SEPARACION DE PIGMENTOS FOTOSINTETICOS Y SU

COMPORTAMIENTO CON EL PH

I. INTRODUCCION:

Los cloroplastos deben su color verde al pigmento clorofila, sin embargo lo que
realmente existe en los cloroplastos es una mescla de los pigmentos: clorofila A,
clorofila B, carotenos y xantofilas. Todas esas sustancias presentan un grado diferente
de solubilidad, lo cual permite su separacin ascendiendo por capilaridad por una tira
de papel filtro. Las ms solubles se desplazaran a mayor velocidad, pues
acompaaran fcilmente al disolvente a medida que este va ascendiendo, mientas que
las menos solubles se desplazan ms lentamente. De esta forma, al cabo de un
tiempo., a lo largo del papel poroso se irn situando los distintos pigmentos, y las
bandas coloreadas sern tanto ms anchas cuanto mayor sea la abundancia de ellas
en la mezcla

II. OBJETIVOS:

- Extraer los pigmentos de las hojas de una planta verde y separarlos gracias a la
tcnica de cromatografa en un papel.
- Comprobar el comportamiento de los pigmentos en PH extremos

III. REVISION BIBLIOGRAFICA:

Pigmentos: son sustancias naturales que brindan los colores que poseen los
alimentos. Es un material que viene incorporado en la textura misma, que refleja la luz
de diferentes formas, generando a nuestra vista, distintos colores y tonalidades. Los
pigmentos adems de existir en forma natural, pueden tambin sintetizarse y
obtenerse qumicamente, para ser aplicados en la industria tanto en alimentacin,
como en pinturas, barnices, cosmticos, ropa, etc. En la alimentacin natural, orgnica
y macrobitica, puede verse extraccin de pigmentos de forma artesanal, con fines
medicinales (prcticamente todos estos pigmentos tienen aplicaciones teraputicas) o
simplemente como colorante natural para alimentacin y bebidas. El ejemplo ms
claro es el uso de un extracto natural de remolacha, con el fin de conseguir tonos rojos
en alimentos. Existen estudios que exponen las posibilidades teraputicas de estos
componentes vegetales, que en su mayora aportan una cantidad de antioxidante al
organismo. Otros, como la crcuma por ejemplo, han mostrado propiedades
antiinflamatorias. Otros, ser fuente de vitaminas.

a) CLOROFILAS: Las clorofilas son los pigmentos pofirinicos fotosintticos

presentes en las plantas superiores y que le confiere colores verdes a los
alimentos, en su estructura hay cuatro anillos pirrolicos unidos unos con otros
con grupos metilo y en el centro de la estructura hay un tomo de magnesio
unido en dos posiciones por nitrgenos. Adems la estructura presenta otros
sustituyentes como grupos etilo, vinilo, ceto, acetato de metilo o propionato de
fitilo. En una de las sustituciones, segn sea un grupo metilo o uno aldehdo,
 ser la clorofila A o la clorofila B respectivamente, cuya coloracin ser verde-
azulado en el primer caso, y verde-amarillento en el segundo. Las clorofilas
pueden sufrir una serie de cambios que se exponen a continuacin:
- En medio cido y con calor, las clorofilas pueden pasar a feofitinas, que
sera la misma estructura pero se sustituye el tomo de magnesio presente
en el centro del anillo terrapirrolico por un tomo de hidrogeno el color
pasara a ser pardo olivceo. Esto ocurre por ejemplo al cocer la acelga
que se oscurece y este cambio de coloracin se produce por lo
anteriormente expuesto, en medio acido en este caso lo proporcionara el
propio alimento. En el escaldado tambin se produce feofitinizacion as
como al someter a los alimentos a irradiaciones gamma para destruir la
flora microbiana.

- Las clorofilas a travs de las enzimas denominadas clrofilasas pueden

pasar a clorifilicos, que ser la misma estructura pero sin el grupo
propionato de fitilo y la coloracin se mantendr verde. Finalmente, las
feofitinas a travs de las enzimas denominadas feofilasas, pueden
convertirse en feoforbidos, que tendrn la misde las clorofilasma estructura
de las feofitinas pero sin e grupo propionato de fitilo. Tambin se pueden
producir otros cambios en la coloracin de las clorofilas por perdidas de
sustituyentes o en la exposicin a la luz en la que se co el l para geberar
una sustancia incolora.

- El grupo propionato de fitilo (C20 H37) proporciona hidrofobicidad a la

molcula por lo que feofitinas y clorofilas sern solubles en medios
orgnicos como acetonas, bencenos, alcohol, etc. mientras que cloroflicos
y feofrbidos son solubles en medio acuoso.

