USO DEL MICROSCOPIO

El estudio prctico de la Histologa y la Embriologa basa su ejercicio principalmente en la

observacin al microscopio de las estructuras citohistolgicas componentes de los organismos vivientes.
Para ello, durante el desarrollo de las sesiones prcticas contar con un microscopio ptico que ser su
instrumento de estudio y le sern proporcionadas lminas de preparaciones histolgicas que deber
visualizar con el microscopio.

Antes de proporcionar las instrucciones de uso, se hace necesario recordar los componentes del
microscopio ptico.

Todo microscopio ptico se compone de dos sistemas:

Sistema ptico

Es el eje de observacin de objetos, y consta de los siguientes elementos:

1) Ocular: Lentes situadas cerca el ojo del observador, que amplifican la imagen del objetivo.

2) Objetivo: Lente ms cercana a la preparacin; amplifica la imagen del preparado histolgico. Puede
ser una lente nica o un conjunto de ellas, de diferentes aumentos, montados en un Revlver.
Habitualmente en el caso de un sistema de revlver, tiene los siguientes aumentos: 4x, 10x, 20x y 100x,
este ltimo objetivo es tambin conocido como lente de inmersin por requerir el uso de aceite de
inmersin para poder hacer la observacin de los preparados.

3) Condensador: Lente concentradora de rayos luminosos sobre la preparacin.

4) Diafragma: Estructura anular que regula la cantidad de luz que ingresa al condensador. Se comporta
como el iris del ojo.

5) Foco: Sistema de iluminacin (sea una ampolleta o espejos) que dirigen el haz de luz hacia el
condensador. En caso de ser una ampolleta, el microscopio tendr una fuente de poder controlada con
un interruptor de encendido, un reostato de regulacin de intensidad de la luz y un enchufe que debe
conectarse al sistema elctrico para que pueda encenderse.

Sistema Mecnico

1) Columna o Soporte: Tambin denominado Estativo, es la parte sobre la que se monta el sistema
ptico. Generalmente se compone de un Pie o base que sustenta todo el peso del microscopio dndole
estabilidad, y un brazo en que se montan el condensador, el sistema de objetivos y oculares, y la platina
de observacin.

2) Platina: Superficie plana, paralela al pie de la columna, donde se pone la preparacin histolgica. La
platina puede tener una pinza de sujecin para el preparado histolgico, unas regletas o vernier, que
permiten realizar mediciones de las estructuras observadas, y Tornillos de desplazamiento en los ejes
frontal y lateral (x e y), tornillos que permiten localizar un segmento del preparado en el eje de
visualizacin.

3) Cabezal: Componente del sistema mecnico en que se sitan los lentes oculares. Este cabezal puede
ser monocular (1 nico lente), binocular (2 lentes), trinocular (habitualmente combinando un sistema
binocular con una salida para conexin de cmaras fotogrficas o de video, o de una pantalla de
proyeccin). Puede ser un nico cabezal o mltiples cabezales, estos ltimos usados preferentemente
en aplicaciones docentes guiadas.

4) Revlver: Pieza rotatoria donde se localizan los lentes objetivos. Esta pieza gira sobre el eje al que
est anclado y, mediante un sistema de encaje, permite el posicionamiento de lentes objetivos de
diferentes aumentos, en el eje de observacin.

5) Tornillos de enfoque: Situados a los costados del brazo del estativo, permiten ajuste fino
(micromtrico) y ms tosco (macromtrico) de la preparacin. Ajustando ambos se logra el enfoque
correcto. Estos tornillos pueden estar separados, o bien integrados, siendo el tornillo macromtrico
controlado por una perilla grande y el micromtrico con una perilla ms pequea habitualmente central
respecto del eje de ambas perillas.

Teniendo clara la composicin de todo microscopio ptico antes descrita, revisaremos a continuacin las
instrucciones de uso.

INSTRUCCIONES

Retire la funda del microscopio

Verifique que el microscopio est enchufado y encienda el microscopio.

Ponga el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y descienda totalmente la platina.

Si en el ltimo uso que tuvo el microscopio fue dejado correctamente, se encontrar en esta
posicin.

Ponga la preparacin sobre la platina, sujetndola con las pinzas de sujecin.

Cercirese que el objetivo 4x est bien encajado en su posicin.

Proceda a enfocar de la siguiente manera:

1. Acerque cuidadosamente al mximo la lente objetivo a la preparacin, empleando el tornillo

macromtrico. Durante este procedimiento mire directamente, no por el ocular, para evitar
la posible ruptura del preparado y posibles daos al objetivo.

