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Frmula:
1. Peptona 5g
2. Extracto de carne 3g
3. Agua c.s.p 1000 ml
4. pH 7,2
Agar nutritivo
Frmula:
1. Agar 20 g
2. Caldo nutritivo 1000 ml
Tipos de medios
Una colonia es una agrupacin de bacterias formada a partir de la reproduccin de una Unidad
Formadora de Colonia (UFC) sobre un medio slido; aunque vara de tamao generalmente es
visible a simple vista. Una UFC puede ser un solo microorganismo o bien un grupo de
microorganismos de una misma especie como en el caso de bacterias que tienen tendencia a
permanecer unidas como los estafilococos o los estreptococos. La morfologa colonial es
comparable a una estadstica ya que se deriva de una clula individual pero es la caracterstica
de la masa celular. As pues, por ejemplo, la pigmentacin es aparente en la colonia, pero no en
la clula individual, en el caso de la consistencia mucosa de algunas colonias esta se deriva de la
sustancia capsular en aquellas bacterias con cpsula muy grande.
Medida de las colonias. sta caracterstica es bastante constante dentro de las especies y puede
ir desde colonias muy diminutas hasta un dimetro de varios milmetros.
Forma. Est determinada por su borde y su espesor. En la figura 2 se pueden observar varias
formas, elevaciones y bordes de colonias bacterianas.
Consistencia y textura. La consistencia de las colonias puede variar desde una colonia seca que
puede moverse sobre el agar con el asa, hasta una colonia viscosa que se pega al asa y forma
filamentos o hilos mucosos cuando se trata de separarla del agar.
Pigmentacin. Esta caracterstica es muy comn en la bacteria saprfita en las que las colonias
aparecen rojas, anaranjadas, amarillas, etc. Entonces tenemos.
METOFOLOGIA
MATERIALES Y EQUIPO
Tubos de prueba.
Placas petri.
Pipetas
Trpode con rejilla.
Algodn.
Par de guantes
Mechero.
Vaso de precipitado
Agua destilada.
Baqueta.
Esptula.
Papel kraft
Autoclave.
Incubadora.
Horno.
PROCEDIMIENTO
2. Retiramos el algodn y flameamos la parte superior de los tubos para luego colocar
el contenido de cada tubo en la placa petri correspondiente. Luego esperamos que
se solidifique por 15 minutos.
3. Exponemos la placa N1 durante 15 minutos para el grupo N1, ambiente: bao FIA;
para el grupo N 3 ambiente: CEIA.
4. La placa N 2 la dividimos en 4 zonas.
GRUPO 1 GRUPO 3
A: Pelo A: Huella digital
B: Huella Digital B: Pelo
C: Inoculador no estril C: Inoculador no estril
D: Inoculador estril D: Inoculador estril
5. Las Placas N 3 y N 4 se
mantienen totalmente esterilizadas. Ahora todas las placas se incuban entre 35 a
37C por 48 horas, despus de cumplido esto se sacan los tubos de la incubadora y
se colocan en la refrigeradora para mantener en estado latente el nmero de
microorganismos.
Procedimiento b (grupo 2 y 4): Crecimiento y caracteres de cultivo en caldo nutritivo
1. Tener 3 tubos con caldo nutritivo y extraer el caldo de cada uno de los tubos
utilizando pipetas previamente flameadas la punta.
2. Lo vertemos en otros tubos y despus los incubamos a 37C por 48 horas. Cumplido
el plazo se retiran de la incubadora y se colocan en la refrigeradora para mantener
en estado latente el nmero de microorganismos.
Procedimiento c (grupo 5): Crecimiento y caracteres de cultivo en agar sabouroud.
1. Tenemos 3 tubos de agar sabouroud fundido de 45C y esterilizado.
2. Flameamos la parte superior de los tubos y colocamos al agar en las placas Petri;
despus esperamos que se solidifique.