En las frutas y verduras congeladas tambin se pueden observar colores ms oscuros

que el verde que sern debidos a que previamente estos alimentos ha sufrido un
escaldado.
En ocasiones las frutas y verduras son desecadas para disminuir la actividad de agua
del alimento y, por consiguiente, su estabilidad, generndose colores diferentes que
irn en funcin del grado de deshidratacin que han sufrido.
Otros productos fermentados como el Choucrout (berza fermentada) que es muy
popular en pases como Alemania o Francia, o los pepinillos, sufren oscurecimientos
ya que se forman feofrbidos.
b) CAROTENOIDES: Los carotenoides se encuentran en forma libre en la
naturaleza en forma libre disueltos en lpidos tambin se encuentran formando
 compuestos con protenas, carbohidratos y cidos grasos. Se pueden encontrar
en la zanahoria, papaya, naranja, durazno, pltano, tomate, meln, huevo, soya.
Son hidrocarburos en donde la molcula de isopropeno se repite
constantemente, estos carotenos se pueden utilizar en la industria de la
mantequilla, margarina, quesos, helados, aceites, sopas y postres.

IV. MATERIALES Y METODOS:

Materiales y reactivos:
- Hojas verdes (albahaca, espinaca)
- Alcohol de 96
- Hidrxido de sodio NaOH al 10%
- cido ctrico C2H8O7 al 10%
Equipos:
- Tubos de ensayos
- Gradilla para tubos de ensayo
- Mortero
- Coladora
- Embudo
- Papel de filtro
- Varilla de cristal
- Vasos de precipitado 250ml
Mtodos:

Extraccin y separacin de los pigmentos:

1. Con una balanza pesara 10- 15 gramos de hojas verdes y partirlas

finamente
2. Echar las hojas en un mortero y machacarlos
3. Aadir alcohol etlico al mortero y seguimos machacando hasta que el
alcohol tome color verde oscuro
4. Filtrar con el embudo para conseguir una solucin de color verde intenso
llamada clorofila bruta
5. Echar pequea cantidad de disolucin de pigmentos en una placa Petri o
vaso de precipitado
6. Colocar un trozo de papel filtro doblado en ngulo recto , de forma que se
sujete vertical
7. Dejar reposar durante 15 a 20 minutos hasta que se separen las bandas

Accin del PH extremo en los pigmentos:

1. A 3 tubos de ensayo ( A, B, C) adicionar 3 ml de la solucin clorofila bruta

2. Al tubo A adicione 2 gotas de cido ctrico
3. Al tubo B adicione 2 gotas de hidrxido de sodio
4. Al tubo C adicione 2 gotas de agua destilada
V. RESULTADOS:

Muestra PH Observaciones
Tubo A con cido ctrico 5,2 Hubo cambio de color
verde ms oscuro
Tubo B con hidrxido de 13,8 Hubo un cambio de
sodio color verde claro

Tubo C con agua destilada 7,8 No se present

modificaciones en el
color

VI. CONCLUSION:

En esta prctica se pudo identificar los diferentes pigmentos que hay en las hojas de
espinaca y se lleg a la conclusin de que en las hojas de espinaca la clorofila es el
pigmento principal presente y est formada por una gran cantidad de pigmentos como
los carotenoides la clorofila A y B, la xantofila le proporciona a las hojas tonos
amarillentos y pardos a las hojas secar.

CUESTIONARIO:

1. Cul es la funcin de los pigmentos en las plantas? Dnde se

encuentran?
Los pigmentos son un material que viene incorporado en la textura misma, que
refleja la luz de diferentes formas, generando a nuestra vista, distintos colores y
tonalidades. Los pigmentos adems de existir en forma natural, pueden tambin
sintetizarse y obtenerse qumicamente, para ser aplicados en la industria tanto
en alimentacin, como en pinturas, barnices, cosmticos, ropa, etc.

2. Cuntos tipos de pigmentos contienen las hojas?

Las Hojas aparte de la Clorofila que es el pigmento ms abundante, algunas
hojas poseen Carotenoides y Xantfilas.Los Carotenoides le dan a las hojas de
ciertos vegetales una gama de colores Rojo, Amarillo, Anaranjado, mientras que
las Xantfilas le dan la apariencia de Azula, Violeta. El color verde predominante
en las hojas se debe a que hay ms concentracin de Clorofila que los dems
pigmentos (Carotenoides y Xantfilas).

3. En qu orden aparecen los pigmentos de arriba abajo en la tira del papel?

En la tira de papel filtro de arriba abajo se observ que arriba se encontraba
xantofilas y carotenoides y en la parte de abajo clorofila A y B.
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

Garca MJ, Vicente JC (eds): Fundamentos y Tcnicas de Anlisis

Bioqumico, 1 Ed. Editorial Paraninfo (Madrid, Espaa)
Badui, S. 1986. Qumica de los Alimentos. Edit. Alhambra. Mxico
Introduccin a la Bioqumica y Tecnologa de los Alimentos. Acribia.
Zaragoza, Espaa