MANEJO DEL AUTOCLAVE, DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN DEL

LABORATORIO Y SUS MATERIALES.

La esterilizacin es un proceso esencial para el
funcionamiento de un hospital, en el cual se deben utilizar todos
los instrumentos quirrgicos, implantes y muchos otros
dispositivos absolutamente esterilizados. La desecacin y la
congelacin eliminan muchas especies de bacterias, pero otras
simplemente permanecen en estado vegetativo. El calor seco o
hmedo elimina todas las bacterias combinando adecuadamente
factores como la temperatura a la que se someten y el tiempo de
exposicin. Se puede esterilizar por calor seco en estufas a ms
de 160 C durante media hora, o por calor hmedo en
autoclaves a 120 C durante 20 minutos y a presin superior a la
atmosfrica. La ebullicin a 100 C no elimina todos los
grmenes patgenos (entre los que no slo estn incluidas las
bacterias sino tambin virus y levaduras). Otro medio habitual
de esterilizacin, utilizado para objetos no resistentes al calor,
son los medios qumicos: el cido fnico, iniciador de la era de la antisepsia (vase Fenol), el
cido cianhdrico (vase Cianuro de hidrgeno), el xido de etileno, la clorhexidina, los
derivados mercuriales, los derivados del yodo (especialmente la povidona yodada) y muchas
otras sustancias. El alcohol etlico no produce esterilizacin completa. Otro medio de
esterilizacin actual son las radiaciones ionizantes (beta, gamma).
La esterilizacin implica la destruccin, de todos los organismos incluyendo esporas, y la
desinfeccin supone la destruccin de los microrganismos vegetativos que pueden causar
enfermedades, pero la desinfeccin no mata necesariamente esporas.
Los mtodos ms usados corrientemente en los laboratorios microbiolgicos son:
Calor rojo (flameado).
Calor seco (aire caliente).
Vapor a presin (calor hmedo)
Vapor fluente (tyndallizacin)
Calor rojo: Los instrumentos tales como las asas y alambres de siembra y varillas secas se
esterilizan calentndolas en la llama del mechero bunsen hasta que se ponga rojo.
Calor seco: Se aplica en un horno calentado elctricamente que se controla mediante termostatos
y que estn provistos de un gran ventilador circulante que asegura la uniformidad de la temperatura
en todas las partes del contenido. Los equipos modernos pueden llevar la temperatura al nivel
requerido, este dispositivo salvaguarda y protege al personal de quemaduras accidentales. El
material que puede esterilizarse por este mtodo incluye placas petri, matraces, pipetas de vidrio
y objetos de metal. El aire no es buen conductor del calor, por lo que las estufas deben cargarse
sin apretar el contenido, de forma que queden abundantes espacios para permitir que circule el aire
caliente. Cuando se calculan los tiempos de funcionamiento para el equipo de esterilizacin por
aire caliente, deben considerarse tres periodos.
El periodo de asenso de temperatura, que es el tiempo necesario para que toda la carga alcance la
temperatura de esterilizacin; puede llevar alrededor de una hora.
Los periodos de mantenimiento a las diferentes temperaturas de esterilizacin recomendadas por
el Medical Research Coucil que son 160C durante 45 minutos, 170C durante 18 minutos, 180C
durante 7 minutos y 190C durante 1 minutos.
El periodo de enfriamiento, que se realiza gradualmente para prevenir la rotura del material de
vidrio como consecuencia de un descenso demasiado rpido de temperatura; este periodo lleva
dos horas.
Vapor a presin: Se realiza mediante la esterilizacin en autoclave. Las bacterias se matan ms
fcilmente por el calor hmedo que por calor seco. El vapor mata las bacterias por
desnaturalizacin de protenas. Una condicin de seguridad convenida para la esterilizacin es
utilizar vapor a 121C durante 15 a 20 minutos. El aire tiene influencia importante en la eficacia
de la esterilizacin, porque su presencia modifica la relacin presin/temperatura, adems, la
existencia de bolsas de aire impedir la penetracin del vapor, debe de eliminarse todo el aire
primero todo el aire que rodea y penetra en la carga antes de que pueda comenzar la esterilizacin
por vapor.

