Revista Cubana de Química

ISSN: 0258-5995
revcubanaquimica@cnt.uo.edu.cu
Universidad de Oriente
Cuba

Carrasco Altamirano, H.; Cardona V., W.; Espinoza C., L.; Gallardo, C.
SÍNTESIS DE PROBABLES ANTIOXIDANTES NATURALES DERIVADOS DE
EUGENOL
Revista Cubana de Química, vol. XVII, núm. 3, 2005, pp. 209-214
Universidad de Oriente
Santiago de Cuba, Cuba

Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=443543687082

Cómo citar el artículo

Número completo
Sistema de Información Científica
Más información del artículo Red de Revistas Científicas de América Latina, el Caribe, España y Portugal
Página de la revista en redalyc.org Proyecto académico sin fines de lucro, desarrollado bajo la iniciativa de acceso abierto
 SÍNTESIS DE PROBABLES ANTIOXIDANTES NATURALES DERIVADOS DE
EUGENOL.
H. Carrasco Altamirano *1(hcarrasco@unab.cl), W. Cardona V.1, L. Espinoza C. 2 y C. Gallardo 2.
H H

1 Departamento de Ciencias Químicas, Universidad Andrés Bello, Campus Viña del Mar, Los Fresnos 52, Viña del
Mar, Chile.
2 Departamento de Química, Universidad Federico Santa María, Avenida España 1680, Valparaíso, Chile.

Resumen
En las últimas décadas los productos que presentan actividad antioxidante han adquirido una gran
importancia desde el punto de vista biológico, pues ellos pueden mostrar una serie de actividades
que van desde el retraso del deterioro celular, la inhibición de ciertos tipos de cáncer, hasta la
prevención de algunos de los procesos ligados a la arteriosclerosis, ya que impiden la deposición de
colesterol y grasa en arterías y de esta manera evitan la obstrucción de ellas.
1. En vista de la importancia generada por estos agentes antioxidantes, en nuestro grupo de
investigación nos hemos dedicado a trabajar con una serie de compuestos, derivados de un producto
natural, el eugenol (4-alil-2-metoxifenol) (Fig.1), el cual es aislado a partir del clavo de olor. Los
compuestos que a nosotros nos interesa sintetizar exhiben dentro de su estructura la presencia de
grupos que se sabe están involucrados en la generación y captura de radicales libres tales como
hidroxilo y nitro, por lo que pensamos que estos compuestos deberían presentar una buena
capacidad antioxidante, y por lo tanto podrían actuar como retardadores del proceso de
envejecimiento celular e incluso podrían prevenir cierto tipo de cánceres.
C H 3O

HO

2. FIGURA 1
Palabras claves: ácidos polifenólicos, actividad antioxidante, deterioro celular, cáncer.

Introducción
Actualmente los productos que presentan actividad antioxidante han adquirido una gran importancia
desde el punto de vista biológico. Destacables son los ácidos fenólicos encontrados en el vino (fig2),
los cuales se ha observado participan en la inhibición de la proteína AP-1, lo que esta directamente
ligado con la prevención y proliferación de tumores celulares1.
HO COOH H3CO

COOH
HO HO
OH OCH3
Acido Gálico Acido Sinápico

COOH COOH
HO HO
OH OCH3
Acido Cafeico Acido ferúlico

Fig. 2
3. Se ha apreciado que la capacidad antioxidante de estos compuestos esta determinada e
incrementa con el número de grupos hidroxilos presentes en la molécula, lo que sugiere que los

