Universidad Autnoma de Ciudad Jurez

Instituto de Ciencias Biomdicas

Lic. En Qumico Farmacutico Bilogo
Laboratorio de Microbiologa I
Ramrez Islas, Luis Alberto
Prctica #1: Microscopa

Resumen
La microscopa ha sido de gran importancia a travs del desarrollo de las ciencias
dedicadas al estudio de la vida, desde la teora celular que explica la vida hasta el
diagnstico clnico de patgenos que pueden terminar con la vida. Se realiz una
revisin bibliogrfica en grupo sobre el desarrollo de la microscopa a finde entender
la evolucin de las tcnicas de microscopa; tambin se realiz la observacin de
tres diferentes muestras: sangre perifrica, Candida y filaria humana, las cuales se
compararon con datos de referencia cientfica.
Palabras clave: Microscopa, tinciones, filaria, Candida, enfoque.
Introduccin
La teora celular postulada por indiscutiblemente autora de Robert
Theodor Schwann (1839) dict en un Hooke es el trmino clula, el cual
principio que (1) todos los organismos surgi en 1665 al describir sus
consisten en una o ms clulas y (2) observaciones con un sencillsimo
que la clula es la unidad estructural microscopio ptico del corcho de la
de todos los organismos; ms tarde, corteza de los rboles, donde
Kart Ngeli (1855) agreg que (3) encontr poros semejantes a los
todas las clulas se originan a partir de hexgonos de los panales de abejas.
otras ya existentes. Estos tres Debido a la gran similitud de que esos
postulados explican qu es vida; mas poros tenan con las celdas habitadas
la concepcin de estos slidos por los monjes del monasterio donde
argumentos sobre la vida no hubieran l viva, surgi la idea de la existencia
surgido sin el microscopio. (Becker, de clulas. (Karp, 2011)
Kleinsmith, & Hardin, 2007) A la par, Anton van
Aunque comnmente el Leeuwenhoek observaba muestras
antecedente ms antiguo del con microscopios, sin embargo, ste
microscopio es sobre Robert Hooke, lo haca con muestras de agua donde
se sabe que el primer microscopio afirmaba observar animlculos;
ptico fue desarrollado por Z. Janssen describi diferentes bacterias
y H. Janssen, sobrino de Z. Janssen, presentes en el agua resultante de
cerca de 1590. (Becker, Kleinsmith, & remojar pimienta y en un raspado de
Hardin, 2007) Algo que es la boca. Sus escritos mandados a la
Royal Society of London fueron
recibidos con escepticismo; su fama
mundial arrib cuando Leeuwenhoek
se puso en contacto con R. Hooke
para comparas sus observaciones.
(Karp, 2011)
Hasta 1830, Matthias Schleiden
concluy que las plantas estaban
hechas de clulas al que el embrin de
sta. Con todo esto, para 1839, el
zologo T. Schwann postul los
primeros dos principios de la teora
celular. (Karp, 2011)
Tras las mejoras tecnolgicas y
la necesidad de diferentes
microscopios, a da de hoy, existe una
mayor diversidad de microscopios que
se limitan solo un campo de luz
luminoso; pues existen tales como el
microscopio de campo obscuro, el
cual se utiliza para especmenes que
no generan un contraste al ser
observado en un campo luminoso; en
el microscopio de contraste de fases,
que se utiliza para evitar teir las
clulas y poder observarlas
detenidamente estando vivas ya que
modifica el ndice de refraccin de la
Metodologa
luz; el microscopio Nomarski o de
contraste de interferencia diferencial,
funciona bsicamente como el de
contraste de fases, pero ste da una
mayor resolucin en una pequea
profundidad de campo produciendo
una imagen casi tridimensional; el
microscopio de fluorescencia utiliza
luz ultravioleta para producir la
fluorescencia, ya sea agregando o no
fluorocromo segn la especie; el
microscopio confocal reconstruye la
imagen a partir de una muestra tratada
con solucin fluorescente con un
sistema digital; y el microscopio digital
que funciona como una computadora
especializada para observar muestras
celulares; no hay que confundir con los
microscopios electrnicos, pues ste
solo est automatizado. Ms
modernos a estos estn los
microscopios electrnicos, los cuales
utilizan haces de electrones para
poder producir las imgenes mediante
diferentes tcnicas utilizadas en
biologa molecular para apreciar
organelos celulares. (Black, 2012)
Resultados
Se observaron tres muestras diferentes, sangre perifrica, Candida ssp. y una filaria,
previamente fijadas y teidas a diferentes objetivos, 10x, 40x y 100x. La sangre
perifrica, en el primer aumento (Imagen #1), pareca un tejido totalmente; al
aumento (Imagen #2) se observ diferentes corpsculos, distinguibles por la
coloracin; en el ltimo aumento (Imagen #3), se pudo observar la individualidad de
casa corpsculo.
La muestra de Candida se mostraba muy densa a 10x (Imagen #4); al
aumentar (Imagen #5) se observ grupos muy unidos entre s de clulas, pero solo
