HIERRO- FERROZINE

MTODO COLORIMTRICO
Para la determinacin in vitro de hierro en suero o plasma

PRINCIPIO PROCEDIMIENTO
En medio ligeramente cido y en presencia de cloruro de guanidinio se libera el
Fe(III) unido a la transferrina. Posteriormente la hidroxilamina reduce el Fe(III) a
Tcnica BR BPR PR ST
Fe(II).
El hierro divalente forma con el FerroZine un complejo coloreado cuanticable mL mL mL mL
espectrofotomtricamente.
Agua desionizada 0,20 -- -- --
(FerroZine: Hach Chemical Co., Ames, IOWA, EE UU). Estndar -- -- -- 0,20

UTILIDAD DIAGNSTICA Muestra -- 0,20 0,20 --

El hierro se encuentra distribuido en el organismo, mayoritariamente formando parte Reactivo A -- 1,00 -- --
de la hemoglobina y de la mioglobina.
Valores bajos de hierro se encuentran en anemia por deciencia de hierro y Reac. de trabajo 1,00 -- 1,00 1,00
por enfermedades infecciosas. Se encuentran valores elevados de hierro en
enfermedades hepticas, hemocromatosis y en concentraciones elevadas de Mezclar e incubar durante 10 min a T ambiente (20-25C) o 5 min a 37C.
transferrina.

Una nica prueba de laboratorio no permite establecer un diagnstico. Los resultados Lectura.
se han de evaluar en el contexto de todos los datos clnicos y de laboratorio obtenidos Longitud de onda: 578 nm, 562 nm
Blanco: agua desionizada
REACTIVOS Estabilidad de color: 30 min
Kit 2 x 100 mL. (Ref. 99 13 42). Contiene:
A. 2 x 100 mL Disolucin tampn Ref. 99 06 20 CLCULOS
B. 1 x 20 mL Reactivo de color Ref. 99 04 12
C. 1 x 5 mL Estndar Ref. 99 02 90 Abs. PR - (Abs. BPR + Abs. BR)
x 200 = g /dL
PREPARACIN DEL REACTIVO DE TRABAJO Abs. ST - Abs. BR
Aadir a 40 mL disolucin tampn (Reactivo A), 1,5 mL del reactivo de color
Donde:
(Reactivo B).
Abs. PR: Absorbancia de la muestra
Abs. BPR: Absorbancia del blanco de muestra
El estndar est listo para su uso.
Abs. BR: Absorbancia del blanco de reactivo
Abs. ST: Absorbancia del Standard
COMPOSICIN DEL REACTIVO DE TRABAJO
Nota: Se incluye un blanco de muestra (BPR) para eliminar la posible interferencia
Las concentraciones en las disolucion reactiva son:
por turbidez de la muestra.
Tampn acetato pH 4,9 200 mM
Clorhidrato de guanidinio 3,4 M Unidades SI
Clorhidrato de hidroxilamina 58 mM (g/dL) x 0,1791 = mol/L
FerroZine 1,5 mM
Conservantes y estabilizantes VALORES DE REFERENCIA
Hombres: 60 - 160 g/dL
Estndar: Disolucin acuosa de hierro equivalente a 200 g/dL (35,8 mol/L). Mujeres: 37 - 145 g/dL

CONSERVACIN Y ESTABILIDAD Estos valores son orientativos. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus
Los componentes del kit mantenidos a 2-8C son estables hasta la fecha de propios valores de referencia.
caducidad indicada en la etiqueta.
El reactivo de trabajo es estable 3 meses a temperatura ambiente ( 25C) y hasta PRESTACIONES. CARACTERSTICAS DE FUNCIONAMIENTO
4 meses a 2 - 8C. Las caractersticas de funcionamiento de un producto dependen tanto del reactivo
como del sistema de lectura empleado.
Indicaciones de alteracin de los reactivos: Los resultados siguientes se han obtenido de forma manual.
Presencia de partculas o turbidez. Blanco del reactivo de trabajo > 0,300.
Sensibilidad, como lmite de deteccin: 18 g/dL
MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO Linealidad: Hasta 1000 g/dL (179 mol/L). Para concentraciones superiores, diluir la
Material comn de laboratorio muestra con agua desionizada (1+1). Multiplicar el resultado nal por 2.
Espectrofotmetro, analizador automtico o fotmetro termostatizado a 37C Exactitud, como % de recuperacin: 97,3%
Precisin en la serie, como CV%: 2,11%
MUESTRA Precisin entre series, como CV%: 2,39%
Suero exento de hemlisis o plasma Veracidad. Los resultados obtenidos con el reactivo no presentan diferencias
El hierro srico es estable durante 7 das a 2 - 8C signicativas al compararlo con el reactivo considerado de referencia.