Vol. XVII, No 3, 2005 209

ácidos fenólicos pueden actuar directamente sobre la célula, vía la inhibición de la actividad
transcripcional de la proteína AP-1.
4. Existen una serie de antecedentes que dan cuenta de la capacidad antioxidante de estos ácidos
polifenólicos, así como también de la inhibición que exhiben sobre algunos tipos de cáncer. Es así
como se ha observado que el ácido ferúlico es un antioxidante potencialmente útil en el proceso de
conservación y estabilidad del sabor de la cerveza, en donde este compuesto conjuntamente con la
(+)-catequina se ha apreciado que participan directamente en la formación y desaparición de algunos
compuestos carbonílicos, además de influir en la formación y perdida de algunos compuestos
activos al UV, que se sabe influyen en la perdida del sabor de la cerveza debido a la formación de
aldehídos que le dan un gusto amargo a esta2. Este proceso de oxidación se produce por la
formación de radicales derivados del oxígeno como son los radicales superóxido e hidroxilo3. Por lo
tanto es lógico suponer que tanto la (+)-catequina así como el ácido ferúlico estarían actuando
directamente al nivel de la inhibición o retardamiento de la formación de dichas especies
radicalarias.
5. Otro antecedente de particular importancia surge al comparar las dietas de los países asiáticos
con la dieta alimentaria del mundo Occidental4. Se ha observado que en los primeros de estos países
la incidencia de cáncer de colon y de mama es marcadamente menor. Witte y colaboradores sugieren
que la causa de este efecto se debería a la presencia de ciertos constituyentes dietarios tales como
fibras o antioxidantes contenidos en el arroz negro, entre los cuales destacan el ácido cafeíco, el
sinápico y el ferúlico, que coincidentemente son los mismos polifenoles hallados en el vino. Los
resultados obtenidos en dichas investigaciones, indican que el ácido ferúlico puede haber
contribuido a la anticlonogenicidad tanto en células de colon como de mama, en tanto que el ácido
sinápico parece estar implicado con el efecto de inhibición de la clonogenicidad de células SW 4805.
6. Esto resulta de particular importancia si se tiene en cuenta el hecho de que los agentes
quemopreventivos que suprimen el desarrollo de tumores son de particular interés, sobretodo si ellos
pueden contraatacar el cáncer aun en tejidos en los cuales la iniciación de la carcenogicidad ya ha
ocurrido.
7. En nuestro grupo de investigación nos hemos dedicado a trabajar con una serie de compuestos,
derivados de un producto natural, el eugenol, el cual es aislado a partir del clavo de olor. Los
productos por nosotros sintetizados se caracterizan por exhibir dentro de su estructura la presencia
tanto de un grupo hidroxilo como de un grupo nitro. La presencia de esta agrupación dentro de la
estructura resulta de interés si se considera la capacidad que ofrece este grupo para generar
intermedios de gran interés biológico, como podrían ser los grupos hidroxilamina, nitrilo y amina,
los cuales se sabe están involucrados en la captura de especies radicalarias. A esto se suma la
reactividad que presentan los grupos nitro e hidroxilo, los que están involucrados en la generación y
captura de radicales libres, por lo que podrían presentar sin lugar a dudas actividades antioxidantes
semejantes a la mostrada por los ácidos fenólicos presentes en el vino.
8.
9. Metodos experimentales
Los reactivos químicos se compraron a Aldrich y se utilizaron sin purificar. Los espectros de RMN-
1
H y 13C fueron registrados en un espectrómetro Bruker, modelo AVANCE 400 Digital. El progreso
de las reacciones químicas se siguió mediante cromatografía de capa fina (TLC) con placas
comerciales de silica gel 60 F254.
B B

El producto natural se obtuvo por destilación por arrastre de vapor sobre clavo de olor pulverizado.
La posterior nitración involucró el tratamiento con una mezcla de ácido nítrico sulfúrico en ácido
acético como disolvente. A fin de generar la nitración en las otras posiciones del anillo aromático, se

Vol. XVII, No 3, 2005 210

procedió a acetilar el eugenol y luego tratarlo bajo las condiciones mencionadas previamente, lo que
nos permitió obtener la mezcla de isómeros en una proporción 1:1. El tratamiento del alcohol en
K2CO3/MeOH nos condujo a los productos deseados.
B B B B

Resultados
Obtención de 4-alil-2-metoxifenol:
H3C
1
O 3 1'
2 4 2'

1 5 CH2
3'
HO 6

10. Se colocan 50g de clavo de olor pulverizados en un matraz de fondo redondo de 250mL,
posteriormente se agregan 150mL de agua destilada y luego se calienta la mezcla de reacción hasta
recibir unos 100mL de destilado. Se vierte el destilado en un embudo de decantación con tapa, el
destilado se extrae con dos porciones de 20mL de diclorometano. El residuo orgánico se lava con
solución de hidróxido de potasio al 5% (2 porciones), a fin de separar el producto deseado de otro
producto natural que se extrae en la destilación, el cariofileno.
11. El residuo acuoso obtenido se trata con solución de HCl al 5% hasta pH ácido y se extrae con
diclorometano (2 porciones). La fase orgánica se seca con sulfato de sodio anhidro, se filtra y el
solvente se evapora bajo presión para obtener 5g (10%) del producto deseado puro, el cual fue
comprobado por espectroscopia de resonancia magnética nuclear.
RMN1H (CDCl3, δ ppm): 3.35 (d, 2H, J=6.67Hz, H 1’); 3.9 (s, 3H, OCH3); 5.15 (m, 2H, H3’); 5.5
B B

