Asignatura de Microbiología, Parasitología e Inmunología

MÉTODOS DIAGNÓSTICOS COMÚNMENTE UTILIZADOS PARA

DISTINTOS VIRUS

A. Virus DNA

1. HSV
- Aislamiento viral (cultivo viral). El herpesvirus simple es uno de
los más sensillo de cultivar y usualmente toma 2 o 3 días en
aparecer el característico efecto citopático viral (ECV)
- Inmunofluorescencia directa (ID)* de las células recogidas por
hisopado o raspado de las lesiones vesiculares.
- Serología: La infección primaria puede ser diagnosticada por una
elevación de títulos de anticuerpos IgG o la detección de
anticuerpos IgM. La recurrencia puede no estar asociada con
elevación del título de anticuerpos totales o una respuesta de IgM.
Los métodos disponibles incluyen: reacción de fijación del
complemento (FC) –prácticamente en desuso- reacciones de
neutralización (RN)*, ELISA* e Inmunofluorescencia indirecta
(IFI)*.
- Biología Molecular: en caso de infecciones en el sistema nervioso
central puede utilizarse la Reacción en cadena de la Polimerasa
(PCR) como diagnóstico de certeza.

2. VZV
- Aislamiento viral. Es un virus difícil de aislar por su labilidad. El
fluido tomado de las vesículas debe ser inoculado lo más
rapidamente posible.
- ID* de las células recogidas por hisopado o raspado de las
lesiones vesiculares.
- Serología: IFI* y ELISA*.

3. CMV
- Aislamiento viral. El cultivo convencional demora 2 a 4 semanas
en mostrar el ECV. El cultivo rápido (Shell vial) puede arrojar
resultados positivos a las 48 hs.
- Test de antigenemia: se basa en la detección de proteínas de
expresión temprana del virus en los neutrófilos. Es una
metodología semicuantitativa, predictiva de la severidad de la
infección.
- PCR para DNA viral: es más utilizada en el diagnóstico de
infecciones congénitas y en afecciones del SNC.
- Serología: FC (muy poco utilizada), ELISA*, aglutinación en latex
(AL)* e IFI*.

4. EBV
- Aislamiento viral.
- PCR e hibridación Molecular : pueden ser utilizadas para
demostrar la presencia de DNA viral en biopsias.

* Metodologías más utilizadas en el laboratorio de diagnóstico virológico

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- Serología: pueden detectarse anticuerpos anti-VCA (antígenos de

la cápside viral), anti-EA (antígenos tempranos) y anti-EBNA
(antígenos nucleares) mediante IFI* y ELISA*.

5. Adenovirus
- Aislamiento viral. Demora entre 2 a 7 días. La identificación en el
cultivo se realiza con ID y la tipificación con ensayos de
neutralización.
- ID* de aspirados nasofaríngeos.
- Serología: test de inhibición de la hemoaglutinación (HAI), test de
microneutralización.tipo específicos.

6. Papilomavirus
- PCR de hisopados o cepillados exo-endocervicales para deteccín
del ADN viral.
- Técnicas de hibridación Molecular.

7. HBV
- Serología: ELISA*, aglutinación con látex*, RIA, Inmunoblot*. Se
determinan anticuerpos y antígenos virales que permiten
identificar la fase de la enfermedad y pronosticar la evolución
(Anticuerpo y antígeno de superficie, antígeno e, anticuerpos para
core viral)
- PCR: para determinar presencia de DNA viral.

B. Virus RNA

1. Enterovirus
- Aislamiento viral: se utilizan distintas líneas celulares según sea
un Poliovirus, Coxsakie A, Coxsakie B o un Echovirus.
- Serología: RN*, HAI, ELISA*.
- PCR: se está difundiendo su utilización para los casos de
meneingitis por enterovirus.

2. Virus Influenza
- Aislamiento viral.
- ID*
- Serología: HAI, ELISA*.

3. Virus Parainfluenza
- Aislamiento viral.
- ID*.
- ELISA*.

4. Virus de la parotiditis
- Aislamiento viral. Se caracteriza por la formación de sincicios. La
identificación en cultivo se realiza por ID y/o inhibición de la
hemadsoción.

* Metodologías más utilizadas en el laboratorio de diagnóstico virológico

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- Serología: HAI, IFI* y ELISA*.

- PCR en caso de encefalitis. (¿)

5. Virus del sarampión

- Aislamiento viral.
- Detección directa: las típicas células multinucleadas gigantes
pueden observarse en forma directa por microscopía de
secreciones nasofaríngeas o hisopados conjuntivales.
- Serología:HAI, IFI*, ELISA*.

6. VSR
- Aislamiento viral.
- ID* de aspirado nasofaríngeo.
- Serología: ELISA*.

7. Arbovirus
- Aislamiento viral
- ID para detectar antígenos virales en los tejidos.
- Serología: IFI, ELISA y RN.

8. HIV
- Serología: ELISA*, alutinación en látex*, inmunoblot*, RIA*,
western blot* (ensayo confirmatorio)
- PCR*: para diagnóstico y confirmación.

9. HAV
- Serología: ELISA*, inmunoblot*.

10. HCV
- Serología: ELISA*, inmunoblot*, westernblot* (confirmatorio).
- PCR*: para confirmación y genotipificación.

* Metodologías más utilizadas en el laboratorio de diagnóstico virológico

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