2017

REPORTE DE PRCTICA: Extraccin

de colorantes sintticos

Ingeniera en industrias
alimentarias

Toxicologa de alimentos

Docente; Carolee Chuzeville

Munguia

Alumna: Mara cristina

Hernndez Lpez

No. De control: 13TE0369

Teziutln, Puebla
Resumen
En la siguiente practica se presentara el mtodo para la extraccin de un colorante
y como representarlo en una cromatografa en papel e identificar el tipo de
colorante usado.

Objetivos
Que el alumno comprenda los principios qumicos involucrados en la extraccin de
colorantes y aplique la cromatografa en papel para identificar los colorantes
presentes en alimentos.

Desarrollo de la prctica

Marco terico
Colorantes

Los pigmentos se clasifican en: naturales, idnticos a los naturales y sintticos.

Los pigmentos naturales son responsables del color de los tejidos vegetales y
animales, aunque tambin se obtienen de algunos minerales. Los pigmentos
sintticos son producidos por sntesis qumica, en tanto que los idnticos a los
naturales se pueden producir por modificacin qumica de precursores naturales, o
bien a partir de procesos biotecnolgicos empleando bacterias, mohos o levaduras.
Los pigmentos o colorantes sintticos se emplean para intensificar el color perdido
durante el procesamiento de alimentos y para asegurar la intensidad y uniformidad
del producto, sin embargo su uso en alimentos ha sido siempre una fuente de
controversia debido a su posible potencial de toxicidad. Los colorantes artificiales
son en general, ms resistentes a los tratamientos trmicos, pH extremos, luz,
entre otros, que los colorantes naturales.
La NOM-118-SSA1-1994, define como colorantes a los materiales que imparten
color, obtenidos por un proceso de sntesis, extraccin o separacin, a partir de
una fuente animal, vegetal o mineral y que posteriormente se someten a pruebas
fehacientes de seguridad que lo liberan para su aplicacin en alimentos y que
directamente o a travs de su reaccin con otras sustancias son capaces de
impartir el color que les caracteriza. El Acuerdo por el que se determinan los
aditivos y coadyuvantes en alimentos, bebidas y suplementos alimenticios, su uso
y disposiciones sanitarias, publicado por Diario Oficial el 16 de julio de 2012,
describe a los colorantes como cualquier sustancia que da o restituye color a un
producto, e incluye a 23 pigmentos, colorantes y lacas con lmites de ingesta diaria
aprobada (IDA), dentro de los cuales se encuentran siete colorantes sintticos,
adems seala que la suma de los colorantes artificiales no debe exceder de 500
mg/kg de producto respetando la concentracin mxima de uso para cada uno de
ellos.

Colorantes sintticos
Se ha demostrado que los alimentos no tienen el sabor correcto si no presentan la
Coloracin adecuada, ya que el color es la primera impresin sensorial que se tiene
de un producto, incluso puede influir en la percepcin de su olor, sabor,
temperatura e incluso textura (Hall, 1958). Adems influyen en la calidad,
uniformidad, proteccin de sabores, vitaminas (por filtracin de rayos solares),
atraccin e identidad del producto. La historia del uso de colorantes se remonta a
pocas antiguas, primeramente utilizando los pigmentos extrados de plantas,
animales y suelos; tiempo despus se reportan compuestos qumicos utilizados con
la finalidad de adulterar diferentes productos, como lo cita Plinio el Viejo en la
adulteracin de vinos. Federick Accum menciona en su libro de adulteraciones en
alimentos (Treatise on Adulterations of Foods and Culinary Poisons, 1820) el caso
de pepinos pintados con sulfato de cobre o dulces coloreados intensamente con
sales de plomo (cromato de plomo).
Colorantes naturales
Ante la perspectiva de problemas toxicolgicos con colorantes sinttico, se retorna
a compuestos naturales y algunos usados desde la antigedad. Sin embargo el
hecho de ser naturales, no significa un uso indiscriminado, ya que algunos
compuestos pueden impartir propiedades indeseables; o bien ser txicos. En
trminos generales los colorantes naturales pueden ser: flavonoides, quinonoides,
quinonas, fenalonas sesquiterpeno, diterpeno, tetraterpeno, alcaloides, porfirinas y
betalainas .

