Universidad Central de Venezuela

Facultad de Agronoma
Departamento de Botnica Agrcola
Ctedra de Fitopatologa
Fitopatologa y Manejo de Enfermedades

SINTOMATOLOGA
ETIOLOGA y
DIAGNSTICO

Junio, 2017
Qu es la evaluacin por competencias?

Proceso de retroalimentacin y
certificacin del aprendizaje de
los estudiantes.

De acuerdo con las

competencias de referencia.

Mediante el anlisis del

desempeo de las personas en
tareas y problemas pertinentes.

Taller, 2015
 FITOPATOLOGA Y MANEJO DE ENFERMEDADES
Junio I-2017

SEMANA FECHA TEORA PRCTICA EVALUACIN

Conceptual Procedimental Actitudinal
13 al 15 Sintomatologa, -Sntomas y signos Actuacin
1 /06/17 etiologa y *COMPETENCIA INTEGRADORA individual
diagnstico **Asignacin del modelo
Preguntas intercaladas 0.15
Reconocimiento y descripcin de sntomas, 0.70 0.30
signos y estado vegetativo.
Lluvia de ideas 0.10
En lnea Asignacin de separatas sobre Historia de la Fitopatologa
Mundial y Venezuela. Mapa Mental 0.15
-*Se evaluar mediante portafolio. Equipo de 2 estudiantes por seccin. Realizar siembra
-**Cada equipo realizar de acuerdo al tema asignado, una infografa para patognesis y otra
para defensa su elaboracin ser elaboradas en papel bond (3 hojas para cada una)
 CONTENIDO

SINTOMATOLOGA, ETIOLOGA Y DIAGNSTICO

Fitopatologa: Concepto, Importancia.

Concepto de enfermedad, dao y prdida.

Caractersticas de las enfermedades.
Factores que determinan el desarrollo de las enfermedades.
Clasificacin de las enfermedades y de los sntomas
Factores que determinan el desarrollo de una enfermedad
Entes biticos y abiticos causantes de enfermedades
Diagnstico (Postulados de Kch)
Tcnicas de diagnstico.
 Ciencia que se encarga del estudio de las
enfermedades de las plantas
Importancia
Perjudicial en los sistemas de produccin
agrcola, agroindustrial y de salud pblica.
Puede provocar inanicin a personas, incluso
la muerte.
Provocan prdidas econmicas: alimentos,
ornamentales, medicinales, forestales.
Influyen en la zonificacin de industrias.
Inducen a la destruccin total o parcial de la
produccin.
Implicaciones de la Fitopatologa en el Sistema de Produccin Agrcola

Erwinia sp.

Potyvirus de la mancha anillada de la lechosa

 Enfermedad

Respuestas visibles en los rganos de la planta

(HOSPEDANTE) por la accin de un organismo
patgeno o un factor ambiental; que resulta en
cambios adversos de forma, funcin, integridad,
deterioro o muerte toda o parte de la planta.

Alteracin negativa morfolgica o fisiolgica en la

planta (HOSPEDANTE) causada por accin continua
de un agente extrao o por la carencia prolongada de
algn factor esencial para su buen funcionamiento.
(Agrios, 2005)
 Respuestas en plantas enfermas

1. Debilitamiento por absorcin continua de

nutrientes por parte del patgeno.

2. Alteracin o inhibicin del metabolismo por la

secrecin de toxinas, enzimas, polisacridos
y reguladores de crecimiento por parte del
patgeno.

3. Bloqueo de la traslocacin de nutrientes,

minerales y agua en los tejidos conductores
por un ente bitico o abitico.
 Respuestas en plantas enfermas

Figura A. Maz. Mitocondria (m) hinchada con crestas reducidas (izquierda) y sana (derecha).

Clulas No tratadas Clulas tratadas con Baculovirus

Figura B. Clulas tratadas con el bioinsecticida viral para el control de Spodoptera frugiperda
 Enfermedad

Dao
Alteracin temporal o transitorio que padece la planta causado por un
agente externo, la cual se recupera porque tiene efecto reversible.

Prdidas
Disminucin de la produccin debido a una enfermedad afectando el
rendimiento, aunado al costo implcito en el manejo integrado. Se puede
considerar dos categoras: Potenciales y Reales.