Autoclave
 Una buena esterilizacin por autoclave depende de la eliminacin de todo el aire de la cmara y la
carga, de los materiales que van a esterilizarse deben colocarse sin apretarse. Los artculos limpios
pueden ponerse en cestillos de alambre, pero el material contaminado debe estar en un recipiente
de fondo slido en una altura no mayor a 8 cm. Deben dejarse grandes espacios de aire alrededor
de cada recipiente y ninguno debe estar cerrado.
Existen dos tipos de autoclave:
El tipo olla de presin.
El de desplazamiento por la gravedad.
Por razones prcticas slo trataremos el tipo olla de presin ya que es el que tenemos en el
laboratorio.
El tipo olla de presin es el ms comn, es un aparato para agua hirviendo a presin. Tiene una
cmara vertical de metal provista de una tapa metlica fuerte que se aprieta y cierra
hermticamente mediante un aro de goma. Se disponen en la tapa una espita para la salida del aire
y el vapor, un indicador de presin y una vlvula de seguridad. El agua del fondo del autoclave se
calienta mediante mecheros de gas exteriores, un calentador elctrico de inmersin o un serpentn
de vapor.
Instrucciones de funcionamiento.
Debe haber agua suficiente dentro de la cmara. Se carga el autoclave y se aprieta la tapa
manteniendo la espita de descarga abierta. Se ajusta seguidamente la vlvula de seguridad a la
temperatura requerida y se conecta a la fuente de calor. Cuando el agua hierva, fluir el vapor por
la espita de descarga, arrastrando con l el aire caliente existente en la cmara. Se deja que salgan
libremente el aire y el vapor hasta que se haya eliminado todo el aire. Cuando se haya alcanzado
esta fase, se cierra la espita de descarga airevapor. La presin del vapor se eleva en la cmara
hasta que la presin deseada, generalmente 1,054 kg/cm2, se alcanza y fluye vapor por la vlvula
de seguridad. Cuando la carga ha alcanzado la temperatura requerida se mantiene la presin de 15
a 20 minutos. Al trmino del periodo de esterilizacin, se apaga el calentador y se deja que la
autoclave se enfre. Se abre la espita de descarga muy lentamente una vez que el indicador ha
llegado a cero, se deja que el material se enfre hasta que tenga una temperatura a la cual pueda
cogerse con las manos.
Nunca se debe dejar enfriar el autoclave por mucho tiempo, ya si no se abre se forma un vaco, el
cual puede romper el material estril.
Bennet ha elaborado una cinta indicador, la cual se coloca en los materiales, y segn la tonalidad
de dicha cinta, se sabe si fue una buena o mala esterilizacin. Adems, cuando los autoclaves se
descargan, los operarios deben llevar viseras protectoras de toda la cara del tipo que recubra la piel
de la barbilla y de la garganta. Tambin deben usar guantes de proteccin trmica.
Tyndallizacin: Utilizar un vaporizador de Koch, que es una caja metlica en el fondo de la cual
hierve el agua mediante un mechero de gas o un serpentn de vapor. Se utiliza este mtodo para
esterilizar medios de cultivo que pueden alterarse por exposicin a temperaturas ms elevadas.
Estos medio se vaporizan durante 3045 minutos al da durante tres das consecutivos. La primera
vez, se matan las bacterias vegetativas; cualquier espora que sobreviva germinar en el medio
nutritivo durante toda la noche, dando lugar a formas vegetativas que sern muertas durante la
segunda y tercera vaporizaciones.
DESINFECCIN
Para esto pueden usarse una gran variedad de sustancias qumicas y todas ellas reciben el nombre
comn de biocidas. Los efectos del tiempo, temperatura, pH y la naturaleza fsica y qumica del
artculo que se va a desinfectar y la materia orgnica presente, no son a menudo totalmente
considerados. Los tipos de desinfectantes son muchos, y su efectividad depende de la sensibilidad
de los microorganismos, los ms sensibles son las bacterias vegetativas, los hongos y los virus que
contienen lpidos. Las mycobacterias y los virus que no contienen lpidos son menos sensibles y
las esporas son por lo general resistentes. En la eleccin de los desinfectantes deben tomarse en
cuenta algunas consideraciones a cerca de su toxicidad y de los efectos perjudiciales que pueden
tener sobre la piel, ojos y vas respiratorias. Los desinfectantes ms utilizados corrientemente en
los trabajos de laboratorio son los fenoles y los hipocloritos. Los aldehdos tienen una aplicacin
limitada y el alcohol y las mezclas de alcoholes son menos populares, aunque merecen mayor
atencin
 menos 2 horas de exposicin; se utiliza para la esterilizacin de material de vidrio. (Lewis, 2002).
por autoclave: