LE NOYAU

Pr BELBACHIR
 INTRODUCTION

Caractristiques des cellules Eucaryotes

Plus gros organite cellulaire
Visible en Interphase
Disparait au cours de la division cellulaire
Contient linformation gntique
 CARACTRISTIQUES MORPHOLOGIQUES DU NOYAU

Taille
Forme
Nombre
Disposition
Nombre de nuclole
Aspects morphologiques particuliers
 TAILLE DU NOYAU

6 % du volume de la cellule
Taille 5 m
Ajoute la taille de la cellule: Rapport nuclo-cytoplasmique
R N/C
 TAILLE DU NOYAU

6 % du volume de la cellule
Taille 5 m
Ajoute la taille de la cellule: Rapport nuclo-cytoplasmique
R N/C
R N/C: les
cellules jeunes indiffrencies et les cellules
cancreuses
R N/C: les cellules matures
 TAILLE DU NOYAU
 FORME DU NOYAU

Arrondie: Lymphocytes
Allonge: Cellule musculaire
Polylobe: Polynuclaires neutrophiles
Irrgulire: Cliv (lymphocytes activs)
Encoch (Cancer de la thyrode)
 FORME DU NOYAU
 NOMBRE DE NOYAU

Gnralement unique
Parfois double - cellules binucls: Hpatocytes
Multiples: Macrophages, Ostoclastes
Aucun: Hmaties
 NOMBRE DE NOYAU
 DISPOSITION DU NOYAU

Centrale: lymphocytes, fibroblastes

Excentre: plasmocytes
Refoul en priphrie: adipocytes
En position basale: Epithlium de type respiratoire, cellules
exocrines
 DISPOSITION DU NOYAU
 NOMBRE DE NUCLEOLE

Nuclole:
Absent
Prsent: unique
Prsent: multiple
 ASPECTS MORPHOLOGIQUES PARTICULIERS

Chromatine en rayons de roue: plasmocytes

Aspects en verres dpolis
Rainures
Chevauchements
Inclusions
 ASPECTS MORPHOLOGIQUES PARTICULIERS
 ASPECTS MORPHOLOGIQUES PARTICULIERS
 CONSTITUANTS DU NOYAU

Plusieurs constituants:
La membrane nuclaire
Les pores nuclaires
Le nuclole
Le nucloplasme
La chromatine
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MEMBRANE NUCLEAIRE

Dlimite le noyau
Spare le contenu du noyau du cytoplasme
Membrane double: externe et interne
Double couche de lipides associe des protines
(Membrane interne en contact avec la lamine +++)
Comporte une Ca++-ATPase
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MEMBRANE NUCLEAIRE

Spares par un espace de 20 40 nm environ

Perce de milliers de pores o elles se
rejoignent
Se continue avec les citernes du RE
Transport actif des ions calcique du cytosol
Ca++: - Echanges nuclo-cytoplasmiques
- Fonctions nuclaires

Q: Transport actif?
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MEMBRANE NUCLEAIRE
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MEMBRANE NUCLEAIRE

Membrane externe
Au contact du cytoplasme
6 8 nm paisseur
Porte des ribosomes
Continuit avec REG
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MEMBRANE NUCLEAIRE

Membrane interne
En contact avec le nucloplasme et la chromatine
6 8 nm paisseur
Tapisse par la lamina nuclaire
Plusieurs protines (rcepteurs) transmembranaires
Rcepteurs aux lamines
Rcepteurs aux histones
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MEMBRANE NUCLEAIRE

Disparaitau cours de la mitose

Phnomne de phosphorylation des protines
Phnomnes de dphosphorylation des protines
Lamines ++++
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MEMBRANE NUCLEAIRE

ESPACE PERI-NUCLEAIRE

Entre la membrane nuclaire externe et interne.

En continuit avec la lumire du REG.
30 50 nm paisseur.
Lieu de stockage:
Ca+.
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LES PORES NUCLEAIRES

Zones dinterruption de la membrane nuclaire

Sites privilgis dchanges nuclo-cytoplasmique
Chaque pore renferme une structure constitue
de quelques dizaines de protines: le complexe du
pore nuclaire CPN un bouchon sur le pore
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LES PORES NUCLEAIRES

Environ
120 nm de diamtre et 200 nm de hauteur
Ce complexe rgule le passage de certaines
macromolcules et particules
Systme complexe: Complexe du pore nuclaire
CPN
Stabilis
par des protines de la matrice nuclaire
dont les lamines
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LES PORES NUCLEAIRES
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LES PORES NUCLEAIRES

Dlimit par 2 anneaux de 120 nm

Anneau cytosolique et nucloplasmique
50 protines diffrentes : Nucloporines
Nucloporines :
Dans les sous units (globulaires) des anneaux:
8 sous units globulaires par anneau
Au niveau des fibrilles et des filaments.
Reconnaissance et guidage des molcules travers le
complexe
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LES PORES NUCLEAIRES

Anneau cytosolique et nucloplasmique

Do partent 16 (8x2) bras radiaires
Samarre un orifice le transporteur central
3me anneaux plus petit dans le nucloplasme
Reli lanneau nucloplasmique par des filaments radiaires
cage
En relation avec un rseau sous membranaire: structure en
treillis
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LES PORES NUCLEAIRES
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LES PORES NUCLEAIRES
 CONSTITUANTS DU NOYAU: ROLE CPN

Mtabolisme + fonctions nuclaires:

Echanges permanents cytoplasme - noyau
Pores nuclaires +++

Enzymes, nuclotides, protines de structure, protines rgulatrices, ions..

ARNm
Units ribosomiaux
 CONSTITUANTS DU NOYAU:TRANSPORT CYTOSOL-NOYAU

Exemple des protines ribosomiques:

Fabriques dans le cytosol
Importes dans le noyau
Assemblage en particules avec l'ARN ribosomique
Export vers le cytosol comme sous-units ribosomiques

Chaque tape ncessite un transport slectif au travers

de l'enveloppe nuclaire +++
 CONSTITUANTS DU NOYAU:TRANSPORT CYTOSOL-NOYAU

Transport bidirectionnel cytosol / noyau.

Diffusion passive : Faible poids molculaire
Nuclotides, ions, enzymes
Diffusion actif : Poids molculaire lev
Du cytosol vers le noyau:
Protines fonctionnant dans le noyau
Histones
ADN et ARN polymrases
Protines rgulatrices de gnes et les protines de maturation de l'ARN
Du noyau vers le cytosol:
ARNt et des ARNm synthtiss dans le compartiment nuclaire
Sous-units ribosomiales
 CONSTITUANTS DU NOYAU:TRANSPORT CYTOSOL-NOYAU

Petites molcules (PM < 40 kDa): ions, nuclotides, petites protines

Grosses molcules (PM > 40 kDa): grosses protines, ARN
 CONSTITUANTS DU NOYAU:TRANSPORT CYTOSOL-NOYAU

En 4 tapes
successives
 CONSTITUANTS DU NOYAU:TRANSPORT CYTOSOL-NOYAU

Complexe du pore nuclaire: nombreuses units protines

Fibrilles de part et dautres
Forment un panier sur le versant nuclaire
Pas dobstruction: espace suffisant
 CONSTITUANTS DU NOYAU:TRANSPORT CYTOSOL-NOYAU

Protine comporte un identifiant

Signal de localisation nuclaire NLS
1 ou 2 squences riches en lysine et
arginine
Signal ou identifiant:
Protines en direction du
noyau
Liaison une protine importine
(rcepteur de transport nuclaire NTR)
Complexe protines NLS