2. Mire a travs de los oculares y separe lentamente el objetivo de la preparacin, usando el

tornillo macromrico hasta que se vea relativamente ntida la muestra.

3. Gire el tornillo micromtrico hasta obtener un enfoque fino.

Cambie al objetivo 10x. Tendr una imagen casi enfocada, por lo que deber mover muy poco el
tornillo micromtrico para conseguir el enfoque fino. Si al realizar el cambio de objetivo pierde
totalmente la imagen, vuelva a enfocar con el lente objetivo anterior y repita los pasos 1 a 3
antes descritos.

Con el objetivo 40x debe tener precaucin por cuanto su enfoque es a muy poca distancia del
preparado, pudiendo suceder que preparacin y objetivo choquen y se incrusten, o bien, que de
haber observado previamente un preparado con el lente de inmersin, hayan quedado restos
de aceite de inmersin y se manche el objetivo.

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 Respecto del lente de inmersin, siga estos pasos:

1. Baje totalmente la platina.

2. Mirando directamente, Suba totalmente el condensador para ver claramente el crculo de

luz que indica la zona a visualizar y donde se habr de echar el aceite.

3. Gire el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo en un punto intermedio entre ste
y el objetivo 40x.

4. Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz.

5. Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin.

6. Mirando directamente el objetivo, suba lentamente la platina hasta que toque la gota de
aceite. Notar que la gota parece ascender y adosarse al lente.

7. Enfoque con precaucin el micromtrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de

inmersin y el preparado es mnimo, por lo que hay grandes riesgos de romper el
preparado.

8. Una vez puesto el aceite de inmersin en el preparado, recuerde que no puede volver a
enfocar con el objetivo 40x pues existe riesgo de manchar el lente con aceite. Si desea
enfocar otro campo baje la platina y repita la operacin desde el paso 3 de esta secuencia.

9. Finalice la observacin bajando la platina y colocando el objetivo de menor aumento

girando el revlver. Proceda al retiro de la preparacin desde la platina.

10. Recuerde que nunca debe retirar el preparado con el objetivo de inmersin puesto en
posicin de observacin.

11. Limpie el objetivo de inmersin con cuidado usando pao de batista o papel especial para
ptica. Compruebe tambin que el objetivo de 40x est limpio.

Al terminar la sesin siga los siguientes pasos:

Retire el ltimo preparado que est observando

Baje la platina
Ponga el revlver del microscopio en el lente de 4x
Baje la perilla reguladora de la intensidad lumnica hasta el mnimo
Apague el microscopio y desenchfelo
Cbralo con la funda protectora

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Mantenimiento y precauciones:

Cuando finalice el trabajo, deje puesto el objetivo menor en posicin de observacin. Asegrese
que la parte mecnica de la platina n sobresale del borde de la misma y cbralo con su funda.

Cuando el microscopio no est en uso tpelo con su funda para evitar que se ensucien y daen
las lentes. Si no usar el microscopio por largos perodos, gurdelo en la caja del mismo, dentro
de un armario para protegerlo del polvo.

No tome jams las lentes con las manos. Si se ensucian, lmpielas muy suavemente con papel
filtro, pao suave sin pelusas o pao de ptica.

Si no est usando el microscopio, no deje puesta ninguna preparacin sobre la platina.

Si ha usado el lente de inmersin, despus de su uso limpie el aceite remanente del objetivo con
paos especiales de ptica o papel filtro. Cuando pase el pao o papel, debe hacerlo SIEMPRE
en un mismo sentido y con suavidad. Si el aceite se ha secado y se ha adherido al objetivo, se
limpia con una mezcla de alcohol-acetona (70%:30%) o con xilol. El uso de estos solventes
orgnicos se hace ocasionalmente, y teniendo en claro que puede daar las lentes y su sujecin
por disolver la grasa mineral que se emplea en la lubricacin del mecanismo de sujecin y
desplazamiento.

Recuerde no forzar los tornillos giratorios del microscopio (macro y micromtrico, platina,
revlver, condensador).

Tenga presente que el cambio de objetivos se realiza girando el revlver y mirando siempre en
forma directa (ojo desnudo) la preparacin, para prevenir el roce entre el lente y la muestra.
Jams cambie el objetivo agarrndolo por el tubo ni mientras se observa a travs del ocular.