Potenciales: La enfermedad destruye el (70 -100)% del cultivo o a su

produccin provocando prdidas devastadoras, es decir, letales.
 CARACTERSTICAS DE UNA
ENFERMEDAD

1. Fisiolgica. Causa desrdenes en el metabolismo del

vegetal (absorcin, translocacin, fotosntesis).

2. Progresiva. No es esttica; es una serie de reacciones

sucesivas y continuas.

3. Anormal. Ocurren alteraciones en la fisiologa y

morfologa de la planta.

4. Daina. Afecta los rganos o a la planta en su

totalidad (marchitamiento, muerte, quemado, entre
otros)
Mycosphaerella louisianae Strawberry Crinkle Virus Cytorhabdovirus

Xanthomonas fragariae
FACTORES QUE DETERMINAN
EL DESARROLLO DE UNA
ENFERMEDAD

1. Sintomatologa

2 . Etiologa

3. Patognesis

4. Epidemiologa

5.Manejo integrado
 1. SINTOMATOLOGA

Sntoma
Manifestacin visible de la
enfermedad de la planta.

Signo
Manifestacin macroscpica o
microscpica del causante de la
enfermedad.
 CLASIFICACIN DE LAS ENFERMEDADES
1. Segn el sntoma que ocasiona
Pudriciones de la raz
Cancros
Marchitamiento
Manchas foliares
Carbones
Royas
Antracnosis
Mosaicos
2. De acuerdo al rgano afectado en la planta
Raz
Hojas
Tallo
Fruto
 CLASIFICACIN DE LAS ENFERMEDADES

3. De acuerdo al cultivo afectado

Cereales
Hortalizas
Frutales
Ornamentales
Forestales

4. De acuerdo al ente causal

Bitico: Straminipila, Microorganismo parecido a
hongos, hongos, bacterias, virus
Abitico: Desbalance de nutrientes, Regmenes
hdricos, Temperaturas desfavorables, Toxicidad por
agroqumicos, Contaminacin ambiental, Genticos,
Edficos, Luz, Prcticas agrcolas inadecuadas
 IMPORTANCIA DEL
CONOCIMIENTO DE LOS SNTOMAS

En algunos casos permite inferir cual es el agente causal de

la enfermedad. Depende de la experiencia del investigador.
Algunos ejemplos:

Mosaico, generalmente denota virosis.

Manchas foliares hmedas bacteriosis.
Manchas necrticas con anillos concntricos,
alternariosis.
Cancros color rojizo en la base del tallo en plantas de
fabceas y maz se puede inferir rizoctoniasis.
Filodia en la inflorescencia del maz, generalmente es
mildi lanoso o falsa punta loca.
 DINAMISMO DE SNTOMAS
Fases o estadios por los que pasa el sntoma durante el
desarrollo de la enfermedad; estas fases son:
Sntoma temprano
La primera manifestacin de la enfermedad.
Ej. Manchas translcidas, puntos amarillos, amarillamiento.
Sntoma tpico
Es aquel que caracteriza a la enfermedad.
Ej. Manchas zonadas; filodias en inflorescencia masculina del
maz, manchas blancas en ajonjol, entre otros.
Sntoma tardo
Es aquel que se presenta en el estado final de la
enfermedad.
Ej. Muerte total de la planta; perforaciones y manchas foliares
en el cafeto.
Dinamismo de sntomas
Clasificacin de los sntomas
1. Aparicin

Primario
En el mismo sitio donde el patgeno
hizo su accin.
Ej. Manchas, Cancros, podredumbre.

Secundario
Distante de donde el patgeno ejerci
su accin, consecuencia del sntoma
primario.
Ej. Muerte regresiva
Clasificacin de los sntomas
2. Invasin
Localizado
Presente en un
rgano de la planta.
Ej. Manchas, cancros

Sistmico
Distribuido en toda la
planta.
Ej. Mosaico, Enanismo
Clasificacin de los sntomas
3. Manifestacin
Simple
Tiene los mismos
sntomas en los
diferentes rganos de
la planta.
Ej. Manchas, pstulas.

