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UNIVERSIDAD LAICA ELOY ALFARO DE MANABI

ULEAM
FACULTAD CIENCIAS AGROPECUAIAS
CARRERA AGROINDUSTRIAS.

1.- DATOS INFORMATIVOS:

MATERIA: MICROBIOLOGA
INTEGRANTES: BORIS TUBAY, JORGE ZAMORA
PROFESOR: ING. MIRABELLA LUCAS ORMAZA Mg.
SEMESTRE: 3er SEMESTRE
PRACTICA: #2
TEMA: TINCIN DE HONGOS Y LEVADURAS

2.- INTRDUCCION:

Los hongos pueden crecer como mohos o como levaduras. Algunas especies son
dimrficas, es decir a temperatura de 37 C (temperatura corporal) son capaces de crecer
como levaduras, y a 25C (temperatura ambiente) se desarrollan como mohos.
Mohos
Microscpicamente, los mohos son organismos multicelulares, forman tbulos cilndricos y
ramificados denominados hifas, poseen un dimetro de 2 a 10 m y crecen por extensin
en longitud desde el extremo de un filamento, as se forma una masa de hifas entrelazadas
denominada micelio. En algunas especies de hongos las hifas estn divididas en clulas
por tabiques o septos que se forman con intervalos regulares durante el crecimiento
filamentoso; cada tabique posee un poro septal que permite la continuidad citoplasmtica
entre una clula y otra del filamento. Otras especies carecen de tabiques septales por lo
que se denominan hongos cenocticos. En estas condiciones las hifas que penetran en el
sustrato cumplen funciones de sostn y de absorcin de nutrientes por lo que se
denominan hifas vegetativas o de sustrato. Los filamentos del micelio que se proyectan por
encima de la superficie del sustrato hacia el aire, constituyen hifas areas o reproductoras
ya que contienen las estructuras reproductoras del hongo llamadas conidias o esporas.

Macroscpicamente, los mohos se desarrollan en el laboratorio sobre la superficie de


sustratos o medios de cultivo, formando colonias areas, de aspecto algodonoso, vellosas
o pulvurulentas y de color variable.
Levaduras
Microscpicamente las levaduras son organismos unicelulares, de forma esfrica o
elipsoidal, y tamao variable de 3 a 15 m de dimetro. La mayora de las levaduras se
reproducen por gemacin o brotacin, aunque unas pocas lo hacen por fisin binaria.
El proceso de brotacin o gemacin se inicia por autolsis en un punto de la pared celular,
lo cual produce un reblandecimiento localizado de la pared. Como consecuencia, se ejerce
una presin interna en esta rea haciendo que la membrana citoplasmtica subyacente
sea excretada a travs de la pared reblandecida y se forme un pequeo brote o gema que
progresivamente comienza a agrandarse. El ncleo de la clula madre se divide en dos y
una copia es segregada hacia el brote. Se sintetiza nueva pared celular alrededor de la
gemacin y sta se separa de la clula madre como blastoconidia, el ciclo se completa y
puede repetirse. En el sitio de unin con la levadura madre, la clula hija presenta una
cicatriz de nacimiento convexa, y la clula madre una cicatriz de formacin de brote
cncava. La clula madre puede brotar, sucesivamente, desde varios puntos de su
membrana; este fenmeno se llama multibrotacin y es caracterstico de pocos hongos
patgenos. De este modo, cada levadura adulta tiene una sola cicatriz de nacimiento, pero
puede poseer diversas cicatrices de formacin de brote. Algunas especies de levaduras
producen brotes que caractersticamente no se separan y se hacen elongadas; as la
continuacin del proceso de brotacin forma una cadena de clulas unidas unas a otras
por una constriccin que semejan hifas, estas falsas hifas se denominan seudohifas.