En pratique: du cytosol vers le noyau

 CONSTITUANTS DU NOYAU:TRANSPORT CYTOSOL-NOYAU

Fibrilles: courtes rptitions dAA

(phnylalanine et de glycine)
Les rptitions FG : sites de liaison
aux rcepteurs d'importation
Dplacement le long du pore:
fixation et dissociation rptitive
Dans le noyau: libration des
protines
Retour du rcepteur de
transport nuclaire vers le cytosol

En pratique: du cytosol vers le noyau

 CONSTITUANTS DU NOYAU:TRANSPORT CYTOSOL-NOYAU

Fibrilles: courtes rptitions dAA

(phnylalanine et de glycine)
Les rptitions FG : sites de liaison
aux rcepteurs d'importation
Dplacement le long du pore:
fixation et dissociation rptitive
Dans le noyau: libration des
protines
Retour du rcepteur de
transport nuclaire vers le cytosol

Transport consommateur dnergie +++

En pratique: du cytosol vers le noyau

 CONSTITUANTS DU NOYAU:TRANSPORT CYTOSOL-NOYAU

Lnergie provient de l'hydrolyse d'une

GTP
Ran: Protine existant sous 2 formes
lie un GTP ou un GDP
Liaison NTR + RAN-GTP:
-> Libration de la protine
Retour du NTR /RAN-GTP vers le
cytosol.
Hydrolyse du RAN-GTP
Dissociation en NTR et RAN-GDP

Conversion dclenche par deux protines rgulatrices spcifiques du Ran

Protine d'activation de la GTPase: GAP . l'hydrolyse du GTP: de Ran-GTP Ran-GDP
Facteur d'change de la guanine: GEF = transforme Ran-GDP en Ran-GTP
En pratique: du cytosol vers le noyau
 CONSTITUANTS DU NOYAU:TRANSPORT CYTOSOL-NOYAU
Noyau vers le cytosol

ARNt
ARNm
S/s ribosomiques

Cytosol vers le noyau

Histones
ARN polymrase
ADN polymrase

Du cytosol vers le noyau - Du noyau vers le cytosol

mcanismes. NLS NES. Importine Exportine.
Liaison avec Ran-GTP toujours dans le noyau
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LE NUCLEOPLASME

Gel renfermant :
Matrice nuclaire
Nuclole
Chromatine
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MATRICE NUCLEAIRE

Composition biochimique du cytoplasme

Lamines
Molcules insolubles du nucloplasme (enzymes,
protines, ribonuclo-protines).
Constituants fibreux du nuclosquelette
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MATRICE
NUCLEAIRE
La lamina nuclaire:
Tapisse la face interne de lenveloppe nuclaire
Sauf au niveau des pores
Un entrelacement de filaments protiques
Soutien mcanique et maintien de la forme de lenveloppe
nuclaire
La lamina contribueraient organiser le matriel gntique de
manire assurer son bon fonctionnement
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MATRICE NUCLEAIRE

La lamina nuclaire:
Filaments de lamine formant une structure grillage.
Membres de la famille des protines du cytosquelette.
Protines de type filaments intermdiaires.
2 types de lamines :
- type A (lamine A et lamine C): dans toutes les cellules.
- type B (lamine B1 et lamine B2): seulement dans les cellules
indiffrencies.
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MATRICE NUCLEAIRE

Rle de la lamina nuclaire:

Stabilise lenveloppe nuclaire
Stabilise les pores nuclaires travers leur arrangement spatial
Maintien de la forme du noyau
Aide la rsistance mcanique de lenveloppe nuclaire
Fixation de la chromatine
Organisation et fonctionnement du gnome: Rle dans la
rplication de lADN et transcription travers la fixation des
facteurs de transcription
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MATRICE NUCLEAIRE

Disparait au cours de la mitose

Phnomne de phosphorylation des protines
Par de protines kinases Changement conformationnels
Liaisons protiques plus faibles Rupture plus facile
Phnomnes de dphosphorylation des protines
Formation de la membrane
A partir du REG
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA MATRICE NUCLEAIRE