Complejo
El patgeno provoca en
los diferentes rganos
de la planta sntomas
distintos.
Ej. Escoba de bruja
 Clasificacin de los sntomas
Necrticos
Conducen a la degeneracin y muerte de las
clulas y tejidos. (Regresivos)
Hipoplsticos
Inciden en el retardo o detencin de la
multiplicacin o el crecimiento celular y reduccin
en la clorofila. (Represivos)
Hiperplsticos
Incitan la multiplicacin excesiva de las clulas
provocando sobrecrecimiento o superdesarrollo
de las clulas o tejidos. (Progresivos)
 Clasificacin de los sntomas
Segn Whetzel, 1970
Quemaduras
Marchitez
Secamiento
Muerte regresiva Necrticos
Manchas Clorosis
Pudriciones Enanismos
Cancros Mosaico
Gomosis Moteados
Hipoplstico
Amarillamientos
Etiolacin
Agallas Albinismo
Callos Achaparramientos
Enrollamientos
Sarna
Fasciacin Hiperplsticos
Virescencias
Heteropia
Filodia
Cancros Pudricin

Muerte regresiva

Gomosis
 Enanismo

Clorosis

Clorosis Amarillamiento Albinismo

Factores ABITICOS
Signo
Es la manifestacin
macroscpica o
microscpica del
patgeno causante
de la enfermedad.
Signo Inclusin citoplsmatica

Exudado por bacteria Alteracin por virus

Signo
Quistes

Polymixa sp.

Oosporas

Peritecios
 FASES QUE DETERMINAN EL
DESARROLLO DE UNA
ENFERMEDAD

1. Sintomatologa Estudio de los agentes

causantes de las
2 . Etiologa enfermedades, cuyo origen
puede ser bitico (vivo) o
abitico (inanimado)
3. Patognesis
1. f. Fil. Estudio sobre las
causas de las cosas.
4. Epidemiologa 2. f. Med. Estudio de las causas
de las enfermedades.

5.Manejo Integrado Real Academia Espaola (http://

www.rae.com)
Entes
BITICOS
Hongos
Bacterias
Fitoplasmas
Spiroplasmas
Virus
Viroides
Nematodos
Insectos
caros
Protozoarios
Algas
Lquenes
Sifongamas
Tamao relativo de diferentes entes en relacin con una clula vegetal. Arauz 1995
 ALGUNOS MICRORGANISMOS CAUSANTES DE
ENFERMEDADES DE PLANTAS
Phylum Ejemplo

SIMILARES A
Plasmodiophoromycota
HONGOS

Plasmodiophora brassicae

STRAMINIPILA Oomycota

Phytophthora palmivora

HONGOS Chytridiomycota
Verdaderos Zygomycota
(FUNGI) Ascomycota
Basidiomycota
Thanatephorus cucumeris
Deacon, 2006 (Rhizoctonia solani )
 Phylum mycota
HONGOS Clase mycetes
Nomenclatura Orden ales
Familia ceae, dae
Enfermedad: Sigatoka negra Gnero
Especie
Ej. Mycosphaerella fijiensis (Paracercospora fijiensis)
Gnero Epteto especfico

Especie

Mycosphaerella fijiensis (fase sexual/teleomorfo)

produce ascocarpo cuando?

Paracercospora fijiensis (fase asexual/anamorfo)

produce conidios cuando?

Phylum Ascomycota
 SIMILARES A HONGOS

Plasmodiophoromycota Caractersticas
Phylum
- Parsito obligado
Plasmodiophora brassicae Intracelular
Especies Spongospora subterranea - Plasmodios
Polymixa graminis - Carecen de micelio
- Zoosporas con 2
flagelos tipo ltigo
- Hiperplasia e
hipertrofia en tejidos

Sarna de la papa
Spongospora subterranea

Hernia de las crucferas

Plasmodiophora brassicae
 STRAMINIPILA

Phylum Oomycota
Orden Peronosporales
-Phytopthora Albugo Plasmopara viticola
Especies infestans candida Peronosclerospora
-Pythium ultimum sorghi

-Tizn o candelilla royas Mildis lanosos

tarda de la papa blancas
Enfermedad -Ahogamiento o
pudricin de la
semilla

Caractersticas
Zoosporas en zoosporangios
Zoosporas biflageladas (ltigo y cepillo)
.Espora sexual: Oosporas
 STRAMINIPILA

Pudricin parda Ahogamiento de las plntulas Roya blanca en girasol

Phytophthora palmivora Damping off Albugo tragopogonis
Pythium aphanidermatum
P. dabaryanum
P. ultimum
 STRAMINIPILA

Mildi lanoso del sorgo o falsa punta loca Mildi lanoso de la vid
Peronosclerospora sorghi Plasmopara viticola
 HONGOS

Phylum Chytridiomycota Caractersticas

- Zoosporas en
Olpidium brassicae
zoosporangios
Especies Physoderma maydis - Zoosporas uniflagelada
Synchytrium endobioticum tipo ltigo

