Carrera Profesional de Ingeniera Ambiental

PracticaN3: CLASES TOXICOLOGICAS AGUDAS OECD

N423

Asignatura: Ecotoxicologia Ambiental

Ciclo : VI
Ao colectivo: 2017-I
Docente: Mg. Apesteguia Infantes, Jos Alfonso.
Realizado por:
Desposorio Hurtado, Renato.
Diaz Gonzales, Sebastian.
Galarreta Soto, Angela.
Goyzueta Penadillo, Eddie.
Mendoza Elias, Carolyne.
Puchulan Ninayahuar, Sandra.
Romero Sotomayor, Ayrton.

Villa El Salvador- Lima

2017
 I. INTRODUCCION

La toxicologa es el estudio de los venenos o, en una definicin ms precisa, la identificacin

y cuantificacin de los efectos adversos asociados a la exposicin a agentes fsicos, sustancias
qumicas y otras situaciones. La toxicologa abarca desde estudios de investigacin bsica
sobre el mecanismo de accin de los agentes txicos hasta la elaboracin e interpretacin de
pruebas normalizadas para determinar las propiedades txicas de los agentes. Aporta una
importante informacin tanto a la medicina como a la epidemiologa de cara a comprender la
etiologa de las enfermedades, as como sobre la plausibilidad de las asociaciones que se
observan entre stas y las exposiciones, incluidas las exposiciones profesionales.

La accin de un agente txico sobre un organismo se traduce en una alteracin del estado
fisiolgico o de salud. Segn el grado de alteracin del individuo, la intoxicacin se puede
calificar como aguda, crnica o recidivante.

La toxicidad aguda se refiere al desarrollo rpido de sntomas y efectos despus de la aplicacin

de una dosis nica relativamente alta o comnmente se relaciona con los daos inmediatos
generados por dosis nicas suficientemente grandes. La observacin de los animales se lleva a
cabo despus de la administracin de la sustancia y dura hasta 14 das, despus de los cuales
los animales son sacrificados y analizados anatomopatolgicamente. Para cumplir con el
principio de las 3 R (reduccin, refinamiento y reemplazo) se han aprobado tres mtodos de
reduccin y refinamiento de la toxicidad aguda: el de la dosis fija, el de la clase txica aguda y
el mtodo arriba y abajo.

Existen dos modos principales a travs de los cuales pueden ejercer los productos qumicos su
toxicidad. Los efectos locales tienen lugar en la zona del cuerpo que ha estado en contacto con
el producto. As ocurren las quemaduras provocadas por cidos o los daos pulmonares por
inhalacin de gases reactivos.2 Los efectos sistmicos tienen lugar despus o una vez que el
producto se ha absorbido y distribuido desde el punto por el que penetr hasta otras zonas del
organismo. Casi todos los compuestos causan efectos sistmicos, aunque algunos pueden
causar ambos. Tal es el caso del aditivo tetraetilo de plomo para gasolinas, que provoca efectos
cutneos en la zona de contacto y por otra parte, se absorbe y causa efectos caractersticos sobre
el sistema nervioso central y en otros rganos.
 II. OBJETIVOS

2.1.Objetivo general:

Determinar la DL50 de estricnina en una rata y conocer los efectos

producidos antes de llegar a la muerte.

2.2.Objetivos especficos:

Conocer la cantidad adecuada de estricnina para preparar una dosis que sea
la adecuada para matar a una rata.
Observar y anotar los efectos posteriores a la aplicacin de la estricnina.

III. MARCO TEORICO

La principal misin de la toxicologa es entender cmo afectan ciertas sustancias qumicas al

organismo de los seres vivos y encontrar los niveles de estas sustancias a partir de los cuales
un compuesto pasa de ser seguro a no serlo. Esta meta es muy difcil de alcanzar puesto que lo
que es inocuo para una persona podra ser letal para otra.