Materiales y mtodos
Materiales y reactivos - Esptula
- Paquete de lunetas - Jeringa
- Colores FD&C para estndares: - Piseta
Rojo, Azul, Verde.
- Probeta graduada de 100 mL
- cido actico 5N
- Varilla de vidrio
- Hidrxido de amonio 0.5N
- Vasos de precipitados de 100 mL
- Etanol 95%
- Vasos de precipitados de 250 mL
- Papel filtro del No. 1 o 4 en pliego 3
Material de vidrio
x 15 cm
Equipo Mtodo; cromatografa
- Parrilla de calentamiento con
agitacin
 Procedimiento
Extraccin y concentracin de colorantes
1. Transferir 5 g del producto en polvo y
disolver en 20 ml de agua.

Extraccin de colorantes de lunetas

1. Separe las lunetas por color
2. Colocar 5 lunetas de un solo color en un vaso de
precipitados y adicionar 20 ml de
agua destilada, agitar suavemente
para extraer el color del confitado y
retirar inmediatamente la fraccin insoluble.

Separacin e identificacin de los colorantes por cromatografa en papel

1. Corte tiras de papel filtro de 3cm por 15 cm de largo. A una distancia de 1.5 cm
del extremo corto del papel de la parte inferior del papel filtro 20 L de cada uno
de los estndares FD&C y 50 L de los extractos que obtuvo, utilice una tira de
papel por extracto o estndar. Lave la jeringa con 5 enjuagues de etanol al 95%
seguido de 5 enjuagues con agua destilada entre cada inyeccin.
2. Seque la manchas.
3. Coloque en el vaso de precipitado de 100 a 150 mL de la fase mvil (Etanol al
50%) y posteriormente coloque la placa.
4. Procese las placas hasta que el frente se encuentre a 2 cm de la parte superior
de la placa.
5. Calcule los valores Rf para todas las manchas y compre los valores obtenidos en
los extractos con los estndares
conocidos para hacer una
identificacin tentativa, acorde con
los Rf. El valor de Rf es la relacin
de la distancia que recorre el
compuesto (Dc) de inters y el
disolvente (Dd)
Rf = Dc/Dd

Resultados

Discusin y/o comentarios

La cromatografa en papel, es un mtodo prctico de realizar para identificar los
colorantes usados o empleados que puede contener un alimento. En el caso de la
prctica los colores identificados fueron tartrazina por hacer una mencin ,estos se
pueden aadir a los alimentos bajo el uso de normas como lo pueden ser NOM,
NMX que son las principales usadas en Mxico.

Bibliografa
NOM-118-SSA1-1994. Bienes y servicios. Materias primas para alimentos,
productos de perfumera y belleza. Colorantes y pigmentos inorgnicos.
Especificaciones sanitarias.