Verruga negra de la papa Mancha parda del maz

Synchytrium endobioticum Physoderma maydis
 HONGOS

Zygomycota Caractersticas
Phylum
-Esporas en
- Rhizopus stolonifer esporangios
- Mucor sp.
-Espora sexual:
Especies
zygospora
- Choanephora cucurbitarum
-Patgenos en
postcosecha

Rhizopus stolonifer
Pudricin blanda en fresa
 Phylum Ascomycota

H O N G O S
Clase HEMIASCOMYCETES EUASCOMYCETES

Especies Saccharomyces cerevisiae Ceratocystis fimbriata

(levadura)
Taphrina deformans Claviceps purpurea
Monilinia fructigena
Sphaerotheca pannosa
Mycosphaerella fijiensis
Caractersticas No producen ascocarpos, las Ascosporas en ascas y stas
ascas estn desnudas dentro de ascocarpos

Torque del duraznero Sigatoka negra

Taphrina deformans Mycosphaerella fijiensis/Paracercospora fijiensis
Phylum Basidiomycota

H O N G O S
Clase UREDINIOMYCETES USTILAGINOMYCETES HYMENOMYCETES

Especies -Puccinia sorghi -Urocystis cepulae Athelia rolfsii*

-Hemileia -Ustilago maydis Corticium sp.*
vastatrix Armillaria mellea^
Caractersticas Diferentes tipos Teliosporas Himenio:
de esporas Basidiosporas *pequeos poros
^en laminillas
Uredosporas

Roya comn del maz Roya del cafeto Teliosporas

Puccinia sorghi Hemileia vastatrix
 H O N G O S
Carbn del ajo Teliosporas
Urocystis cepulae
(Cuarentenada)

Carbn del maz

Pudricin de las races de los rboles Ustilago maydis
Armillaria mellea
 BACTERIAS
Nomenclatura
Ej. Xanthomonas vesicatoria

Gnero Epteto especfico

Especie
Mancha bacteriana del tomate y
pimentn
Otros ejemplos:
Xanthomonas oryzae pv. oryzae
Patovares
Xanthomonas axonopodis pv. manihotis

Ralstonia solanacearum raza 3 Razas

 BACTERIAS
Gneros
Pseudomonas
Pectobacterium
Gram (-) Enterobacter
Xanthomonas
Ralstonia
CON PARED CELULAR

SIN PARED CELULAR

Clavibacter Spiroplasmas
Curtobacterium Phytoplasmas
Clostridium
Gram (+) Bacillus
Streptomyces
 VIRUS
Nomenclatura
Ej. Potyvirus de la mancha anillada de la lechosa (PRSV)

Epteto especfico
Gnero
Acrnimo
Especie

Enfermedad: Mancha anillada de la lechosa

 VIRUS

FAMILIAS

Mosaico del tabaco

Tobamovirus mosaico del tabaco
 Factores ABITICOS

Culillo Deformacin foliar

Deficencia de calcio Efecto de un herbicida

Escaldadura
Golpe de sol
 Proceso para identificar la causa de una
enfermedad

PRESUNTIVO PRECISO
Reconoce la enfermedad y Desconoce la enfermedad
conoce su etiologa

LABORATORIO
Ergot o Cornezuelo del centeno 1ro Procesar la muestra
Claviceps purpurea (teleomorfo) 2do Cmo??? En funcin de
Sphacelia purpurea (anamorfo) 3ero Posible ente causal???
 VEGETAL AGUA DE RIEGO

-Preferiblemente con -Indagar las

dinamismo de sntomas. normas de
colecta y
-Es importante colectar el SUELO traslado.
signo de estar presente.
- Conservar en bolsas de -Recoger varias
papel o de plstico de submuestras,
acuerdo al sntoma mezclar,
homogeneizar
y colectar 1Kg
para el anlisis
 DIAGNSTICO DE ENFERMEDADES EN PLANTAS

1
INSPECCIN IN SITU

R E C O R R I D O

CONSIGNACIN DE LA MUESTRA
1. Debe ser trasladada en el ms corto periodo de tiempo
2. Debe ser conservada en funcin del posible patgeno
3. Ser consignada con una planilla de recoleccin de informacin
INSPECCIN IN SITU

