UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER

CARRERA: LABORATORIO CLNICO Y ANATOMA PATOLGICA

INFORME

TEMA: VIAS METABOLICAS DE LOS CARBOHIDRATOS

CURSO : BIOQUMICA

CICLO : IV

DOCENTE : CAPCHA AGUILAR, LUIS ALFREDO

ALUMNO: ELVIS VILLARREAL LLAUCE

LIMA - PER
2016
INTRODUCCION
Las enzimas sufren los mismos efectos estructurales observadas con la protena
mediante la variacin de pH y temperatura, estos factores pueden alterar la actividad
de las enzimas y por lo tanto la velocidad de las reacciones catalizadas por ellos.
Por lo tanto, cada enzima tiene un pH ptimo de actividad (donde su actividad es
mxima); para la mayora de las enzimas se encuentra entre 4,5 y 8,0. Teniendo en
cuenta que los cambios extremos en el pH pueden alterar la estructura de la enzima
debido a una repulsin cargas. No Sin embargo, los cambios de pH que no afectan
por completo la estructura de una enzima y slo se puede disminuir su actividad que
slo a sitio de residuos cataltica.

LAS VAS METABLICAS DE LOS CARBOHIDRATOS

Los monosacridos: glucosa, fructosa, galactosa y manosa oligosacridos:

Maltosa: azcar de malta (glucosa + glucosa).

La sacarosa: la caa de azcar (glucosa y fructosa).
azcar de la leche a la lactosa (glucosa + galctose).
azcar invertido utiliza en la industria alimentaria, que consiste en un jarabe hecho
de sacarosa qumicamente. La frmula reaccin qumica es la siguiente:
sacarosa + agua = glucosa + fructosa
Dextrina: son mezclas de polmeros de D-glucosa (-1,4). En la produccin
industrial, se obtiene por hidrlisis cida del almidn. No todas las formas de
dextrinas indigeribles son, stos no digerible forma se utiliza como suplemento de
fibra diettica. La maltodextrina se usa como un aditivo alimentario es altamente
digestible, siendo absorbido tan rpidamente como la glucosa. maltodextrina Los
alimentos pueden contener trazas de aminocidos, incluyendo el cido glutmico
como subproductos.
 isomaltosa: Hecho a partir de sacarosa de la remolacha azucarera. La isomaltulosa
se obtiene por tratamiento con cidos fuertes a partir de glucosa, maltosa por la
accin de la glucosa y dextranos por hidrlisis cida.
La rafinosa estaquiosa: Los fructo-oligosacridos (rafinosa y estaquiosa) son
polmeros naturales de fructosa, que se encuentran generalmente unidas a una
molcula de glucosa inicial. Ellos son completamente resistentes a la digestin en
el tracto gastrointestinal y se utiliza casi exclusivamente por las bifidobacterias en el
colon, promoviendo as la integridad de la mucosa gastrointestinal.

Polisacridos:
El almidn es una mezcla de dos polisacridos: amilosa y amilopectina.
La amilosa: macromolcula que consiste en residuos de D-glucopiranosa unidas por
a-1,4 enlaces glicosdicos, lo que da la molcula una estructura helicoidal.
La amilopectina: macromolcula menos soluble en agua que la amilosa consiste en
los residuos -glucosa unidas por alfa-1,4 enlaces glicosdicos que ocurren
demasiado -1,6 vnculos. La amilopectina constituye aproximadamente el 80% de
los polisacridos existen en los grnulos de almidn. Se compone de molculas de
glucosa.
Fibras: son nutrientes que se encuentran en las plantas que no son digeridos por
las enzimas en el sistema digestivo humano. Algunas fibras son:
Tipo Prebiticos_ de fibra utilizada en el alimento funcional ingeniera de alimentos
o ingredientes alimentarios no digeribles que se pueden beneficiar del anfitrin en
la estimulacin selectiva del crecimiento y / o actividad de una o un nmero limitado
de especies bacterianas en el colon.
Los prebiticos pueden tener las siguientes caractersticas: no se someten a
hidrlisis, o absorcin en el intestino delgado; y cambio de la microflora del colon
con una microflora bacteriana sana, induciendo efectos favorables para la salud.
Celulosa: Es una secuencia lineal de unidades de D-glucosa unidas mediante
enlaces glucsido beta (1 4). Es el componente principal de las paredes celulares
en los vegetales y uno de los compuestos orgnicos ms abundantes en la biosfera.
La digestin y absorcin de carbohidratos

Los principales carbohidratos de la dieta son almidn, sacarosa y lactosa. El

glucgeno, maltosa, glucosa y fructosa libre son relativamente pequeas fracciones
de carbohidratos ingeridos.