PRECAUCIONES
Las indicaciones de seguridad se encuentran en la etiqueta de los productos.
Manipular con precaucin.
Se aconseja consultar la cha de datos de seguridad antes de la manipulacin del
reactivo.
La eliminacin de residuos debe hacerse segn la normativa local vigente.
CONTROL DE CALIDAD
Es recomendable la inclusin de sueros control, Seriscann Normal (Ref. 99 41 48)
y Seriscann Anormal (Ref. 99 46 85), en cada proceso de medida para vericar los
resultados.
Se aconseja que cada laboratorio establezca su propio programa de control de
calidad y los procedimientos de correccin de las desviaciones en las medidas.
AUTOANALIZADORES
Adaptaciones a distintos analizadores automticos, disponibles bajo demanda.
Los datos detallados del estudio de las prestaciones del reactivo estn disponibles
bajo demanda.
INTERFERENCIAS
No utilizar sueros lipmicos.
Debido a que se trata de una tcnica muy sensible, debe evitarse la contaminacin
por hierro del material a utilizar, por lo que se recomienda el uso de material de
plstico desechable.
Se desaconseja la introduccin de pipetas en el frasco de reactivo, para evitar
contaminaciones.
En caso de contaminacin accidental del estndar, se aconseja utilizar como tal un
suero valorado, como por ejemplo Seriscann Normal (Ref. 99 41 48).
BIBLIOGRAFA
Stookey L.L., (1970). Anal. Chem., 42, 779 - 781.
Yee, H.Y.and Zin, A.(1971).Clin. Chem. 17, 950 - 953.
Persijn, J.P.y col.,(1971). Clin Chim. Acta. 35, 91 - 98.
Williams J.H.,Johnson D.J. and Haut, M.J. (1977). Clin. Chem. 23, 237 - 240.
Thompsen J.C. and Mottola H.A.,(1984). Anal. Chem. 56, 755 - 757.

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Revisin: 01.2017 PRO4_REG9_FEFER_4A
 IRON - FERROZINE
COLORIMETRIC METHOD
For in vitro determination of iron in serum or plasma

PRINCIPLE PROCEDURE
In a slightly acid medium and in the presence of guanidine hydrochloride, iron is
released from transferrin and reduced by hydroxylamine from Fe (III) to Fe(II).
Procedure BR BSA SA ST
Divalent iron forms a coloured complex with FerroZine, quantifiable
spectrophotometrically. mL mL mL mL

(FerroZine: Hach Chemical Co., Ames, IOWA, U.S.A). Deionized water 0.20 -- -- --
Standard -- -- -- 0.20
DIAGNOSTIC USE
Sample -- 0.20 0.20 --
Iron is distributed in the body forming part of hemoglobin and myoglobin.
Low iron concentations are found in infectious diseases and anemia. High levels of Reagent A -- 1.00 -- --
iron are presented in liver disease, hemochromatosis, and at high levels of Transferrin.
Working reagent 1.00 -- 1.00 1.00
Single test result could not be used to make a clinical diagnosis. It should integrate
clinical and laboratory data. Mix and incubate 10 min at room Temp. (20 - 25C) or 5 min at 37 C

REAGENTS Reading
Kit 2 x 100 mL. (Ref. 99 13 42). Contents: Wavelength: 578 nm, 562 nm
A. 2 x 100 mL Buffer solution Ref. 99 06 20 Blank: deionized water
B. 1 x 20 mL Colour reagent Ref. 99 04 12 Colour stability: 30 min
C. 1 x 5 mL Standard Ref. 99 02 90
CALCULATIONS
WORKING REAGENT PREPARATION
Add 1.5 mL of colour reagent (Reagent B) to 40 mL of buffer solution (Reagent A). SA Abs - (BSA Abs + BR Abs)
Standard is ready to use. x 200 = g/dL
ST Abs - BR Abs
WORKING REAGENT COMPOSITION Where:
The reagents composition is as follows: SA Abs: Sample absorbance
BSA Abs: Sample blank absorbance
Acetate buffer pH 4.9 200 mM BR Abs: Blank reagent absorbance
Guanidine hydrochloride 3.4 M ST Abs: Standard absorbance
Hydroxylamine hydrochloride 58 mM
FerroZine 1.5 mM Note: A sample blank (BSA) is included to eliminate possible interference from
a sample turbidity.
Preservatives and stabilizers

