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09/05/2014

3.3.1- Peso seco celular


3.3.2- Absorcin
3.3.3- Peso hmedo
3.3.4- Volumen
3.3.5- Nmero de clulas
3.3.6- Mediciones fsicas

Consiste en dejar secar volmenes


conocidos de cultivo celular lentamente
hasta que alcancen peso cte. Se mide
en g/l
En ocasiones para concentrar las
clulas se usa el centrifugado o filtrado
segn la dificultad.
Es el mas usado
Desventaja: pueden dar grandes
errores en caso de absorcin de
humedad por las clulas secas.

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Consiste en el uso de celdas


espectrofotomtricas
pues las clulas desvan la luz q llega al
detector y esa desviacin est relacionada
con el n de clulas presentes (o tambin
puede relacionarse con la densidad ) en la
muestra segn la Ley de Beer

Consiste en una centrifugacin


o filtracin seguida del pesado.
Este proceso es extrarrpido, hay
necesidad de estandarizar el proceso
ya que se mide tanto el agua
intracelular como el extracelular
ocasionando errores considerables.

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Consiste en la centrifugacin
en tubos graduados de tal forma q
me permitan determinar el
volumen de clulas empacadas.
Es un mtodo bastante
inexacto especialmente para
pequeos cambios de la poblacin
celular

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por cmara de Petroff-


Hausser

Muestra de cultivo diludo en cmara de volumen


pequeo y conocido (2,5x10-7 ml), recuento de
clulas en numerosos cuadrados de la cmara.
Promedio de clulas contenidas en dicho volumen
se expresa por ml de muestra (alto error
experimental).
Desventaja: no se pueden distinguir clulas viable y

El crecimiento de clulas
origina la generacin de calor la
cual est relacionada con la
concentracin de biomasa. Es un
proceso rpido y no necesita de
muestreo. Se usa para el caso de
biorreactores , pues sino las
variaciones de calor generado son
pequeas para poder ser mediadas
adecuadamente.

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Cultivo pequea escala, se lleva acabo en


frascos de 250 mL a 1 L de capacidad.
Se controla las condiciones de pH y
temperatura de crecimiento
Se mide la composicin media y
concentracin del m/o.

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De 1 a 2 L de capacidad
Equipado con instrumentos para medir y
ajustar la temperatura, el pH, la
concentracin de oxgeno disuelto, y
velocidad de agitacin.
Se controla el crecimiento del cultivo
microbiano.
Se obtiene informacin sobre las necesidades
de oxgeno del m/o, sensibilidad de cizalla,
caractersticas espumantes.
Determinar si el reactor es capaz o no de
proporcionar las condiciones ptimas para la
actividad celular.

Recipientes entre 100 y 1000 L de capacidad


Diseo similar al biorrector de escala piloto
(condiciones ptimas).
El objetivo es examinar la respuesta de las
clulas al cambio de escala.
Puede haber prdida o variacin del
rendimiento del proceso por el cambio de
escala.

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Se disea el reactor para el


bioproceso y los servicios
que acompaan a su
funcionamiento.
Se proporciona suministro de
aire y equipo de
esterilizacin, generador de
vapor y lneas
suplementarias, equipos de
preparacin y esterilizacin
del medio, suministro de
agua de refrigeracin, red de
control de proceso.
Recuperacin del producto

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