(s, 1H, OH); 5.98 (m, 1H, H2’); 6.72 (m, 2H, H3 y H5); 6.88 (d, 1H, J=8.47 Hz, H6).
RMN13C (CDCl3, δ ppm): 39.901 (C1’); 55.866 (OCH3); 11.102 (C5); 114.247 ( C6); 115.535
(C3’); 121.183 (C3); 131.933 (C4); 137.836 (C2’); 143.900 (C1); 146.436 (C2).
Síntesis de 4-alil-2-metoxi-6-nitrofenol:
H3C
1
O 3 1'
2 4 2'

1 5 CH2
3'
HO 6

+
N
-
O O
En un matraz de fondo plano de 50ml se disolvieron 1,5g de 4-alil-2-metoxifenol en 30mL de
CH2Cl2, los que se trasvasijaron a un matraz de fondo plano de 100mL que contenía 4,5g de
B B B B

KHSO4, 3g de NaNO3 y 3,5g de sílica gel húmeda al 50 % p/p. La reacción se dejas proseguir bajo
B B B B

agitación por un tiempo de 5,5 horas a temperatura ambiente y fue seguida por TLC
(Hexano/Acetato de Etilo 3:1). Durante los primeros 45min se aprecia un cambio de color marrón
suave a marrón rojizo intenso, junto con la parcial homogeneidad de la silica en el fondo a modo de
capa homogénea de aspecto graso. Los productos fueron purificados en columna de silica gel con
gradiente de polaridad en Hexano/Acetato de Etilo (5:1 optimo) y succión inferior optimizando el
tiempo de separación en 4 horas, obteniéndose 1,0970g (63,2 %) del producto esperado. Es
interesante destacar que además del producto deseado se obtuvieron 0,0430g (2,9%) de 5-alil-3-
nitro-1,2-bencenodiol.
Vol. XVII, No 3, 2005 211
RMN1H ( CDCl3, δ ppm): 3.35 (d, 2H, J=6.6Hz, H1’); 3.93 (s, 3H, OCH3); 5.13 (m, 2H, H3’); 5.91
B B B B

(m, 1H, H2’); 6.96 (s, 1H, H3); 7.50 (d, 1H, J=0.9Hz, H5); 10.67 (s, 1H, OH).
RMN13C (CDCl3, δ ppm): 39.368 (C1’); 56.669 (OCH3); 115.062 (C5); 117.127 (C3’); 118.572
B B B B

(C3); 131.202 (C4); 133.608 (C6); 135.906 (C2’); 144.850 (C1); 149.827 (C2).
Síntesis de 5-alil-3-nitro-1,2-bencenodiol:
H

O 6 1'
1 5 2'

2 4 CH2
3'
HO 3

+
N
-
O O
El resultado obtenido en la reacción de nitración del 4-alil-2-metoxifenol empleando nitrato de
sodio, sulfato ácido de potasio, sílica húmeda al 50% en diclorometano, nos llevó a intentar la
desprotección del grupo metoxilo empleando las condiciones descritas para la nitración del anillo
aromático.
Para ello se disolvieron 200mg de 4-alil-2-metoxifenol en 5mL de diclorometano y se dejó la
mezcla bajo agitación hasta homogenización completa. Posteriormente, se adicionaron al medio
800mg de Sílica húmeda, 1,2g de KHSO4 y 800mg de NaNO3 y se dejó proseguir la reacción a
B B B B

temperatura ambiente durante 6 horas, al cabo de este tiempo por cromatografía en capa fina
(AcOEt:n-hexano 1:3) se aprecia la completa desaparición del producto de partida y del derivado 4-
alil-2-metoxi-6-nitrofenol. El producto obtenido se purificó por cromatografía en columna para
obtener 115mg (46%) del producto deseado.
RMN1H ( CDCl3, δ ppm): 3.32 (d, 2H, J=6.5 Hz, H1’); 5.19 (m, 2H, H3’); 5.90 (m, 2H, H2’ y OH);
B B

7.09 (d, 1H, J=1.9 Hz, H6); 7.46 (d, 1H, J=1,8 Hz, H4); 10.5 (s, 1H, OH)
RMN13C (CDCl3, δ ppm): 39.139 (C1’); 114.969 (C4); 117.102 (C3’); 122.308 (C6); 132.236 (C3);
B B

133.366 (C5); 135.821 (C2’); 141.291 (C2); 146.287 (C1).