La absorcin de hidratos de carbono por las clulas del intestino delgado se lleva a
cabo despus de la hidrlisis de los disacridos, oligosacridos y polisacridos a
sus monosacridos componentes. Los abandonos ocurren secuencialmente en
diferentes segmentos del tracto gastrointestinal por reacciones enzimticas:

1. -amilasa salivar.
La digestin del almidn comienza durante la masticacin por la actividad -amilasa
salival (ptialina) que hidroliza los enlaces glicosdicos alfa (1 4), la liberacin de
la maltosa y oligosacridos. Sin embargo, la saliva -amilasa no contribuye
significativamente a la hidrlisis de los polisacridos, debido a la breve contacto
entre la enzima y el sustrato. Al alcanzar el estmago, la enzima es inactivada por
la gstrica bajo pH.

2. -amilasa pancretica.
El almidn y el glucgeno se hidrolizan en el duodeno en presencia de -amilasa
produce maltosa como principales dextrinas y oligosacridos producto llamado - que
contiene un promedio de ocho unidades de glucosa con uno o ms glicosdico (1
6). Tambin se forma una cierta cantidad de isomaltosa (disacrido).

3. Las enzimas de la superficie intestinal.

La hidrlisis final del maltosa y dextrina se lleva a cabo por maltasa y dextrinasa,
presente en la superficie de las clulas epiteliales del intestino delgado. Otras
enzimas tambin actan en la superficie de las clulas intestinales: la isomaltasa
que hidroliza los enlaces alfa (1 6) de la isomaltosa, la sacarasa, que hidroliza
los enlaces alfa, (1 2) de sacarosa en glucosa y fructosa, la lactasa que
proporciona la glucosa y la galactosa por hidrlisis de vinculado (1 4) la lactosa.

Los monosacridos lumen de captura en la clula intestinal se realiza mediante dos

mecanismos:

El transporte pasivo (difusin facilitada).

El movimiento de la glucosa es "para" el gradiente de concentracin (de un
compartimiento de concentracin de glucosa superior a un compartimiento de
concentracin ms baja). La difusin facilitada est mediado por un sistema de
transporte monosacrido del tipo Na + - independiente. El motor tiene una alta
especificidad para la D-fructosa.

El transporte activo.
La glucosa se recoge del lumen en la clula epitelial del intestino a travs de un co-
transportador de Na + -monossacardeo (SGLT). Es un proceso indirecto activa
cuyo mecanismo es implica la (Na + -K +) - ATPasa (a partir de (Na + K +), que
elimina Na + desde el celular a cambio de K +, con la hidrlisis concomitante de
ATP (vase el captulo 9: seccin 9.4.D). El mecanismo tiene una alta especificidad
para D-glucosa y D-galactosa.

En el intestino, la fosfofructoquinasa fosforila fructosa para asegurarlo dentro de la

clula.

Nota: Las quinasas son importantes para unir la molcula dentro de la clula por la
fosforilacin.

Despus de la absorcin, las subidas de glucosa en la sangre y las clulas beta

secretan insulina de los islotes pancreticos que estimula la captacin de glucosa
principalmente por tejido adiposo y muscular. El hgado, el cerebro y los eritrocitos
no requieren insulina para la captacin de glucosa por sus clulas (tejidos
independiente de insulina). Otras hormonas y enzimas, y diversos mecanismos de
control son importantes en la regulacin de glucosa en sangre.

La fructosa y galactosa solamente se convierten en glucosa en el hgado.

Nota: El transporte de fructosa (a travs de la GLUT 5) no es muy eficiente, no
permitiendo su absorcin total. Por lo tanto, una gran cantidad de fructosa en la
dieta puede causar diarrea.

