HEPATITIS VIRAL: ENZIMAS DE USO CLNICO DIAGNSTICO

Varn de 37 aos de edad, soltero, vigilante. INGRESA AL hospital por presentar

malestar general, coloracin amarillenta de piel y mucosas y das antes alza trmica
no justificada ni cuantificada. Abdomen distendido y dolor a nivel de reborde costal
derecho. Presenta nauseas y est incapacitado para ingerir alimentos por va oral.
El Laboratorio mostr: AST 1 200 UI/Litro (VN 7 a 20) ALT: 800 UI/Litro. (VN 9 a 30)
Fosfatasa alcalina: 25 UKA (VN 5 a 15) Bilirrubina total: 8 mg/dl Bilirrubina directa:
5 mg/dl

Niveles altos de AST (Aspartato Aminotransferasa ) 1200 Ul/Litro VN 7 a 20

La AST est presente en muchos tejidos del organismo, si alguno se ve afectado se libera en el
torrente sanguneo.

Alanina aminotransferasa (ALT) 800Ul/LITRO ( VN 9 a 30)

La enzima se encuentra dentro de las clulas del hgado. Pero si el hgado presenta una inflamacin
o una lesin, libera la enzima en el torrente sanguneo.

Fosfatasa Alcalina 25UKS ( VN 5 a 15 )

Presente en gran variedad de tejidos del organismo, como las membranas canaliculares de los
hepatocitos, leucocitos, huesos, rin, intestino y placenta. La mayor parte reconoce un origen seo
(termolbil, representa 58-67%) y heptico (termoestable, representa del 25-33%).

La elevacin concomitante de otras enzimas hepticas como 5-NT y GGT, ayuda a establecer el
origen heptico de la elevacin de la FA. Es uno de los ms importantes marcadores de olestasis, si
bien un valor normal no excluye el diagnstico. Los niveles sricos de la FA se encuentran elevados
habitualmente en la obstruccin biliar, lesiones ocupantes de espacio o enfermedades infiltrativas
del hgado, as como en las situaciones que motiven colestasis intrahepticas (cirrosis biliar 1,
colangitis esclerosante 1, colestasis inducida por frmacos). Puede observarse una FA
anormalmente baja en la hipofosfatemia hereditaria, en pacientes con dficit de cinc y magnesio,
anemia perniciosa, hipotiroidismo, caquexia y anticoagulacin. El grado de elevacin de la FA no
diferencia la localizacin o causa de la colestasis.

-Causas de elevacin de fosfatasas alcalinas

El primer paso frente a una elevacin de fosfatasas alcalinas consiste en confirmar su origen
heptico mediante la medicin de otras enzimas que se elevan en la colestasia. La enzima ms
utilizada para este propsito es la gama glutamil transpeptidasa.

Las enfermedades que causan elevaciones de fosfatasas alcalinas de origen heptico pueden
dividirse en enfermedades colestsicas extra e intra-hepticas, y enfermedades infiltrativas.

1) Colestasia extra-heptica
La obstruccin de la va biliar en cualquier nivel es causa de elevaciones de las fosfatasas alcalinas.
Entre las causas que producen esta elevacin se encuentran la obstruccin por clculos biliares,
tumores (cncer de pncreas, colangiocarcinoma y otros) y colangitis esclerosante.

2) Colestasia intra-heptica

Hay enfermedades que producen dao de la va biliar intraheptica. Las ms comunes incluyen
cirrosis biliar primaria, obstruccin segmentaria de la va biliar y medicamentos.

Bilirrubina total : 8mg/dl ( VN: 0.3 a 1.9 mg/dL) bilirrubina directa: ((tambin llamada
conjugada VN: 0 a 0.3 mg/dL.) 5mg/ dl

Las grandes cantidades de bilirrubina en la sangre pueden llevar a que se presente ictericia, una
coloracin amarilla en la piel, las membranas mucosas o los ojos.