Síntesis de 4-alil-2-metoxifenil acetato:

H3C
1
O 3 1
'
O 2 4 2'

1* 1 5 CH2
3'
H3C O 6
2*
En un matraz de fondo redondo de tres bocas de 200mL, se colocan 3g (0,0183mol) de 4-alil-2-
metoxifenol disueltos en 50mL de diclorometano seco y se deja homogenizar la mezcla de reacción
mediante agitación magnética. Posteriormente, se adicionan 4mL de piridina seca y 230mg de 4-
N,N-dimetilaminopiridina (DAMP), una vez que la mezcla de reacción se homogeniza se agregan
gota a gota desde un embudo de compensación 4mL de anhídrido acético. Después de la adición, se
adapta al matraz un condensador de reflujo y se deja proseguir la reacción bajo reflujo durante 1
hora. Al cabo se este tiempo por TLC se aprecia que la reacción ha concluido (AcOEt:n-hexano
1:3).

Vol. XVII, No 3, 2005 212

A fin de dar término a la reacción se agregan 2g de hielo picado y 200mL de agua,, se transfiere la
mezcla a un embudo de decantación, la fase orgánica se extrae y se lava con solución acuosa de HCl
2N (3x15mL), luego con solución saturada de bicarbonato y luego con salmuera hasta obtener pH
neutro en los lavados. La fase orgánica se seca con sulfato de sodio anhidro, se filtra, el sólido
residual se lava con diclorometano y luego se remueve el disolvente bajo presión reducida, cuidando
que la temperatura no sobrepase los 40°C. El producto se purifica por cromatografía en columna
para obtener el producto deseado en rendimiento cuantitativo.
RMN1H ( CDCl3, δ ppm): 2.31 (s, 3H, H2*); 3.38 (d, 2H, J=6.7 Hz, 1’); 3.82 (s, 3H, OCH3); 5.10
B B B B

(m, 2H, H3’); 5.97 (m, 1H, H2’); 6.77 (m, 2H, H3 y H5); 6.95 (d, 1H, J=7.9 Hz, H6).
RMN13C (CDCl3, δ ppm): 20.629 (C2*); 40.050 (C1’); 55.770 (OCH3); 112.692 (C3); 116.113
B B B B

(C3’); 120.628 (C5); 122.477 (C6); 136.998 (C4); 137.967 (C1); 138.969 (C2’); 150.832 (C2);
169.169 (C1*).
Síntesis de 4-alil-2-metoxi-3-nitrofenilacetato y de 4-alil-2-metoxi-5-nitrofenilacetato:
-
O O
+
H3C N H3C
1 1

O 3 1' O 3 '
1 CH2
2 4 2' 2 4
'
2 '
3
O O
1* 1 5 CH2 *
1 1 5 O
3' +
H3C O 6 H3C O 6 N
2* *
2
-
O
Se colocan en un matraz Erlenmeyer de 100mL, 200mg (0.97mmol) de 4-alil-2-metoxifenil acetato
disueltos en 5mL de diclorometano, la mezcla de reacción se introduce en un baño de hielo y una
vez que se ha enfriado se agregan cuidadosamente 2mL de mezcla sulfonítrica, la cual se preparó
por la adición de ácido nítrico concentrado sobre ácido sulfúrico concentrado. La reacción se deja
proseguir a 0°C durante 30 minutos, apreciándose al cabo de este tiempo por CCF la desaparición
del producto de partida (AcOEt:n-hexano 1:3).
La reacción se detiene agregando agua, la mezcla se vierte en un embudo de decantación, se separan
las fases, la fase orgánica se lava reiteradas veces con agua a fin de extraer el exceso de ácido
presente, posteriormente se seca con sulfato de sodio anhidro, se filtra y el solvente se evapora bajo
presión para obtener un producto oleoso, el cual fue purificado por cromatografía Flash (AcOEt:n-
hexano 1:3), lo que permitió obtener 51mg (35%) de la mezcla de isómeros puros.
La mezcla de isómeros se recristalizó en una mezcla de AcOEt/n-hexano, lo que permitió separar
ambos isómeros.
Datos espectroscópicos de 4-alil-2-metoxi-5-nitrofenilacetato:
RMN1H ( CDCl3, δ ppm): 2.32 (s, 3H, H2*); 3.76 (d, 2H, J=6.4Hz, H1’); 3.91(s, 3H, OCH3); 5.14
B B B B