Gluclisis
La gluclisis es la va central del catabolismo de la glucosa se produce en el citosol
de todas las clulas humanas. Cada molcula de glucosa se convierte en dos
molculas de piruvato, cada uno tres tomos de carbono en un proceso en el que
se oxidan varios tomos de carbono. Parte de la energa libre liberado a partir de
glucosa se almacena en forma de ATP y NADH. La gliclisis consiste en dos etapas:
Primera etapa (fase de preparacin) comprende cinco reacciones en las que la
glucosa es fosforilada por dos ATP y se convierten en dos molculas de
gliceraldehdo 3-fosfato.

2 fase (fase de pago) Las dos molculas de gliceraldehdo 3-fosfato se oxida

por el NAD + y la reaccin fosforilada empleando fosfato inorgnico.

El resultado del proceso total gluclisis es la formacin de ATP 2, piruvato 2 NADH

y 2, a expensas de una molcula de glucosa.

En condiciones de bajo suministro de oxgeno (hipoxia) o sin clulas mitocondrias,

el producto final de la gliclisis es la piruvato lactato y no en un proceso llamado
gluclisis anaerbica

Cuando el suministro de oxgeno es adecuado, el piruvato se convierte en acetil-

CoA en las mitocondrias. El grupo acetilo de la acetil-CoA se oxida completamente
en el ciclo del cido ctrico con la formacin de dos molculas de CO2.
Las reacciones de la gluclisis
Todas las reacciones de la gluclisis con la formacin de piruvato (o lactato) son
catalizadas por enzimas presentes en el citoplasma (Figura). Por cada molcula de
glucosa consumida son dos molculas de ATP en la primera etapa y la segunda
etapa se produce cuatro 2 ATP y NADH. Los electrones procedentes de la re-
oxidacin de NADH a NAD + en condiciones aerbicas, se transfieren al oxgeno
molecular en la cadena de transporte de electrones mitocondrial que libera la
energa libre para la sntesis de ATP por la fosforilacin oxidativa.

Piruvato
El piruvato puede seguir varias rutas metablicas. En los tejidos que funcionan en
condiciones anaerbicas como el msculo esqueltico durante las actividades
fsicas vigorosas, piruvato a lactato se reduce para regenerar NAD +, que permite
la gluclisis continu con una baja produccin de ATP.

La reduccin de lactato a piruvato es catalizada por lactato deshidrogenasa con el

uso de NADH como el agente reductor.

NADH generado se utiliza para reducir la gluclisis durante la oxidacin de la

gliceraldehdo 3-fosfato en gliceraldehdo-1,3-bifosfato.

Esta reaccin es la opcin principal utilizado por las clulas bajo condiciones de
hipoxia como en el msculo esqueltico sometido a una intensa actividad, por
ejemplo, para la reoxidacin de NADH a NAD + en el citosol y por lo tanto seguir
produciendo ATP por la glicolisis. El lactato formado en el msculo activo se difunde
a la sangre y transportada al hgado donde se convierte a la glucosa por la
gluconeognesis.

El piruvato formado en la gluclisis se utiliza en diferentes vas dependiendo de

muchos factores y de las necesidades momentneas de ciertos metabolitos clave.
Los principales destinos son: Ciclo de Krebs (lactato), sntesis de protenas ciclo de
Cori (acetil-CoA) (alanina) y Gliconeognese (oxalacetato).

Ciclo de Krebs

El ciclo del cido ctrico (ciclo de Krebs) es la etapa final de la oxidacin de los
combustibles metablicos. Los tomos de carbono entran en el ciclo, como grupos
acetilo derivados de hidratos de carbono, cidos grasos y aminocidos. El grupo
acetilo unido a la coenzima A (acetil CoA) se oxida en ocho reacciones
mitocondriales para formar dos molculas de CO2 a la conservacin de la energa
libre liberada en tres molculas de NADH, una FADH2 y un compuesto de "alta
energa" (GTP o ATP). NADH y FADH2 se oxidan y los electrones son impulsados
por la cadena de transporte de electrones mitocondrial con la liberacin de energa
almacenada en forma de ATP a partir de ADP y sitetizado Pi por llamado proceso
de la fosforilacin oxidativa.

