CHOLESTEROL

Colesterol
CHOD-POD. Enzimtico colorimtrico

Determinacin cuantitativa de colesterol 5. Leer la absorbancia (A) del Patrn y la muestra, frente al Blanco de
IVD reactivo. El color es estable como mnimo 60 minutos.

Conservar a 2-8C CALCULOS

( A ) Muestra
PRINCIPIO DEL METODO x 200 (Conc. Patrn) = mg/dL de colesterol en la muestra
( A ) Patrn
El colesterol presente en la muestra origina un compuesto coloreado
segn la reaccin siguiente: Factor de conversin: mg/dL x 0,0258= mmol/L.
CHE CONTROL DE CALIDAD
steres colesterol + H2O Colesterol + cidos grasos
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
CHOD
Colesterol + O2 4-Colestenona + H2O2 SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
POD Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar
2 H2O2 +Fenol + 4-Aminofenazona Quinonimina + 4H2O el instrumento, los reactivos y el calibrador.
La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
colesterol presente en la muestra ensayada1,2. correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las
tolerancias.
SIGNIFICADO CLINICO
VALORES DE REFERENCIA
El colesterol es una sustancia grasa presente en todas las clulas del 5,6
organismo. El hgado produce naturalmente todo el colesterol que Evaluacin del riesgo :
necesita para formar las membranas celulares y producir ciertas Menos de 200 mg/dL Normal
hormonas. La determinacin del colesterol es uno de las herramientas 200-239 mg/dL Moderado
ms importantes para el diagnostico y clasificacin de las lipemias. El 240 o ms Alto
aumento del nivel de colesterol es uno de los principales factores de Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
riesgo cardiovascular5,6. establezca sus propios valores de referencia.
El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos
clnicos y de laboratorio.
CARACTERISTICAS DEL METODO
Rango de medida: Desde el limite de deteccin de 0,6 mg/dL hasta el limite
REACTIVOS de linealidad de 600 mg/dL.
R1 PIPES pH 6,9 90 mmol/L Si la concentracin es superior al limite de linealidad, diluir la muestra 1/2
Tampn Fenol 26 mmol/L con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
Colesterol esterasa (CHE) 300 U/L Precisin:
R2 Colesterol oxidasa (CHOD) 300 U/L Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
Enzimas Peroxidasa (POD) 1250 U/L Media (mg/dL) 90,1 305 90,4 301
4 - Aminofenazona (4-AF) 0,4 mmol/L SD 0,64 3,30 1,12 2,30
Patrn primario acuoso de Colesterol 200 CV (%) 0,71 1,08 1,24 0,76
CHOLESTEROL CAL
mg/dL Sensibilidad analtica: 1 mg/dL = 0,002 A.
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias
PREPARACION sistemticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
Reactivo de trabajo (RT): Disolver ( ) el contenido de un vial de R 2 comerciales (x).
Enzimas en 1 frasco de R 1 Tampn. Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. Coeficiente de correlacin (r): 0,995.
Estabilidad (RT): 4 meses en nevera (2-8C) o 40 das 15-25C. Ecuacin de la recta de regresin: y= 1,004x - 0,931.
Mantener protegido de la luz Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
CONSERVACION Y ESTABILIDAD INTERFERENCIAS
Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de No se han observado interferencias de hemoglobina hasta 5 g/L y
1,2
caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bilirrubina hasta 10 mg/dL .
bien cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita su Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
3,4
contaminacin. No usar reactivos fuera de la fecha indicada. determinacin del Colesterol .
Indicadores de deterioro de los reactivos:
NOTAS
- Presencia de partculas y turbidez.
1. CHOLESTEROL CAL: Debido a la naturaleza del producto, es
- Absorbancia (A) del Blanco a 505 nm 0,1.
aconsejable tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar
MATERIAL ADICIONAL con facilidad.
- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 505 nm (500-550). 2. LCF(Lipid Clearing Factor) est integrado en el reactivo.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. 3. La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores
- Equipamiento habitual de laboratorio. sistemticos en mtodos automticos. En este caso, se recomienda
utilizar calibradores sricos.
MUESTRAS 4. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensacin.
1,2
Suero o plasma : Estabilidad de la muestra 7 das a 2-8C y varios 5. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la
meses si se mantiene la muestra congelada (-20C). aplicacin de este reactivo en distintos analizadores.

PROCEDIMIENTO BIBLIOGRAFIA
1. Condiciones del ensayo: 1. Naito H.K. Cholesterol. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . 505 nm (500-550) Toronto. Princeton 1984; 1194-11206 and 437.
2. Meiattini F. et al. The 4-hydroxybenzoate/4-aminophenazone Chromogenic
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .1 cm paso de luz
System. Clin Chem 1978; 24 (12): 2161-2165.
Temperatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37C /15-25C 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
3. Pipetear en una cubeta: 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Blanco Patrn Muestra
RT (mL) 1,0 1,0 1,0 PRESENTACION
(Nota1-2)
Patrn ( L) -- 10 -- Ref: 1001090 R1, R2 (Lio.):10 x 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
Muestra ( L) -- -- 10 Ref: 1001091 R1, R2 (Lio.):10 x 20 mL, CAL: 1 x 5 mL
Cont.
4. Mezclar e incubar 5 minutos a 37C 10 min. a temperatura Ref: 1001092 R1, R2 (Lio.):4 x 125 mL, CAL: 1 x 5 mL
ambiente. Ref: 1001093 R1, R2 (Lio.):4 x 250 mL, CAL: 1 x 5 mL

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