OBJETIVOS

 Evaluar el rendimiento instrumental de un espectofotómetro.

 Verificar la exactitud de la escala de longitud de onda, la presencia de radiación dispersa, el
ancho de banda, la exactitud fotométrica, la proporcionalidad de respuesta y el rendimiento
global del instrumento.

FUNDAMENTO

Un espectrómetro o espectrofotómetro es un instrumento que descompone la radiación policromática

en distintas longitudes de onda. En la figura 16.12 se presenta un diagrama de bloques de un
espectrómetro. Todos los espectrómetros necesitan: 1) una fuente de radiación continua en las
longitudes de onda que interesan; 2) un monocromador para seleccionar una banda angosta de
longitudes de onda del espectro de la fuente; 3) una celda para la muestra; 4) un detector o
transductor, para convertir energía radiante en energía eléctrica, y 5) un instrumento para interpretar
la respuesta del detector. La muestra puede estar antes o después del monocromador. Cada una de
estas partes, a excepción del dispositivode lectura, varía de acuerdo con la región de longitudes de
onda.

RESULTADOS.

Exactitud de la escala de longitud de onda.

1) Método del filtro de tierras raras (Didimio)

Longitud %T 490 45.7

de onda 500 43.4
(nm) 510 6.6
400 105.4 520 4.2
410 103.3 530 2.3
420 91.8 540 45.1
430 37.1 550 83.7
440 11.1 560 73
450 10.4 570 2.7
460 14.9 580 0.6
470 9.2 590 0.5
480 13.7

Tabla 1.- Espectro de transmición del filtro de Didimio.

 Espectro de transmisión del filtro de
Didimio
120

100

80

60
%T

40 %T

20

0
0 100 200 300 400 500 600 700
-20
Longitud de onda (nm)

Gráfica 1.- Espectro de transmisión del filtro de Didimio.

Observados Referencia Longitudes de

onda que
coinciden
Picos 400,490.550 420,490,550 490,550
Valles 470,520,570 470,520 470,550

2) Método de la solución estándar NISO4*6H2O al 20%

Longitud %T 490 45.7

de onda 500 43.4
(nm) 510 6.6
400 105.4 520 4.2
410 103.3 530 2.3
420 91.8 540 45.1
430 37.1 550 83.7
440 11.1 560 73
450 10.4 570 2.7
460 14.9 580 0.6
470 9.2 590 0.5
480 13.7

Tabla 2.- Espectro de transmisión de la solución de NISO4*6H2O

 Espectro de transmisión de la solución de
NiSO4 .6H2O al 20%
120

100

80
%T

60
%T
40

20

0
0 100 200 300 400 500 600 700
Longitud de onda (nm)

Gráfica 2.- Espectro de transmisión de la solución de NiSO4*6H2O

a) Verificar la longitud de onda en la que obtuvo el valor máximo de %T

Se obtuvo a 500 nm y fue de 96.6

b) ¿Cómo es la exactitud de la escala de longitud de onda del

espectrofotómetro a esta longitud de onda?

Es igual a la de referencia, muy exacta.

c) Describa ventajas y desventajas de los métodos empleados en la práctica

para estimar la exactitud de la escala de longitud de onda.

Ventajas: Ya que solo se varía 10nm la longitud de onda se obtiene de manera

mas exacta el comportamiento del espectro de transmisión, además de que se
puede comparar con un estándar.

Desventajas: Es un procedimiento tardado y los filtros son muy caros.

B) Proporcionalidad fotométrica

El cálculo de las absorbancias se hizo de la siguiente manera, tomando los valores

del %T de la tabla 2.

A= 2-log (%T)
Por ejemplo para la longitud de onda de 530, se tiene un %T de 88.2, entonces

A= 2-log (88.2)

A=2-(1.9454)

A= 0.05453

De la misma manera se calcularon las demás absorbancias, en todos los casos,

Longitud Absorbancia
de onda
(nm)
530 0.054
540 0.075
550 0.096
560 0.122
570 0.16
Tabla 3.- Proporcionalidad entre absorbancia y longitud de onda para el
NiSO4*6H2O

Absorbancia vs longitud de onda

0.18
0.16
0.14
0.12
Absorbancia

0.1 y = 0.0026x - 1.3231

0.08 r = 0.990
0.06
0.04
0.02
0
520 530 540 550 560 570 580
Longitud de onda

Gráfica 3.- Proporcionalidad entre absorbancia y longitud de onda para el

NISO4*6H2O

a) ¿Qué se puede concluir respecto a la proporcionalidad fotométrica en este

intervalo de longitudes de onda?