Standard: Aqueous solution of iron equivalent to 200 g/dL (35.8 mol/L). SI Units
(g/dL) x 0.1791 = mol/L
STORAGE AND STABILITY
When stored at 2-8C the components of the kit will remain stable until the expiration REFERENCES VALUES
date stated on the label. Men: 60 - 160 g/dL
The working reagent will remain stable for 3 months at room temperature ( 25C) Women: 37 - 145 g/dL
and for 4 months at 2-8C.
The stated values are for guidance. It is advisable that each laboratory determines its
s Signs of reagent deterioration: own reference values.
Presence of particles or turbidity in the reagent. Working reagent blank > 0.300.
PERFORMANCE CHARACTERISTICS
ADDITIONAL EQUIPMENT The performance characteristics depend on the method used. It is recommended
o General laboratory equipment. to calculate these data for each particular test protocol. These results have been
Spectrophotometer or photometer thermostable at 37C. obtained using a manual method.

SAMPLE Sensitivity, as detection limit: 18 g/dL

Non hemolyzed serum or plasma. Linearity: 1000 g/dL (179 mol/L). Samples that give higher concentration should be
a Serum iron is stable for up to 7 days at 2-8C. diluted in deionised water (1+1) and the nal result has to be multiplied per 2.
Accuracy: 97.3%
CAUTION Repetitivity, as CV%: 2.11%
The safety statements are on the label.Handle with care. We advice to read MSDS Reproducibility, as CV%: 2.39%
before reagent handling. Trueness: Results obtained with this reagent did not show systematic differences
s Waste products must be handled as per local regulations. when compared with reference reagent.
Details of the performance studies are available on request.
QUALITY CONTROL
s Control serum, Seriscann Normal (Ref. 99 41 48) and Seriscann Abnormal (Ref. INTERFERENCES
99 46 85) should be included in each test series. Each particular laboratory should Hemolyzed serum samples should be discarded.
establish its own control program. It is recommended to use disposable plasticware to run the tests to avoid any possible
undesirable contamination.
AUTOANALYZERS Do not introduce pipettes into reagents bottles, to avoid any possible undiserable
n Adaptations to different autoanalyzers arer available on request. contamination.
e In case of accidental contamination of the standard, it is advisable to use a control
serum as a standard, such as Seriscann Normal (Ref. 99 41 48).
ar
REFERENCES
n Stookey L.L., (1970). Anal. Chem., 42, 779 - 781.
Yee,H.Y.and Zin,A. (1971). Clin. Chem. 17, 950 - 953.
Persijn, J.P.and col.,(1971).Clin Chim.Acta.35, 91 - 98.
Williams J.H., Johnson D.J. and Haut, M.J. (1977). Clin. Chem. 23, 237 - 240.
Thompsen J.C. and Mottola H.A.,(1984). Anal. Chem. 56, 755 - 757.

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Revision: 01.2017 PRO4_REG9_FEFER_4A
FER - FERROZINE
MTHODE COLORIMTRIQUE
Pour la dtermination in vitro du fer dans le srum ou le plasma

PRINCIPE TECHNIQUE
En milieu lgrement acide et en prsence de chlorure de guanidinium, lion Fe(III)
li la transferrine se libre. Par la suite, lhydroxylamine rduit lion Fe(III) en ion
Technique BL R BL ESSAI ESSAI TALON
Fe(II). Le fer bivalent forme avec la FerroZine un complexe color quantiable par
spectrophotomtrie. mL mL mL mL
Eau dionise 0,20 -- -- --
(FerroZine: Hach Chemical Co., Ames, IOWA, USA).
talon -- -- -- 0,20
UTILIT DE DIAGNOSTIC
chantillon -- 0,20 0,20 --
Le fer contenu dans le corps se trouve dans lhmoglobine et la myoglobine.
On observe de faibles taux de fer en cas danmie ferriprive et anmie due des Ractif A -- 1,00 -- --
maladies infectieuses. Des taux de fer levs sont observs en cas de maladies du
R. de travail 1,00 -- 1,00 1,00
foie, dhmochromatose et de concentrations leves de transferrine.
Un test de laboratoire unique ne peut pas tablir un diagnostic. Les rsultats doivent
tre valus dans le contexte de toutes les donnes cliniques et de laboratoire Mlanger et incuber pendant 10 minutes temprature ambiante (20 - 25C) ou
obtenus. 5 minutes 37C