Hiperbilirrubinemia heptica: es la que se da por un dao en el hgado, por ejemplo en

una hepatitis. Si hablamos de que es hepatitis aguda, los niveles usualmente no pasan
de 10mg/dL, pero si es crnica los niveles oscilan entre 20-25mg/dL. Con estos niveles
se puede presentar alguna complicacin pero por s sola no es lo que causa la muerte,
pero es un indicador de dao heptico grave que lleva a hipoglicemia, deficiencia en el
sistema inmune, en la coagulacin etc. que s puede llevar a la muerte.
Hiperbilirrubinemia postheptica: cuando la alteracin est despues de que la
bilirribina ha pasado por el hgado, puede ser por taponamiento del conducto cstico,
por estasis biliar etc. En esta no se sube tanto y usualmente solo llega a ser de 10mg/dL
o menos.
Hiperbilirrubinemia preheptica: esta se da por una alta produccin de la bilirrubina,
esto puede ser causado porque los glbulos rojos de la sangre (que son los que
contienen la hemoglobina de la que te habl antes) se estn rompiendo y liberando la
hemoglobina que a su vez se transforma en bilirrubina elevando sus niveles en sangre
para luego acumularse en los tejidos dando el tinte amarillo. Esta es la que se da
frecuentemente en los reciennacidos, y en este caso niveles por encima de 35mg/dL se
correlaciona con un 90% de resultados adversos (dao neurolgico permanente o
muerte). Estos niveles por s solos si provocan una patologa en el reciennacido
llamada Kernicterus en la cual la bilirrubina se acumula en el cerebro daandolo de
forma permanente. Slo se presenta en los reciennacidos por el bajo contenido de
grasa corporal en los que la bilirrubina pueda acumularse para evitar que llegue al
sistema nervioso central. Entre el 50 y 75% de los nios que presentan kernicterus
mueren prematuramente.

Esta ltima es de especial importancia porque es en donde los niveles de bilirrubina por si mismos
representan un peligro para la vida. En conclusin, respecto a los niveles peligrosos: 35mg/dL son
casi mortales. Niveles ms bajos pueden ser INDICADOR de algo peligroso.
ENZIMILOGA HEPTICA

COLINESTERASA: niveles bajos en enfermedades hepatocelulares.

est disminuida en colestasis prolongada por alteracin en la capacidad de sntesis de las

clulas hepticas.

Gamma Glutamil transferasa: muy elevada en obstruccin biliar

se encuentra en la membrana de la mayora de las clulas con funcin secretoria o
absortiva, en el rin, hgado, bazo, pulmones, cerebro, intestino, corazn, rstata y, en
menor cantidad, en linfocitos, granulocitos y eritrocitos. La actividad de la enzima en el
rin es 10 veces mayor que en el hgado, sin embargo la GGT srica presenta un origen
principalmente hepatobiliar. El principal valor de la determinacin de los niveles de GGT
es excluir enfermedades seas que causen aumento de la FA. Se observa aumento del
valor srico en la mayora de las enfermedades hepatobiliares, pero la mayor elevacin
ocurre en la infiltracin heptica por clulas neoplsicas, obstruccin biliar intra o
extraheptica y enfermedad heptica alcohlica. Mltiples drogas tambin provocan
aumento de GGT
Isocitrico deshidrogenasa : elevada en hepatitis viral
Cuando el acetil-COA se incorpora al ciclo de Krebs en una situacin de altas
concentraciones de ATP, durante el reposo, se forma cido ctrico, el cual se acumula
en la mitocondria debido a la inhibicin alostrica que ejercen el ATP y el NADH sobre
la isoctrico deshidrogenasa. En estas condiciones se favorece la salida de este
compuesto al citosol, donde cumple la funcin de ser fuente de acetil-COA para la
reaccin de la acetil-COA carboxilasa y constituir, adems, el principal activador
alostrico de esta enzima que, al polimerizarla, la activa y es el sitio ms importante de
regulacin de sntesis de cidos grasas
Deshidrogenasa lctica: elevada en heptitis sobre todo LDH1
Cuando el acetil-COA se incorpora al ciclo de Krebs en una situacin de altas
concentraciones de ATP, duranteel reposo,se forma cido ctrico, el cual se
acumula en la mitocondria debido a la inhibicin alostrica que ejercen el ATP y el
NADH sobre la isoctrico deshidrogenasa
.
Leucinoam, inopeptidasa: en enfermedades hepatocelulares

Fosfatasa alcalina:Elevada en trastornos biliares , sobre todo en termoestables.