Se cumple dicha proporcionalidad ya que entre mayor sea la longitud de onda

mayor es el valor de la absorbancia.
 b) ¿Qué relación existe entre la absorbancia y la longitud de onda en este
intervalo de longitudes de onda?

Existe una relación lineal.

C) Luz dispersa.

a) Los valores obtenidos se registraron en la última tabla, según lo que dice el

manual.

b) Se considera que la luz dispersa rebasa los límites permitidos cuando se

presentan incrementos del 3% T con respecto a los valores de referencia. ¿Qué
puede concluir a ese respecto en el instrumento que evaluó?

Qué el aparato está dentro de los límites.

D) ANCHO DE BANDA.

a) los valores de %T obtenidos se registraron en la última tabla como dice el

manual.

b) Considerando que la variación en el ancho de banda se presenta cuando hay

disminuciones o incrementos en el %T de más de 3%T, en relación a los valores
de referencia ¿Qué puede concluir con respecto al ancho de banda del
instrumento? Que el ancho de banda está dentro del 3% de incremento, por lo que
está en regla.

c) Si el %T se incrementó ¿Qué ocurrió con el ancho de banda? ¿Qué ocurre si el

%T disminuye? A mayor %T mayor ancho de banda Si el ancho de banda
disminuye provoca una disminución los mínimos de transmisión.

E)EXACTITUD FOTOMÉTRICA

Longitud de onda 400 nm 500 nm

Parámetro
Absorbancia esperada 3 0.020
Tolerancia aceptada 1.4-1.7 0.03-0.06
Absorbancia medida 2.6 0.0310
Tabla 4.- Exactitud fotométrica. Método del NiSO4*6H2O

a) Con base en el resultado obtenido, discuta si el espectrofotómetro tiene

exactitud fotométrica.
Sí se tiene exactitud fotométrica, en el caso de la absorbancia a 400 nm el valor
está muy por arriba del esperado, esto se debe a que ese parámetro está
considerado para espectrofotómetros más antiguos y dado que usamos uno nuevo
este tiene mucho más sensibilidad y por lo tanto da una mayor lectura.

F) INTERVALO DINÁMICO LINEAL DE CONCENTRACIÓN

La concentración se calculó con la siguiente formula:

C1V1 = C2V2

Para el tercer tubo se pusieron 0.6 mL de NiSO4*6H2O y el volumen total que

fue igual en todos los tubos es de 4mL., por lo que:

C2= (0.19)(0.6)/ 4 = 0.0285

De la misma forma se calculó la concentración en todos los tubos.

Tubo Concentración A400

a a' de Serie a Serie b
NiSO4*6H2O
1 1' 0 0 0
2 2' 0.0095 0.053 0.05
3 3' 0.0285 0.136 0.133
4 4' 0.0665 0.315 0.312
5 5' 0.1045 0.49 0.491
6 6' 0.1425 0.664 0.67
7 7' 0.152 0.713 0.714
8 8' 0.171 0.803 0.799
9 9' 0.1805 0.851 0.855
10 10' 0.19 0.888 0.887
Tabla 5.- Intervalo dinámico lineal de la concentración.
 y = 4.6758x + 0.0026
Curva de calibración R² = 0.9999

1
0.9
0.8
0.7
Absorbancia

0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 0.05 0.1 0.15 0.2
Concentración

Gráfica 4.- Curva de calibración del NiSO4*6H2O

a) El intervalo dinámico lineal de concentración es el intervalo de

concentraciones en el que se observa una respuesta lineal entre
absorbancia y concentración. ¿Cómo es este intervalo respecto al señalado
por el profesor?

Muy parecido, de hecho hay una diferencia mínima, ya que casi todos los datos
( a excepción del último están muy bien alineados)

b) ¿Qué puede indicar el que el intervalo sea menor al esperado?

A partir de determinada concentración se pierde esa proporcionalidad, puede

ser por ejemplo, por la estabilidad del compuesto o el medio en el que se
encuentre.

PREGUNTA EXTRA

1. Señale dos causas que originen:

a) Luz extraña:
 Que la compuerta para poner la muestra esté abierta.
 Que entre luz del exterior al espectrofotómetro por algún lugar que
no se detecte a simple vista.
 b) Cambio en el ancho de banda.
 Que la luz de la fuente radiante tenga poca intensidad.
 Acumulación de polvo en la ranura del monocromador.
c) Alteración de la respuesta relativa o rendimiento instrumental.
 Muestra muy pequeña (indetectable) o muy concentrada (que de
valores de absorbancia muy altos)
 Que el aparato se encuentre en un cuarto con mucha humedad.