1. Previamente se debe realizar una revisin

exhaustiva de literatura especializada
2.Inspeccionar la superficie de siembra, en las
plantas evaluadas considerar:
Distribucin espacial
Dinamismo de sntomas
Rapidez en desarrollar los sntomas
Especies de plantas involucradas
Tipos de sntomas y/o signo
Recabar toda la informacin posible
(ver planilla)
 Planilla de Informacin

Colector Cultivo Ciclo del Variedad/ Muestra Fecha Fecha Recibida por
cultivo hibrido -Vegetal de de
-Suelo colecta entrega Institucin/
-Agua Laboratorio
Finca / Estado, Superficie de Siembras Prcticas culturales, agrcolas u otras aplicadas
Unidad de Municipio, siembra anteriores anteriormente y actualmente
produccin Sector
Modalidad de siembra 1. Campo abierto 2. Casa de campo 3. otro Siembra 1. Campo 2. sustrato
Posible ente causal (impresin/informacin del lugar) 1. Hongo 2. Bacterias 3. Virus 4. Nematodos 5. Otra 5. Ni idea

Sntoma 1. Primario 2. Secundario 3. Localizado 4. Sistmico 5. Simple 6. complejo

rgano afectado 1. Follaje 2. Tallo 3. Flores 4. Frutos 5. Races 6. Ramas 7. Otro
Tipo de sntoma 1. Necrtico 2. Hipoplstico 3. Hiperplstico (detalle brevemente)
Presencia de signo (Detalle color, forma, aspecto, olor, textura, acuoso, seco)
La muestra se envi para el anlisis: 1. Bolsa plstica (BPl) 2. Bolsa de papel (BP) 3. BPl+ hielo en cava 4. BP+ caja 5.
sueltas 6. otras
La muestra exterioriza sntoma: temprano, tpico o tardo. Para el anlisis la muestra est: completa y en buen estado,
deteriorada y contaminada 3. otros
Distribucin espacial de la enfermedad en el campo 1. Aleatoria 2. Agrupada 3. Hileras 4. Bordes 5. Otra

Fecha y dosis de aplicacin 1. Fungicidas 2. Bactericidas 3. Herbicidas 4. Fertilizantes 5. Insecticidas 6. Otros

Del colector y/o Analista 1. Nombres y apellidos 2. Nmeros telefnicos 3. Email 4.

Informacin adicional 1. Coordenadas del lugar de la colecta y otros que considere de inters
 Preferiblemente hacerlo el mismo da al lugar del anlisis.

La muestra colectada debe ser trasladada en caja o en

cava con o sin hielo de acuerdo al posible agente causal.

Es de carcter obligatorio consignar un formulario con

toda la informacin relevante (sntomas, signo -si est
presente-), actividades agrcolas empleadas u otras de
inters.
 DIAGNSTICO DE ENFERMEDADES EN PLANTAS

Donde se puede consignar la muestra?

Departamento de Fitopatologa/ Sanidad Vegetal/

Instituciones publicas y/o privadas
Instituto Nacional de Investigaciones Agrcolas (INIA)
Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias (CENIAP)
Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas (IVIC)
Instituto Nacional de Salud Agrcola Integral (INSAI)

Universidades
Central de Venezuela (UCV)
Lisandro Alvarado (UCLA)
Del Zulia (LUZ)
Francisco de Miranda (Falcn)
Nacional Experimental de los Llanos Ezequiel Zamora (UNELLEZ)
 DIAGNSTICO PRECISO
POSTULADOS DE KCH

1. El patgeno debe encontrarse asociado con la enfermedad

en todas las plantas enfermas que se examinen.

2. El patgeno debe aislarse en medios nutritivos y obtener un

cultivo puro (axnico) para describir sus caractersticas.

3. El patgeno aislado en cultivo puro debe ser inoculado en

plantas sanas de la misma variedad o especie en donde
apareci la enfermedad y debe inducir los mismos sntomas
originales.

4. El patgeno debe reaislarse en cultivo puro y sus

caractersticas deben coincidir con las descritas en el
segundo postulado.
 DIAGNSTICO EN EL LABORATORIO
1. El patgeno debe encontrarse asociado con la
enfermedad en todas las plantas enfermas que se
examinen.