Una concentracin elevada de fosfatasa alcalina suele indicar que existe un dao heptico
o que por algn motivo existe un aumento de la actividad celular en el hueso.

Si tambin se detecta un aumento de los niveles de otras pruebas hepticas como

bilirrubina, aspartato aminotransferasa (AST) o alanina aminotransferasa (ALT), el
aumento de fosfatasa alcalina podr seguramente atribuirse al hgado. Si adems la GGT
tambin est aumentada, las probabilidades de que la causa sea heptica aumentan.
Contrariamente, si los resultados de estas pruebas son normales, es ms probable que la
 afectacin sea sea. De manera similar, si calcio y fosfatos (fsforo) estn alterados, es
ms probable que el aumento de la fosfatasa alcalina sea por una causa sea.

Transaminasas: elevada en enfermedades hepatocelulares.

(aspartato y alanina-aminotransferasa): la elevacin de stas indica lesin y necrosis
hepatocelular. Un incremento marcado de las mismas puede orientar hacia una
patologa hepatocelular aguda (vrica, inducida por drogas o isqumica)

1. ANAMNESIS
Se debe realizar un interrogatorio minucioso, rescatando informacin que ayude a recabar causas
de colestasis intra y/o extraheptica. Interrogar acerca de medicacin, tratamiento hormonal,
qumicos (ocupacin, hobbies, casa y jardn), alcohol, homeopticos, cosmticos, etc.; tambin
investigar sntomas como fiebre, artralgias, prurito y cambios en la coloracin de la orina y la materia
fecal.

2-Hallazgos clnicos:

- Ictericia: no necesariamente acompaa la colestasis. Se ve en cuadros obstructivos con colestasis

severa y prolongada.

- Prurito: puede ocurrir en estadios muy tempranos, a veces siendo el primer signo de colestasis. Es
ms pronunciado en la noche y en el clima fro. Con el curso de la enfermedad se puede transformar
en doloroso. Se acompaa de lesiones epiteliales por rascado. La teora tradicional propone a los
cidos biliares como mediadores del prurito, sin embargo no se ha demostrado una asociacin
directa.

-Malestar abdominal: el dficit de bilis en la materia fecal produce disturbios en la flora bacteriana
con alteracin en la digestin y absorcin de grasas, lo que produce meteorismo, distensin
abdominal, disminucin del apetito, intolerancia a comidas grasas, nuseas y vmitos.
1- Qu es una enzima, coenzima, isoenzima?
Enzima: son catalizadores biolgicos que actan aumentando la velocidad de las
reacciones qumicas. mayor especificidad, cada una induce la transformacin de
una nica sustancia.
Coenzima: molculas orgnicas (no tienen naturaleza proteica) importantes para la
actividad de las enzimas. Encargadas se sufrir la catlisis enzimtica en lugar de las
enzimas, de ese modo la enzima no sufrir dao alguno y podr seguir realizando
ms ciclos de reaccin cambiando de coenzima.
Isoenzima: Protena que cataliza la misma reaccin, con los mismos
requerimientos, pero con propiedades cinticas y fisicoqumicas diferentes y que se
desplazan de diversas maneras.

2- Cul es el papel de las enzimas con respecto a la energa de activacin?

Aumentando la velocidad de reaccin haciendo que disminuya la energa de activacin.