Tabla 7.- Resumen de resultados de evaluación del funcionamiento del

espectrofotómetro.

Parámetro estudiado Valores de Valores Conclusión

referencia experimental
es
EXACTITUD DE LA ESCALA DE Cumple, se evalúa el
LOGITUD DE ONDA del monocromador
1) Filtro de Didimio
Máximos (λ,nm) 420,490,550 400,490,550
Mínimos ((λ,nm) 470,520 470,520
2) Solución de NiSO4*6H2O
Máximos (λ,nm) 500 500
Mínimos ((λ,nm) 400 400

PROPORCIONALIDAD FOTOMÉTRICA Aprox. 1 0.990 Cumple, se evalua el

Datos de regresión de 530 a 570 nm detector.
LUZ DISPERSA Cumple, se evalúa el
Filtro 0 0.2 detector
%T a 400 nm (Solución de NiSO4*6H2O 0.1 0.4
al 20%)

ANCHO DE BANDA 96.6 93 Cumple, se evalúa el

%T a 500 nm monocromador.
EXACTITUD FOTOMÉTRICA Cumple, se evalúa el
Método de la Solución de NiSO4*6H2O monocromador y el
al 20% detector.
Absorbancia a 400nm 2.6 1.4-1.7
Absorbancia a 500nm 0.0310 0.03-0.06
INTERVALO DINÁMICO LINEAL DE r= 1 r=0.9999 Cumple, se evalúa el
CONCENTRACIÓN 0.0095-0.19 0.0095- monocromador.
Datos de la regresión lineal 0.1805
Intervalo de concentración
DISCUSIÓN

Del espectro de transmisión del Didimio obtuvimos picos a 400, 490 y 550 y
valles a 470 y 520 mientras que del espectro del NiSO 4*6H2O obtuvimos valles
a 400nm y picos 500 nm, esto quiere decir que el espectrofotómetro es exacto
en cuanto a la escala de longitud de onda y que las determinaciones que en el
se hagan van a ser confiables. Por otro lado es importante notar que si bien
ambos métodos son buenos, usar el filtro de Didimio es mucho más caro que la
solución de sulfato.

En cuanto a la proporcionalidad fotométrica para el intervalo de 530 a 570 nm

se obtuvo una recta con coeficiente de correlación muy cercano a 1, esto nos
indica que la intensidad radiante absorbida si es proporcional a la respuesta del
equipo.

Otro parámetro importante a evaluar fue la luz dispersa, para ello se utilizó un
filtro oscuro y se midió la transmitancia del NiSO4*6H2O a 500 nm, las lecturas
que obtuvimos no fueron de cero, sin embargo están dentro de los parámetros
permitidos de luz dispersa y por lo tanto, es espectrofotómetro está en buenas
condiciones para su uso.

El valor que usamos para evaluar el ancho de banda fue el %T a 500 nm, esto
es porque esa es la absorbancia máxima del NiSO 4*6H2O, si el ancho de
banda disminuye se provoca un incremento en los máximos de los espectros
de absorción y tuvimos una desviación el 3%, por lo que también entra en los
límites permitidos.

Para la exactitud fotométrica no realizamos la prueba del filtro de vidrio nuestro

ya que no se contaba con un filtro para los nuevos equipos, pero por el método
de la solución de NiSO4*6H2O se determinó una vez más que estaba dentro de
los parámetros, aunque se debe destacar el hecho de que las lecturas más
grandes del parámetro se dieron ya que dichos parámetros están pensados
para equipos más antiguos y dado que se verificó el nuevo equipo no se
actualizó este parámetro que dio tan grande por el grado de sensibilidad de
este nuevo equipo y por la intensidad de la fuente radiante.

Por último, el intervalo dinámico de concentración casi se cumplió de acuerdo a

lo esperado salvo por el último punto esto pudo deberse a la influencia del
medio ácido ya que hay interacciones y puede que nuestra sustancia no
absorba de la misma forma, sin embargo el coeficiente de correlación también
fue casi de 1, por lo que se cumple la Ley de Bouguer y Beer y la
concentración si es proporcional a la absorbancia.
 CONCLUSIONES.

 El espectrómetro está en condiciones óptimas para hacer análisis, ya

sea para lecturas de absorbancia o transmitancia.

REFERENCIAS

 Christian, Gary D., Química analítica , 1a ed., México : McGraw Hill, ,

2009