LABORATORIO DE QUIMICA ANALITICA - UNIVERSIDAD DEL VALLE

DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE NITRGENO

POR EL MTODO DE MICROKJELDAHL.
Andrs Chinguad (1532565), Oscar David Gutirrez Nopia (1626872).
andres.chinguad@correounivalle.edu.co, gutierrez.oscar@correounivalle.edu.co
4 de abril del 2017. Departamento de Qumica, Universidad del Valle.

Palabras claves: protena, nitrgeno, kjeldahl

Abstract. La presente prctica consisti en la determinacin del contenido de nitrgeno en un alimento, mediante la
utilizacin del mtodo de Kjeldahl, para ello se tom una muestra, la cual se digesto en medio acido, despus la
muestra se dej enfriar, y se le agrego una solucin alcalina, formando amoniaco. El amoniaco formado se destila
hacia una solucin de cido brico con indicador mixto, formndose el ion borato. Seguidamente la solucin formada
se titula con cido clorhdrico estandarizado, obteniendo 1.90% de y 11.88% de protena en la muestra.

Introduccin. En la tierra se encuentran una diversa
cantidad de elementos qumicos que en diversas
formas conforman toda la materia que conocemos. El
nitrgeno (), es uno de los elementos ms
abundantes presentes en la tierra solo superado por el
oxgeno y es el elemento libre ms abundante en la
tierra, siendo el constituyente principal de la atmosfera.
El nitrgeno se encuentra en su estado libre como
molcula de dinitrgeno (2 ) en estado gaseoso y se
extrae de la atmosfera por destilacin del aire liquido
[1]. Aunque el nitrgeno se encuentra presente dentro
de muchos compuestos, se considera uno de los
elementos ms inertes en la tierra, ya que su reaccin
con otros elementos es nula debido a la fortalece del
enlace ( ) [1].
La asimilacin del nitrgeno por parte de los seres
humanos es un proceso muy largo, ya que como se
haba mencionado antes el N es un compuesto muy
poco reactivo, aun as existen ciertas formas de
asimilarlo, bien sea por la ingesta de carne o por la
ingesta de plantas, los cuales tiene presente el N en
forma de protena, y estas protenas son
fundamentales para la vida de las personas [2].
Uno de los mtodos ms usados para la cuantificacin
de nitrgeno en una protena fue el mtodo creado por
el seor Johan Kjheldahl, el cual propuso realizar una
digestin acida a la muestra para despus, poder
cuantificar el nitrgeno presente en ella, mediante el
uso de diversas reacciones[3].
Metodologa. Se pesaron 0.08 gramos de muestra
aproximadamente y se depositaron en un matraz
microkjeldahl, seguidamente a la muestra se le
adiciono 0.1 g de una mezcla 3:1 de 4 y y
2.0 g de 2 4 . Posteriormente a la muestra se le
agrego 2.5 ml de 2 4 y se coloc en el digestor a un
ngulo de 45 grados dentro de la campana de
extraccin. Se calienta la muestra hasta que hierva,
vigilando que la muestra no se suba al cuello del
matraz y se pierda.
Se calienta suavemente la muestra (30 min a 2 horas),
hasta que adquiera un color incoloro o verde claro y no
se observen partculas en suspensin. Se deja enfriar
la muestra y se deposita dentro del equipo de
microdestilacin, realizando lavados al matraz que
contena la muestra, con un valor mximo de 10 ml de
agua destilada y depositando los lavados en el equipo
de microdestilacin. Se conecta el equipo de
destilacin a la llave y se habr la llave, suministrando
agua al condensador. La manguera que se desprende
del condensador se sumerge en un erlenmeyer con 10
ml de 3 3 al 4% y 5 gotas de indicador mixto.
A la muestra, se le adiciona 15 ml de solucin alcalina
y se tapa inmediatamente. Se procede con el proceso
de destilacin, calentando suavemente y aumentando
la temperatura gradualmente. Se espera el cambio del
indicador, con lo cual se sigue destilando durante 10
min ms. Despus se retira el erlenmeyer y el borato
formado se titula con estandarizado. Por ltimo se de amoniaco (3 ), la reaccin ocurrida aparece en la
realiza un blanco. siguiente ecuacin:

Resultados. Como primera parte de la prctica se 4 4 + 3 + 2 + 4

procedi a la preparacin de una solucin 0.02 M de
, a partir de al 37%, para ello es necesario
conocer la densidad del reactivo y saber cuntos
mililitro se va a preparar. Como la solucin es para
todo el grupo se prepararon 100 ml de solucin. Los
clculos utilizados para preparar la solucin son:
El amoniaco formado se lleva a calentamiento, para
despus condensarlo, y depositarlo dentro de una
solucin de cido brico con indicador mixto (3 3 )
dando la formacin del ion amonio y el ion borato. La
reaccin ocurrida se describe de la siguiente forma.

0.02 36.458
100 3 + 3 3 4 + + 2 3
1000 1
100 1
= 0.17 El ion borato formado se titula con la solucin de
37 1.184
estandarizada, consumindose 5 ml de para la
valoracin, la reaccin ocurrida se describe a
Se requieren 0.17 ml del reactivo concentrado para continuacin.
preparar 100 ml de una solucin 0.02 M de .
2 3 + 3 3 + 4
Seguidamente se procedi a realizar la
estandarizacin de la solucin preparada Con los 5 ml de , se procede a calcular el
anteriormente, utilizando para ello 2 3 seco. Se porcentaje de en la muestra, as como el porcentaje
tomaron 0.05 g de 2 3 y se disolvieron en 10 ml de de protena presente en la muestra. Hay que tener en
agua, de ah se tomaron 2.5 ml y se titul con la cuenta que la relacin entre el y2 3 es 1:1, as
solucin de , consumindose 10 ml, la mismo la relacin entre el 3 3 y el 3 , es 1:1, y la
concentracin real se halla de la siguiente relacin del 3 , con el N proveniente de la muestra
manera: es 1:1, con estas relaciones se procede a hallar la
1 2 3 2 cantidad de nitrgeno en la muestra de la siguiente
0.05 2 3
105.99 2 3 ! 2 3 manera:
1 1 1 0.0025

