“UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA DE

ICA”
FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA

INFORME DEL SEGUNDO LABORATORIO:

METABOLISMO BACTERIANO

PRESENTADO POR:

Laura Lucas Karol.

Saldaña Anchante Daily.
Apaza Quichua Carlos.
Gutiérrez Misael.
Yauricassa Angela.
Saravia Yoselyn.
Canales Heidi
Yuri elfer

ICA – PERÙ

2017
INDICE:
 INTRODUCCION
las células de los microorganismos, al igual que las de todos los seres vivos,
por medio de su metabolismo incorporan y transforman los diversos
compuestos obtenidos del medio ambiente, compuestos requeridos para vivir,
para su crecimiento y para su reproducciones estas transformaciones
participan diferentes enzimas que catalizan las reacciones de oxidación
,reducción, hidrolisis, transferencia de grupos, isomerización y síntesis, dando
lugar a la degradación de los compuestos incorporados durante el catabolismo
y a la síntesis de nuevos compuestos durante el anabolismo.
Las exoenzimas son secretadas por la célula y actúan fuera de ella sobre el
sustrato, disminuyendo el tamaño de las moléculas complejas en el medio
ambiente, hasta lograr un tamaño que pueda difundir al interior de la célula,
donde servirán de sustrato a las endoenzimas.
Asimismo, cada grupo de microorganismos muestra una capacidad enzimática
diferente para transformar los compuestos, regida por la constitución genética y
por factores ambientales. Pueden poseer una bacteria reducida de enzimas
actuando sobre pocos sustratos o pueden presentar una amplia variedad de
sistemas enzimáticos actuando sobre una gran diversidad de sustratos.
 OBJETIVOS
Objetivos generales:
 Conocer y comprender los procedimientos y fundamentación de las pruebas
bioquímicas como herramienta en los procesos bacterianos.

Objetivos específicos:
 Conocer las principales pruebas bioquímicas utilizadas para la
identificación de los microorganismos
 Aprender el fundamento bioquímico de cada una de las pruebas.
 Interpretar el resultado de las reacciones de acuerdo a la reacción
colorimétrica.
 Marco teórico
Metabolismo bacteriano:
El metabolismo bacteriano se define como el conjunto de procesos por los
cuales un microorganismo obtiene la energía y los nutrientes que necesita para
vivir y reproducirse. Los microorganismos utilizan numerosos tipos de
estrategias metabólicas distintas y las especies pueden a menudo distinguirse
en base a estas estrategias. Las características metabólicas específicas de un
microorganismo constituyen el principal criterio para determinar su papel
ecológico, su responsabilidad en los ciclos biogeoquímicos y su utilidad en los
procesos industriales.
Las principales funciones del metabolismo son:
 Formar las subunidades que luego serán utilizadas en la síntesis de
macromoléculas.
 Proporcionar la energía necesaria para todos aquellos procesos que la
requieran como transporte activo, movilidad, biosíntesis, etc.

Medios de cultivo:
Un medio de cultivo es una técnica de laboratorio (véase microbiología) que
consta de un gel o una solución que contiene los nutrientes necesarios para
permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento
de virus, microorganismos, células, tejidos vegetales o incluso
pequeñas plantas. Según lo que se quiera hacer crecer, el medio requerirá
unas u otras condiciones. Generalmente se presentan desecados en forma de
polvo fino o granular antes de ser preparados; ya preparados pueden
encontrarse en estado sólido, semisólido o líquido. El objetivo último del cultivo
es variado: antibiograma, identificación, multiplicación
 Materiales para la experiencia:
CALDO NUTRITIVO:
Medio de cultivo utilizado para
propósitos generales, para el desarrollo
de microorganismos con escasos
requerimientos nutricionales. Estos
pueden ser: lactosado,glucosado y
peptonado.
TSI:
Medio universalmente empleado para la
diferenciación de enterobacterias, en
base a la fermentación de glucosa,
lactosa, sacarosa y a la producción de
ácido sulfhídrico.

INDOL:
El indol es un compuesto que se genera
mediante la desaminación reductiva
del triptófano y esta reacción es llevada a
cabo por algunas bacterias que poseen las
enzimas denominadas en su conjunto
triptofanasas.

LIA:
Medio de cultivo utilizado para
diferenciar microorganismos,
especialmente Salmonella spp., basado
en la decarboxilación / desaminación de
la lisina y en la producción de ácido
sulfhídrico.

CITRATO DE SIMMONS:
Simmons Citrate Agar (agar citrato
Simmons) es un medio de cultivo para la
diferenciación de bacterias gram
negativas mediante la utilización
de citrato.