En primer lugar, la glucosa en piruvato derivados y otros azcares a travs de la

gluclisis se oxida a acetil-CoA y CO2 para entrar en el ciclo del cido ctrico.

oxidacin de piruvato a acetil-CoA y CO2

En condiciones aerbicas el piruvato se convierte en CO2 y un fragmento de dos
carbonos, la acetil-CoA en la reaccin de descarboxilacin oxidativa. La reaccin es
catalizada por el complejo de la piruvato deshidrogenasa se compone de tres
enzimas diferentes: piruvato deshidrogenasa (E1), el diidrolipoil-transacetilasa (E2)
y diidrolipoi deshidrogenasa (E3) asociadas no covalentemente cinco diferentes
coenzimas. Debido a la gran energa libre negativa estndar de esta reaccin en
condiciones fisiolgicas, el proceso es irreversible que impide la reaccin inversa de
la formacin de piruvato a partir de acetil-CoA.

La actividad del complejo de la piruvato deshidrogenasa est regulada por

mecanismos alostricos y covalentes.
Inhibidores de activadores

La coenzima ATP
NAD + NADH
Acetil-CoA AMP
Ca2 + BC. graso de cadena larga

transformaciones metablicas de acetil-CoA

La principal acetil-CoA metablico producido en las mitocondrias destinos incluyen:
La oxidacin completa del grupo acetilo en el ciclo del cido ctrico para la
generacin de energa; La conversin del exceso de acetil-CoA a los cuerpos
cetnicos (acetoacetato, -hidroxibutirato y acetona) en el hgado; Transferencia de
unidades de acetilo en el citosol con la biosntesis subsiguiente de molculas
complejas tales como esteroles y cidos grasos de cadena larga.

cido ctrico ciclo de reacciones

El ciclo se oxida dos unidades de carbono de la produccin de dos molculas de
CO2, una molcula de GTP, tres molculas de NADH y una molcula de FADH2.
La energa en el ciclo del cido ctrico

El ciclo del cido ctrico es la va oxidativa terminal para la mayora de los

combustibles metablicos (piruvato, aminocidos y cidos grasos). Los dos
carbonos del grupo acetilo participar en el ciclo completo se oxidan a CO2 y H2O.
La energa liberada por tal oxidacin se conserva en forma de tres NADH, una
FADH2 y una molcula de GTP (o ATP). Para cada NADH que transfiere sus
electrones a la cadena de transporte electrnico mitocondrial, alrededor de 2,5 ATP
se produce a partir de ADP + Pi. Para cada FADH2, sobre 1,5 ATP se producen.
Por lo tanto, la oxidacin completa del grupo acetilo de la acetil-CoA en el ciclo del
cido ctrico produce 10 ATP.
Nota: deshidrogenasas darn la H + a NAD + y FAD, convirtindolos a NADH y
FADH (sus cofactores) durante la fosforilacin oxidativa.

Resumen Ciclo de Krebs

1. Los organismos aerbicos utilizan oxgeno para generar energa a partir de
combustibles metablicos por vas bioqumicas: ciclo del cido ctrico, cadena de
transporte electrnico mitocondrial y la fosforilacin

Oxidativo.
2. El ciclo del cido ctrico es una serie de ocho reacciones consecutivas que se
oxida completamente sustratos orgnicos tales como hidratos de carbono, cidos
grasos y aminocidos para formar CO2, H2 O y coenzimas NADH reducido y
FADH2. El piruvato, el producto de la gluclisis se convierte en acetil-CoA, el
sustrato para el ciclo del cido ctrico.

3. Los grupos acetilo entran en el ciclo del cido ctrico como acetil CoA a partir del
piruvato producido por las enzimas piruvato deshidrogenasa complejos
multienzimticos que contienen tres y cinco coenzimas.

4. En el papel de generador de potencia, ciclo del cido ctrico tambin juega un

papel importante, la biosntesis de glucosa (gluconeognesis), aminocidos, bases
de nucletidos y los grupos hemo.

Gluconeognesis
La gluconeognesis es la sntesis de glucgeno a partir de glucosa. El glucgeno
es un polisacrido compuesto por unidades repetidas de D-glucosa unidas por
enlaces glucosdicos alfa que constituyen el principal polisacrido forma reserva en
los tejidos animales.

Los depsitos ms grandes estn presentes en el hgado y los msculos

esquelticos. El glucgeno se almacena en grnulos intracelulares tambin
contienen las enzimas que catalizan las reacciones para la sntesis y la degradacin.
La glucosa se almacena como glucgeno en el hgado y los msculos estn
destinados para diferentes funciones:
El glucgeno heptico.
Acta como un depsito de glucosa en el torrente sanguneo con la distribucin a
otros tejidos.