El conocimiento de la toxicidad de las sustancias, solo puede obtenerse, a partir de las

previsiones tericas, por 2 vas: estudios retrospectivos de casos de intoxicacin y mediante
ensayos experimentales con animales y plantas. Slo en muy contadas ocasiones, se efecta
experimentacin con humanos debido a las implicaciones ticas y legales que ello tiene; de
estudios retrospectivos de intoxicaciones ocurridas en humanos, se obtienen los datos de
toxicidad estimada (Hernandez Guijo, 2010).
Generalmente, los ensayos de toxicidad se llevan a cabo sobre animales, de manera que con el
propsito de extrapolar la informacin animal a los humanos, los toxiclogos usan el mximo
nivel de exposicin que no provoca efectos adversos detectables de ninguna clase, en cualquier
ensayo animal, y luego establecen el denominado margen de seguridad, que es una
separacin establecida arbitrariamente entre el umbral de una sustancia encontrada por medio
de experimentos sobre animales, y el nivel de exposicin estimado como seguro para los
humanos (Hernandez Guijo, 2010).

Clases de intoxicacin

La accin de un agente txico sobre un organismo se traduce en una alteracin del estado
fisiolgico o de salud. Segn el grado de alteracin del individuo, la intoxicacin se puede
calificar como aguda, crnica o recidivante.

Aguda: consiste en la aparicin de un cuadro clnico patolgico, a veces dramtico,

por la adsorcin de una o varias dosis o exposiciones a un agente durante un perodo
de exposicin inferior a 24 horas. En algunos casos como lo que ocurre con el fsforo,
los efectos podran aparecer a la semana de su ingestin o exposicin.
Subaguda: significa un menor grado de aparatosidad de la intoxicacin, produciendo
algunos trastornos a nivel biolgico pero sin manifestarse de forma aparente y clara.
Generalmente como consecuencia de un tiempo de exposicin no demasiado grande
al agente.
Crnica: se produce como consecuencia de la repetida absorcin de un txico, siendo
el tiempo de exposicin especialmente alto (>90 das). A veces esta intoxicacin se
produce por la absorcin de cantidades pequeas de agente txico pero, ante las
sucesivas exposiciones, se produce acumulacin en algn rgano o tejido. No suele
 manifestarse (estado subclnico) hasta que llega el momento en que, por un estado
fisiolgico ms bajo o un posible movimiento del agente txico, se manifiesta a largo
plazo. Generalmente, esto suele ocurrir en nuestros das con el uso de plaguicidas,
ciertos compuestos qumicos y por efecto de la Contaminacin Ambiental.
Recidivante: conducen al individuo a un estado de carencia biolgica cada vez mayor
que va mermando su capacidad de recuperacin de manera que su restitucin es cada
vez ms deficiente.

IV. METODOS

2.1.Materiales

RATAS DE LABORATORIO

El ratn de laboratorio es un roedor,

usualmente de la especie Mus musculus,
que se utiliza para la investigacin
cientfica. Su cariotipo est compuesto por
40 cromosomas y suelen ser albinos.

ESTRICNINA

La estricnina es un alcaloide de la nuez

vmica y de otras especies del
gnero Strychnos. Se utiliza habitualmente
como pesticida para matar pequeos
vertebrados, en particular pjaros y
roedores.

CANULA

Tubo pequeo de goma u otro material

que se aplica a diversos aparatos mdicos
y de laboratorio, como el que se emplea
en medicina para evacuar o introducir
lquidos en el cuerpo.
 SONDA PLASTICA

Una sonda es un aparejo que se emplea

para la exploracin de las cavidades del
cuerpo o para llevar ciertas sustancias
hacia ellas.

V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Paso 1:

Seleccionar la especie animal con la que se trabajar, en este caso, la

especie animal son 3 ratas nulparas entre 8 y 12 meses.

Paso 2:

Cogemos la primera rata , por la parte trasera del animal (pellejo del
cuello), e instantneamente le estiramos la cola ;se le administra la
dosis de 5 mg/kg colocando la jeringa en posicin recta.
Paso 3:
Despus de unos minutos de ingerida la dosis se le extender el cuerpo
para que la sustancia siga introducindose en el organismo del animal.

Paso 4:
Aislaremos cada rata para observar lo que sucede con cada
una al ingerir la sustancia toxica y las reacciones que genera.

Paso 5:

Observaremos las reacciones de cada rata y tomaremos el tiempo

en que mueren cada una de ellas.
Paso 6:

Pasado unos minutos anotar el tiempo de muerte, y fijarse

sus palpitaciones.

Paso 7:

Se procede a la apertura del roedor con una hoja de afeitar o bistur,

por el centro del estmago.