Durante la reaccin, la enzima se unir a un sustrato formando un complejo transitorio,
sin embargo al final de la catlisis la enzima aun mantendr su conformacin inicial y
podr continuar unindose a otras molculas de sustrato.

3. Cul es el papel de las enzimas con respecto al punto de equilibrio de una

reaccin qumica reversible

Para disminuir la actividad enzimtica se les denomina inhibidores, y son utilizadas en

las reacciones qumicas del organismo in vivo para controlar el grado de actividad de
una enzima concreta. Sin embargo depende del tipo de union que establezcan para
clasificarlas en reversibles o irreversibles

La inhibicin de enzimas 1) Inhibicin reversible Dentro de los inhibidores reversibles

hay tres grupos dependiendo del lugar y forma de unin a la enzima:

- Los inhibidores competitivos

compiten con el sustrato por ocupar el centro activo, las cuales presentan semejanza
estructural con el sustrato que les permite situarse en el centro activo y bloquear la
catalizacin enzimtica

Esto ocasiona un descenso en la velocidad de reaccin.

Se puede revertir la inhibicin incrementando la concentracin de sustrato, asi aumente
la probabilidad de que el centro activo est ocupado por el sustrato y no por el inhibidor.

- Los inhibidores no competitivos

se unen a la enzima en puntos distintos al centro activo, esta unin incapacita a la

enzima para desarrollar su accin cataltica, y en este caso, el aumento en la
concentracin de sustrato no revierte la inhibicin.

- Los inhibidores acompetitivos o incompetitivos , no presentan afinidad por la molcula

de enzima libre, sino que se unen a la enzima cuando sta se encuentra formando el
complejo enzima-sustrato (ES), inhabilitndole para continuar el proceso y formar
producto

4. Como se valoran las enzimas en el Laboratorio

En primer lugar se preparan los reactivos y se mezclan en una cubeta de

espectrofotmetro, de manera que las concentraciones de los substratos (Piruvato y
NADH) estn por encima de sus respectivos KM.

El enzima se aade al aadir la muestra de suero.

Se mide entonces la velocidad de reaccin como moles consumidos de NADPH por

minuto.

Se expresa este valor en Unidades de Actividad Enzimtica (IU) Se refiere dichas

unidades al volumen que se haba aadido de suero

Se expresa el resultado final como Unidades de actividad enzimtica por ml de suero

 OTRAS DETERMINACIONES COMPLEMENTARIAS Hbs Ag y otros marcadores
virales Alfa 1-fetoproteina Ferritina Cupremia y ceruloplasmina Anticuerpos
antimitocondriales Anticuerpos anti-msculo liso

5. Por qu no se expresan en mg/100ml o en milimoles /Litro frecuentemente?

Porque son biocatalizadores que se encuentran en mnimas cantidades en nuestro

organismo, un tipo de sustancias proteicas. por convencin es preferible expresarlas
en Unidades Internacionales puesto que alguno podra expresarse por ej. 0,0005
mg/dL, lo cual no es prctico.
 La actividad enzimtica se expresa Unidades Internacionales (UI) por unidad de
volumen (UI/ml, UI/L) siendo una UI la cantidad de enzima que transforma un
micromol de sustrato por minuto en condiciones estndar previamente establecidas.

6. Dentro del organismo dnde actan las enzimas

La sangre

Los lquidos intestinales

La boca (saliva)

El estmago (jugo gstrico)

Las enzimas digestivas

Las enzimas digestivas sn secretadas por el cuerpo, que ayuda en la digestin de los
alimentos. Los nombres de las enzimas, que ayudan en la digestin sn:
Amilasa: Esta enzima ayuda a descomponer los carbohidratos. Se encuentra en los jugos
de la saliva, el pncreas y el intestino.

Las proteasas: Ayudan con la digestin de las protenas. Est presente en los jugos
gstricos, los jugos pancreticos y los jugos intestinales.

Las lipasas: Las lipasas ayudan con la digestin de las grasas. Se encuentra en el
estmago, el jugo pancretico y en las grasas alimenticias.