La lamina nuclaire:
Anomalies des lamines: laminopathies.
Maladies gntiques rares: dont la progria.
Snescence acclre:
o Peau fripe
o Chute des dents
o Chute des cheveux
Causes:
o Instabilit nuclaire + anomalie de la division cellulaire? fripe
o Augmentation de la mort cellulaire?
o Dfaut de rparation tissulaire?
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LE NUCLEOLE

Souvent unique
Parfois deux nucloles, ou plus, selon lespce et la phase du cycle
reproductif de la cellule
Cellule au repos diminution du nombre des nucloles
Synthse protique augmentation de la taille du nuclole
Incompltement cern par la chromatine
Disparat en mitose
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LE NUCLEOLE

En microscopie optique :
Organite nuclaire sphrique ou ovode
Nest pas limit par une membrane
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LE NUCLEOLE
En microscopie lectronique:
Rgions claires:
Le centre fibrillaire:
ADN ribosomal
Situes sur les CHS 13,14,15,21,22
Forment des boucles
Transcription des ARNr
Rgions sombres:
Un composant fibrillaire dense:
Entourant +/- le centre fibrillaire
Maturation des ARN
Un composant granulaire :
Autour des 2 autres structures
Particules pr-ribosomiques
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LE NUCLEOLE

Structure intranuclaire la + visible en interphase

Synthse de lARN ribosomique (ARNr)
A partir de linformation de lADN de plusieurs Chr
Dans le noyau:
ARN ribosomique + protines* : sous-units ribosomiques
Direction le cytoplasme
Une grande sous-unit et une petite se combinent pour
former un ribosome

* importes du cytoplasme.
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA CHROMATINE

Forme dcondense des chromosomes

Deux types de chromatine
Euchromatine ou chromatine diffuse claire
Htrochromatine ou chromatine condense
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA CHROMATINE

Euchromatine ou chromatine diffuse

Rpartie dans le nucloplasme
Active sur le plan transcriptionnel
10% de la chromatine totale

Htrochromatine ou chromatine condense

 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA CHROMATINE

Htrochromatine ou chromatine condense:

En priphrie du noyau (contre la lamina nuclaire)
Autour du nuclole
Disperse en mottes dans le nucloplasme
90% de la chromatine totale
Inactive sur le plan transcriptionnel
Situe proximit des centromres et des tlomres
 CONSTITUANTS DU NOYAU: LA CHROMATINE

Structure complexe constitue :

ADN
Protines
~ 2 mtres dADN
Contenus dans un noyau de quelques microns !!!
Compaction de lADN:
Protines ont rle important +++
 COMPACTION DE LADN

2m

Protines Histone: octamres H2A H2B H3 H4

+ molcule H1
 COMPACTION DE LADN

Protines: Histone
 COMPACTION DE LADN

2m

Aspect en collier de perle

 COMPACTION DE LADN

Nuclosome

ADN: 2 tours autour de la protines dhistone

+ protine H1 de liaison entre les nuclosomes
 COMPACTION DE LADN

2 Aspects
Lche: Euchromatine.

Compact: Htrochromatine
 COMPACTION DE LADN

Dernier niveau de compactage: enroulement

 COMPACTION DE LADN

Dernier niveau de compactage: enroulement

chromatide
 LE CYCLE CELLULAIRE

Interphase
Mitose
Q: Combien de phases?
 LE CYCLE CELLULAIRE
 LE CYCLE CELLULAIRE

Interphase:
Phase G1 (Gap 1)
Phase S (synthse de lADN)
Phase G2 (Gap 2)

