambas enzimas utilizan energa del ATP y se comportan como nucleasas (cortando las cadenas de
ADN) y luego como ligasas (restableciendo las uniones fosfodister).

Las topoisomerasas I y II se diferencian no slo porque la primera corta una de las cadenas y la
segunda corta las dos, sino tambin porque la topoisomerasa I realiza desenrollamientos de corto
alcance y la girasa abarca una extensin de ADN bastante mayor.
 Fig. 12.12 - Efecto hipottico de la topoisomerasa II para evitar el superenrollamiento que se produce en el
ADN como consecuencia de la separacin progresiva de sus cadenas.

3.LA DUPLICACIN DEL ADN ES BIDIRECCIONAL

Al abrirse la doble hlice se forma una burbuja de replicacin, cuyo tamao aumenta a medida que
avanza la separacin de las dos cadenas del ADN, fenmeno que se produce en ambos extremos de la
burbuja en forma simultnea. Se establece de este modo, en cada uno de los extremos, una estructura
en forma de Y, a la que llamamos horquilla de replicacin, cuyos brazos representan a las cadenas ya
separadas de ADN y el tronco la doble hlice en vas de separacin. As cada burbuja tiene dos
horquillas de replicacin que a partir de un punto de origen comn avanzan en direcciones opuestas.
Las horquillas desaparecen cuando se van integrando a las burbujas contiguas. Las horquillas que
recorren los telmeros desaparecen cuando se separa el ltimo par de nucletidos.

El segmento de ADN que se sintetiza a partir de un origen de replicacin (con sus dos horquillas), lo
llamamos replicn. De este modo la replicacin del ADN termina cuando se ensamblan los sucesivos
replicones. Esto permite que el ADN se sintetice en un tiempo bastante breve para el ciclo de vida
de una clula.

Fig. 12. 14 - Esquema que muestra dos replicones contiguos y los puntos donde se origina la replicacin
(flechas). Puede observarse el carcter bidireccional de la replicacin y los sectores donde el ADN se
sintetiza en forma continua y discontinua.

4.LA SNTESIS DE ADN ES DISCONTINUA

Una de las caractersticas de las ADN-polimerasas es que slo pueden actuar en direccin 5 3,
por agregado de nucletidos en el extremo 3 de las cadenas nuevas. Como vimos, a medida que se
separan las cadenas progenitoras en la horquilla de replicacin, una presenta sus nucletidos en
direccin 5 3 y la otra en direccin 3 5. De manera que la primera al ser copiada debera
formar una cadena hija en sentido 3 5, algo que las polimerasas no pueden hacer.

Las clulas solucionan esta situacin utilizando estrategias distintas en la construccin de cada una de
las nuevas cadenas. La cadena hija que se form en direccin 5' 3 se construye en forma
continua mediante el agregado de nucletidos en el extremo 3 a medida que avanza la horquilla de
replicacin. En cambio la otra cadena hija es sintetizada de manera discontinua, en pequeos
tramos, llamados fragmentos de Okazaki, los cuales se unen entre s a medida que se sintetizan, por
accin de la enzima ADN-ligasa.

Por lo expuesto, podemos decir que la sntesis del ADN es un proceso bidireccional, no slo porque se
produce en dos direcciones divergentes a partir de una misma burbuja de replicacin, sino tambin
porque las cadenas de la doble hlice son sintetizadas en direcciones opuestas.

Fig. 12. 15 - Replicacin semiconservativa del ADN.

5.MODELO SEMICONSERVATIVO

Como las nuevas hlices de ADN estn formadas por una cadena original (preexistente) que sirvi
de molde y una cadena nueva (recin sintetizada) decimos que el mecanismo de replicacin es
semiconservativo.

INICIO DE LA SNTESIS DE ADN

Para iniciar la sntesis de las cadenas complementarias se requiere adems del ADN molde un cebador
o primer , que consiste en una pequea cadena de ARN de unos diez nucletidos de largo. La sntesis
del cebador es catalizada por una enzima llamada ARN-primasa y. el cebador queda unido al ADN
temporariamente. Una vez sintetizado el cebador la sntesis contina si la ADN-polimerasa tiene
disponibles suficientes desoxirribonucletidos trifosfatados (dATP, dGTP, dCCP y dTTP). stos se
agregan en la cadena nueva de acuerdo a la secuencia de nucletidos de la cadena que sirve de molde.
Gran parte de la energa requerida durante la replicacin la aportan los desoxirribonucletidos
trifosfatados, que hidrolizan los ltimos dos grupos fosfato (liberando energa) cuando se unen
entre s.

Al iniciarse la sntesis continua del ADN, en cada origen se forman dos cebadores orientados
divergentemente uno en cada cadena de la doble hlice y a continuacin la ADN-polimerasa
cataliza la sntesis de la cadena continua agregando nucletidos en el extremo 3 de la hebra en
formacin. Mientras tanto los cebadores son removidos por una nucleasa reparadora y su lugar es
reemplazado por un fragmento de ADN equivalente sintetizado por la ADN-polimerasa .

