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TRIGLYCERIDES

Triglicridos
GPO-POD. Enzimtico colorimtrico

Determinacin cuantitativa de triglicridos Blanco Patrn Muestra


IVD RT (mL) 1,0 1,0 1,0
(Nota1,2)
Patrn ( L) -- 10 --
Conservar a 2-8C
Muestra ( L) -- -- 10
PRINCIPIO DEL METODO Mezclar e incubar 5 minutos a 37C o 10 min. a temperatura ambiente.
Los triglicridos incubados con lipoproteinlipasa (LPL) liberan glicerol y 4. Leer la absorbancia (A) del Patrn y la muestra, frente al Blanco de
cidos grasos libres. El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato reactivo. El color es estable como mnimo 30 minutos.
deshidrogenasa (GPO) y ATP en presencia de glicerol quinasa (GK) para
producir glicerol-3-fosfato (G3P) y adenosina-5-difosfato (ADP). El G3P CALCULOS
es entonces convertido a dihidroxiacetona fosfato (DAP) y perxido de ( A ) Muestra
x 200 (Conc. Patrn) = mg/dL de triglicridos en la muestra
hidrogeno (H2O2) por GPO. ( A ) Patrn
Al final, el perxido de hidrogeno (H2O2) reacciona con 4-aminofenazona
(4-AF) y p-clorofenol, reaccin catalizada por la peroxidasa (POD) dando Factor de conversin: mg/dL x 0,0113 = mmol/L.
una coloracin roja:
CONTROL DE CALIDAD
LPL
Triglicridos + H2O Glicerol + cidos grasos libres Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
Glicerol quinasa SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
Glicerol + ATP G3P+ ADP Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el
GPO instrumento, los reactivos y el calibrador.
G3P + O2 DAP + H2O2
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
POD correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
H2O2 + 4-AF + p-Clorofenol Quinona + H2O
La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de VALORES DE REFERENCIA
triglicridos presentes en la muestra ensayada1,2,3. Hombres: 40 160 mg/dL
SIGNIFICADO CLINICO Mujeres: 35 135 mg/dL
Los triglicridos son grasas que suministran energa a la clula. Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
Al igual que el colesterol, son transportados a las clulas del organismo establezca sus propios valores de referencia.
por las lipoprotenas en la sangre. CARACTERISTICAS DEL METODO
Una dieta alta en grasas saturadas o carbohidratos puede elevar los Rango de medida: Desde el limite de deteccin de 0,7 mg/dL hasta el limite de
niveles de triglicridos. linealidad de 1000 mg/dL.
Su aumento es relativamente inespecfico. Diversas dolencias, como Si la concentracin es superior al lmite de linealidad, diluir la muestra 1/2 con
ciertas disfunciones hepticas (cirrosis, hepatitis, obstruccin biliar) o ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
diabetes mellitus, pueden estar asociadas con su elevacin 3,6,7,. Precisin:
El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos
clnicos y de laboratorio. Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
Media (mg/dL) 118 216 119 215
REACTIVOS SD 0,67 0,94 2,17 2,91
R1 GOOD pH 7,5 50 mmol/L CV (%) 0,60 0,43 1,83 1,36
Tampn p-Clorofenol 2 mmol/L
Lipoprotein lipasa (LPL) 150000 U/L Sensibilidad analtica: 1 mg/dL = 0,0012 A.
Glicerol quinasa (GK) 500 U/L Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemticas
R2 Glicerol-3-oxidasa (GPO) 2500 U/L significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
Enzimas Peroxidasa (POD) 440 U/L Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
4 Aminophenazone (4-AF) 0,1 mmol/L Coeficiente de correlacin (r): 0,996.
ATP 0,1 mmol/L Ecuacin de la recta de regresin: y= 1,00x + 0,0743.
TRIGLYCERIDES CAL Patrn primario acuoso de Triglicridos 200 mg/dL Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
PREPARACION INTERFERENCIAS
Reactivo de trabajo (RT): Disolver ( ) el contenido de un vial de R 2 No se han observado interferencias con bilirrubina hasta 170 mol/L y
Enzimas en un frasco de R 1 Tampn. hemoglobin hasta 10 g/L .
2

Ref: 1001310 Reactivo de trabajo (RT): Reconstituir ( ) el contenido de Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
4,5
un vial de R 2 Enzimas en 10 mL de R 1 Tampn. determinacin de los triglicridos .
Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. NOTAS
RT Estabilidad: 6 semanas en nevera (2-8C) o una semana a 15-25C. 1. TRIGLYCERIDES CAL: Debido a la naturaleza del producto, es
aconsejable tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con
CONSERVACION Y ESTABILIDAD facilidad.
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad 2. LCF(Lipid Clearing Factor) est integrado en el reactivo.
indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 3. La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores sistemticos
2-8C, protegidos de la luz y se evita su contaminacin. en mtodos automticos. En este caso, se recomienda utilizar calibradores
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. sricos.
Indicadores de deterioro de los reactivos: 4. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensacin.
- Presencia de partculas y turbidez. 5. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de
- Absorbancia (A) del Blanco a 505 nm > 0,14. este reactivo en distintos analizadores.
MATERIAL ADICIONAL BIBLIOGRAFIA
- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 505 nm. 1. Buccolo G et al. Quantitative determination of serum triglycerides by use of enzimes.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. Clin Chem 1973; 19 (5): 476-482.
- Equipamiento habitual de laboratorio. 2. Fossati P et al. Clin. Chem 1982; 28(10): 2077-2080.
3. Kaplan A et al. Tryglycerides. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto.
MUESTRAS Princeton 1984; 437 and Lipids 1194-1206.
Suero y plasma heparinizado o EDTA 1. Estabilidad de la muestra: 5 das 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
a 2-8C. 5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
6. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
PROCEDIMIENTO 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
1. Condiciones del ensayo:
PRESENTACION
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . 505 (490-550) nm
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .1 cm paso de luz Ref: 1001310 5 x 10 mL
Temperatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C Ref: 1001311 10 x 20 mL
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. Ref: 1001312 Cont. 10 x 50 mL
3. Pipetear en una cubeta: Ref: 1001313 4 x 125 mL
Ref: 1001314 4 x 250 mL

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