Macroscpicamente las levaduras crecen en los medios de cultivo slidos formando


colonias opacas, de aspecto pastoso, color cremoso, aunque algunas especies son
caractersticamente pigmentadas. (Jessica, 2014)

Las levaduras se han definido como hongos microscpicos, unicelulares, la mayora se


multiplican por gemacin y algunas por escisin. Este grupo de microorganismos
comprende alrededor de 60 gneros y unas 500 especies. Histricamente, los estudios
sobre microbiologa enolgica se han centrado en las levaduras pertenecientes al gnero
Saccharomyces, que son las responsables de la fermentacin alcohlica. Anteriormente se
crea que slo ellas participaban en el proceso de produccin de alcohol, sin embargo, las
diferentes levaduras no-Saccharomyces, especialmente durante la fase inicial de la
fermentacin, pueden influir en las propiedades organolpticas de las bebidas alcohlicas.
El papel de las levaduras como agentes fermentadores no fue reconocido sino hasta 1856
por Luis Pasteur. Las teoras cientficas de esa poca reconocan la presencia de stas en
la fermentacin alcohlica, pero eran consideradas como compuestos qumicos complejos,
sin vida. Esta era la teora mecanstica liderada por los qumicos alemanes von Liebig y
Whler. Luis Pasteur, propuso la teora vitalstica y demostr que las clulas viables de
levaduras causan fermentacin en condiciones anaerobias; durante la cual el azcar
presente en el jugo es convertido principalmente en etanol y CO2.

Las levaduras son los agentes de la fermentacin y se encuentran naturalmente en la


superficie de las plantas, el suelo es su principal hbitat encontrndose en invierno en la
capa superficial de la tierra. En verano, por medio de los insectos, polvo y animales, son
transportados hasta el fruto, por lo que su distribucin se produce al azar. Existe un gran
nmero de especies que se diferencan por su aspecto, sus propiedades, sus formas de
reproduccin y por la forma en la que transforman el azcar. Las levaduras del vino
pertenecen a varios gneros, cada uno dividido en especies. Las especies ms extendidas
son Saccharomyces ellipsoideus, Kloeckera apiculata y Hanseniaspora uvarum, las cuales
representan por s solas el 90% de las levaduras utilizadas para la fermentacin del vino.
Como todos los seres vivos, tienen necesidades precisas en lo que se refiere a nutricin y
al medio en que viven. Son muy sensibles a la temperatura, necesitan una alimentacin
apropiada rica en azcares, elementos minerales y sustancias nitrogenadas, tienen ciclos
reproductivos cortos, lo que hace que el inicio de la fermentacin sea tan rpido, pero, as
como se multiplican, pueden morir por la falta o el exceso de las variables mencionadas.
(Vilema, 2012)
3.- OBJETIVOS:

Objetivo general

Conocer las tcnicas de tincin y manipulacin de hongos y levaduras, para la


diferenciacin de caractersticas morfolgicas y estructurales, microscpicas de las
mismas.

Objetivos especficos:

Aprender y reconocer las nuevas tcnicas de manipulacin.


Observar las caractersticas morfolgicas de las distintas muestras.
Reconocer las distintas estructuras tanto en mohos y levaduras.
4.- MATERIALES Y EQUIPOS:

Laminas portaobjetos
Cubreobjetos
Asa de platino
Microscopio ptico
Mechero de Bunsen
Goteros
Vaso de precipitado. 100 o 250 ml.

Reactivo, medios de cultivo.

Solucin de agua destilada


Solucin de azul de metileno
Muestra de mohos (meln)
Muestras de levaduras

5.- PROCEDIMIENTO:

Descripcin microscpica de levaduras


1. De las colonias de levaduras preparar un frotis fijado al calor y teirlo con azul de
metileno.
2. Hacer observaciones al microscpico con objetivo de 40x y 100x

Descripcin microscpica de mohos en montaje con cinta adhesiva


1. Se corta una tira de 4-5 cm de cinta adhesiva transparente tomndola nicamente
por los extremos.
2. Cerca del mechero se abre la caja y se presiona ligeramente la cinta transparente
sobre la periferia de la colonia
3. Colocar la cinta con la muestra adherida sobre una gota de azul de metileno,
previamente colocada en el centro de un portaobjetos. La cinta funcionar como
cubreobjetos por lo que se deber aplanar lo mejor posible, evitando la formacin de
burbujas y sin alterar demasiado las estructuras.
4. Dejar reposar durante 3-5 minutos y hacer las observaciones en el microscopio con
los objetivos de 10x y 40x.
5. Localizar en las preparaciones hifas, estructurales especiales como conidiforos,
conidias, esporangiforos, esporangios y rizoides. Determine si las hifas presentan
septos o no.
6.- RESULTADOS:

Resultados tincin en mohos


En la muestra de Meln (Cucumis melo) nos dimos cuenta que Hifas y micelio, en los
mohos estn constituidos por unos filamentos ramificados y entre cruzados llamados hifas,
cuyo conjunto forma el llamado micelio. Otro punto muy importante es que nuestra muestra
tiene micelio cenoctico ramificado. Tambin que tiene las Hifas gruesas y aceptadas, y con
un todo azul en cada estructura gracias al azul de metileno.