Debe mantener siempre seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama algn lquido
sobre ella, squelo con un pao. Si se mancha con aceite, lmpiela con un pao humedecido con
xilol, o con isopropanol si dispone de l.

Recuerde revisar y limpiar siempre el microscopio al final de cada sesin prctica.

T.M. Adolfo Antonio Ros Alcorta

Coordinador Nacional de Histotecas
Universidad Pedro de Valdivia

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 LABORATORIO N 1 : MICROSCOPIA

Microscopio ptico (M.O), de Campo Claro o Fotnico:

La luz, al atravesar el preparado cito-histolgico, es modificada en algunas de sus caractersticas, las que
pueden ser captadas por el ojo:
-Variaciones de luz (contraste de luz y sombras).
- Variaciones de color (diferentes longitudes de onda).
Dado que la mayor parte de las clulas, tejidos y rganos carecen de color, el paso de la luz a travs de
ellos no nos permite observer todas sus caractersticas, por este motive, debe modificarse la
preparacin cito-histolgica mediante la aplicacin de tinciones histolgicas, obteniendo una absorcin
diferencial de luz permitiendo la visualizacin de diferentes estructuras.
El M.O, presenta dos caractersticas importantes:
1. Poder de resolucin: Distancia mnima que debe existir entre dos puntos del objeto para que se
visualicen separadas
2. Aumento: que es la relacin entre el tamao de la imagen y del objeto,en valores lineales.

La calidad de una imagen, su claridad y riqueza de detalles, depende del poder de resolucin.
El M.O, tiene un mximo poder de resolucin de 0,2 micrometros, aunque en forma rutinaria es de 0,5
micrometros; este tipo de microscopio est formado por partes mecnicas (tornillos macro y
micromtrico, platina, verniers, columna, base o estativo) y pticas (condensador y diafragma , lente
objetivo y lente ocular).

Las clulas son las unidades bsicas de los seres vivos. La mayora de ellas son de pequeo tamao por
lo que es indispensable el uso de instrumentos como los microscopios para su visualizacin. Por lo
general el poder resolutivo del ojo humano es de 0.2mm (200 m), o sea la menor distancia vista o
resuelta por el ojo humano es de dos lneas separadas a algo menos de 1mm de distancia; si hay dos
lneas a 200 m de distancia, veremos una sola lnea. Los microscopios se utilizan para mejorar la
resolucin.

La invencin del microscopio en el siglo XVII posibilit la serie de descubrimientos posteriores de las
mismas. En 1665 Robert Hooke utilizando un microscopio ptico simple, examin un corte de corteza,
encontr que esta estaba compuesta por una masa de diminutas cmaras, que llam clulas, en
realidad slo vi las paredes celulares, ya que este tejido est muerto a la madurez y las clulas ya no
tienen contenido. Ms tarde, Hoock y algunos de sus contemporneos observaron clulas vivas.

Microscopio ptico (MO)

El tipo de microscopio ms utilizado es el microscopio ptico, que se sirve de la luz visible para crear una
imagen aumentada del objeto. El microscopio ptico ms simple es la lente convexa doble con una
distancia focal corta. Estas lentes pueden aumentar un objeto hasta 15 veces. Por lo general se utilizan

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microscopios compuestos, que disponen de varias lentes con las que se consiguen aumentos mayores.
Algunos microscopios pticos pueden aumentar un objeto por encima de las 2.000 veces.

El microscopio compuesto consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular, montados en

extremos opuestos de un tubo cerrado. El objetivo est compuesto de varias lentes que crean una
imagen real aumentada del objeto examinado. Las lentes de los microscopios estn dispuestas de forma
que el objetivo se encuentre en el punto focal del ocular. Cuando se mira a travs del ocular se ve una
imagen virtual aumentada de la imagen real. El aumento total del microscopio depende de las
longitudes focales de los dos sistemas de lentes.

El equipamiento adicional de un microscopio consta de un armazn con un soporte que sostiene el

material examinado y de un mecanismo que permite acercar y alejar el tubo para enfocar la muestra.
Los especimenes o muestras que se examinan con un microscopio son transparentes y se observan con
una luz que los atraviesa, y se suelen colocar sobre un rectngulo fino de vidrio. El soporte tiene un
orificio por el que pasa la luz. Bajo el soporte se encuentra un espejo que refleja la luz para que
atraviese el espcimen. El microscopio puede contar con una fuente de luz elctrica que dirige la luz a
travs de la muestra.

Los MO actuales tiene un poder resolutivo de 0,2 m, unas mil veces la del ojo humano.
El tipo de microscopio ms utilizado es el microscopio ptico, que se sirve de la luz visible para crear una
imagen aumentada del objeto. El microscopio ptico ms simple es la lente convexa doble con una
distancia focal corta. Estas lentes pueden aumentar un objeto hasta 15 veces. Por lo general se utilizan
microscopios compuestos, que disponen de varias lentes con las que se consiguen aumentos mayores.
Algunos microscopios pticos pueden aumentar un objeto por encima de las 2.000 veces.

El microscopio compuesto consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular, montados en

extremos opuestos de un tubo cerrado. El objetivo est compuesto de varias lentes que crean una
imagen real aumentada del objeto examinado. Las lentes de los microscopios estn dispuestas de forma
que el objetivo se encuentre en el punto focal del ocular. Cuando se mira a travs del ocular se ve una
imagen virtual aumentada de la imagen real. El aumento total del microscopio depende de las
longitudes focales de los dos sistemas de lentes.

El equipamiento adicional de un microscopio consta de un armazn con un soporte que sostiene el

material examinado y de un mecanismo que permite acercar y alejar el tubo para enfocar la muestra.
Los especmenes o muestras que se examinan con un microscopio son transparentes y se observan con
una luz que los atraviesa, y se suelen colocar sobre un rectngulo fino de vidrio(portaobjeto).

El soporte tiene un orificio por el que pasa la luz. Bajo el soporte se encuentra un espejo que refleja la
luz para que atraviese el espcimen.

El microscopio puede contar con una fuente de luz elctrica que dirige la luz a travs de la muestra.

Los MO actuales tiene un poder resolutivo de 0,2 m, unas mil veces la del ojo humano

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Todo microscopio ptico se compone de dos sistemas:

Sistema ptico

Es el eje de observacin de objetos, y consta de los siguientes elementos:

1) Ocular: Lentes situadas cerca el ojo del observador, que amplifican la imagen del objetivo.

2) Objetivo: Lente ms cercana a la preparacin; amplifica la imagen del preparado histolgico. Puede
ser una lente nica o un conjunto de ellas, de diferentes aumentos, montados en un Revlver.
Habitualmente en el caso de un sistema de revlver, tiene los siguientes aumentos: 4x, 10x, 20x y 100x,
este ltimo objetivo es tambin conocido como lente de inmersin por requerir el uso de aceite de
inmersin para poder hacer la observacin de los preparados.

3) Condensador: Lente concentradora de rayos luminosos sobre la preparacin.

4) Diafragma: Estructura anular que regula la cantidad de luz que ingresa al condensador. Se comporta
como el iris del ojo.

5) Foco: Sistema de iluminacin (sea una ampolleta o espejos) que dirigen el haz de luz hacia el
condensador. En caso de ser una ampolleta, el microscopio tendr una fuente de poder controlada con
un interruptor de encendido, un reostato de regulacin de intensidad de la luz y un enchufe que debe
conectarse al sistema elctrico para que pueda encenderse.

Sistema Mecnico

1) Columna o Soporte: Tambin denominado Estativo, es la parte sobre la que se monta el sistema
ptico. Generalmente se compone de un Pie o base que sustenta todo el peso del microscopio dndole
estabilidad, y un brazo en que se montan el condensador, el sistema de objetivos y oculares, y la platina
de observacin.

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 2) Platina: Superficie plana, paralela al pie de la columna, donde se pone la preparacin histolgica. La
platina puede tener una pinza de sujecin para el preparado histolgico, unas regletas o vernier, que
permiten realizar mediciones de las estructuras observadas, y Tornillos de desplazamiento en los ejes
frontal y lateral (x e y), tornillos que permiten localizar un segmento del preparado en el eje de
visualizacin.

3) Cabezal: Componente del sistema mecnico en que se sitan los lentes oculares. Este cabezal puede
ser monocular (1 nico lente), binocular (2 lentes), trinocular (habitualmente combinando un sistema
binocular con una salida para conexin de cmaras fotogrficas o de video, o de una pantalla de
proyeccin). Puede ser un nico cabezal o mltiples cabezales, estos ltimos usados preferentemente
en aplicaciones docentes guiadas.

4) Revlver: Pieza rotatoria donde se localizan los lentes objetivos. Esta pieza gira sobre el eje al que
est anclado y mediante un sistema de encaje, permite el posicionamiento de lentes objetivos de
diferentes aumentos, en el eje de observacin.