Valle Pedro (2000) Toxicologia de alimentos. Instituto Nacional de Salud Pblica

Centro Nacional de Salud Ambiental .
 Cuestionario
1. Investigue en qu consiste la
certificacin y los requisitos que deben
cubrir los colorantes sintticos para su
uso en alimentos, acorde con la
normatividad nacional, la FDA y la
Comunidad Europea.
Colorantes Certificados son compuestos
sintticos que no se encuentran en la
naturaleza y se clasifican en provisionales y permanentes. Para poder certificarse
debe someterse una muestra de cada lote producido a anlisis por la FDA (Food
and Drug Administration) y cumplir con las normas de calidad. Estn formados por
cuatro clases qumicas bsicas:
Azo
Trifenilmetano
Xantina
ndigo.
Colorantes exentos de certificacin o reconocidas generalmente como seguras
GRAS (generally recognized as safe), son los pigmentos naturales o determinados
colorantes sintticos idnticos a los naturales. Estas sustancias se pueden utilizar
sin limitaciones excepto las de las buenas prcticas de manufactura
2. Cul es el fundamento de la cromatografa en capa fina, qu
significado tiene el valor Rf y cmo se calcula.
Fundamento
La cromatografa en capa fina (en ingls thin layer chromatography o TLC) es una
tcnica analtica rpida y sencilla, muy utilizada en un laboratorio de Qumica
Orgnica. Entre otras cosas permite:
Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar as, por
ejemplo, la efectividad de una etapa de purificacin.
Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podran ser idnticas.
Si, por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia.
Realizar el seguimiento de una reaccin. Es posible estudiar cmo desaparecen
los reactivos y cmo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber
cundo la reaccin ha acabado. La muestra a analizar se deposita cerca de un
extremo de una lmina de plstico o aluminio que previamente ha sido recubierta
de una fina capa de adsorbente (fase estacionaria). Entonces, la lmina se coloca
en una cubeta cerrada que contiene uno o varios disolventes mezclados (eluyente
o fase mvil). A medida que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a
travs del adsorbente, se produce un reparto diferencial de los productos
presentes en la muestra entre el disolvente y el adsorbente.
Determinacin del Rf
La retencin se puede explicar en base a la competencia que se establece entre el
soluto a separar y la fase mvil por adsorberse a los centros activos polares de la
fase estacionaria. As, las molculas de soluto se encuentran adsorbidas en la fase
estacionaria y a medida que se produce la elucin van siendo desplazadas por la
fase mvil. La retencin y la selectividad en la separacin dependen de los valores
respectivos de las constantes de los diferentes equilibrios qumicos que tienen
lugar, que estn en funcin de: la polaridad del compuesto, determinada por el
nmero y naturaleza de los grupos funcionales presentes. Los solutos ms polares
quedarn ms retenidos puesto que se adsorben ms firmemente a los centros
activos de la fase estacionaria, mientras que los no polares se eluirn con mayor
facilidad. naturaleza del disolvente. As, para un mismo compuesto, un aumento
en la polaridad del disolvente facilita su desplazamiento en la placa. La relacin
entre las distancias recorridas por el soluto y por el eluyente desde el origen de la
placa se conoce como Rf, y tiene un valor constante para cada compuesto en unas
condiciones cromatogrficas determinadas (adsorbente, disolvente, tamao de la
cubeta, temperatura, etc.). Debido a que es prcticamente imposible reproducir
exactamente las condiciones experimentales, la comparacin de una muestra con
otra debe realizarse eluyendo ambas en la misma placa. Para calcular el Rf se
aplica la siguiente expresin:
Rf = distancia recorrida por el compuesto (X) / distancia recorrida por el eluyente
(Y) La distancia recorrida por el compuesto se mide desde el centro de la mancha.
Si sta es excesivamente grande se obtendr un valor errneo del Rf. Se
recomienda elegir un eluyente en el que los componentes de la mezcla presenten
un Rf medio en torno a 0.30.5. Para compuestos poco polares, se debe utilizar un
disolvente apolar como el hexano. En el caso de compuestos con polaridad media,
se aconseja utilizar mezclas hexano/acetato de etilo en distintas proporciones. Los
productos ms polares, requieren disolventes ms polares como mezclas de
diclorometano/metanol en distintas proporciones.

3. Busque informacin sobre los procedimientos para la extraccin y

purificacin de colorantes artificiales.
Extraccin por medio de Solventes Orgnicos:
Cualquiera sea el solvente usado la operacin se realiza en forma similar. Por otra parte
existen en la literatura, para cada tipo de solvente, estudios experimentales sobre
temperatura ptima de la extraccin, con el fin de optimizar los resultados del proceso y
asegurar la calidad del producto obtenido. La operacin adoptada en esta etapa depende
del solvente que se utiliza. En algunas plantas se usan alcoholes como el metanol, el cual
posteriormente es removido del producto final. Se presume que el uso de tal compuesto
aumenta la eficacia de la extraccin y la separacin de los estevisidos. Sin embargo el
uso de esta en la operacin, parece ser la razn por la cual la FDA (Food and Drug
Administration) no califica a los extractos de Stevia como productos naturales y seguros.
Los mtodos aplicables si se usan esta clase de solventes son:
 Maceracin: consiste en remojar la materia prima, debidamente fragmentada,
hasta que el solvente penetre en la primera estructura celular ablandando y
disolviendo las partes solubles. El recipiente a utilizar debe ser hermtico y resistir
la accin de los solventes utilizados. Se colocan el material y solvente,
dejndoselos reposar tapados durante un perodo de 2 a 14 das con agitacin
espordica. Posteriormente se filtra el solvente que contiene los compuestos de
inters, y se prensa el residuo slido. En el caso de que la extraccin no haya sido
completa se repite la operacin.
Lixiviacin (percolacin): es uno de los procesos ms difundidos pudiendo utilizarse
para solventes orgnicos e inorgnicos en fro para preservar los compuestos
termolbiles que pudiera contener el material. Se coloca la hoja fragmentada, en
una especie de embudo y se hace pasar el solvente adecuado a travs del mismo.
Para realizar esta operacin deben tenerse en cuenta una serie precauciones, el
material slido debe estar debidamente compactado para que el eluyente pueda
atravesarlo con una lentitud adecuada, que permita el tiempo de contacto
requerido entre los solutos y el solvente.
Extraccin Soxhlet: Consta de un baln en donde se hace bullir el solvente
apropiado y sus vapores se condensan encima de la muestra, segn el
procedimiento clsico. Esta operacin se repite sucesivamente, con lo cual la
solucin contenida en el baln evaporador se va enriqueciendo con los principios
aislados. Este mtodo no es apto para trabajar con sustancias termolbiles.