Se acumula despus de las comidas, y cuando sea necesario, que se degrada

lentamente para mantener la concentracin de glucosa en sangre ms o menos
constante. Las reservas de glucgeno de hgado en el hombre tienen un papel
importante como suministro de glucosa en el periodo entre las comidas y, en mayor
medida durante el ayuno nocturno.

El glucgeno muscular.
Sirve como combustible para generar ATP por aumento de la actividad muscular.
Se form durante el descanso despus de las comidas. Los niveles de glucgeno
muscular tienen menos variabilidad que los niveles hepticos en respuesta a la
ingesta de hidratos de carbono.

Nota: La grasa tambin requiere la glucosa para la sntesis de triacilglicerol

(Glucosa a travs de la dihidroxiacetona glicoltica P-glicerol-3-P glicerol).

Reacciones de la gluconeognesis
La sntesis de glucgeno se produce despus de las comidas, cuando los niveles
de glucosa en sangre son altos. Hasta hace poco, se ha supuesto que la glucosa
en sangre fue el nico precursor directo en el proceso. Sin embargo, bajo
condiciones fisiolgicas, la mayora de glucgeno es producido por un mecanismo
que implica la secuencia: glucosa dieta molcula C3 hgado de glucgeno.
El lactato y alanina son las principales molculas de C3 este proceso. El lactato se
forma en los eritrocitos por la gluclisis y es capturado por el hgado y convierte en
glucosa-6-fosfato en la gluconeognesis. La sntesis de glucgeno se produce a
partir de glucosa-6-fosfato derivado de glucosa libre por la accin de la glucoquinasa
(hgado) o hexoquinasa (msculo).

Gluconeognesis
La formacin de nuevas molculas de glucosa a partir de precursores no
carbohidratos en el hgado. En ciertas situaciones, como la acidosis metablica o el
hambre, los riones tambin sintetizan glucosa. precursores no glicidilo incluyen
lactato, piruvato, glicerol, y cadenas de carbono de la mayora de aminocidos.
Entre las comidas, los niveles adecuados de glucosa en sangre se mantienen por
hidrlisis del glucgeno heptico. Cuando el hgado agota su suministro de
glucgeno (por ejemplo el ayuno prolongado o ejercicio vigoroso), gluconeognesis
proporciona la cantidad apropiada de glucosa para el cuerpo.

El cerebro y los eritrocitos utilizando glucosa como fuente de energa primaria. El

ejercicio del msculo esqueltico utiliza la glucosa a partir del glucgeno en
combinacin con cidos grasos y cuerpos cetnicos para la energa.

Reacciones de la gluconeognesis
Considerando que el piruvato como el punto de partida de la gluconeognesis, las
reacciones se pueden comparar con la va glicoltica, pero en la direccin opuesta.
Muchas de las enzimas y compuestos intermedios son idnticos.

La sntesis de glucosa a partir de dos molculas de piruvato requiere al menos 6

ATP. Por lo tanto, la gluconeognesis es un proceso costoso en trminos de
consumo de energa. Como la gluconeognesis se procesa a alta velocidad,
consume ms del 60% de la ATP generado en el hgado. Este ATP proviene
principalmente de la oxidacin de cidos grasos. Las condiciones fisiolgicas que
requieren la sntesis de glucosa, son generalmente el mismo que la disponibilidad
de funciones de los cidos grasos en la sangre. En estas ocasiones, los cidos
grasos son oxidados en la mitocondria a cuerpos cetnicos con la consiguiente
produccin de ATP.
Los precursores para la gluconeognesis
Lactato.
El piruvato se lleva al hgado donde se convierte en piruvato por lactato
deshidrogenasa y luego a la glucosa por la gluconeognesis. La glucosa resultante
se difunde en la circulacin y es captada por las clulas de los msculos
esquelticos para reponer las reservas de glucgeno. Por lo tanto, la glucosa
transferencia de la gluconeognesis en el hgado a los tejidos perifricos.