Descripcin de los
sntomas
Observacin macro y/o
microscpica del signo
Asociacin de los
sntomas con las
condiciones ambientales
y el manejo de la
plantacin

Cmara Hmeda (Hongos)

2. El patgeno debe aislarse en medios nutritivos y
obtener un cultivo puro (axnico) para describir
sus caractersticas.

Si el patgeno es necrtrofo en medio artificial

Si el patgeno es biotrfo en hospedante susceptible

Factores a considerar:
Estadio del sntoma
Clase de desinfectante (concentracin y tiempo de
exposicin)
Medio de cultivo. Pueden ser naturales o artificiales
(no selectivos, selectivos y diferenciales)
PROCARITICO
BACTERIAS

Flujo bacteriano

Exudado bacteriano
 PROCARITICO
BACTERIAS

Se seleccionan 2 a
3 hojas de la planta Se filtra el lquido
infectada con virus, macerado y luego se
las mismas son recoge el mismo para
maceradas con inocular (puede ser con
buffer o agua el mazo del mortero,

de Virologa Vegetal (1982).

destilada estril. una esponja, una varilla
de vidrio o un pincel).

Macerar y sembrar por agotamiento en agar

Finalmente, se nutritivo (AN), a las 48h
Muestra con Bacteriosis seleccionar
Las plantas sanas, jvenesuna colonia
(de 1 a 2
chequean las plantas a semanas) son tratadas con abrasivo
y sembrar por estriacin
fin de constatar la en AN o celite ) en las hojas;
( carborundum
aparicin de sntomas el lquido recogido debe ser
artificial
 Re alizar c o rte e n la zo na d e
avanc e d e la e nfe rme d ad

Lavar c o n ag ua d e s tilad a
e s tril (ADE) varias
ve c e s

Ag re g ar ADE y mac e rar

To mar una p e q ue a p o rc in c o n
una
unaas a d de
ansa e pplatino
latino
Re alizar un e s triad o p o r
ag o tamie nto e n una c p s ula d e
p e tri c o n me d io d e c ultivo

Inc ub ar p o r 24 ho ras ye marcar

id e ntific a r
las c o lo nias

Se le c c io nar las c o lo nias

c re c id as ad elas
s p48
ushoras
d e 24 ho ras

Re alizar e s triad o p o r ag o tamie nto d e las c o lo nias c re c id as da elas

s p48
ushoras
de
24 ho ras
 AISLAMIENTO INDIRECTO

Escoger un fruto sano Realizar corte en el fruto

Placa petri co
Escoger un fruto sano Realizar corte en el fruto
o Cortar un trocito de la muestra vegetal enferma hongo
Tomar un trocito
Escoger un fruto sano
previamente de la
desinfectada
Realizar o de suelo y colocarlo en
corte en el fruto
el orificio realizado en el fruto
7 colonia del hongo puro
Cu
a
Incubar
Placaenpetri
condiciones de temperatura
con colonia del y
Placa petri 4 con colonia del hu
luz favorables para elRealizar Colocar el trocito en la zona hongo puro e
o sano hongo puro corte en el fruto
desarrollo del hongo
donde seTomar
realizuneltrocito de la
corte en c
colonia del hongo puro
el fruto f
Tomar un trocito de la
Cubrir con
Cubrir con colonia del hongo puro
algodn
6
algodn humedecido h
humedecido Colocar el fruto en condiciones
en ADE y de cmara 24
Colocar el trocito en la zona Placa petri con colonia del
en ADE y hmeda (24-48 h)
donde se realiz el corte en hongo puro colocar el
colocar el Colocar el trocito en la zona fruto en
elTomar
fruto un trocito de la Al observarse los sntomas,
Sembrar enfruto
placasen
con medio de cultivo donde
aislar se realiz
seccionando el corte
un trozo eny
pequeo
colonia del hongo puro cmara
cmaraPDA
el fruto
desinfectar
hmeda por
Cubrir con
hmeda por 24-48 horas
algodn
PROCEDIMIENTO PARA AISLAR BITROFOS
El patgeno se inocula sobre un hospedante vivo
susceptible; ste debe producir los sntomas y/o
signos que induce el patgeno.
PROCEDIMIENTO PARA AISLAR VIRUS FITOPATGENOS
Se seleccionan 2 a
3 hojas de la planta Se filtra el lquido
infectada con virus, macerado y luego se
las mismas son recoge el mismo para
maceradas con inocular (puede ser con
buffer o agua el mazo del mortero,

Fuente: Cartel mural de la Ctedra de Virologa Vegetal (1982).

destilada estril. una esponja, una varilla
de vidrio o un pincel).