3. Llevamos las placas a los ambientes escogidos:
Grupo N1: Bao de varones FIA
Grupo N2: Laboratorio de fisicoqumica
Grupo N3: CEIA
Grupo N4: Biblioteca
RESULTADOS
PROCEDIMIENTO A:
Plac
a
Placa
Nro. Placa Nro. 4
GRUPO Nro. 1 Placa Nro. 2 estril
3 no estril
estril
est
ril
Sector
C Sector D
Bao varones Sector A Sector B (huella NO
(inocul (inoculador NO ABRIR
FIA ( Pelo) dactilar) ABRIR
1 ador
estril)
no estril)
25 alrededor
Nmero de del cabello
13 3
colonias 4 en el
12 cabello - -
(4) 0.1 cm
(4) 0.2cm
dimetro X1<1mm(19) X1<1mm(5)
(1) 0.4 cm X2 = 1mm(0) X2 = 1mm(1)
X1 =65mm (1)
(1) 0.6 cm X3 = 2mm(6) X3 = 2mm(2)
Tamao - X2 =4mm(1)
(1) 1.8 cm X4 = 3mm(1) X4 = 3mm(3)
X3 = 2mm(1)
(1) 2.2 cm X5 = 4mm(1) X5 = 13mm(1)
X6 = 5mm(2) X6 = 15mm(1)
Elevacin
Convexo(29)
Amarillo(1)
Crema(10) Blanco(3) Blanco(2) Crema Crema
Cromognesis Crema(1)
Amarillo(11) Crema(1) Negro() (1) (1)
Blanco(1) Crema(2)
Opaco Opaco
Opaco(0) Opaco(1) Opaco(0) (0) (0)
Caracteres Opaco(25)
Traslucida Translucida Translucida Translu Transluci
pticos Traslucida(3)
(4) (4) (1) cida da
(1) (1)
Grupo N 2 Tubo estril Tubo no estril Tubo estril
Pipeta estril Pipeta estril Pipeta no estril
Cantidad de
Escaso escaso escaso
crecimiento
Distribucin de
Turbidez Sedimento Sedimento
crecimiento
Olor Ptrido Imperceptible Ptrido
Cantidad de
Escaso Escaso Abundante
crecimiento
Distribucin de Pequea
Sedimento Pelcula aerobia
crecimiento turbidez
Olor Aromtica Imperceptible Ptrido
PROCEDIMIENTO C:
Grupo 1 2 3 4
Bao de varones FIA Laboratorio de CEIA Biblioteca
Ambiente
fisocoquimica
N de hongos 16 16 15 10
Caracteristicas
DISCUSION
Observamos que en los grupos, el numero de hongos no hay demasiada diferencia en
el conteo de hongos, ya que los ambientes analizados pertenecen a la facultad de
ingeniera ambiental
Grupo 1 : 16
Grupo 2 : 15
Grupo 3 : 14
Grupo 4 : 16
CONCLUSIONES
RECOMENDACIONES
Pasar el agar nutritivo de los tubos de ensayo a las placas petri, previa
esterilizacin de la cabeza del tubo para eliminar cualquier microorganismo que
se pudiera encontrar que altere el experimento.
Tener especial cuidado al momento de esterilizar el inoculador, ya que una mala
esterilizacin no garantiza que solo las colonias crezcan sino tambin otro tipo
de microorganismos fuera de estudio.
Recoger las placas para sacar resultados a las 48 horas, pues si pasa ms tiempo,
las colonias tendern a aumentar o disminuir de forma mucho ms rpida;
adems pueden proliferar otro tipo de microorganismos ajenos al estudio.
Para realizar una buena desinfeccin del inoculador se le debe calentar con el
mechero hasta que est cerca al rojo vivo, de manera que los microorganismos
mueran al no soportar tan altas temperaturas.
Se puede utilizar la misma pipeta en el pipeteo del agar y caldo nutritivo.
Al observar los resultados manejar las muestras con mucho cuidado, ya que un mal
manejo de estas puede confundir en la deduccin de la morfologa de las colonias
formadas.
BIBLIOGRAFIA
1- Michael Madigan,John Martinko,Jack Parker ,Biologa de los
microorganismos ,Madrid,Editorial Pearson ,2004.
2- Michael J.Pelczar ,Elementos de Microbiologa ,Mxico,Editorial Mc-Graw
Hill,1984
ANEXOS
www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r6282.DOC
http://www.elergonomista.com/microbiologia/loscultivos.htm
es.wikipedia.org/wiki/Medio_de_cultivo
CUESTIONARIO
Que factores influyen en la microbiologa del aire, explique?
Temperatura
Humedad
Partculas en suspensin
Radiacin
Ventilacin
ASPERGILUS
Dominio: Eucariota
Reino: Fungi
Phylum: Ascomycota
Subphylum: Pezizomycotina
Clase: Eurotiomycetes
Orden: Eurotiales
Familia: Trichocomaceae
Gnero: Aspergillus
Especie: Aspergillus niger
Nombre vulgar: Carbonillo
RHIZOBIUM
Las bacterias Rhizobium son organismos de vida libre que habitan en la rizosfera y se alimenta
de los restos de organismos muertos. Estas contienen un plsmido que codifica informacin
que es vital para la infeccin y la nodulacin de la planta hospedadora correspondiente. Son
bacilos mviles, Gram-negativos, con dos capas de pared celular (la primera capa esta hecha
por carbohidratos y protenas, y la segunda capa por lpidos y carbohidratos), procariotas,
aerobios (necesita oxgeno para crecer), mviles (al hacerse el test de motilidad, el agar se
vuelve amarillo y no de su color original morado-), beta (digiere la hemoglobina), crece casi
en cualquier temperatura, pero su desarrollo es ms ptimo a una temperatura de 25 C
(77 F), sus dimensiones son de 0.5-0.9 x 1.2-3.0 m, y cuenta con flagelos.
PENICILIUM
Se caracterizan por formar conidios mediante una estructura ramificada que recuerda la forma
de un pincel, las ramificaciones terminan en unas clulas que se conocen como fialides. Las
filides originan las esporas.
Cuando existe solamente un verticilo se denomina monoverticilado y si existen varios
biverticilado, terverticilado o poliverticilado
LEVADURA
Realizan fermentacin
Agar Sabouraud
Contiene:
40 g/L glucosa
10 g/L pluripeptona
15 g/L agar
0,05 g/L [cloranfenicol]
pH 5.6
Agar Nutritivo
Contiene:
0,5% de peptona;
0,3% de extracto de carne/extracto de levadura;
1,5% de agar;
0,5% de cloruro de sodio;
agua destilada;
pH casi neutro (6,8) a 25 C.
Caldo Nutritivo
Medio no selectivo, contiene pluripeptona y extracto de carne que constituye la