Rhizopus spp con azul de metileno.


Observacin con lente de 5x Observacin con lente de 10x

(Zamora, 2016) (Zamora, 2016)


Observacin con lente de 40x Observacin con lente de 100x
(Zamora, 2016)

(Zamora, 2016)
Resultados tincin en levaduras
Levaduras con azul de metileno
Observacin con lente de 40x Observacin con lente de 100x

(Zamora, 2016) (Zamora, 2016)

6.1.- ANALISIS DE RESULTADOS:


Primeramente, tenemos que recordar que la practica con respecto a descripcin
microscpica del moho fue muy favorable, porque pudimos observar algunas de sus
estructuras como son las hilas y micelios. Tambin que nuestra muestra de Meln tuvo
micelio cenoctico ramificado.
Y con respecto a la descripcin microscpica de levaduras no obtuvimos los resultados
adecuados, porque tanto las observaciones de 40x y 100x fueron un fracaso.
En lo que se refiere a analizar otro tipo de resultados con los dems grupos de trabajo nos
pudimos dar cuenta que nuestra muestra estuvo muy bien realizada debidamente a que
prestamos mejor atencin.

7.- CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

Durante el conocimiento de nuevas tcnicas de manipulacin entendimos que el


montaje con cinta adhesiva es aceptable en prcticas con mohos, y tambin que
dicho montaje acta como cubreobjetos.
En lo que se refiere a mohos en el meln nos concluimos que nuestra muestra es
totalmente ramificada y mediante investigacin suelen aparecer no solo en frutas
tambin en el suelo, degradando vegetales, heces animales, y residuos.
Tambin concluimos que las estructuras ms visibles microscpicamente en mohos
fueron hifas y micelio, en los mohos estn constituidos por unos filamentos
ramificados y entre cruzados llamados hifas.
8.-CUESTIONARIO.

1. Cules son las principales estructuras caractersticas de levaduras y mohos.

Mohos:

Esporangios
Esporas
Micelio
Hifas (Sanchez, s.f.)

Levaduras:
Vesculas secretorias
Microtbulos
Ncleo
Membrana
Pared celular
Granulo lipdico
Peroxisoma
Mitocondrias
Endosoma
Aparato de Golgi
Vacuola
Retculo endoplstico (Sanchez, s.f.)

2. Elaborar un cuadro comparativo de caractersticas morfolgicas, nutricionales y


sensibilidad a antibiticos de hongos y bacterias. Mencione las diferencias que hay entre
las esporas de hongos y las esporas bacterianas.

HONGOS BACTERIAS
Los hongos microscpicos Este tipo de clulas son
pueden ser: unicelulares, de, ms o menos, un
se llaman levaduriformes dcimo del tamao de
o levaduras; filamentosos, una clula eucariota y
se llaman mohos y cada tienen una longitud de
organismo contiene aproximadamente 0.5 a
muchas clulas. 5 micrmetros; aunque
Tanto las levaduras como hay algunas especies
los mohos presentan que pueden llegar a
clulas eucariontes, es medir hasta medio
decir, con cromosomas milmetro de largo y
CARACTERISTICAS mltiples, membrana pueden ser vistas con el
MORFOLOGICAS nuclear bien definida, ojo desnudo. Por el otro
mitocondrias, retculo lado, dentro del grupo
endoplsmico y pared ms pequeo de
celular. bacterias existen los
Son microorganismos que miembros del gnero
contienen paredes micoplasma, los cuales
celulares rgidas hechas miden solamente 0.3
de glucgeno, de celulosa, micrmetros.
de quitina, o mananas. La (Dominguez, s.f.)
membrana celular fngica,
a diferencia de la
bacteriana, presenta
esteroles.
(microbiologia3bequipo5.b
logspot, 2014)
Son hetertrofos que Las bacterias, como el
utilizan materia orgnica resto de los seres vivos,
para su nutricin. necesitan una fuente de
Su nutricin es por carbono para poder
absorcin de sustancias sobrevivir. El origen de
orgnicas simples o esta fuente de carbono
compuestas. sirve como criterio de
Capaces de respiracin clasificacin para las
CARACTERISTICAS aerobia o fermentacin. bacterias. Adems, se
NUTRICIONALES Son aerobios facultativos. necesita una fuente de
(Pineda, s.f.) energa que sirva para
poder construir sus
propias molculas.
(recursos.cnice.mec.es,
s.f.)
SENSIBILIDAD A -Penicilina -Bacitracina
ANTIBIOTICOS -Griseofulvina -Polimixina

Mencione las diferencias que hay entre las esporas de hongos y las esporas bacterianas.