eran distinguibles como grupos y no por su individualidad celular; en el ltimo
aumento (Imagen #6) se observ su individualidad celular con forma redondeada.
La muestra de filaria con un aumento de 10x (Imagen #7) poda ilustrar la
diferencia entre la filaria y el tejido sanguneo alrededor; a 40x (Imagen #8) se
observ cmo sta era rodeada por las clulas sanguneas; con el ltimo objetivo
(Imagen #9), se observ perfectamente su forma alargada.
Discusin albicanis, pues esta solo especie
constituye ms del 50% de las
El microscopio utilizado fue un
especies de Candida. La C. albicanis
microscopio de tipo ptico de campo
es la nica de su gnero que posee
claro; estos se caracterizan por utilizar
una morfologa de clamidosporas,
el contraste generado entre la muestra
seudomicelios y tubos germinales; la
y el lugar donde se encuentra gracias
C. glabrata es totalmente opuesta a la
a cmo la muestra absorbe o refleja la
C. albicanis en el aspecto morfolgico,
luz que incide en ella. Por lo general,
ya que no presenta ninguna de estas
este contraste no es suficiente para
estructuras. Las C. tropicalis, C.
poder observar las muestras, por
krusei, C. parapsilosis, C.
tanto, es necesario utilizar tinciones,
guilliermondii y C. lusitaniae solo
ya que, al teir la muestra, se agrega
presentan una morfologa
un compuesto orgnico que se une a
seudomidelada. Debido a las
los compuestos celulares. La
caractersticas morfolgicas, se trata
utilizacin del aceite de inmersin es
de una C. glabrata. La identificacin
muy importante debido a que favorece
efectiva requiere el uso de pruebas
el ndice de refraccin de la luz para
bioqumicas, por ejemplo midiendo su
que pueda mostrar la imagen en los
respuesta a la asimilacin de
oculares. (Madigan, Martinko, Dunlap,
azcares. (Prats, 2005)
& Clark, 2009)
Las filarias son parsitos
La observacin de sangre
pertenecientes a los nemtodos, es
perifrica mostr un alto contenido de
decir, gusanos redondos de tamao
glbulos rojos, los cuales se pueden
variable. Al mostrar la muestra, se dijo
distinguir fcilmente debido a su forma
que era de un paciente masculino del
de oz, al mostrarse de forma regular,
sur del pas, propiamente dicho,
indican una hemoglobina sin
Chiapas. La distribucin mundial
mutaciones tal como la que
indica que esta filaria puede ser de tipo
desencadena la anemia falciforme,
Wauchereria bancrofti o Onchoderca
donde glbulos rojos tienen forma de
volvulus, mas cada pertenen a un
pltanos. (Saladin , 2013) Tal como
grupo diferente de filarias humanas, la
marca la bibliografa, mayormente se
W. bancrofti es del tipo linftica, por lo
observ glbulos rojos y en una muy
que se encunetra en la circulacin
baja presencia glbulos blancos. Es
sangunea, mientras que la O.
muy probable que los tres cuerpos
volvulus es una filaria
celulares con ncleo observados sean
cutnea/subcutnea. La O. volvulus
neutrfilos, ya que stos se
presenta sintomatologa
encuentran entre un 50 a 70% entre
macroscpica, ya que forma ndulos
los diferentes leucocitos. Adems de
subcutneos visibles y palpables.
que su ncleo polimrfico refuerza
Debido a que la tincin muestra un
esta aseveracin. (Martini, Timmons,
tejido similar al tejido sanguneo, es
& Tallitsch, 2009)
muy probable que se trate de una W.
La Candida observada
bancrofti. (Prats, 2005)
posiblemente sea de la especie C.
Conclusin Bibliografa
La utilizacin del microscopio ptico Becker, W. M., Kleinsmith, L. J., &
de luz se ha generalizado debido a su Hardin, J. (2007). El mundo de la
gran capacidad para mostrar clula. Madrid: Pearson Education.
microorganismos, si bien, por si solo Black, J. G. (2012). Microbiology.
no es capaz de mostrar a todos los Principles and explorations. United
microorganismos, la utilizacin de States of America: Wiley. John
tinciones es una gran mejora para Wiley & Sons, inc.
poder hacer. Aunque, estas tinciones Karp, G. (2011). Biologa celular y
dan mayor versatilidad al microscopio molecular. D.F.: McGraw-Hill.
ptico de luz, existen otros Madigan, M. T., Martinko, J. M.,
microscopios que pueden mostrar Dunlap, P. V., & Clark, D. P.
microorganismos vivos que deberan (2009). Brook. Microbiologa de los
ser teidos para ser observables en el microorganismos. Madrid: Pearson
microscopio de luz. Educacin.
Cualquiera que sea el Martini, F. H., Timmons, M. J., &
microscopio indicado para la Tallitsch, R. B. (2009). Anatoma
observacin de alguna muestra, la Humana. Madrid: Pearson
identificacin correcta del organismo Educacin.
se consigue comprando y contrastado Prats, G. (2005). Microbiologa
las caractersticas morfolgicas y clnica. Madrid: Editorial Mdica
bioqumicas con otros Panmericana.
microorganismos siguiendo la Saladin, K. S. (2013). Anatoma y
bibliografa pertinente. Fisiologa. La unidad entre forma y
funcin. D.F.: McGraw-HIll.