(m, 2H, H3’); 5.98 (m, 1H, H2’); 6.85 (s, 1H, H6); 7.83 (s, 1H, H3).
RMN13C (CDCl3, δ ppm): 20.438 (C2*); 37.702 (C1’); 56.342 (OCH3); 114.165 (C6); 117.442
B B B B

(C3’); 120.663 (C3); 134.820(C4); 136.054 (C2’); 137.657 (C5); 140.884 (C1); 155.093 (C2);
168.360 (C1*).
Datos espectroscópicos de 4-alil-2-metoxi-3-nitrofenilacetato:
RMN1H ( CDCl3, δ ppm): 2.35 (s, 3H, H2*); 3.34 (d, 2H, J=6.7Hz, H1’); 3.89 (s, 3H, OCH3); 5.12
B B B B

(m, 2H, H3’); 5.86 (m, 1H, H2’); 7.03 (d, 1H, J=8.5Hz, H6); 7.16 (d, 1H, J=8.4Hz, H3).

Vol. XVII, No 3, 2005 213

RMN13C (CDCl3, δ ppm): 20.708 (C2*); 35.014 (C1’); 62.570 (OCH3); 114.165 (C6); 117.878
B B B B

(C3’); 125.046 (C3); 125.472 (C4); 130.310 (C2’); 134.011 (C5); 142.378 (C1); 143.797 (C2);
168.338 (C1*).

Discusión
12. El trabajo por nosotros propuesto plantea una ruta sintética asequible, la que permite obtener
derivados de un producto natural que presenta actividad antioxidante, como es el eugenol, los cuales
presentan como rasgo fundamental la introducción de grupos nitro, que se conoce participan en la
generación y captura de especies radicalarias y que por lo tanto debiesen presentar una marcado
efecto en la actividad antioxidante respecto del eugenol. Cabe destacar que en uno de los productos
obtenidos, como es el caso del 5-alil-3-nitro-1,2-bencenodiol, se incrementa el número de grupos
fenólicos presentes en la estructura, lo cual de acuerdo a los conocimientos previos del tema también
debería mejorar la capacidad antioxidante de este producto con respecto al eugenol.
13.
14. Referencias
15. H. F. Liao; Y. Y. Chen; J. J. Liu; M. L. Hsu; H. J. Shieh; H. J. Liao; C. J. Shieh; M. S. Shiao;
and Y. J. Chen. .Inhibitory Effect of Caffeic Acid Phenethyl Ester on Angiogenesis, Tumor
Invasion, and Metastasis J. Agric. Food Chem. 51/27, 7907. 2003
16. M. T Walters, A. P Heasman .and P. S. Hughes. Comparison of (+)-Catechin and Ferulic Acid
as Natural Antioxidants and Their Impact on Beer Flavor Stability. Part 1: Forced-Aging.. J. Am.
Soc. Brew. Chem. 55/2, 83:89. 1997
17. C. W. Bamforth, R. E .Muller and M. D. Walker. Oxygen and Oxygen radicals in malting and
brewing., J. Am. Soc. Brew. Chem. 51, 79:88. 1993
18. Y. Kuroda, Y. Hara, Antimutagenic and Anticarcinogenic Activity of Tea Poliphenols. Mutat.
Res., 436, 69:97. 1999
19. Characterization of Potencially Chemopreventive Phenols in Extracts of Brown Rice That
Inhibit the Growth of Human Breast and Colon Cancer Cells. Cancer Epidem Biomark., 9,
1163:1170. 2000

Acknowledgements: UNAB-DI 13-04.

Vol. XVII, No 3, 2005 214