AGAR:
El agar o agar-agar es una sustancia
gelatinosa no animal de origen marino.
Su uso principal es como medio de
cultivo en microbiología; también se usa
como laxante, espesante para sopas,
gelatinas vegetales, helados y algunos
postres y como agente aclarador de la
cerveza.
 PRUEBAS BIOQUIMICAS
Metabolismo-carbohidrato:
 Producción de ácido y gas

 Agente: escheriechicoli
 Medio: caldo lactosado
 Siembra por agitación
 Reposar de 24 a 48 horas a una temperatura de 37°.
Lectura:
Pasado ese tiempo pueden ocurrir dos cosas:
 En el primer caso es que el color inicial no varié y esto me indicara
presencia de gas ya que a la vez aparecerán burbujas.
 En el segundo caso si el color varia de rojo a amarillo hay presencia de
acidez.
Resultado:

Como observamos el color no vario y a la vez hay una burbuja por lo tanto se
me indica que hay presencia de gas.
 Producción de ácido y acetil metil carbinol:
Voges proskower:
Determinar la capacidad del microorganismo de producción.
 Agente: enterobacter.
 Medio: caldo glucosado.
 La siembra es por agitación.
 Se incuba a 37° por un periodo de 24 a 48 horas.
Lectura:
Una vez transcurrido el tiempo se procede a agregarle:
 12 gotas de alfa naftol al 5%
 4 gotas de K(OH) al 40%
  Agitar y dejar reposar por un espacio de 10 minutos

Resultado:
 Si el color es rojizo es positivo
 Si el color se mantiene es negativo

 Como observamos tampoco hubo cambio de color por ello es negativo

 Hidrolisis de almidón:

 Agente: salmonella y bacillus cereus.

 Medio: Agar de almidón.
 La siembra se da por estría.
 Se incuba por un periodo de 24 a 48 horas a una temperatura de 37°.
Lectura:
Una vez pasado e tiempo se vierten de 2 a 3 gotas de Lugol ya que este
detecta presencia de almidón.
Existen:
 Hidrolisis de almidón positivo: se forma un halo.
 Hidrolisis de almidón negativo: no se forma nada.

Resultado:
Como se observa si hay presencia de halos por ello es un hidrolisis de almidón
positivo.
 Producción de azúcar

 Agente: salmonella
 Medio: TSI
 La siembra se da por estría.
 Se incuba por un periodo de 24 horas a una temperatura de 37°.
Lectura:
 Será positivo si hay cambio de color
 Será negativo si no hay viraje

Resultado:
Como se observa si hay cambio de color aunque es poco pero igual será
positivo.
 Metabolismo de proteína:

 Producción de indol

 Medio: caldo peptonado.

 Agente: bacillus cereus.
 Se da la siembra por agitación.
 Por un periodo de 24 a 48 horas a una temperatura de 37°.
Lectura:
Pasado ese tiempo se agrega el reactivo de Kovács( 4gotas)
 Si aparecen anillos de color cereza será positivo
 Si no hay presencia de nada será negativo.

Resultado:
Como se observa no hay presencia de anillos por lo tanto será negativo.
 Producción de aminoácidos:

 Medio: LIA.
 Agente: escheriechicoli.
 La siembra se da por estría.
 Se incuba por un periodo de 24 horas a 37°.
Lectura:
 Será positivo si hay viraje de color
 Será negativo si no lo hay
Resultado:
como se observa no hay viraje por lo tanto será negativo

Metabolismo-Lípidos:
 Producción de glicerol

 Medio: Agar mantequilla.

 Agente: Bacillus y proteus.
 Se da la siembra por estría.
 Se incuba por un periodo de 24 horas a 37°.
Lectura:
 Será positivo si se encuentra un halo transparente
 Será negativo si no se presenta ningún cambio

Resultado:
Como se observa hay presencia de un halo transparente por ello será positivo.
 Utilización de citrato:

 Medio: agar urea o citrato de Simmons

 Agente: shigella
 Por un periodo de 24 horas a 37°.
Lectura:
 Sera positivo si hay un color amarillo verdoso o azul.
 Será negativo si no hay presencia de nada.
Resultado:
Como se observa hay un cambio de color azulado por ello es positivo.
Otros:
 se tomaron muestras fuera del laboratorio:

Resultado:
se detecta la presencia de hongos.
 Se tomo muestra del caño del laboratorio como también el lapicero de
un compañero.

Resultado:
 Conclusiones
 Es muy importante saber los distintos tipos de agente que se usan en la
bioquímica para así poder detectar ya sea la presencia de azucares,
proteína y lípidos.
 Tener el debido cuidado al momento de realizar las experiencias ya que
cualquier cambio inesperado podría alterar los resultados por ello la
paciencia es transcendental en el experimento que realizamos.