Paso 8:

Finalmente se extrae los rganos para visualizar los

efectos de la estricnina
VI. CLCULOS Y RESULTADOS

6.1. Clculos

Calculo de la DL50:

Peso de las ratas: 150 gramos

Tenemos de dato que la estricnina es daina, por lo tanto, usaremos:

5 1

150

= 0.75

Ahora, en el frasco de solucin de estricnina viene a 200mg%, entonces:

250 100

0.75

= 0.375

Se prepara la solucin en una jeringa, completando con 2.5 ml de Agua, solo para
que el lquido pueda ingresar con facilidad al sistema digestivo de la rata.

= . + .

6.2. Resultados

RATA 1 RATA 2 RATA 3

Temblor 3:11 1:24 3:35
Convulsin 3:54 4:30 4:25
Letargia 6:05 4:50 7:00
Sueo 7:21 - 8:30
Coma 7:40 - 8:42
Muerte 8:02 5:00 9:10
VII. DISCUSIN

Segn (Lazo, 2009), el animal de experimentacin, se puede observar que al

aplicarse la estricnina, este pasara por las siguientes periodos:

Periodo de hiperreflexia: se dan respuestas exageradas, inespecficas en el

animal: inquietud o estados de quietud, estados de rigidez en el msculo
esqueltico, prurito generalizado, micro convulsiones, hipersecrecin salival,
inestabilidad en el deambular.

Periodo convulsivo: cualquier estimulo conllevara a espasmos de varios

planos musculares perdindose toda coordinacin (es caracterstico la rigidez
de la cola), agitacin, convulsiones tnico/clnicas (segundos), rigidez de los
msculos flexores y extensores, la estimulacin ms ligera tal como tocar la
mesa o un pequeo aplauso hace que empiece la convulsin, colapso y
pataleos, respuesta exagerada a algunos sonidos.

Periodo de parlisis: caracterizado por la parlisis de los msculos

intercostales, trismus, aflojamiento de esfnteres, apnea y por consiguiente la
muerte del animal por asfixia.....este momento puede ser violento o tardo.

Adems, segn (Gonzales, 2010) y cmo especifica en el anexo 1, la dosis

letal media (DL50) en ratas es de 3 mg/kg; el perodo entre la ingestin y la
presentacin de los sntomas va de 30 minutos a 1 hora. El rigor mortis se
manifiesta ms rpido de lo usual. Sangre oscura por la asfixia.

VIII. CONCLUSIONES
La cantidad adecuada de estricnina fue de 1.25ml para la DL50 de
50mg/Kg.
Comparando los tres ensayos se dedujo que dentro de los 2 primeros
minutos se presentara el primer efecto que es el temblor, seguido de
convulsiones, letargia, sueo, como y finalmente a los 8 minutos morir.
 IX. BIBLIOGRAFIA

Cordero, A. L. (2000). Soluciones Qumicas. INACAP.

Gonzales, J. (2010). Principios de toxicologa veterinaria. Bogot: Laboratorias Erma S.A.

Lazo, L. (2009). Prcticas de vas de laboratorio. Lima.

Mnica Salas, C. M. (Marzo 2015). Soluciones en Qumica. Universidad Nacional de Catamarca.

Vivas, P. (2016). Analisis de quimica. Recuperado de

http://analisisdequimica.blogspot.pe/2016/04/objetivo-4-las-soluciones-
concentracion.html.

X. CUESTIONARIO
1. Cmo se coge a un animal para la administracin oral?

En caso de ratones el animal debe ser sujetado realizando una pinza en la base de la
cola con el dedo meique y la palma de la mano. Luego se debe tomar el pliegue
cutneo dorsal del cuello con los dedos ndice y anular. Se debe garantizar con la
cavidad oral y el cuello est en un ngulo igual o mayor a 60 grados.

En caso de ratas el animal debe ser sujetado realizando una pinza en la zona del cuello
con los dedos ndice y anular dirigindose de lateral a medial. Con el resto de la mano
y dedos se sujeta al animal de la porcin proximal del abdomen.

2. Cul es la concentracin letal de estricnina para un hombre de 80 kg?

Para la dosis de 5mg/kg

5 1
400 80

La concentracin letal de estricnina para un hombre de 80 kg es 400mg.

XI. ANEXOs