1 1 0.010 0.010
0.0236 1 2 3
= 0.0236 5.0
1000 1
1 4 + 1 3 1
Posteriormente se tom 0.0871 g de la muestra y se le +
realizo una digestin mediante calentamiento y con la 1 2 3 1 4 1 3
adicin de 2 4 , descomponiendo la protena en 14.01
= 1.65318 103 g de N
diversos compuestos, la reaccin que ocurre est dada 1
por la siguiente ecuacin:
Con los gramos de nitrgeno, se procede a hallar el
porcentaje de nitrgeno en la muestra cmo % p/p, el
+ 2 4 2 + 2 + 4 4
clculo se realiza de la siguiente manera.
El N en la muestra de protena se encuentra presenta
1.65318 103
en forma de sulfato acido de amonio (4 4 ). %( ) = 100 = 1.90 %
0.0871
Despus la muestra se transfiere a un baln, con
destilador, y se le adiciona una solucin alcalina de
Obtenindose 1.90 % de N en la muestra. Para hallar
y tiosulfato de sodio, observndose la formacin
el porcentaje de protena en la muestra, se hace
necesario la utilizacin del factor proteico. Este factor
proteico es singular para cada alimento, aun as se ha
establecido un valor genrico del factor proteico, el
cual es de 6.25 y sirve para hallar el porcentaje de
protena en una muestra. Multiplicando el factor
proteico y el porcentaje de N en la muestra, se obtiene
el porcentaje de protena en la muestra.
% = % 6.25( ) 4 y , a la muestra y adicionamos el cido
= 1.90 6.25 = 11.88 %
El porcentaje de protena reportado en la muestra es
del 10% por cada 5 g de muestra, observando este
valor, se evidencia que se obtuvo ms protena que la
reportada en la etiqueta del producto, realizando el
clculo del error relativo se obtiene.
10.00 11.88
%. = 100 = 18.8%
10.00
Discusin. La cuantificacin de nitrgeno en una
muestra se realiza, para hallar la relacin entre el
nitrgeno y la protena presente en la muestra. Aunque
hay varias maneras de determinar los contenidos
mencionados anteriormente cabe resaltar que uno de
los mtodos ms utilizados en la antigedad y an
vigente, es el mtodo Johan Kjheldahl planteado en
1883, el cual por medio de una digestin acida logra
descomponer, los componentes de la protena y a su
vez transforma el nitrgeno de la protena en sulfato
acido de amonio el cual puede ser cuantificado
mediante la utilizacin de diversos reactivos y
reacciones [3]. Hay que tener en cuenta que aunque el
mtodo era eficiente respecto a una buena
cuantificacin del nitrgeno y de la protena, este
mtodo era demasiado lento, tardndose horas para
realizar la cuantificacin. En el ao de 1889 el seor
Harry Gunning, descubri que el sulfato de potasio
elevaba el punto de ebullicin del cido sulfrico,
ocasionando que la digestin se realizara ms rpido y
por ende que la cuantificacin se demorara menos. As
mismo observo que el sulfato de potasio no intervena
en la reaccin sino que simplemente actuaba como
espectador [3].
Aunque en ese tiempo, no se saba el porqu del
comportamiento del sulfato de potasio con el tiempo se
descubri que esta sustancia era un catalizador. Un
catalizador es una sustancia que se agrega a una
reaccin, para que esta se efectu ms rpido, sin que
la sustancia agregada reaccione con las sustancias
presentes en la reaccin [4]. En este sentido cuando
agregamos el sulfato de potasio y la solucin 3:1 de
sulfrico, el sulfato de potasio, 4 y actuaron
simplemente como catalizadores, aumenta la ebullicin
del cido sulfrico y sin intervenir en la reaccin del
cido con la muestra.
Una vez digestada y reposada la muestra, se traspasa
a un baln con destilador, observndose que la
muestra se encuentra en un estado muy denso,
resistindose a deslizarse por las paredes del baln,
esto se debe a que la muestra est concentrada y esta
concentracin, ayudo que la viscosidad de la muestra
aumentara, al puto de casi no deslizarse.
En la adicin de la solucin alcalina a la muestra, se
observa la formacin de un gas, el cual es el amoniaco
en forma gaseosa, este gas es de olor desagradable.
El gas pasa a travs del condensador y llega hasta la
solucin de cido brico formando el ion borato, en
esta reaccin hay que resaltar el hecho de que no se
presenta transferencia completa del protn del 3 3
al 3 , esto se debe a que el 3 es una base dbil,
la cual solo reacciona parcialmente, con el cido,
obteniendo concentracin de 3 y concentracin del
4 + en la solucin [5].
En la titulacin del ion borato con el hay que tener
en cuenta, que se utiliza un indicador mixto. Este
indicador se prepara de la combinacin del indicador
rojo de metilo y verde de bromocresol, se dice mixto
porque este indicador reacciona tanto a pH alcalino
como a pH acido, en un intervalo no tan alejado de pH.
Tambin hay que resaltar el hecho de que los blancos
en la prctica se daaron, ocasionando que no se
pueda saber cunto volumen de titlante consume el
indicador.
En la prctica se obtuvo un error por manipulacin de
los reactivos por parte de los practicantes, ya que en el
momento de adicionar la solucin alcalina a la
muestra, parte de la solucin se traspas por medio
del condensador hacia la solucin de 3 3 ,
ocasionando que esta solucin se tornara azul, por la
presencia de la solucin alcalina. Despus se cambi
de solucin de 3 3 , y se burbujeo el amoniaco hasta
el cambio del indicador. En esta parte se obtuvo
bastante error ya que en el momento del cambio de
una solucin a otra, la manguera que provee el
amoniaco no estuvo sumergida en ninguna solucin y
por ende el amoniaco formado se escap al ambiente.
En esta parte tambin hay que tener en cuenta que
como parte de la solucin alcalina haba pasado a
travs del condensador, parte de esta solucin se
qued dentro de la manguera de desprendimiento
lateral, ocasionando que cuando se destilaba el
amoniaco, parte de la solucin alcalina se pas
nuevamente a la solucin de 3 3 , esta situacin se
ve reflejada en el hecho de que cuando se titul la
solucin de 3 3 , con , esta solucin nunca
cambio de color, habiendo agregado ms de 25 ml de
, lo que confirma que la solucin se encontraba
alcalina.
borato (2 3 ), la fuerza cida del ion amonio es
despreciable, ya que es el cido conjugado de una
base dbil el amoniaco, razn por la cual en solucin
este no tiende a ceder protones por otro lado, se
encuentra el ion borato es la base conjugada del cido
brico, un cido dbil, que es ms fuerte que el cido
conjugado del 4 + , lo cual significa que su base
conjugada posee una fuerza bsica suficiente para
reaccionar con el cido clorhdrico completamente,
gracias a esto, es que principalmente se debe utilizar
en vez de [5].
2// R
8.5 1
1.50
100 14.01
1 3 1 1000
1 1 3 0.1
= 91.00
Conclusiones.
Se debe tener extrema precaucin, en el momento de
transvasar la muestra al baln, ya que si se deja enfriar
mucho, la muestra se coloca muy densa, haciendo
caso imposible el traslado cuantitativo de un
instrumento al otro.

