Ao del buen servicio al ciudadano

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL
CIENCIAS BIOLOGICAS

CULTIVOS PUROS
CURSO :
MICROBIOLOGIA
ALUMNO :
FARFN PASAPERA BRANDON YAMIR
SEMESTRE :
2017-I
DOCENTE :
Blgo.-McBlgo. M. Dorothy Torres de Len
Contenido
INTRODUCCIN ........................................................................................................................ 3
CULTIVOS PUROS ..................................................................................................................... 4
1. Historia .............................................................................................................................. 4
2. CARACTERSTICAS DE LOS CULTIVOS PUROS ..................................................... 4
3. Mtodos para obtener los cultivos puros ......................................................................... 5
3.1. Mtodo de siembra para aislamiento por agotamiento o en estra ............................ 5
3.2. Tcnica del cultivo por enriquecimiento ................................................................... 6
4. Conservacin de cultivos puros......................................................................................... 6
5. Mantenimiento ................................................................................................................. 6
CONCLUSION: ............................................................................................................................ 7
Bibliografa .................................................................................................................................... 7
 INTRODUCCIN

Desde el momento en que el medio de cultivo se poda esterilizar con rigor,

tericamente caba la posibilidad de aislar cultivos puros. Nos obstante,
aunque Pasteur haba sealado que los diferentes procesos de fermentacin
y putrefaccin estaban asociados con el crecimiento de microorganismo
morfolgicamente diferentes (ej. Levaduras con la fermentacin alcohlica,
diferentes bacterias con las fermentaciones lctica, actica y butrica),
algunos cientficos mantenan que todos los microorganismos, y
particularmente todas las bacterias, eran variantes de un nico tipo bsico
(teora del pleomorfismo). Por otro lado estaba la teora del monomorfismo,
segn la cual haba un amplio nmero de organismos diferentes que deban
poder obtenerse en cultivo puro.
Fundamentalmente, cualquier mtodo se basa en sembrar una nica clula
microbiana en un medio de cultivo estril en recipiente adecuado. Por
desgracia, el pequeo tamao de la mayora de los microorganismos hace
imposible la separacin mecnica de sus clulas de una en una. Es cierto que
los ltimos perfeccionamientos en micro manipulacin han hecho esto
posible, pero es una tcnica muy especializada y difcil para uso general.
Se han descubierto otros mtodos basados en la dilucin de una muestra; con
ellos se llegan a conseguir clulas aisladas que al crecer dan origen a un
cultivo puro.
 CULTIVOS PUROS

Son aquellos que contienen un solo tipo de microorganismo. El modo de

obtener estos cultivos consiste en obtener colonias aisladas, que provienen
de una sola clula (son clones).
1. HISTORIA
El problema de separar una especie microbiana de las otras, de tal
manera que pueda crecer en cultivo puro, fue solucionado en el
laboratorio del famoso microbilogo alemn Roberto Koch (1843-
1910). Koch, tal como lo hicieron otros bilogos, descubri que
debera emplearse un medio slido en lugar del lquido si se deseaban
obtener cultivos microbianos puros. Como ocurre frecuentemente en
la ciencia, los descubrimientos de Koch y su grupo estaban basados en
las observaciones de algn otro investigador.
En 1872, Johann Samuel Schroeter not que las bacterias crecan sobre
la superficie de materiales diversos, incluyendo la superficie de una
papa cortada. Aqu las bacterias daban lugar a la formacin de una
masa relativamente grande a la que despus se le denomin colonia.
Cuando estas colonias individuales fueron examinadas al microscopio,
se encontr que cada una de ellas estaba formada por cantidades
enormes de bacterias; pero el asunto ms importante era que todos los
organismos de una misma colonia pertenecan a la misma especie.
Aparentemente, las clulas individuales haban cado del aire, tocando
la superficie de la papa en un cierto lugar, multiplicndose ah hasta
producir millones de individuos, con lo que las colonias se hacan
visibles a simple vista. Todas las bacterias de una sola colonia habran
derivado de una sola clula, y, por lo tanto, cada colonia constitua un
cultivo puro.