Mitose
3 types de cellules
Celluleslabiles (actives)
Cellules quiescentes
G0
Cellules permanentes
 LE CYCLE CELLULAIRE
Interphase:
G1 (intervalle):
Mtabolisme normal
Croissance cellulaire (taille critique)
Prparation la rplication de lADN
S:
Synthse et rplication de lADN
G2 :
Croissance
Prparation la mitose
Rplication des centrosomes
Mitose
 LE CYCLE CELLULAIRE

Plusieurspoints de contrle
Points de contrle G1
Points de contrle G2
Points de contrle M

Q: Pourquoi?
 LE CYCLE CELLULAIRE
Plusieurspoints de contrle.
Points de contrle G1
Points de contrle G2
Points de contrle M.
Pourquoi?
 LE CYCLE CELLULAIRE: POINT DE CONTRLE - POURQUOI?

Vrification du bon droulement

des tapes du cycle cellulaire
Si anomalies: arrt du cycle
Jusqu rparation
Points de contrle G1:
ADN altr?
Environnement favorable
 LE CYCLE CELLULAIRE: POINT DE CONTRLE - POURQUOI?

Vrification du bon droulement

des tapes du cycle cellulaire
Si anomalies: arrt du cycle
Jusqu rparation
Points de contrle G2:
ADN endommag?
ADN mal rpliqu?
 LE CYCLE CELLULAIRE: POINT DE CONTRLE - POURQUOI?

Vrification du bon droulement

des tapes du cycle cellulaire
Si anomalies: arrt du cycle
Jusqu rparation
Points de contrle M:
Tous les chromosomes attachs
correctement au fuseau
mitotique?
 LE CYCLE CELLULAIRE: POINTS DE CONTROLE

Points de contrle
Complexe protique:
Cyclin-dependant Kinase Cdk
Cyclin
Plusieurs type de Cyclin: G1 G2/M - M
 LE CYCLE CELLULAIRE: POINTS DE CONTROLE

Activation du Complexe Cyclin-cdk

Initialement inactif
Phosphorylation sur un site par Cdk-activating kinase Cak
Et dphosphrylation sur un autre site
 LE CYCLE CELLULAIRE: POINTS DE CONTROLE

Points de contrle
Complexe protique:
Cyclin-dependant Cdk
Cyclin
Plusieurs type de Cyclin
 LE CYCLE CELLULAIRE ET MOYENS DE REGULATION

Complexe
Points de contrle
Activateurs (nombreux)
Bcl2 (anti-apoptotique)
E2F
Inhibiteurs (nombreux)
p21
p16
Rb
p53
 LE CYCLE CELLULAIRE ET MOYENS DE REGULATION : p53 + p21

Ex: ADN altr

P21 stimule
par la p53

Action de la p21
sur la G1/S-Cdk

Arrt du cycle
cellulaire en G1
 LE CYCLE CELLULAIRE ET MOYENS DE REGULATION : p53

Actions de la p53:
Sur la p21 inhibiteur de la Cdk:
Inhibition du complexe Cyclin-Cdk
Pas de phosphorylation de la protine Rb
Arrt du cycle cellulaire

Sur le facteur de croissance Bcl-2:

Inhibition du Bcl-2 (anti-apoptotique)
Apoptose cellulaire
LE CYCLE CELLULAIRE ET MOYENS DE REGULATION :
p53
Mutation de la p53:
Rle cl et central dans le contrle du cycle cellulaire
Nombreux cancers humains +++
 LE CYCLE CELLULAIRE ET MOYENS DE REGULATION : Rb

Complexe Rb-E2F
Phosphorylation du Rb: libration de E2F
Poursuite du cycle cellulaire
 LE CYCLE CELLULAIRE ET MOYENS DE REGULATION : Rb

Mutation au niveau du gne Rb

Dveloppement de tumeur oculaire chez les nourrissons
Le rtinoblastome
 DIVISION CELLULAIRE

Pendant la mitoses:
Disparition de la membrane nuclaire
Condensation en chromosomes du matriel gntique
Disparition du nuclole
 LE NOYAU INTERPHASIQUE: INTERPHASE