Por ultimo cabe aclarar que los clculos realizados son

Con el equilibrio acido-base se puede encontrar las
errneos ya que como, se mencion anteriormente la
concentraciones de iones + , siendo estas de
valoracin no se dio, y por lo tanto se utilizaron los
gran utilidad para definir el equilibrio del sistema, aun
datos de otro compaero para realizar los clculos. Por
as en esta caso tambin se pudo definir la
tanto se puede afirmar que el error en el clculo se
concentracin de N, con lo cual se estable que si se
debe a que la muestra del grupo no era en peso, la
conoce la estequiometria de las diversas reacciones en
misma que haban tomado los compaeros y por eso
un proceso, se puede hallar la concentracin de la
el error que nos da es por exceso de muestra.
especie de inters.
Tambin este error se puede a atribuir al hecho que
dentro de la muestra se podra encontrar nitrgeno no
Se debe tener cuidado en el momento de adicionar la
proteico, el cual no tiene ningn valor nutricional.
solucin alcalina a la muestra, ya que una pequea
Siendo as se podra encontrar un exceso en la
traza de solucin que pase al condensador y a la
cuantificacin de nitrgeno, por parte de la
solucin de cido brico, ocasionara que la solucin
cuantificacin del nitrgeno de la protena ms el
se volviera alcalina y por ende que la valoracin no se
nitrgeno no proteico que podra contaminar la
d adecuadamente.
muestra.

Preguntas.
1// R: se tiene que la solucin obtenida, luego de
burbujear amoniaco gaseoso en cido brico es una
solucin que contiene ion amonio (4 + ) y el ion
Bibliografa.

[1] SHRIVER, D.F. ATKINS, P.W. Qumica inorgnica. 2Ed.

Editorial Reverte, S.A. pg. 517 a 521.

[2] la gua qumica. Monica Gonzales.

http://quimica.laguia2000.com/conceptos-
basicos/importancia-del-nitrogeno visitada el 03 de abril del
2017.

[3] depsito de documentos de la FAO. Departamento de agricultura.

http://www.fao.org/docrep/010/ah833s/ah833s17.htm. Visitada el
03 de abril del 2017.

[4] la gua qumica, Angeles Mendes.

http://quimica.laguia2000.com/ecuaciones-
quimicas/catalizadores visitada el 3 de abril del 2017

[5] HARRIS, D.C. Anlisis qumico cuantitativo 3Ed. Reverte

S.A. Pg. 189 a 193