5) Tornillos de enfoque: Situados a los costados del brazo del estativo, permiten ajuste fino
(micromtrico) y ms tosco (macromtrico) de la preparacin. Ajustando ambos se logra el enfoque
correcto. Estos tornillos pueden estar separados, o bien integrados, siendo el tornillo macromtrico
controlado por una perilla grande y el micromtrico con una perilla ms pequea habitualmente central
respecto del eje de ambas perillas.

Existen distintas variantes de observacin en MO:

Microscopa ptica normal (de campo brillante coloreado): El material a observar se colorea con
colorantes especficos que aumentan el contraste y revelan detalles que no aprecian de otra manera

Clula de Arveja (Pisum sp.) Traqueidas del leo de Pino (Pinus sp.)
coloracin: safranina-fast-green Coloracin: safranina

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LUPA STEREOSCPICA
Es una variacin de los microscopios pticos de campo claro. Su utilidad es la observacin y manipulacin de
de muestras pequeas, como la observacin grosso modo de piezas completas. Brinda utilidad en
Embriologa, Biologa, Histologa, Patologa, Infectologa, y Geologa.

La lupa stereoscpica consta de las siguientes componente:

Interruptor de encendido
Fuente de iluminacin incidente y transmitida
Comando de enfoque
Tornillo de la abrazadera
Soporte de deslizamiento
Ocular
Anillo de ajuste de dioptras
Prisma cubierto
Objetivo
Interruptor de encendido
Sujetador de muestra
Platina de vidrio en blanco y negro.

Cabezal La cabeza es binocular y vertical con una inclinacin de 45. Ajuste de dioptras +/- 5.
Distancia interpupilar ajustable de 54-76mm.
Seleccin de tapas: a) La platina de vidrio esmerilado se coloca en la base y se fija con un tronillo.
Se utiliza cuando se intenta visualizar una muestra por transparencia. En este caso por favor utilice el
iluminador de transmisin.
b) La tapa negra y blanca se mantiene en el embalaje como accesorio. Cuando se utiliza por favor saque
la tapa de vidrio y el lugar ponga la etapa en blanco y negro en la base. Normalmente, el lado blanco
esta hacia arriba. Si la muestra es de color blanco o colores claros, utilice el lado negro para mejorar el
contraste con el iluminador incidente.

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INSTRUCCIONES DE USO DEL MICROSCOPIO PTICO

Teniendo clara la composicin de todo microscopio ptico antes descrita, revisaremos a continuacin las
instrucciones de uso.

1. Retire la funda del microscopio

2. Verifique que el microscopio est enchufado y encienda el microscopio.

3. Ponga el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y descienda totalmente la platina. Si en

el ltimo uso que tuvo el microscopio fue dejado correctamente, se encontrar en esta posicin.

4. Ponga la preparacin sobre la platina, sujetndola con las pinzas de sujecin.

5. Cersirese que el objetivo 4x est bien encajado en su posicin.

6. Proceda a enfocar de la siguiente manera:

7. Acerque cuidadosamente al mximo la lente objetivo a la preparacin, empleando el tornillo

macromtrico. Durante este procedimiento mire directamente, no por el ocular, para evitar la posible
ruptura del preparado y posibles daos al objetivo.

8. Mire a travs de los oculares y separe lentamente el objetivo de la preparacin, usando el tornillo
macromrico hasta que se vea relativamente ntida la muestra.

9. Gire el tornillo micromtrico hasta obtener un enfoque fino.

10. Cambie al objetivo 10x. Tendr una imagen casi enfocada, por lo que deber mover muy poco el
tornillo micromtrico para conseguir el enfoque fino. Si al realizar el cambio de objetivo pierde
totalmente la imagen, vuelva a enfocar con el lente objetivo anterior y repita los pasos 1 a 3 antes
descritos.

11. Con el objetivo 40x debe tener precaucin por cuanto su enfoque es a muy poca distancia del
preparado, pudiendo suceder que preparacin y objetivo choquen y se incrusten, o bien, que de haber
observado previamente un preparado con el lente de inmersin, hayan quedado restos de aceite de
inmersin y se manche el objetivo.

12. Respecto del lente de inmersin, siga estos pasos:

13. Baje totalmente la platina.

14. Mirando directamente, Suba totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que
indica la zona a visualizar y donde se habr de echar el aceite.

15. Gire el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo en un punto intermedio entre ste y el
objetivo 40x.

16. Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz.

17. Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin.

10
18. Mirando directamente el objetivo, suba lentamente la platina hasta que toque la gota de aceite.
Notar que la gota parece ascender y adosarse al lente.

19. Enfoque con precaucin el micromtrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersin y el
preparado es mnimo, por lo que hay grandes riesgos de romper el preparado.

20. Una vez puesto el aceite de inmersin en el preparado, recuerde que no puede volver a enfocar con
el objetivo 40x pues existe riesgo de manchar el lente con aceite. Si desea enfocar otro campo baje la
platina y repita la operacin desde el paso 3 de esta secuencia.

21. Finalice la observacin bajando la platina y colocando el objetivo de menor aumento girando el
revlver. Proceda al retiro de la preparacin desde la platina.

22. Recuerde que nunca debe retirar el preparado con el objetivo de inmersin puesto en posicin de
observacin.

23. Limpie el objetivo de inmersin con cuidado usando pao de batista o papel especial para ptica.
Compruebe tambin que el objetivo de 40x est limpio.

Mantenimiento y precauciones:

Cuando finalice el trabajo, deje puesto el objetivo menor en posicin de observacin. Asegrese
que la parte mecnica de la platina n sobresale del borde de la misma y cbralo con su funda.

Cuando el microscopio no est en uso tpelo con su funda para evitar que se ensucien y daen
las lentes. Si no usar el microscopio por largos perodos, gurdelo en la caja del mismo, dentro
de un armario para protegerlo del polvo.

No tome jams las lentes con las manos. Si se ensucian, lmpielas muy suavemente con papel
filtro, pao suave sin pelusas o pao de ptica.

Si no est usando el microscopio, no deje puesta ninguna preparacin sobre la platina.

Si ha usado el lente de inmersin, despus de su uso limpie el aceite remanente del objetivo con
paos especiales de ptica o papel filtro. Cuando pase el pao o papel, debe hacerlo SIEMPRE
en un mismo sentido y con suavidad. Si el aceite se ha secado y se ha adherido al objetivo, se
limpia con una mezcla de alcohol-acetona (70%:30%) o con xilol. El uso de estos solventes
orgnicos se hace ocasionalmente, y teniendo en claro que puede daar las lentes y su sujecin
por disolver la grasa mineral que se emplea en la lubricacin del mecanismo de sujecin y
desplazamiento.

Recuerde no forzar los tornillos giratorios del microscopio (macro y micromtrico, platina,
revlver, condensador).

Tenga presente que el cambio de objetivos se realiza girando el revlver y mirando siempre en
forma directa (ojo desnudo) la preparacin, para prevenir el roce entre el lente y la muestra.
Jams cambie el objetivo agarrndolo por el tubo ni mientras se observa a travs del ocular.

11
 Debe mantener siempre seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama algn lquido
sobre ella, squelo con un pao. Si se mancha con aceite, lmpiela con un pao humedecido con
xilol.

Recuerde revisar y limpiar siempre el microscopio al final de cada sesin prctica.

INSTRUCCIONES DE USO DE LA LUPA STEREOSCPICA

A diferencia del Microscopio ptico, el uso y mantenimiento se simplifica dado que solamente consta de
un aumento menor

1. Retire la funda de la lupa

2. Verifique que la lupa est enchufada y encienda el microscopio.

3. Verifique que las protecciones de goma estn puestas en ambos oculares. stas se utilizan para
proteger de la luz incidente el torno a los oculares y as mejorar la visibilidad.

3. Ponga la preparacin sobre el centro la platina, sujetndola con las pinzas de sujecin.

4. Ponga el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y descienda totalmente la platina. Si en

el ltimo uso que tuvo la lupa fue dejada correctamente, se encontrar en esta posicin.

3. Ponga el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y descienda totalmente la platina. Si en

el ltimo uso que tuvo la lupa fue dejada correctamente, se encontrar en esta posicin.

4. Ponga la preparacin (muestra) sobre la platina, sujetndola con las pinzas de sujecin.

5. Afloje el tornillo de fijacin del cuerpo de la lupa y mueva ste hacia arriba y hacia abajo. Fjelo a la
distancia deseada.

6. Gire el mando de zoom mientras mira por el ocular derecho hasta que aparezca la imagen. Utilizando
el mando de enfoque conseguir una imagen ms ntida de la muestra.

7. A continuacin, mire a travs del ocular izquierdo con el ojo izquierdo y gire el anillo de ajuste de
dioptras hasta obtener una imagen tan ntida como el dado derecho. Hacer este ajuste sin mover el
enfoque.