Croissance cellulaire
Augmentation en taille +++
Activits mtaboliques
Rplication de lADN
Les chromosomes non
individualiss
Sous forme de chromatine
lintrieur du noyau
Le centrosome est compos de
2 centrioles perpendiculaires
 LA DIVISION CELLULAIRE / MITOSE: LA PROPHASE

Chromosomes individualiss
Chromosomes paissis - court
2 chromatides lis entre elles
au niveau des centomres
Centrosomes + microtubules
migrent vers les ples
 LA MITOSE: LA PROMETAPHASE

Dbut brutal
Disparition de membrane
nuclaire
Attachement au fuseau
mitotique des chromosomes
par les Kinetochores
Possibilit de mouvement actif
 DISPARITION DE LA MEMBRANE NUCLEAIRE

Phosphorylation des protines du pore nuclaire + lamine

Dsassemblage de la membrane nuclaire
 LA MITOSE: LES KINETOCHORES

Lient les chromosomes au fuseau mitotique

Rails: permet le glissement et la migration sur le fuseau mitotique
 LA MITOSE: LA METAPHASE

Alignement des Chr

lquateur mi-chemin entre
les asters du fuseau
Chaque kinetochore associ
son Chr se lie en direction dun
des ples du fuseau
La sparation des chromatides
est bloqu tant que les Chr:
Ne sont pas tous aligns
Ne sont pas relis aux ples
 LA MITOSE: LA METAPHASE - LE CARYOTYPE -

EX CARYOTYPE.
 LA MITOSE: LANAPHASE

Sparation des Chr en deux

De manire synchronise
Monte vers les ples le long
des microtubules
Chr tirs vers le ple
Microtubules rtrcissent
Traction au niveau des asters
Sparation des Chr
 LA MITOSE: LANAPHASE
 LA MITOSE: LA TELOPHASE

Les Chr arrivent aux ples

Formation dune nouvelle enveloppe
nuclaire autour de chaque lot de
Chr
Formation de 2 noyaux
Formation de lanneau de
contraction:
Prlude la Cytokinse ou
cytodirse
Dcondensation progressive des Chr
 FORMATION DE LA MEMBRANE NUCLEAIRE

R-phosphorylation des protines du pore nuclaire + lamine

Rsassemblage de la membrane nuclaire
 LANNEAU DE CONTRACTION

Structure transitoire du cytosquelette

Durant la mitose
Le fuseau mitotique (microtubules) est gnr en premier pour
spar les Chr rpliqus
Lanneau de contraction (filaments dactine et de myosine) est gnr
pour diviser la cellule en 2
 LA MITOSE: LA CYTOKINESE

Contraction de lanneau de
contraction
Pincement de la cellule
Cration de 2 cellules filles
Chacune avec 1 noyau
 LA MITOSE: APPLICATIONS EN PATHOLOGIE CANCEREUSE

Les mitoses anormales

Elment diagnostic capital en pathologie cancreuse
 LA MITOSE: APPLICATIONS EN PATHOLOGIE CANCEREUSE

Les mitoses anormales

Elment diagnostic capital en pathologie cancreuse
 LA MITOSE: APPLICATIONS EN PATHOLOGIE CANCEREUSE

Le compte mitotique: facteur pronostic +++

Pathologie cancreuse
LA MITOSE: APPLICATIONS EN PATHOLOGIE INFLAMMATOIRE

Dans certaines situations pathologiques: influence de certains stimulis

Division du noyau sans cytokinse
Dautres thories: + fusion de cellules
 LA MEIOSE
REFERENCES
ESSENTIAL CELL BIOLOGY, 4th Edition
Alberts et al
CELL AND MOLECULAR BIOLOGY: Concepts and
Experiments, 6th Edition
G. Karp
BIOLOGIE, 9th Edition
Campbell et al
Biology, 6th Edition
Raven Johnson