Los carbohidratos continan el trnsito hacia el intestino delgado sin sufrir mayores
modificaciones. Al salir el alimento del estmago, se distiende la pared duodenal y esto
estimula la secrecin de dos hormonas a la sangre: la colecistoquinina y la secretina. La
primera llega hasta el pncreas exocrino y provoca la liberacin de un lquido rico en
enzimas. Dentro de estas se encuentra la alfa-amilasa pancretica, acta sobre los enlaces
(alfa1-4) de los polisacridos. La secretina por su parte, trabaja tambin en el pncreas
donde estimula la liberacin de un lquido rico en bicarbonato. Este bicarbonato es el
responsable de la alcalinizacin del medio intestinal, que permite la accin de las enzimas
a valores de pH cercanos a su pH ptimo.
La amilasa pancretica puede degradar completamente la amilosa del almidn hasta
maltosa, pero solamente de manera parcial el glucgeno(o amilopectina). El producto de
esta digestin parcial de amilopectina y el glucgeno da origen a maltosas, maltotriosas,
isomaltosas y lo que se conoce como dextrina limite, que es el producto del ataque mximo
que pueden realizar las amilasas sobre el glucgeno. El resultado es un ncleo muy
ramificado de glucosa, debido a la presencia de numerosos enlaces (alfa 1-6). La
degradacin posterior de la dextrina lmite y la isomaltasa requiere de otra enzima,
sintetizada por las glndulas del duodeno, que se llama isomaltasa o (alfa 1-6) glucosidasa,
que quita la glucosa en posicin (alfa 1-6) y, al hacerlo, deja expuesta la siguiente glucosa,
que se encuentra en posicin (alfa 1-4), sobre la cual puede actuar la amilasa pancretica
sin ninguna restriccin.

7. Por qu se alteran en las enfermedades

En una enfermedad puede haber cambios de niveles normales de Ph, esto altera la e
enzima, tambin las temperaturas bajas porque inhiben el sitio activo. Las temperaturas
altas a ms de 37C desnaturalizan la parte proteica o Apoenzima. Las enzimas pueden
ser inhibidas en forma Reversible o Irreversible. Existen 2 formas de inhibicin
Reversible: la Competitiva y la No Competitiva. En la Inhibicin Competitiva un
compuesto de estructura similar a la del sustrato forma un complejo con la enzima de
la siguiente manera: Ki = E + I <-----> (EI) donde E es la enzima. I es el Inhibidor y Ki la
Constante de asociacin del complejo enzima - inhibidor. El (EI) no se desdobla en
productos de reaccin y enzima libre. Como ejemplo de esta inhibicin se halla la
Succnico - deshidrogenasa que es inhibida por el cido Malnico, cuya estructura
molecular tiene similitud con la del cido Succnico. En este caso, tanto el sustrato
(succnato) como el inhibidor (malonato) compiten por el sitio activo, lo cual reduce la
actividad de la enzima. Sin embargo, esta inhibicin puede ser anulada por el aumento
de la concentracin de sustrato, de manera que las molculas de sustrato exceden en
nmero a las del inhibidor.

En la Inhibicin No competitiva el inhibidor y el sustrato no estn estructuralemente

relacionados y ambos se unen a sitios distintos. La inhibicin no competitiva no puede
ser anulada por concentraciones altas de sustrato. La inhibicin Irreversible puede
deberse a la desnaturalizacin de la enzima o bien a la formacin de una unin
covalente con sta

8. Qu papel juega los lquidos biolgicos, Origen y destino

Referencia bibliogrfica:

http://www4.ujaen.es/~esiles/TEMA%205enzimologia.pdf

Nelson DL, Cox MM. Lehninger: principios de bioqumica. Ediciones Omega, S.L.;
2014. pg. 183-203.

Antonio blanco
https://books.google.com.pe/books?id=qn_0tgAACAAJ&dq=bioquimica+antonio+bl
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