2. CARACTERSTICAS DE LOS CULTIVOS PUROS

- Las colonias deben ser iguales en forma, tamao y color.
- Que no existan formas inhibidas.
- Al microscopio deben tener un aspecto comn.
- Tiene que tener iguales propiedades tintoriales
- Deben ser bioqumicamente y fisiolgicamente iguales.
- Una regla importante es no coger nunca de la primera colonia.
3. MTODOS PARA OBTENER LOS CULTIVOS PUROS
3.1. Mtodo de siembra para aislamiento por agotamiento o en estra
Materiales:
Placa Petri con medio de cultivo
Muestra (slida o lquida)
Asa de siembra de platino
Con el asa estril tomamos la muestra y hacemos extensiones
en la placa. Volvemos a esterilizar el asa de siembra y
extendemos parte de la extensin anterior en otra direccin.
Volvemos a esterilizar el asa de siembra y volvemos a extender
parte de la segunda extensin en otra direccin. Esterilizamos y
repetimos la operacin. Incubamos a 37 durante 24 horas y, en
la primera zona, habr un amasijo de clulas. En la segunda,
parte de la primera zona estar mejor extendida, y en la tercera
y en la 4 mejor an. Si tomamos una colonia y la ponemos sobre
una placa Petri, tendremos un cultivo puro.

3.1.1. Estra nica: depositamos la muestra lo ms alejado de

nosotros y realizamos la siembra en forma de zig-zag. De
esta forma vamos descargando la muestra del asa. Es
importante no volver a repasar el trozo de medio de cultivo
que ya hemos sembrado. Para conseguir que al final de la
estra tengamos colonias aisladas es importante que al
principio hagamos la estra ms junta y que la cantidad de
muestra tomada en el asa sea la adecuada.
3.1.2. Estra mltiple: en esta tcnica de aislamiento por
agotamiento se realizan varias estras. Esto se puede llevar a
cabo flameando el asa de paso en paso, es decir, de estra en
estra, o sin flamear el asa. Adems, dependiendo de la forma
en la que hagamos las estras, existen varios tipos de
estriados:
3.1.2.1. Estriado sobre cuatro cuadrantes: Se utiliza cuando
queremos conservar algn microorganismo que nos
interesa. Consiste en sembrar uno a uno los
cuadrantes, sin flamear el asa entre estra y estra, de
tal forma que en el cuarto cuadrante, al ir agotando la
muestra del asa, tendremos los microorganismos
aislados.
 3.1.2.2. Esterilizando asa entre siembra y siembra: consiste en
realizar un primer estriado en uno de los extremos de
la placa, esterilizar el asa, girar un poco la placa y
realizar otro estriado introduciendo el asa en el primer
estriado para ir arrastrando la muestra y volver a
repetir esta operacin con un tercer estriado.

3.2. Tcnica del cultivo por enriquecimiento

Consiste en ajustar las condiciones de cultivo para seleccionar
el microorganismo que nos interesa aislar. Ejemplo: nos interesa
aislar bacterias fotoauttrofas. Tomamos un matraz con agua y
sales y lo incubamos a la luz, de manera que crezcan las
bacterias fotoauttrofas. Ejemplo: queremos aislar bacterias
quimiolittrofas del azufre; ponemos azufre, CO2 como fuente
de carbono (disuelto en agua) e incubamos en la oscuridad para
eliminar fotoauttrofos. Para incubar enterobactrias como
enterobacter hay que incubar a 37, mientras que para incubar
otra enterobacteria, E. Coli, hay que incubar a 45.
4. CONSERVACIN DE CULTIVOS PUROS
- Almacenamiento a temperaturas bajas: Ponemos las bacterias con
glicerol al 20 - 50% a -70 C y podemos mantenerlas as durante
aos y dcadas.
- Liofilizacin: es un mtodo ms eficaz. En un vial de liofilizacin
ponemos leche desnatada y las bacterias, lo congelamos, lo
llevamos al liofilizador y lo sometemos al proceso de liofilizacin.
La liofilizacin es una evaporacin por condensacin. Se basa en
el punto triple del agua; podemos pasar de slido a gas. El agua se
evapora y queda un polvillo formado por la leche y las bacterias.
Cerramos el bote y podemos almacenar el cultivo durante dcadas.

5. MANTENIMIENTO
- Debemos transferir peridicamente, ya que los tubos de agar se
secan, se evapora el agua.
- Se debe cubrir con parafina, con lo cual la transferencia se puede
hacer ms tarde, disminuye el metabolismo y tardan en envejecer.
 - Se disminuye la temperatura, congelamos las clulas. Para proteger
las clulas y que no se formen cristales que las daen se usa el
glicerol

CONCLUSION:
- Los cultivos puros permiten obtener organismos especficos para
su posterior manipulacin.

Bibliografa
Tortora, G. J., Funke, B. R., & Case., C. L. (2007). Introduccin a la microbiologa. Buenos Aires:
Mdica Panamericana.

Wilkinson, J. (1976). Introduccin a la Microbiologa. Madrid: Hermann Blume.