Metodología

Se tomo agua residual en un recipiente. Se llevo al laboratorio un día antes de la clase y se realizó
una inoculación de un cultivo de E. coli de 3 Ml, LUEGO SE llevo a incubar a una temperatura de
37°c o/n, con una agitación. Al siguiente día (sábado) se realizó una filtración bajo la cabina de
flujo laminar y con todas las medidas asépticas correspondientes para evitar contaminación
cruzada; DE esto se obtuvo un lisado viral que se agregó a un tubo rotulado como número 1, se
transfirió 1 Ml a otro tubo rotulado como número 2 que contenía 9ml de solución salina al
(0.85%), así mismo se transfirió otro mililitro a otro tubo rotulado como número 3 con 9ml de
solución salina.

en un erlenmeyer se tenía un cultivo de E.coli y aparte tres tubos de ensayo rotulados como tubo
A tubo B y tubo C, se hizo diluciones seriadas de 0.1ml con la micropipeta; se llevó a incubar
durante un periodo de 10 minutos sin agitación. Durante los 10 minutos de incubación, se
etiqueto las 3 placas de agar TS con las iniciales de los nombres de los integrantes del grupo, así
como con las letras A, B y C. seguido se Retiró del baño de agua, el recipiente que contiene el agar
blando TS.

Pasado el tiempo se pasó al lisado viral 0.1ml del tubo A, al tubo #2 se le adiciono 0.1ml al tubo #2
y del tubo C se pasó 0.1Ml al tubo #3. se hizo agitación para la homogenización en cada uno de los
tubos y se puso en la gradilla. Después, se Recogió el tubo A (mezcla de lisado viral + cultivo
bacteriano) y se agrego 3 ml de ABTS. Se Cerro rápidamente el tubo, se mézclo con vortex y se
virtio el contenido en el centro de la placa de agar A. se Giror suavemente la placa para que el
agar se distribuyera uniformemente. Se Repitio con el tubo B, otro tubo de agar y la placa B.
Luego se hizo lo mismo con el tubo C y la placa C. esto se llevo a incubar a 37°C por 48h.

Conclusión

Es importante tener en cuenta que los virus tienen su rango de hospedador, es decir, son muy
específicos, así que los virus encontrados en cualquier muestra reflejarán el tipo de bacteria
presente en el ambiente natural.

Es importante tener muy claro el procedimiento para tener resultados verdaderos, tomar los
tiempos exactos y las medidas indicadas en la metodología, un cambio puede generar falsos
positivos o en su efecto que no resulte con éxito la practica.

Por otro lado es de importancia para optener resultados exitosos haber realizado la dilución del sí
lisado viral apropiadamente para que en las placas líticas se puedan contar para estimar el número
de partículas virales presentes por unidad de volumen como Unidades Formadoras de Placas o
(UFP).