Las Esporas de las bacterias solo cumplen la funcin de defensa, es decir sobrevivir
cuando el ambiente se torna desfavorable. En cambio, las Esporas de los hongos, cumplen
funciones de Reproduccin.

3. Mencione la clasificacin de hongos filamentosos y levaduras.

FILAMENTOSOS FILAMENTODOS NO LEVADURAS


SEPTADOS SEPTADOS

Aspergillus Mucor Candida


Fusarium Rhizopus Cryptococcus
Acremonium Absidia Trchosporon beigelii
Penicillium Pichia ohmeria
Cladosporium
Curvularia
Alternaria
Paecilomyces
4. Describir brevemente tres problemticas concretas para el hombre causadas por hongos
y tres ejemplos de utilizacin benfica.

El hongo de la especie Fusarium puede ocasionar esta infeccin. Estos hongos


pueden entrar al cuerpo a travs del tracto respiratorio, senos nasales o la piel.
Puede ocasionar seales y sntomas asociados con una infeccin de los senos
nasales (sinusitis), una infeccin de las vas urinarias, una infeccin en la sangre
o meningitis.
Como con muchas otras infecciones por hongos, la cigomicosis puede ocurrir
con ms probabilidades en nios con sistemas inmunes debilitados. Se puede
desarrollar en nios con leucemia, linfoma o diabetes y aquellos que usan
vendajes no estriles en heridas o cortes.
Los nios con sistemas inmunes debilitados son susceptibles a tricosporonosis,
que afecta los pulmones, el corazn o el flujo sanguneo. El hongo Trichosporon
beigelii, que puede producir lesiones en la piel, en el torso, rostro y brazos
ocasiona la tricosporonosis. (Immunizations Infectious Diseases: An Informed
Parent's Guide (Copyright 2006 American Academy of Pediatrics), 2016)

Utilizacin Benfica:
Grifola frondosa
Uso: Medicinal para el hombre
Candida utilis
Uso: Alimenticio como reforzamiento del forraje
Russula brevipes
Uso: Alimenticio para el hombre (buenas tareas, s.f.)
9.- Bibliografa

(s.f.). Obtenido de recursos.cnice.mec.es:


http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/micro/contenidos5.htm
(s.f.). Obtenido de buenas tareas: http://www.buenastareas.com/ensayos/Tarea-De-
Micologia-10-Hongos/2184860.html
(25 de noviembre de 2014). Obtenido de microbiologia3bequipo5.blogspot:
http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com/2014/11/morfologia-de-hongos.html
(4 de julio de 2016). Obtenido de Immunizations Infectious Diseases: An Informed
Parent's Guide (Copyright 2006 American Academy of Pediatrics):
https://www.healthychildren.org/Spanish/health-
issues/conditions/infections/Paginas/Fungal-Diseases.aspx
Dominguez, M. (s.f.). Obtenido de
http://www.batanga.com/curiosidades/2011/07/28/morfologia-de-las-bacterias
J, H. (s.f.). Obtenido de http://es.slideshare.net/HansJc/mohos-expo
Jessica, H. (25 de Noviembre de 2014). Obtenido de Blogspot:
http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com/2014/11/morfologia-de-hongos.html
Pineda, M. S. (s.f.). Obtenido de http://es.slideshare.net/maryosantiz/hongos-45044487
Sanchez, I. M. (s.f.). Obtenido de http://www.diversidadmicrobiana.com/:
http://www.diversidadmicrobiana.com/index.php?
option=com_content&view=article&id=671&Itemid=790
Vilema, M. (18 de Julio de 2012). Obtenido de Slideshare:
http://es.slideshare.net/michellevilema/levaduras-vilema-lazo
Zamora, J. (2016). Foto de prtica de laboratorio en tincin de mohos y levaduras. 2016.
10.- ANEXOS:

Manipulacin de la muestra (Meln). Montaje con cinta adhesiva muestra.

Flameando el asa de platino.

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