You are on page 1of 3

Mtodos

Para la cuantificacin de casena primero se realiz la extraccin de la casena de 50 ml de leche


descremada, se coloc el vaso de precipitados en bao mara controlando la temperatura hasta alcanzar los
40C. Despus se agreg cido actico al 10% hasta llegar al punto isoelctrico (pH 4,6) para que precipite la
protena.

Se filtr la solucin en un vaso de precipitados y se desech el sobrenadante, luego se volvi a filtrar con 50
ml de agua destilada y se repiti este paso dos veces.

Se coloc el sobrante de casena en una toalla de papel de codina para que termine de eliminarse el exceso
de humedad.

De la casena obtenida se pesaron 0,5 g para diluirlos en un tubo de ensayo con 500 l de agua destilada y
despus se agregaron aproximadamente 0,8 ml de NaOH 0.1N hasta llegar a un pH 10 y se complet a 1,5 ml
de solucin con agua destilada.

Se realizaron los tubos 1-8 con ayuda del ayudante para poder obtener la curva patrn.

Para los tubos 9 y 10 se utilizaron las cantidades de agua y solucin de casena detalladas en la gua y de cada
tubo se sacaron 100 l para mezclarlos con 9,9 ml de agua destilada y as obtener una solucin diluida tanto
del tubo 9 como del 10.

A cada uno de los 4 tubos que se obtuvieron se le agrego el reactivo de Lowry, se agitaron y se dejaron
incubar por 10 minutos, posteriormente se agreg el reactivo de Folin a cada tubo y se dej incubar por 35
minutos.

Por ltimo se llevaron 3 ml de las soluciones al espectrofotmetro para obtener la absorbancia a 550 m y
con los datos obtenidos realizo el anlisis de datos.

Resultados

Tabla 1. Curva patrn

Concentracin g/ml Absorbancia


0 0
0,05 0,083
0,1 0,202
0,2 0,361
0,4 0,641
0,7 0,921
0,9 1,112
1,2 1,432
Absorbancia vs Concentracin
1.6

1.4

1.2

0.8

0.6

0.4 y = 1,1677x + 0,0758


0.2
R = 0,9875
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4

Figura 1. Curva patrn, ecuacin y R

Tabla 2. Tubos 9 y 10 de casena

Tubo Absorbancia
9 1,399
10 2,062
9 diluido 0,203
10 diluido 0,111
Figura 2. Ubicacin de los datos de los tubos 9 y 10 en la curva patrn.

Aplicando la frmula:

cx 0,0758 1,1677 x

Y reemplazando x por los datos de la absorbancia de los tubos 9 y 10 tanto diluidos como no diluidos se
tiene:

Tubo 9: c9 0,0758 1,1677 1,399

g
c9 1, 709
ml

Tubo 9 diluido: c9dil . 0,0758 1,1677 0, 203

g
c9 dil . 0,313
ml

Tubo 10: c10 0,0758 1,1677 2,062

g
c10 2, 484
ml

Tubo 10 diluido: c10dil . 0,0758 1,1677 0,111

g
c10 dil . 0, 205
ml
Conclusiones

En el experimento se pudieron aplicar los fundamentos de solubilidad de protenas para obtener la casena
de la leche (en este caso descremada) de vaca en su forma precipitada, adems se aplicaron mtodos
colorimtricos para determinar la concentracin de la misma (casena aislada) obteniendo distintos
resultados tanto en su forma concentrada como diluida, habiendo utilizado una mayor concentracin en el
tubo 9 en forma diluida debido a que el volumen utilizado de casena es mayor que en el tubo 10.

You might also like