RACTIFS Lecture
Kit 2 x 100 mL. (Rf. 99 13 42). Contenu: Longueur donde: 578 nm; 562 nm
A. 2 x 100 mL Solution tampon Rf. 99 06 20 Blanc: eau dionise
B. 1 x 20 mL Ractif de coloration Rf. 99 04 12 Stabilit de la coloration: 30 minutes
C. 1 x 5 mL talon Rf. 99 02 90
CALCULS
PRPARATION DU RACTIF DE TRAVAIL
Ajouter 1,5 mL de ractif de coloration (ractif B) 40 mL de solution tampon (ractif Abs. ESSAI - (Abs. BL ESSAI+ Abs. BLR)
x 200 = g /dL
A). Abs. T. - Abs. BLR
Ltalon est prt lemploi.
O:
COMPOSITION DU RACTIF DE TRAVAIL Abs ESSAI: Absorbance de lssai
Les concentrations dans la solution ractive sont les suivantes: Abs BL ESSAI: Absorbance blanc de lessai
Abs BLR: Absorbance blanc du ractif
Tampon actate pH 4,9 200 mM Abs. TALON: Absorbance de ltalon
Chlorhydrate de guanidinium 3,4 M
Chlorhydrate de hydroxylamine 58 mM Remarque: Il est inclus un blanc dchantillon pour liminer les possibles interfrences
FerroZine 1,5 mM par la turbidit.
Conservateurs et stabilisants
Units SI
talon: Solution aqueuse de fer quivalente 200 g/dL (35,8 mol/L). (g/dL) x 0,1791 = mol/L

CONSERVATION ET STABILIT VALEURS DE RFRENCE

Conservs entre 2 et 8C, les composants du kit sont stables jusqu la date de
premption indique sur ltiquette.
Le ractif de travail est stable pendant 3 mois temprature ambiante ( 25C) et
jusqu 4 mois au rfrigrateur une temprature comprise entre 2 et 8C.
Indications daltration du ractif:
Prsence de particules ou de turbidit. Blanc du ractif de travail > 0,300.
MATRIEL NCESSAIRE MAIS NON FOURNI
Matriel courant de laboratoire.
Spectrophotomtre, analyseur automatique ou photomtre thermostat 37C.
CHANTILLON
Srum non hmolys ou plasma.
Le fer srique est stable pendant 7 jours une temprature comprise entre 2 et 8C.
PRCAUTIONS DEMPLOI
Les indications de scurit sont sur ltiquette des produits. Manipuler avec
prcaution.
On conseille de consulter la che des donnes de scurit avant de manipuler le
ractif.
Llimination des dchets doit tre effectue conformment aux normes en vigueur.
CONTRLE DE QUALIT
Nous recommandons linclusion de srums de contrle Seriscann normale (Rf. 99
41 48) et Seriscann anormale (Rf 99 46 85) dans chaque processus de mesure pour
vrier les rsultats.
Nous suggrons que chaque laboratoire dtablir son propre programme et les
procdures de correction des carts dans les mesures de contrle qualit.
ANALYSEURS AUTOMATIQUES
Des adaptations diffrents analyseurs automatiques sont disponibles sur demande.
Hommes: 60 - 160 g/dL
Femmes: 37 - 145 g/dL
Il est recommand que chaque laboratoire tablisse ses propres valeurs de rfrence.
PERFORMANCE. CARACTRISTIQUES DE FONCTIONNEMENT
Le fonctionnement du produit dpend tant du ractif que du systme de lecture
manuel ou automatique utilis. Les rsultats suivants ont t obtenus avec une
technique manuelle:
Sensibilit comme limite de dtection:18 g/dL
Linarit: Lessai est linaire jusqu 1000 g/dL (179 mol/L). Pour des valeurs
suprieures, diluer lchantillon avec de leau dionise (1+1). Multiplier le rsultat
par 2.
Exactitude: le pourcentage de rcupration est de 97,3%.
Coefcient de variation dans la srie: 2,11 %
Coefcient de variation entre les sries: 2,39%
Justesse. Les rsultats obtenus avec le ractif ne sont pas signicativement diffrents
par rapport au ractif de rfrence considr.
Ltude dtaille de la performance du ractif est disponible sur demande.
INTERFRENCES
Ne pas utiliser de srums lipmiques.
Il est recommand dviter la contamination du matriel utiliser par le fer. Lutilisation
de matriel en plastique jetable est conseille.
Lintroduction de pipettes dans le acon de ractif est dconseille an dviter des
contaminations.
En cas de contamination accidentelle de ltalon, il est conseill dutiliser un srum
contrle de concentration connue comme talon, comme par exemple, le Seriscann
normal (Rf. 99 41 48).
BIBLIOGRAPHIE
Stookey L.L., (1970). Anal. Chem., 42, 779 - 781.
Yee, H.Y.and Zin, A.(1971).Clin. Chem. 17, 950 - 953.
Persijn, J.P. et coll.,(1971). Clin. Chim. Acta, 35, 91 - 98.
Williams J.H.,Johnson D.J. and Haut, M.J. (1977). Clin. Chem. 23, 237 - 240.
Thompsen J.C. and Mottola H.A., (1984). Anal. Chem. 56, 755 - 757.