Como vimos la cadena continua requiere un solo cebador que se forma a comienzo de la replicacin,
en cambio la cadena discontinua necesita muchos cebadores, uno para cada fragmento de Okazaki.
La enzima responsable de la sntesis discontinua es la ADN-polimerasa . Cabe sealar que las
ADN-polimerasas son sostendas por un anillo proteico llamado PCNA (Proliferating Cell Nuclear
Antigen) mientras realiza el deslizamiento por la cadena de ADN

Fig. 12.16 - Doble hlice de ADN desenrrollndose. Cada cadena servir de molde para la sntesis de
cadenas nuevas


Fig. 12.17 - La energa para el proceso de replicacin la proveen los mismos desoxirribonucletidos
trifosfatados, con la hidrlisis de los ltimos dos grupos fosfato-
 Fig. 12. 18 - Unin del aro de PCNA a la ADN polimerasa

Los fragmentos de Okazaki alcanzan una longitud de 200 nucletidos. Una vez completa la sntesis
de un fragmento ambas enzimas se liberan y vuelven juntas hacia el ngulo de la horquilla de
replicacin, dejando atrs los 200 nucletidos del segmento que acaban de sintetizar y otros tantos
del ADN molde que se usar para copiar el prximo fragmento de Okazaki.

Como ocurre con la polimerasa d en movimiento, la ADN-polimerasa a no se desprende del ADN

debido a que se le asocia un aro de PCNA. Luego el cebador es hidrolizado por una nucleasa, la que
se encarga tambin de reparar errores (segundo sistema de reparacin) y los huecos son rellenados
con desoxirribonucletidos por la ADN-polimerasa . Finalmente los fragmentos de Okazaki son
unidos por la ADN-ligasa.

La discontinuidad de la sntesis hace que la hebra mal orientada crezca ms lentamente que la otra,
que lo hace en forma continua, por esta razn se les asign el nombre de cadena rezagada y cadena
adelantada respectivamente.

Replicacin de la heterocromatina

La heterocromatina por estar muy compactada se replica tardamente durante la fase S del ciclo
celular.

Sntesis de histonas

Hemos sealado que el ADN se replica en forma semiconservativa, es decir que las cadenas de la
doble hlice progenitora, al separarse para su replicacin, se comparten por igual en ambos
cromosomas hijos. En cambio no se sabe como se segregan las histonas. Es posible que al cabo de la
replicacin sean heredadas totalmente por uno de los cromosomas hijos, en este caso el otro
cromosoma hijo debe procurarse de la totalidad de histonas nuevas.

En su mayor parte las histonas se sintetizan durante la fase S de la interfase y se incorporan al

cromosoma apenas es duplicado el ADN

Replicacin en Procariontes

Muchas de las caractersticas esenciales de la duplicacin del ADN son universales, aunque existen
algunas diferencias entre procariontes y eucariontes debido a que su material gentico est
organizado de manera distinta.

En las bacterias casi todo el ADN se encuentra formando una cadena circular, en cambio en los
eucariontes cada cromosoma no duplicado contiene una cadena lineal asociada a una gran cantidad de
protenas y algo de ARN.

En procariontes al existir un nico punto de origen se forma slo un ojal de replicacin. Aqu actan
tres ADN-polimerasas:
ADN-polimerasa I, es la que elimina el cebador y reemplaza los ribonucletidos de ste por
desoxirribonucletidos, rellenando los huecos dejados por la ADN-polimerasa II. Adiciona 10
nucletidos/seg.

ADN-polimerasa II, tiene actividad de nucleasa, es decir que retira nucletidos de la cadena de
ADN en los sitios donde se produjeron errores o desemparejamientos.

ADN-polimerasa III, es la enzima responsable de alargar las cadenas en el proceso de replicacin.

Adiciona 500 nucletidos/seg.

Fig. 12.19 - Mecanismo de replicacin del ADN en clulas procariontes

 Fig. 12.20 - Mecanismo de replicacin en procariotas

Cuadro 12.1 - MLTIPLES FUNCIONES DE LAS ADN-POLIMERASA EN E. COLI

Sntesis de ADN en sentido 5 3

Exonucleasa en sentido 3 5
Poli. I y Poli. III
Correccin de errores, removiendo
nucletidos en sentido 5 3
Poli. I Exonucleasa en sentido 5 3

Cuadro 12.2 - PRINCIPALES ENZIMAS QUE ACTUAN EN LA REPLICACIN

Enzimas Reacciones que catalizan
Elimina el cebador, reemplazando los
ADN-polimerasa I (procariontes) ribonucletidos por desoxirribonucletidos.
Rellena los huecos del ADN.
ADN-polimerasa II (procariontes) Nucleasa, corrige errores.
Principal enzima de la replicacin. Sintetiza la
ADN-polimerasa III (procariontes) cadena nueva a partir del cebador. Realiza
correccin de pruebas.
Sintetiza los fragmentos de ADN discontinuos
ADN-polimerasa (eucariontes
a partir del cebador.
Rellena los huecos dejados por el cebador y
ADN-polimerasa (eucariontes) repara errores como un segundo sistema de
reparacin.
Sintetiza la hebra continua a partir del
ADN-polimerasa (eucariontes)
cebador y realiza lecturas de prueba.
Helicasas Rompen los puentes de hidrgeno, separando
 las cadenas del ADN.
Primasas Sintetizan el primer o cebador.
Se extienden sobre las hebras del ADN
Protenas SSB evitando autoapareamientos entre las bases
libremente expuestas
Topoisomerasas I y II Corrigen el superenrollamiento

[1] Cohesinas: protenas que mantienen unidas transitoriamente a las cromtidas hermanas.

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