Purificacin
Al igual que para la etapa anterior, se realiz una recopilacin bibliogrfica sobre todo en
revistas nacionales e internacionales de corriente principal, en donde se encontraron 3
opciones para llevar a cabo la etapa de purificacin, las cuales se detallan a continuacin:
Combinacin de membranas filtrantes: Este mtodo consta de la purificacin por
combinacin de membranas filtrantes de distinto tamao. (Fuh and Chiang, 1990)
sta consistente en el pasaje del extracto por membranas sucesivas de distinto
tamao. Inicialmente se realiza un filtrado con membranas que van desde 20 a 1
micra, luego la solucin pasa por un filtro de carbn activado y finalmente se
somete a un proceso de ultrafiltracin, diafiltracin y nanofiltracin en ese orden.
Los filtros retienen pigmentos y sustancia de alto peso molecular de hasta 150
Daltons, con un rendimiento del 20% en concentrado donde estn presentes los
glucsidos de inters.
Adsorcin con zeolitas modificadas: Consiste en la clarificacin del extracto por
pasaje del mismo por una columna de zeolitas, previamente modificadas. sta se
logra intercambiando los iones sodio por iones calcio , bario o magnesio usando
siempre cloruro como anin para facilitar su eliminacin. En el caso del Bario
provoca un sabor salado indeseable en el edulcorante. Tambin introdujeron
amonio cuaternario en la resina convencional utilizada (Shi, 2002), y se observ
 que el mecanismo de adsorcin y decoloracin se basa en interacciones
hidrofbicas, pero la decoloracin, depende de las interacciones hidrofbicas y del
intercambio inico. El extracto de stevia circula por el lecho de zeolitas modificadas
en forma ascendente quedando retenidos los pigmentos por adsorcin en la
superficie de la zeolita, logrndose una decoloracin de hasta 90 % pero con
retencin de edulcorantes. Posteriormente se demostr a travs de la
experimentacin que la mejor relacin decoloracin-retencin se lograba utilizando
un extracto con 7% de edulcorante.
Resinas de Intercambio Inico: Este mtodo se basa en una extraccin acuosa de
las hojas a temperatura controlada seguida del pasaje del lquido de extraccin a
travs de una resina (Res.1) que retiene selectivamente los principios edulcorantes
que posteriormente se recuperan por elusin de la columna con una mezcla
hidroalcohlica, completndose la purificacin por pasajes sucesivos a travs de
una resina de intercambio catinico , una resina de intercambio aninica y una
columna de carbn activado granulado, obtenindose un extracto incoloro. .
Tambin se realizaron pruebas utilizando etanos tales como metanol, etanol y
dioxano para la etapa de extraccin obteniendo jarabes altamente coloreados, de
los cuales no se logr precipitar el estevisido por adicin de alcohol ni cristalizarlo
por evaporacin. El rendimiento de proceso es de 5% sobre la base de las hojas
secas.
4. Dibuje la estructura de los colorantes de la tabla 3.1 y discuta las ventajas y
desventajas del uso de colorantes artificiales.

Tartrazina

Amarillo ocaso
 Azul brillante

Indigot
ina

Eritrosina

Rojo allura

Verde rpido
Ventajas y desventajas de los colorantes;

Los colorantes son sustancias txicas, por lo tanto el proceso de la tincin generalmente
resulta letal para los microorganismos por as mencionarlo , provocando su inmovilizacin,
lo cual puede significar una ventaja o desventaja para el investigador segn sean los
objetivos con la sustancia colorante, algunos colorantes solo tienen afecto letal para
determinadas especies o gneros bacterianos, siendo utilizados como constituyentes de
medios de cultivo selectivo para impedir el desarrollo de microorganismos indeseables y
favorecer el desarrollo de las especies que nos interesa estudiar. Por ejemplo: el verde de
malaquita.