Prctica No. 10 Curva de crecimiento microbiano.

Prctica No. 10
Curva de crecimiento microbiano

Objetivo
Conocer las etapas que se presentan al color un microorganismo en condiciones
adecuadas para su desarrollo.
Determinar el crecimiento microbiano mediante conteo de clulas y turbidimetra para
obtener la curva de crecimiento.
Calcular el tiempo de generacin del microorganismo.

Observaciones
Se realiz una curva de crecimiento microbiano con un cultivo de Saccharomyces
cerevisiae. A nuestro equipo nos toc le realizar la curva con 2.5% (3.75 ml) de inculo,
se estuvo muestreando durante 13 horas (desde el tiempo 0 a tiempo 12), empezando a
las 8:20 am y finalizando a las 8:19 pm del da 25 de septiembre del 2017. Se utiliz el
espectrofotmetro nmero 2, realizando las lecturas a 600 nm. Para la realizacin de la
curva:
-Se prepar caldo Dextrosa Sabouraud en dos matraces de diferentes cantidades
-Se esterilizo los tubos con caldo (6 al 12) y tubos vacos (0 al 5) al igual que los matraces
-Se esterilizaron 15 pipetas para utilizarlas al momento de realizar la curva.
Tiempo Observaciones
El muestro se empez el muestreo a las
8:20 am despus de realizar una
inoculacin en CSD y se obtuvo una abs
0 = 0.011 lo cual se divide entre 10, lo que
nos da una abs = 0.0011, para as poder
congelar y hacer un conteo y se obtuvo
un promedio 76.9 clulas contadas.
El muestro se empez el muestreo a las
9:20 am y se obtuvo una abs = 0.019 lo
cual se divide entre 10, lo que nos da una
1 abs = 0.0019, para as poder congelar y
hacer un conteo y se obtuvo un promedio
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51.5 clulas contadas.

Se realiz a las 10:20 am y se obtuvo una
abs = 0.024 este resultado se divide entre
2 10 lo cual da una abs = 0.0024. Para el
conteo en cmara de Nuebauer se obtuvo
un resultado promedio de 66.5 de clulas
contadas.
El tiempo 3 fue medido a las 11:23 am y
la absorbancia registrada es de 0.042
3 dividida entre 10 es de 4.2x10-3. En el
conteo de clulas al microscopio da un
promedio de 93.5
El tiempo 4 fue medido a las 12:23 pm
dando una absorbancia de 0.053 dividida
4 entre 10 es de 5.3x10-3. Para el conteo de
clulas al microscopio en los 4 campos,
da un promedio de 158.
Se realiz a las 12:30 pm y se obtuvo una
absorbancia de 0.082. Al momento de la
5 observacin al microscopio se observ
una cantidad de clulas con promedio de
122.
El anlisis se realiz a las 2:30 pm
obteniendo una absorbancia de 0.044, lo
cual nos indica un crecimiento en
6 comparacin a la absorbancia anterior, en
el conteo de las clulas de cuatro campos
nos arroj un resultado de 834 del cual se
obtuvo el promedio de estos dando como
resultado 208.5.
Se realiz a las 3:25 pm y se obtuvo una
7 absorbancia de 0.036, la observacin al
microscopio nos arroj un valor promedio
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de clulas de 110.

En el muestreo del tiempo 8 se realiz a

las 4:26 pm, de la cual se obtuvo una
8 absorbancia de 0.053. En la observacin
de las clulas se pudieron localizar en los
4 campos un total de 834 dando as un
promedio de 208.5.
Se realiz la lectura de absorbancia a las
5:24, dando 0.088 Y al realizar el conteo,
9 dentro de los campos se observaban
levaduras muy redondas esparcidas por
los campos, obteniendo un promedio de
377.75.
El tiempo 10 se realiz a las 6:24 dando
una absorbancia de 0.115. En el
microscopio se observ gran abundancia
10 de clulas en los 4 campos en los que se
realiz el conteo, obtenindose as un
promedio de 359.26
El tiempo 11 se realiz a las 7:21 pm
arrojando una absorbancia de 0.197. La
11 observacin en microscopio nos dio un
promedio de 353.25 clulas, era notoria la
gran abundancia de clulas agrupadas.
A las 8:19 se realiz la ltima lectura de
absorbancia dando un resultado de 0.202.
Al momento de realizar el conteo se not
12 una gran cantidad de clulas dentro de
los cuadrantes, se observaban en varios
campos clulas pegadas y redondas,
dando un promedio de 652.75.
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Tiempo Clulas observadas en

microscopio
0
1

2 266 clulas
3 374 clulas
4 632 clulas
5 490 clulas
6 463 clulas
7 440 clulas
8 834 clulas
9 1,511 clulas
10 1,437 clulas
11 1,413 clulas
12 2,611 clulas

Clculos
Preparacin del caldo Dextrosa Sabouraud

30 g 100 ml 30 g 100 ml
x - 150 ml x - 80 ml

x = 4.5 g x = 2.4 g

Nmero de Clulas/ml

Tiempo 0 # = (76.9) 10,000 = 769,000 cel/ml

Tiempo 1 # = (51.5) 10,000 = 515,000 cel/ml

Tiempo 2 # = (66.5) 10,000 = 665,000 cel/ml

Tiempo 3 # = (93.5) 10,000 = 935,000 cel/ml
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Tiempo 4 # = (158) 10,000 = 1,580,000 cel/ml

Tiempo 5 # = (122) 10,000 (10) = 12,200,000 cel/ml

Tiempo 6 # = (115.75) 10,000 (10) = 11,575,000 cel/ml

Tiempo 7 # = (110) 10,000 (10) = 11,000,000 cel/ml

Tiempo 8 # = (208) 10,000 (10) = 20,800,000 cel/ml

Tiempo 9 # = (352.26) 10,000 (10) = 35,226,000 cel/ml

Tiempo 10 # = (377.75) 10,000 (10) = 37,775,000 cel/ml


Tiempo 11 # = (353.25) 10,000 (10) = 35,325,000 cel/ml

Tiempo 12 # = (652.75) 10,000 (10) = 65,275,000 cel/ml

Resultados
Tiempo Cel/ml Tiempo Hora Absorbancia

0 769,000 cel/ml 0 8:20 0.011

1 515,000 cel/ml 1 9:20 0.019

2 665,000 cel/ml 2 10:20 0.024

3 935,000 cel/ml 3 11:23 0.041

4 1,580,000 cel/ml 4 12:23 0.053

5 12,200,000 cel/ml 5 1:30 0.082

6 11,575,000 cel/ml 6 2:30 0.044

7 11,000,000 cel/ml 7 3:25 0.036

8 4:26 0.053
8 20,800,000 cel/ml
9 5:24 0.088
9 35,226,000 cel/ml
10 6:24 0.115
10 37,775,000 cel/ml
11 7:21 0.197
11 35,350,000 cel/ml
12 8:19 0.202
12 65,275,000 cel/ml
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Discusin
La curva de crecimiento microbiano nos ayuda a representar la evolucin del
nmero de nmero de clulas viables presente en un cultivo microbiano lquido a
lo largo del tiempo de estudio. En este caso se estudi el nmero de clulas viables
por mililitro de un cultivo de volumen limitado y con una cantidad de nutrientes
limitada.
En cuanto a los resultados obtenidos de absorbancia
Conclusin
Referencias