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CENTRO DE CIENCIAS BSICAS

DEPARTAMENTO DE QUMICA
BIOQUIMICA I
PRCTICA #5: SEPARACIN DE AMINOACIDOS POR CROMATOGRAFIA EN
PAPEL

MC MARA CRISTINA SERNA GUTIRREZ

LICENCIATURA EN BIOTECNOLOGA
3ER SEMESTRE

ADOLFO ANDRADE DE LA CRUZ

09/10/17
RESULTADOS
Leucina
= 4.25
= 5.5
4.25
= =
5.5
= 0.73

cido Asprtico
= 1.25
= 5.5
1.25
= =
5.5
= 0.23

DISCUSIONES
Con los datos obtenidos y los clculos realizados se obtuvieron las correspondientes
razones de frentes (Rf) y se dispuso a compararlos con la bibliografa para poder identificar
los aminocidos. Sin embargo al revisar tablas de Rf se pudo notar que estos valores son
muy variados en distintas bibliografas, los cambios ms drsticos corresponden a distintos
sistemas de solventes, o incluso distintas concentraciones de un mismo sistema. An
despus de seleccionar las tablas de bibliografas que manejan el sistema de solventes al
utilizado en esta prctica (Butanol-Agua-cido Actico), se encuentran los valores
expuestos en la Tabla 1.
Aminocido Rf Experimental Rf Terico 1 Rf Terico 2 Rf Terico 3
(Fieser, 2005) (Rivera, 2005) (Walton, 2005)
Leucina 0.73 0.79 0.61 0.47
cido Asprtico 0.23 0.32 0.16 0.21
Tabla 1. Valores Rf experimentales y tericos.
Al ser muy difcil ubicar correctamente a la Leucina y al cido Asprtico encontrados
mediante la fase experimental en ninguna de las tablas tericas, se encontraron ciertos
inconvenientes o limitaciones de este sistema cromatogrfico. Y es que los valores de Rf
encontrados en las bibliografas slo deben ser tomados como una gua, ya que es
prcticamente imposible el reproducir exactamente todas las condiciones del experimento
a las que se usaron para obtener los valores de las tablas. Es por eso que muchos autores
prefieren no dar valores de referencia y que cada laboratorio, con muestras de aminocidos
purificados, obtenga sus propios valores de referencia en las condiciones del experimento
(Voet, 2004).
Tambin hay que remarcar que las propiedades fsicas del o los solventes son de suma
importancia, ya que de ello depende la velocidad de migracin de la fase mvil que arrastra
y separa a los aminocidos. Velocidad que tambin es correspondiente a la polaridad de
tales aminocidos, los no polares se desplazan ms rpido que las no polares. Esto debido a
su afinidad con el solvente. (Fieser, 2005). De tal manera se puede notar que la leucina (no
polar) tiene mayor afinidad con nuestro solvente menos polar, mostrando una mayor
distancia recorrida, ocurriendo lo contrario con el cido asprtico (polar, cargado
negativamente).
De igual manera hay que notar que existen sistemas de solventes que no resuelven algunos
aminocidos, es decir, que se obtienen valores Rf bastante semejantes en estos
aminocidos. Para resolverlos hay que realizar ms de una corrida, para obtener Rfs ms
confiables (Rivera, 2005)

CONCLUSIONES
Con esta prctica se reconoce que la cromatografa en papel puede ser de gran ayuda a la
hora de separar e identificar aminocidos. Aunque para mejores resultados se recomienda
la elaboracin de una tabla de Rf propia. Y, a pesar de que actualmente existan tcnicas
ms precisas y especficas para la identificacin de aminocidos, la cromatografa en papel
o capa fina seguir utilizndose por su facilidad y bajo costo.

BIBLIOGRAFA
Fieser, L. 2005. Experimentos de Qumica Orgnica. 7 ed. Revert. Espaa. Pgs. 159-160

Rivera, E. 2005. Prcticas de Bioqumica Descriptiva. 1 ed. UniSon. Mxico. Pgs. 174-176

Voet, D. & Voet, D. 2004. Bioqumica. 3 ed. Panamericana. Uruguay. Pgs. 150-153

Walton, H. & Reyes, J. 2005. Anlisis Qumico e Instrumental Moderno. 6 ed. Revert.
Espaa. Pg. 344.

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