Alanina.
Es el aminocido ms importante convertido a intermedios glicolticas para la
gluconeognesis. Durante el ayuno prolongado o inanicin, alanina y otros
aminocidos son liberados de las protenas en los msculos esquelticos. La
alanina es transportado hasta el hgado, donde sufre transaminacin para generar
piruvato. El piruvato a travs de la gluconeognesis forma de glucosa que puede
devolver a los msculos o ser degradado por la va glucoltica. El mecanismo se
denomina ciclo de la glucosa-alanina y tambin lleva NH4 + en el hgado para la
sntesis de urea. Los aminocidos son las principales fuentes de carbono para la
gluconeognesis durante el ayuno, cuando se agoten los suministros de glucgeno.

Glicerol.
Es un producto de la hidrlisis enzimtica de los triglicridos en el tejido adiposo.
Se transporta al hgado a travs de la sangre y luego se fosforila por la glicerol 3-
fosfato por glicerol cinasa. El glicerol 3-fosfato participa en la gluconeognesis (o la
gluclisis) a travs del intermedio, glicerol 3-fosfato comn. A travs de la glicerol
complejo 3-fosfato deshidrogenasa, glicerol-3-fosfato se convierte en
dihidroxiacetona fosfato (DHAP) de reaccin que se produce cuando citoplsmica
NAD + contenido es relativamente alta.
La inhibicin de la gluconeognesis por etanol
El alcohol (etanol), especialmente para las personas con desnutricin, puede causar
hipoglucemia. Esta condicin resulta de los efectos inhibitorios del alcohol en la
gluconeognesis heptica causada por el NADH producidas durante el metabolismo
del alcohol. El etanol se convierte en acetaldehdo (CH3CHO).

El exceso de NADH en el citosol reduce la gluconeognesis, ya que desplaza el

equilibrio de las reacciones catalizadas por la deshidrogenasa de lactato y malato
deshidrogenasa, las instrucciones de formacin de lactato y malato
respectivamente:

El NADH debe ser transportado a la mitocondria por el circuito de malato-aspartato,

pero el hgado no puede hacerlo a una velocidad suficiente para evitar trastornos
metabolitos. El exceso de bloques de NADH la conversin de glucosa a lactato
causar hipoglucemia y tambin promueve la conversin de lactato a alanina, resulta
en la acumulacin de este ltimo en la sangre (acidosis lctica). La sustancia que
causa lesiones a nivel de los hepatocitos, el alcohol no es sino el producto de la
degradacin, el acetaldehdo.

Pentosa
La va del fosfato de pentosa es una ruta metablica alternativa de la gluclisis a la
oxidacin de glucosa que no requiere y no produce ATP. Sus principales productos
son:

NADPH (nicotinamida adenina dinucletido fosfato reducido) un agente reductor

utilizado para los procesos anablicos.

Ribosa 5-fosfato de un componente estructural de nucletidos y cidos nucleicos.

La va de las pentosas fosfato en el citosol tiene lugar en dos etapas: Etapa de
oxidacin y de paso no oxidativo. En la etapa de oxidacin, la glucosa 6-fosfato se
convierte en ribulosa-5-fosfato seguido por la formacin de dos molculas de
NADPH.

El paso no oxidativo implica la isomerizacin y la condensacin de varias diferentes

molculas de azcar. Tres intermedios del procedimiento se utilizan en otras formas:
ribosa-5-fosfato, fructosa-6-fosfato y gliceraldehdo 3-fosfato.

Alternativamente, el camino de fosfato pentoses- puede estar diseado como una

"desviacin" para la produccin de fructosa-6-fosfato a partir de glucosa-6-fosfato.
Cualquiera de glucosa-6-fosfato en gliceraldehdo-3-fosfato producido por medio de
fosfato pentoses- puede metabolizar a piruvato y finalmente oxida en sistema
enzimtico mitocondrial.

Glucogenolisis
Es la degradacin de glucgeno que consiste en los residuos de glucosa de escisin
secuenciales de los extremos no reductores en glucgeno ramificacin. La ruptura
de los enlaces es por fosforolisis con formacin de -D-glucosa-1-fosfato por la
accin de la enzima glucgeno fosforilasa y ataque fosfato inorgnico.

La glucgeno fosforilasa elimina unidades de glucosa sucesivas a lo largo de la

cadena hasta que slo 4 restos en un punto de ramificacin. Contina la
degradacin se produce despus de la transferencia de una unidad de 3 residuos
de glucosa de ramificacin bajo la accin de la enzima desramificante de glicgeno,
para el extremo no reductor de otra rama, es decir, el caso de la ruptura de un enlace
(1 4) con la formacin de un nuevo enlace (1 4). En su nueva posicin, los
residuos de glucosa son liberados por la accin de la glucgeno fosforilasa.

