Brucella

Caractersticas generales:
Son parsitos intracelulares obligados
Entre las especies ms importantes se encuentra: B. melitensis (cabras),
B.suis (cerdos), B. abortus (bovinos) y B. canis (perros). Aunque todas
stas se denominan como especies con estudios de ADN se demostr que
slo hay una especie B. melitensis, las dems son sub-especies, sin
embargo para efectos didcticos quedan entendidas todas como diferentes
especies que suelen infectar a los animales antes nombrados.
La enfermedad en seres humanos es conocida cmo Brucelosis (fiebre
ondulante o fiebre de malta) caracterizada por una etapa bacterimica
aguda acompaada de una fase crnica prolongada.
Bacilos o cocos, predominando la forma cocobacilar corta
GRAM- pero se tien con irregularidad
Aerobios, No mviles y no forman esporas

Lesiones patolgicas
La principal lesin es la inflamacin de tejido reticuloendotelial teniendo en cuenta que la
celula blanco de sta bacteria intracelular son los PMN y monocitos, presenta una
notable proliferacin de leucocitos mononucleares, exudacin de firbina, necrosis
coagulativa y fibrosis. En la brucelosis hay formacin de ndulos granulomatosos que se
desarrollan y pasan a formar abscesos en: tejido linftico, hgado, bazo, medula sea, y
otras partes del sistema reticuloendotelial, suelen causar,osteomielitis, meningitis y
colecistitis.
Cuadro Clnico
Periodo de incubacin de una a cuatro semanas, tiene un inicio insidioso caracterizado por
malestar general, fiebre, debilidad, mialgias generalizadas y diaforesis. La fiebre aumenta
por la tarde y deciende en la noche, se acompaa de sudoracin abudante. Puede haber
sntomas digestivos y nerviosos. Auemnto de tamao de ganglios linfticos, el bazo se
vuelve palpable. Despus de sta fase inicial aguda puede presentarse una etapa crnica
con sntomas psiconeurticos.
Fuentes de infeccin segn va

Va oral: las bacterias pasan al aparato digestivo, siendo la fuente principal de esta
va de infeccin la ingestin de leche no pasteurizada o de productos lcteos,
(queso elaborado con leche no pasteurizada de cabra), carnes poco cocidas y
aerosoles.
 Contacto directo: las bacterias ingresan al organismo por heridas en la piel, o la
conjuntiva ocular, o la mucosa nasal. La fuente principal de estas infecciones es la
manipulacin de animales infectados o sus productos, afectando de esta manera a
veterinarios, matarifes, investigadores de laboratorio y cuidadores de animales.
Va inhalatoria: las bacterias ingresan por la mucosa nasal. La fuente principal de
bacterias que ingresan por esta va son aerosoles en laboratorios con muestras
contaminadas, vacunas vivas, aerosoles en establos y lanas, afectando a personal
de laboratorio, trabajadores de la lana y aseadores de establos.
Va parenteral: se da principalmente por inoculacin accidental en laboratorios, o
en ambientes de trabajo veterinario, y tambin puede darse la contaminacin de
transfusiones que pueden afectar a cualquier persona.
Patogenia y Diseminacin

Cuando las bacterias ingresan en el organismo, son fagocitadas por los neutrfilos
y monocitos y transportadas por la va hematgena a los sinusoides del hgado, bazo,
mdula sea y ganglios linfticos, donde se multiplican dentro de las vacuolas de los
fagocitos circulantes y tisulares. Los mecanismos de ingreso de la bacteria a estas clulas
no estn suficientemente aclarados aunque se presume que el LPS y las protenas de la
membrana externa podran participar en los mismos, mediante receptores tipo manosa o
integrinas, respectivamente. Brucella consigue invadir y persistir en el interior de
las clulas mediante la inhibicin de los mecanismos celulares de muerte celular
programada (apoptosis). La supervivencia de Brucella dentro de las clulas se ha asociado
con la sntesis de enzimas antioxidantes y a la produccin de GMP (guanosina
5monofosfato) y adenina, que inhiben la fusin entre el fagosoma y el lisosoma,
la degranulacin, la activacin del sistema mieloperoxidasa-haluro y la produccin
del factor de necrosis tumoral (TNF-).
La aparicin de la enfermedad depende de la capacidad del husped para restringir
esta multiplicacin. Las especies de Brucella son patgenas intracelulares facultativas,
propiedad que las mantiene protegidas de la accin de los antibiticos y de los
mecanismos dependientes de anticuerpos siendo sto su principal factor de
patogenicidad. Esta capacidad de supervivencia intracelular determina el curso ondulante
de la enfermedad, su tendencia a presentar recadas y evolucionar a formas crnicas.

Diagnstico

Se diagnostica generalmente mediante la deteccin de anticuerpos especficos

contra Brucella en sangre por seroaglutinacin. Tambin por aislamiento del patgeno
mediante hemocultivo. La PCR (PolymeraseChainReaction) la cual es altamente especfica
e incluso sirve para distinguir entre las diferentes especies de Brucella, pero su costo hace
que la seroaglutinacin siga siendo la tcnica ms utilizada.
 Diagnstico microbiolgico

1. Muestra: sangre, medula sea, orina, bilis, LCR, exudados y material de biopsias

- Examen directo: Gram con coloracin irregular hay cocobacilos gram + y gram -

2. Bacteriolgico del microorganismo: En las infecciones recientes, el hemocultivo resulta

positivo en el 100 % de los casos, en las formas crnicas, el aislamiento resulta bastante
difcil. El crecimiento de las brucelas es lento.

