BIOQUMICA CLNICA QUMICA ORGNICA I NOMBRES: Aguirre Claudia, Molina Priscila, Narvez Michael, Pazmio Joyce GRUPO: 5 TEMA: Espectroscopia UV- visible La espectrometra ultravioleta-visible o espectrofotometra UV-vis implica espectroscopia de fotones en la regin de radiacin ultravioleta-visible. Utiliza la luz en los rangos visible y adyacentes (UV) cercano y el infrarrojo (IR) cercano. La regin del ultravioleta del espectro electromagntico se extiende del extremo de longitud de onda corta de la regin visible (410-7m) al extremo de longitud de onda larga de la regin de rayos X (10-8m), sin embargo el intervalo de 210-7m a 410-7m es la porcin de mayor inters para los qumicos orgnicos.
En esta regin del espectro electromagntico, las molculas se someten a transiciones
electrnicas. Cuando se irradia una molcula orgnica con energa electromagntica, la radiacin pasa a travs de la muestra o es absorbida, dependiendo de su energa, al irradiar esta molcula con UV, la energa absorbida corresponde a la cantidad necesaria para promover un electrn de un orbital a otro en una molcula conjugada (McMurry, 2008). Luz Ultravioleta y transiciones electrnicas Las longitudes de onda de la luz UV absorbida por una molcula se determinan por las diferencias de energa electrnicas entre los orbitales de la molcula. Los enlaces tienen electrones que pueden ser excitados ms fcilmente y promovidos a orbitales de energa ms altos. Los sistemas conjugados normalmente tienen orbitales vacantes de baja energa, por lo que las transiciones electrnicas hacia estos orbitales dan lugar a absorciones caractersticas en la regin UV. Un fotn con la cantidad de energa adecuada puede excitar a un electrn desde el orbital enlazante al orbital antienlazante *, esta transicin se conoce como . (Wade, 2004) La longitud de onda necesaria para efectuar esta transicin en una molcula conjugada depende de la diferencia de energa entre HOMO y LUMO, la cual depende de la naturaleza del sistema conjugado (McMurry, 2008). De esta manera se puede determinar que a medida que un compuesto contenga mayor cantidad de dobles enlaces conjugados, absorber mayor longitud de onda en el UV. Cuando no existe interaccin en los dobles enlaces, los dobles enlaces aislados no contribuyen a desplazar las absorciones en el UV a longitudes de onda superiores (Wade, 2004). Obtencin de un espectro de ultravioleta Para medir el espectro ultravioleta de un compuesto, la muestra se disuelve en un disolvente, etanol, que no absorba por encima de 200 nm, esta muestra se coloca en una celda de cuarzo y parte de disolvente se coloca en una celda de referencia. El espectrmetro UV compara cantidades de luz transmitidas a travs del haz de muestra con la cantidad del haz de referencia que pasa a travs de la celda de referencia para compensar cualquier absorcin de luz debido a la celda y al disolvente. La luz pasa a travs de un monocromador y la dispersa descomponindola en un amplio espectro y selecciona una longitud de onda y se divide en dos haces, las cuales pasan por una celda de muestra y el disolvente por una celda de referencia. El detector mide la relacin de intensidad entre el haz de referencia y el haz de la muestra (Wade, 2004). Ley de Lambert-Beer Es el resumen de dos leyes que permite relacionar la fraccin de la radiacin absorbida con la concentracin del analto y el espesor del medio. La muestra absorbe luz a una longitud de onda determinada, el haz de muestra (IS) es menos intenso que el de referencia (Ir) y su relacin es mayor a I. Cuando no hay absorcin esta relacin es 1.
= ( ) =
Donde: c= concentracin de la muestra (mol/L) l= espacio que recorre la luz a travs de la celda (cm) = absorcin molar de la muestra (medida de intensidad con que la muestra absorbe la luz a esa longitud de onda). El espectro UV-visible muestra picos y valles amplios, sus caractersticas esenciales son: 1. La longitud de onda de mxima absorbancia. 2. Valor de la absorcin molar de cada mximo. BIBLIOGRAFA McMurry, J. (2008). Qumica Orgnica (7ma. ed.). Mxico, D.F., Mxico: Cengage Learning Editores. Wade, L. J. (2004). Qumica Orgnica (5ta. ed.). Madrid: PEARSON EDUCACIN.