La eliminacin del residuo de glicosilo restante vinculada a la cadena principal por

(1 6) se lleva a cabo por hidrlisis de la misma enzima desramificante con la
formacin de glucosa y licogenio no ramificado. Por lo tanto, se explica la aparicin
de pequeas cantidades de glucosa libre (8-10%) en lugar de la glucosa-1-fosfato
en la degradacin de glucgeno.

El producto final de las reacciones de degradacin de glucgeno es la glucosa-1-

fosfato se convierte en glucosa 6-fosfato por phosphoglucomutase

Aminalasa
La actividad enzimtica se puede evaluar mediante la medicin de la velocidad de
consumo de sustrato o aparicin del producto tasa. Esta actividad depende de
varios factores tales como el tiempo de reaccin, la concentracin de enzima, la
concentracin de sustrato, temperatura, pH del medio y la presencia de cofactores
y / o inibidores. Para ilustrar estos conceptos, esta prctica es evaluaron la actividad
de la amilasa salival. El (amilasa se encuentra en los animales (sangre, saliva y jugo
pancretico), plantas, ebactrias hongos. Esta enzima es una endo-amilasa y
hidroliza los enlaces glicsido de almidn, glicgeno, poli y oligosacridos al azar.
Como resultado de la accin no hace ordenado amilasa salival, obtenido
serapidamente una mezcla compleja de productos de hidrlisis incluyen almidn
soluble, maltodextrinas, maltosas y posiblemente glucosa en la boca, la amilasa
salival participa en decarboidratos digiriendo la amilasa pancretica es ms
responsable del glicdico por digestin en el duodeno. Esta enzima tambin se
encuentra normalmente en el suero y la elevacin de suero de su actividad
enzimtica puede ayudar nodiagnstico diversas enfermedades pancreticas
(obstruccin, tumores, pancreatitis aguda, etc.).

El almidn se compone de amilosa (no ramificado) y amilopectina (ramificado). La

forma en que micelashidratadas amilosa adsorber yodo presente en la solucin de
lugol en sus espirales helicoidales, con el azul-violeta.
La tabla a continuacin muestra que muchas enzimas tienen un pH ptimo
determinado a partir de una curva del efecto del pH sobre la actividad de la enzima:

Sin embargo, muchas enzimas no presentan una curva en forma de campana como
se muestra en el grfico anterior, que muestra que no hay un valor ptimo de pH
solo, pero una gran gama de pH (6,0 a 8,5), como se muestra a continuacin y en
la tabla.
ENZIMAS pH TIMO

Lipasa (pncreas) 8,0

Lipasa (estmago) 4,0 - 5,0

La pepsina 1.5 -1.6

7.8- 8.7 tripsina

7.0 ureasa

4.5 invertasa

Maltasa 6.1- 6.8

Amilasa (pncreas) 6.7- 7.0

Catalasa

7.0

Tambin hay que considerar el hecho de que puede haber grupos ionizables en el
sitio activo. Esto afecta a:

Sustratos de conexin

Catlisis
Es posible determinar los grupos ionizables de pKa que afectan a la catlisis
mediante el anlisis de la grfica de la velocidad de reaccin inicial (V0) en funcin
del pH. Por lo tanto, tenemos:

Slo un grupo ionizable con la enzima activa en forma desprotonada: grupos que
pueden estar afectando a la catlisis son histidina (pKa = 6,0) o incluso residuos de
aminocidos con grupos carboxilo (Asp y Glu), ya que el pK estos grupos pueden
estar muy alterados por el microambiente que es. En el caso de la cadena lateral de
Asp, por ejemplo, el pKa pasa 3,9 (cido libre amino), en ribonucleasa T1 a 0,6 a
6,4 o una forma mutante de la misma enzima. En el grfico, el pKa del residuo es
de 7.1.

Slo un grupo ionizable, con la enzima activa en la forma protonada: a diferencia

del caso anterior, cuando el grupo ionizable comienza a desprotonar, la enzima
pierde actividad. El pKa de este grupo de enzimas representado lado es igual a 9,5.