Finalmente, se Las plantas sanas, jvenes (de 1 a 2

chequean las plantas a semanas) son tratadas con abrasivo
fin de constatar la ( carborundum o celite ) en las hojas;
aparicin de sntomas el lquido recogido debe ser
locales y sistmicos inoculado en las hojas de las plantas
entre 2 a 21 das. sanas.
Para evitar el dao del abrasivo en las
plantas, las mismas deben ser
lavadas suavemente con agua
destilada despus de inoculadas.
Las plantas
inoculadas son
colocadas en
invernadero ( la
temperatura ideal es
de 20 a 22C).
3. El patgeno aislado en cultivo puro debe ser inoculado en plantas sanas de la
misma variedad o especie en donde apareci la enfermedad y debe inducir los
mismos sntomas originales.

CONCENTRACIN DE INCULO
Bacterias Hongos Virus

Escala de Mc Farland Lesiones locales

Cmara de Neubauer o
Espectrofotmetro Hematocmetro
Microscopio Electrnico de Transmisin
 INOCULACIN (Prueba de patogenicidad)
HONGOS BACTERIAS VIRUS

PUNCIN + + +

EMBEBER (Races) + + +

INJERTO + + +
(contacto haces vasculares)
ASPERSIN + +

HERIDAS + +
Algunas +
VECTORES
MECNICA +

PERODO DE INCUBACIN
Una vez aadida el ADE se procede a realizar un
raspado de la superficie del medio
 Escoger un fruto sano Realizar corte en el fruto

Placa petri con colonia del

hongo puro
Tomar un trocito de la
colonia del hongo puro
Cubrir con
algodn
humedecido
Colocar el trocito en la zona en ADE y
donde se realiz el corte en colocar el
el fruto fruto en
cmara
hmeda por
24-48 horas
METODOLOGA PARA INOCULAR PATOGENOS DE SUELO
Pythium, Sclerotium, Phytophthora, Fusarium y
NEMTODOS
4. El patgeno debe reaislarse en cultivo
puro y sus caractersticas deben coincidir
con las descritas en el segundo postulado.
 POSTULADOS DE KCH
1

3y4

Comprobar la patogenicidad del microorganismo aislado

 ?

Helicotylenchus Radopholus Meloidogyne

multicinctus similis incognita

1. Descripcin de sntomas IDENTIFICACIN

2. Aislamiento en medio de cultivo artificial (MCA)
Ergot o Cornezuelo del centeno
Sphacelia purpurea (anamorfo)
Claviceps purpurea (Teleomorfo)
 Hereque o
Moko
Ralstonia
solanacearum

Mal de Panam
Fusarium
oxysporum
f. sp.
cubense

Mosaico del
pepino
Cucumovirus
mosaico del
pepino
 TCNICAS PARA EL DIAGNSTICO
E IDENTIFICACIN
Serolgicas
Doble difusin en agar
ELISA, Inmunofluorescencia
Microscopa Electrnica Inmunoadsorbente

Moleculares
Electroforesis
PCR
Westhern blotting (Protenas)
Southern blotting (ADN)
Northern blotting (mRNA)
TCNICAS UTILIZADAS EN EL DIAGNSTICO E IDENTIFICACIN

Doble difusin en agar

ELISA

PCR
Inmunofluorescencia
 HONGO BACTERIA VIRUS

Pruebas morfolgicas
Pruebas fisiolgicas y bioqumicas
Postulados de Kch
Serologa
Electroforesis
Pruebas de cidos nucleicos
Secuenciacin del ARN
Anlisis de cidos grasos
Bacterifagos
Pruebas biolgicas
 ALGUNOS FITOPATGENOS
Phylum Gnero
Plasmodiophora ,
SIMILARES A Spongospora y Polymixa
Plasmodiophoromycota
HONGOS
Phythopthotora, Pythium, Albugo
STRAMINIPILA Oomycota
Plasmopara y Peronosclerospora

HONGOS Chytridiomycota Olpidium, Physoderma y Synchytrium.

Verdaderos Zygomycota Rhizopus, Mucor y Choanephora
(FUNGI) Ascomycota Claviceps , Monilinia y Mycosphaerella
Puccinia, Hemileia, Ustilago, Athelia y
Basidiomycota Armillaria

Bacterias
Pseudomonas, Pectobacterium , Xanthomonas y Ralstonia

Virus Closterovirus, Potyvirus, Bromovirus, Comovirus yGeminivirus

GRACIAS