8. A continuacin, sujete la cubierta del prisma derecha e izquierda y mueva ms cerca con el fin de
coincidir con la distancia de pupila.

9. El ajuste es correcto cuando el campo de visin se visualice cmodamente y presente un solo campo
completo.

10. En algunos modelos de lupas stereoscpicas, existe la posibilidad de cambiar de aumento de 2x a 4x.
Si se trata de uno de estos modelos, el procedimiento a realizar implica desenroscar el anillo de los
objetivos. Poner el nuevo objetivo (opcional) y enrsquelo hasta fijar correctamente.

11. Finalice la observacin subiendo el cuerpo de la lupa y colocando el objetivo de menor aumento.
Proceda al retiro de la preparacin desde la platina.

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12. Limpie el objetivo con cuidado usando pao de batista o papel especial para ptica.

TCNICAS DE IDENTIFICACIN EN HISTOLOGA

Introduccin
Las clulas en su mayora son incoloras, aquellas que en su citoplasma poseen Inclusiones que son
sustancias o partculas coloreadas de origen endgeno como caroteno, melanina, licopenos o exgenos
como carbn.

Cuando se trata de estudiar clulas aisladas o disociadas, tejidos delgados el proceso de coloracin no
tiene problemas. El problema se produce cuando se tiene que analizar rganos o tejidos ms
voluminosos, en donde por la densidad celular se dificulta la coloracin y la observacin de ellos; sobre
todo en la observacin al microscopio ptico, que se basa en lo delgado de la muestra que debe ser lo
ms trasparente para que el haz de luz la atraviese.

Es recomendable que su grosor est entre 7 a 10 micrometros o micras ( m), para una clara
observacin, adems debern ser teidos los tejidos.

Al realizer el corte, depender de la orientacin especial el cmo se observe el preparado, como

observaremos en el esquema:

Para lograr la adecuada preparacin y observacin de los preparados, se debe realizar el siguiente
procedimiento con los siguientes pasos:

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 ACTIVIDADES PRCTICAS DE ENTRENAMIENTO EN EL USO DE LUPA Y MICROSCOPIOS

Objetivos

1.- Comprender los principales tipos de microscopio usados en los estudios citohistolgicos.

2.- Enfocar con los diferentes aumentos de manera progresiva las preparaciones histolgicas,
presentadas.

3.-Comparar el poder de resolucin de los diferentes lentes objetivos, ante la aparicin detalles en la
muestra, imperceptibles a la visin humana, mediante el uso progresivo de los diversos aumentos.

Actividades

1.- Se le entregarn 3 preparaciones de aprendizaje:

a) Hilos.
b) Letras y nmeros
c) Cuadrcula de papel milimetrado

2.- Observe en los aumentos de 4x, 10x y 40x, las muestras preparadas entregadas.

3.- a) Identifique y rotule cada una de las partes del esquema de microscopio
b) Anote qu observa con la nitidez de la imagen cuando mueve el tornillo micromtrico
c) Anote qu observa con la nitidez de los planos ms superficial y profundo cuando mueve el
tornillo micromtrico
d) Anote qu observa con la orientacin de la imagen a cada aumento
e) Anote qu observa con la resolucin de la imagen a diferentes aumentos

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 2a.- Observe la muestra entregada con los aumentos del microscopio incluyendo inmersin. (Hilo de
colores). Reconozca las formas a cada aumento y describa lo observado.

4x 10x 40x

MUESTRA TINCIN

ELEMENTOS QUE
RECONOCE FUNCIN

DESCRIPCIN 4X

DESCRIPCIN 10X

DESCRIPCIN 40X

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 2b.- Observe la muestra entregada con los aumentos del microscopio incluyendo inmersin. (Letras y
nmeros). Reconozca las formas y posicin a cada aumento y describa lo observado.

4x 10x 40x

MUESTRA TINCIN

ELEMENTOS QUE
RECONOCE FUNCIN

DESCRIPCIN 4X

DESCRIPCIN 10X

DESCRIPCIN 40X

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2c.- Observe la muestra entregada con los aumentos del microscopio incluyendo inmersin. (Cuadrcula
de papel milimetrado). Anote las mediciones realizadas a cada aumento.