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Rvision: 01.2017 PRO4_REG9_FEFER_4A
 HIERRO - FERROZINE
IRON - FERROZINE
A

H302,H315,H319
P280,P302+P352,P305+P351+P338,P321,P337+P313,P362+P364,P501
ES - HIERRO (FERROZINE), TAMPON
Atencin
Peligro: Nocivo en caso de ingestin. Provoca irritacin cutnea. Provoca irritacin ocular grave.
Precaucin: Llevar guantes/prendas/gafas/mscara de proteccin. EN CASO DE CONTAC-
TO CON LA PIEL: Lavar con abundante agua. EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS:
Aclarar cuidadosamente con agua durante varios minutos. Quitar las lentes de contacto, si
lleva y resulta fcil. Seguir aclarando. Se necesita un tratamiento especfico. Si persiste la
irritacin ocular: Consultar a un mdico. Quitar las prendas contaminadas y lavarlas antes de
volver a usarlas. Eliminar el contenido/el recipiente segn el punto 13 de la Ficha de Datos de
Seguridad.
Contiene: cloruro de guanidinio
GB - IRON (FERROZINE), BUFFER
Warning
Hazard: Harmful if swallowed. Causes skin irritation. Causes serious eye irritation.
Precautionary: Wear protective gloves/protective clothing/eye protection/face protection. IF ON
SKIN: Wash with plenty of water. IF IN EYES: Rinse cautiously with water for several minutes.
Remove contact lenses, if present and easy to do. Continue rinsing. Specific treatment. If eye
irritation persists: Get medical advice/attention. Take off contaminated clothing and wash it befo-
re reuse. Dispose the contents/container according to point 13 of the Safety Data Sheet.
Contains: guanadine hydrochloride,guanidinium chloride
PT - FERRO (FERROZINE), TAMPO
Ateno
Perigo: Nocivo por ingesto. Provoca irritao cutnea. Provoca irritao ocular grave.
Precauo: Usar luvas de proteco/vesturio de proteco/proteco ocular/proteco facial.
SE ENTRAR EM CONTACTO COM A PELE: lavar abundantemente com gua. SE ENTRAR
EM CONTACTO COM OS OLHOS: enxaguar cuidadosamente com gua durante vrios
minutos. Se usar lentes de contacto, retire-as, se tal lhe for possvel. Continuar a enxaguar.
Tratamento especfico. Caso a irritao ocular persista: consulte um mdico. Retirar a roupa
contaminada e lav-la antes de a voltar a usar. Eliminar o contedo / recipiente de acordo com
o ponto 13 da Ficha de Segurana.
Contm: cloreto de guanidnio
FR - FER (FERROZINE), TAMPON
Attention
Danger: Nocif en cas dingestion. Provoque une irritation cutane. Provoque une svre
irritation des yeux.
Prcaution: Porter des gants de protection/des vtements de protection/un quipement de
protection des yeux/du visage. EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU: Laver abondamment
l'eau. EN CAS DE CONTACT AVEC LES YEUX: rincer avec prcaution l'eau pendant
plusieurs minutes. Enlever les lentilles de contact si la victime en porte et si elles peuvent tre
facilement enleves. Continuer rincer. Traitement spcifique. Si l'irritation oculaire persiste:
consulter un mdecin. Enlever les vtements contamins et les laver avant rutilisation. liminer
le contenu / rcipient conformment au point 13 de la fiche de donnes de scurit.
Contient: chlorure de guanidinium

B
ES - HIERRO (FERROZINE), REACTIVO COLOR
GB - IRON (FERROZINE), COLOR REAGENT
PT - FERRO (FERROZINE), REAGENTE COR
FR - FER (FERROZINE), RACTIF COLOR

C
ES - HIERRO ESTNDAR, 200 uG/DL
GB - IRON STANDARD, 200 uG/DL
PT - FERRO STANDARD, 200 uG/DL
FR - FERRO STANDARD, 200 uG/DL

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