SESIÓN N° 3: DIAGNOSTICO DE GENERO Staphylococcus

1. Primero para realizar el diagnóstico de staphylococcus utilizamos el Agar

Sangre donde habíamos hecho el sembrado de Hisopeado Nasal.
2. Identificamos aquellas colonias de color amarillas o blanquecinas que sean
convexas de formas regulares y tengan de tamaño de 1 a 3 um.

PRUEBA DE LA CATALASA
1. Agarramos colonias blanquecinas o amarillas con una asa bacteriológica y
realizamos a colocar en los porta objetos con el objetivo de que estas den
burbujeo con la presencia de una gota de peróxido de hidrogeno.
2. Posteriormente volvemos a agarrar una misma colonia que nos haya dado
catalasa positivo ponemos en el porta objeto y realizamos tinción Gram.

3. En la tinción Gram realizamos:

 Frotis
 Fijación
 Colorante primario: violeta de genciana 1 – 3 minutos
 Lavar con agua corriente
 Mordiente; lugol 30 seg – 1min
 Lavar con agua corriente
 Decolorar: alcohol 92° acetona 30seg – 1min
 Lavar con agua corriente
 Colorante secundario: fuccina básica 1-3min
 Lavar con agua corriente
 Secar
 Observar
5. Luego llevamos al microscopio a observar donde tenemos que identificar y ver
cocos Gram positivos.

PRUEBA DE LA COAGULASA
1. Primero preparamos los materiales para toma de muestra de sangre

2. Luego procedemos a hacer la toma de muestra de sangre donde vamos a sacar

5ml, para después introducir esta en un tubo de ensayo con anticoagulante.
3. Llevamos el tubo de ensayo con la muestra de sangre a centrifugar durante 10
minutos.

4. Luego sacamos de la centrifugadora y procedemos a sacar el plasma que se

formó en dos tubos de ensayo cada una conteniendo 1 ml.
5. Procedemos a inocular en los tubos de ensayo aquellas colonias que nos hayan
dado catalasa (+) y Gram (+) y luego llevamos a incubar.

AGAR MANITOL
1. Procedemos a dividir en 4 partes nuestra caja Petri de agar manitol que nos
proporcionó el doctor.
2. Sembramos por estriamiento con la asa bacteriológica en las 4 partes que
dividimos a aquellas colonias que nos dieron catalasa (+) y Gram (+) y luego
llevamos a incubar durante 24 horas

RESULTADOS
PRUEBA DE LA CATALASA

CATALASA
PRIMER PORTA OBJETO POSITIVO

SEGUNDO PORTA OBJETO POSITIVO

TERCER PORTA OBJETO POSITIVO

CUARTO PORTA OBJETO POSITIVO

PRUEBA DE LA COAGULASA

En esta prueba nos salió negativo los dos tubos

MANITOL
En nuestro sembrado en el agar manitol nos salio negativo ()