Cada cuadrcula mide 20 mm x 20 mm. Ubique la preparacin de manera que la cruz de lneas ms
gruesas quede en el centro preciso del campo. Cada divisin de la cuadrcula representa 1 mm

En cada aumento, cuente la cantidad de lneas que dividen a la lnea central. Anote este valor frente a
cada aumento en la tabla que sigue bajo el encabezado N DE DIVISIONES CONTADAS:

AUMENTO SEGN N DE DIVISIONES

AUMENTO REAL
LENTE OBJETIVO CONTADAS
4x
10x
40x

En cada aumento, cuente la cantidad de lneas que dividen a la lnea central. Anote este valor frente a
cada aumento en la tabla que sigue bajo el encabezado N DE DIVISIONES CONTADAS:

Calcule el aumento real de cada campo segn la siguiente frmula:

AUMENTO REAL: __________20___________

N DE DIVISIONES CONTADAS

Donde 20 corresponde al total de divisiones (mm) de la cuadrcula.

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3.- Identifique las partes del Microscopio y seale sus funciones:

NOMBRE FUNCIN
LETRA
A

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INSTRUCCIONES PARA TODAS LAS PREPARACIONES QUE OBSERVAR DURANTE
LAS SESIONES PRCTICAS DE HISTOLOGA

a) Verifique que el microscopio tenga adecuadamente conectado el enchufe en su puerto de

conexin y en el enchufe bajo su estacin de trabajo. Encienda su microscopio con el botn de
encendido (0 I) y luego con el restato (perilla <<<) aumente gradualmente la intensidad.
b) Una vez encendido su microscopio, asegrese que la lmpara est encendida
c) Enfoque en aumento 4x (lupa o aumento menor) la muestra, utilizando para ello el micro y
macromtrico cuidando de no romper la preparacin
d) Identifique los componentes, estructuras, clulas y matriz extracelular de los preparados.
e) Dibuje y rotule cada capa identificada
f) A aumento mayor (10x), identifique las clulas que componen a cada capa
g) Dibuje y rotule lo observado
h) Repita estos ltimos 2 pasos a aumento 40x
i) Baje la intensidad de la iluminacin. Si es su ltimo preparado a observar, apague el microscopio,
ponga el objetivo 4x volviendo de mayor a menor aumento, baje la platina, retire el preparado y
vuelva a dejarlo en la bandeja que est al comienzo del mesn

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BIBLIOGRAFA

BASICA

Histologa:
Genesser, F (2000). Histologa. 3a Edicin. Editorial Mdica Panamericana.
Genesser, F (2015). Histologa. 4a Edicin. Editorial Mdica Panamericana.

COMPLEMENTARIA

General:

Alberts B, Bray D, Lewis J, y cols (2000). Biologa Molecular de la Clula. 3a Edicin. Ediciones Omega,
Barcelona, Espaa.

Alberts B, Bray D, Lewis J, y cols (2004). Biologa Molecular de la Clula. 4a Edicin. Ediciones Omega,
Barcelona, Espaa.

Alberts B, Bray D, Lewis J, y cols (2014). Biologa Molecular de la Clula. 6a Edicin. Ediciones Omega,
Barcelona, Espaa.

De Robertis E D P, Hib J (2001). Biologa Celular y Molecular. 15a Edicin. Editorial El Ateneo. Buenos
Aires, Argentina.

Histologa:

Ross M, Pawlina Wojciech (2012). Histologa Texto y Atlas color con Biologa Celular y Molecular. 6a
Edicin. Editorial Mdica Panamericana. Buenos Aires, Argentina.

Ross M, Pawlina Wojciech (2015). Histology: A Text and Atlas With Correlated Cell and Molecular Biology.
7th Edition. Wolters Kluver.

Gartner L, Hiatt J (2008). Texto y Atlas de Histologa. 3a Edicin. Editorial Mdica Panamericana. Buenos
Aires, Argentina.

Ovalle WK, Nahirney PC (2013). Netters Essential Histology. 2nd Edition. Elsevier-Saunders.

Kierszenbaum A (2016). Histology and Cell Biology: An introduction to Pathology. 4th Edition. Elsevier-
Saunders.

Weather WK, Nahirney PC (2014). Functional Histology: A text and atlas. 6th Edition. Elsevier-Saunders.

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REFERENCIAS DIGITALES

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2. http://www.sinonimos.com
3. http://www.scielo.cl
4. http://www.investigacionyciencia.es
5. http://www.ncbi.nhi.org
6. http://www.medlineplus.com
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12. http://www.cincel.com
13. http://www.beic.com
14. https://www.mega.nz/

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