Dos grupos ionizables que participan en la catlisis: en este caso, se observ una
curva de campana con un pH ptimo = 7,5. Uno de los grupos ionizables que
participan en la catlisis (PK1 = 5,5) necesitan ser desprotonado y el otro (pK2 =
9.0) debe estar protonado para que la velocidad de reaccin es 100% (es decir, con
actividad relativa igual a 1, 0 como se muestra en el grfico).
Las amilasas son enzimas que catalizan la hidrlisis de alfa-1-4 enlaces glicosdicos
de los polisacridos tales como el glucgeno, almidn o sus productos de
degradacin. Acerca de almidn, acto por la liberacin de varios productos,
incluyendo dextrinas y polmeros progresivamente ms pequeos compuestos por
unidades de glucosa. Producido en la saliva y el pncreas, amilasa tambin es
producida por diversos hongos, bacterias y plantas. Las amilasas se dividen en dos
grupos: endoamilases y exoamilasas. Los endoamilases catalizan la hidrlisis
aleatoria dentro de la molcula de almidn. Esta accin provoca la formacin de
ramas de cadenas de oligosacridos lineales de diferentes longitudes y por lo tanto
romper los enlaces glicosdicos -1,4 cadenas presentes en el interior (endo) de
amilosa o amilopectina. La _-amilasa es el ms conocido endoamilasa. Las
exoamilasas exclusivamente hidrolizan enlaces glucosdicos - 1, 4, tales como -
amilasa o ambos alpha enlaces 1,4 y -1, 6, y glucosidasa como amiloglucosidasa.
Otros ejemplos de ciclodextrina glicosiltransferasa son exoamilasas y maltognica
-amilasa.

OBJETIVO

Para determinar el rango de pH ptimo de la alfa-amilasa.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

. En tubos de ensayo se pipatados 0,5 ml de solucin de 1% de almidn soluble y

0,4 ml 0,1 M solucin tampn de diferentes valores de pH, y estos eran incabados
en bao de ebullicin;

. Es exactamente lo que se aadi 0,1 ml de solucin de alfa-amilasa y llevado a

una incubacin de 5 minutos en bao hirviendo. Despus de la incubacin con el fin
de detener la reaccin, 0,5 ml de HCl 0,1 N;

. A continuacin, los tubos se aadieron 0,1 ml de yodo-KI (0,3% iodoe 0,3% KI);
. Despus de esta ltima adicin, se aaden 13,4 ml, aadiendo 15 ml de solucin
en el tubo "en blanco", a fin de ser medido por absorbancia a 620 nm.

Recordando que el tubo blanco se aadi 0,1 ml de solucin de yodo y 14,9 ml de

agua destilada. En el tubo de control se pipetearon 0,5 ml de solucin de 1% de
almidn soluble, 0,5 ml de agua destilada, 0,1 ml de solucin de KI yodo, 0,5 ml de
0,1 N HCl, aadiendo el tubo de 15 ml con agua destilada.
RESULTADOS Y DISCUSIN

Tabla - amilasa para diferentes valores de pH

Casquillos Abs 620 nm

La actividad enzimtica (U / ml)

0,1 M de acetato pH 3,6 0 0,603

0,1 M de acetato de pH 4,0 0,542 0,0181

0,1 M de acetato de pH 5,0 0,361 0,0789

0,1 M de acetato pH 5,6 0,176 0,1409

0,1 M de acetato de pH 6,0 0,033 0,1889

0,1 M de acetato de pH 7,0 0,153 0,1487

0,1 M de acetato pH 8,0 0,224 0,1248

0,1 M de acetato de pH 9,0 0,265 0,1111

0,1 M de acetato pH 10,0 0,520 0,0255

Control 0,596

La grfica anterior pudo ver que el pH ptimo de la enzima alfa-amilasa (Termamyl)

est en el intervalo 6-7, que mostr la actividad enzimtica ms alta. El clculo de
la actividad enzimtica tuvo en cuenta la desaparicin del sustrato, amido, en el que
cada uno de los tubos que contienen la misma concentracin de enzima y el
sustrato, pero el pH se vari.

CONCLUSIN

La enzima alfa-amilasa tiene una actividad de pH ptimo en el intervalo de 6 - 7.

Cuando en el medio de ms cido o alcalino que este intervalo, la actividad de la
enzima tiende a disminuir su actividad gradualmente a ser inactivado por
desnaturalizacin