3. Cultivo: El medio clsico de RuizCastaeda, que utiliza una fase slida y otra lquida, es
el ms apropiado para el diagnstico. En la mayora de los procesos agudos, tras incubar el
medio 2-4 das, es posible observar en la fase slida pequeas colonias que se deslizan por
el agar enforma que recuerdan las lgrimas de cera resbalando por la vela.

- Para muestras contaminadas se utilizan medios selectivos como Thayermartin

- Subcultivo y aspecto colonial: El subcultivo del medio difsico o del frasco procedente
del aparato automtico, en medio con agar-sangre o agar-chocolate, muestra el
crecimiento, al cabo de 48 horas, de pequeas colonias brillantes, de diferente tamao y
de color miel claro. Si no se observan cuidadosamente las placas, en casos con crecimiento
de escaso nmero de colonias, se puede falsear errneamente algn diagnstico. Tras la
tincin de Gram de estas colonias para observar su aspecto caracterstico, se realizar la
reaccin de la oxidasa (positiva) y aglutinacin con suero especfico frente a Brucella,
suficiente para identificar el aislamiento.

3. Serologa (la ms importante para el diagnostico)

* La seroaglutinacin de Wright lenta o de tubo es la tcnica usual. Se realiza en tubos o

en placa de microtitulacin. Una reaccin positiva indica contacto previo con la
enfermedad. Un ttulo superior a 1/80 se considera significativo en el medio urbano y en
reas no endmicas., pero cuando las aglutininas ceden su puesto a Ac no aglutinantes
hay que recurrir a otras tcnicas.

* PRUEBA DEL ROSA DE BENGALA: Aglutinacin en porta, enfrentando directamente el

suero a un Ag brucelar. Valor predictivo positivo muy alto, 99 % en los paciente con
brucelosis aguda o crnica; un resultado negativo excluye prcticamente la enfermedad.

Aglutinacin:

En sus diferentes modalidades, es la prueba ms utilizada debido a su rapidez y

sensibilidad adems de permitir una aproximacin diagnstica inmediata. De especial
utilidad en zonas no endmicas, en las que se realiza como mtodo de "despistaje". Utiliza
como antgeno una suspensin bacteriana a la que se ha aadido el colorante rosa de
bengala, enfrentndola al suero sin diluir del enfermo. Proporciona una aproximacin
diagnstica en pocos minutos con una sensibilidad y especificidad muy altas. Presenta
elevado grado de correlacin con la seroaglutinacin y, por su simplicidad, es muy til
como prueba de despistaje inicial o screening. Sus falsos negativos se limitan a enfermos
con procesos de pocos das de evolucin y a algunos casos de enfermedad de curso muy
prolongado.

* PRUEBA DE COOMBS ANTI-BRUCELLA: Se utiliza en paciente con brucelosis crnica en

los que la seroaglutinacin es negativa por la presencia de Ac IgG no aglutinantes.

Seroaglutinacin tras tratamiento del suero con 2-mercaptoetanol: es una modificacin

de la seroaglutinacin en la que se usa solucin salina al 0,85% con 0,1M de 2-
mercaptoetanol. Este compuesto es capaz de destruir las molculas de IgM, perdiendo
stas su capacidad aglutinante, sin interferir con las de IgG que son las que se cuantifican.
Aunque se consideraba la persistencia de anticuerpos resistentes al tratamiento con 2-
mercaptoetanol como indicativa de actividad de la enfermedad, esta afirmacin clsica es
hoy muy cuestionable y en la actualidad prcticamente no se utiliza. En general, la prctica
de la seroaglutinacin y la prueba de Coombs conjuntamente, permiten el diagnstico de
la mayora de los casos. La negatividad de ambas

* ELISA: Estudio individualizado de los anticuerpos, que supone una alternativa pruebas,
salvo en los primeros das de la enfermedad excluye la brucelosis. La limitacin ms
importante de las pruebas de aglutinacin es que no permiten conocer el estado de
actividad de la brucelosis.

*BRUCELLACAPT: la deteccin anticuerpos aglutinantes y no aglutinantes de las clases

IgG e IgA, propios de las fases evolucionadas de la enfermedad. El uso de BRUCELLACAPT
est especialmente diseado para el diagnstico de la brucelosis crnica. Posee gran
sensibilidad y especificidad a la serologa convencional. Estas tcnicas son muy sensibles.
Se ha obtenido una buena correlacin de los niveles de IgM con los ttulos de
seroaglutinacin, y de los IgG con los de la prueba de Coombs.

Estrategia para la realizacin de las pruebas serolgicas:

Prueba del rosa de Bengala como screening.

Seroaglutinacin Wright en caso de positividad.
Prueba de Coombs en caso de ttulos bajos o negativos de esta ltima.
ELISA para el estudio de Ig especficas.

Cadena epidemiolgica

AGENTE: B. melitensis ,B. suis, B. canis, B. abortus

RESERVORIO: Animales y humanos afectados

PUERTA DE SALIDA: Via gastrointestinal, renal y secreciones

 TRANSMISIN: Contacto directo con los animales o sus productos, o ingestion de
los mismos

PUERTA DE ENTRADA: Via oral, respiratoria y cutnea

HUESPED: animales y humanos en contacto con alimentos contaminados o

animales infectados.

Medidas de prevencin

Las formas ms importantes de reducir el riesgo de brucelosis son:

Comer productos lcteos, como quesos y leche, pasteurizados ya que son los
alimentos el vehiculo ms usual de contaminacin. Las personas que manipulan
carne deben utilizar gafas y ropas protectoras y proteger cualquier herida en la
piel de una infeccin.
La segunda medida ms importante es la inmunizacin activa de novillos, con la
cepa 19 viva no virulenta y la deteccin de animales infectados para controlar la
infeccin de raz. En caso de que el animal est infectado es necesario el sacrifico
del mismo para evitar la diseminacin. Aun no existen vacunas para el humano.