UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

EAP DE MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA

LABORATORIO DE FISIOLOGIA MICROBIANA

PRACTICA Nº10

ESTUDIO DEL EFECTO PASTEUR

Nombre: Ramirez Ortiz, Ingrid

Grupo: Miércoles 10:00 am – 02:00 pm

Ciudad universitaria
2015
 PRACTICA Nº 8
ESTUDIO DEL EFECTO PASTEUR
INTRODUCCION
El efecto Pasteur es la inhibición de la fermentación por la presencia de oxígeno. El
oxígeno permite formar gran catidad de ATPs en la fosforilacion oxidativa, sin embargo hay
microorganismos que pueden generar energía sin la presencia de oxígeno, realizando una
fermentación. Sacharomices cereviceae es una levadura anaeróbica facultativa que se utilizara
en la práctica para ver el efecto Pasteur. La respiración, por ser un forma de obtención de
energia mas eficiente que la fermentacion, se puede comprender que por económia celular, la
levadura va a preferir realizar la respiración en presencia de oxigeno.
En la práctica se evalúa el consumo de glucosa en aerobiosis, anaerobiosis y en
aerobiosis pero con DNP para evidenciar el desacoplamiento entre la fosforilacion oxidativa y el
transporte de electrones.

PROCEDIMIENTO
Se preparó tres cultivos de Sacharomices cerevisiae y se colocaron en diferente condiciones

Aerobiosis Anaerobiosis Aerobiosis con DNP

Incubar por 24 -48 horas

DETERMINACION DE LA CONCENTRACION DE GLUCOSA
Para determinar la concentración de glucosa consumida en el medio, se elaboró una curva
patrón y a partir de ella se interpolaron los datos obtenidos de la absorbancia
a) ELABORACION DE LA CURVA PATRON

EFECTO PASTEUR :3
[] Glucosa Absorbancia
100 3,363
25 0,962
6,25 0,204
1,56 0,048
RESULTADOS

[] Glucosa Absorbancia
Aerobico I 48,41 1,653
F 46,29 1,582
Anaerobico I 45,96 1,571
F 39,13 1,342
DNP I 47,54 1,624
F 42,44 1,453
Consumo de glucosa
[] glucosa INICIAL- [] glucosa FINAL

 Aerobico: 2.12
 Anaerobico: 6.83
 DNP: 5.1

GRÁFICA DE LA CONCENTRACIÓN DE GLUCOSA POR EL MÉTODO DE LA

ANTRONA

Curva de calibracion Glucosa-Antrona

4

3.5 y = 0.0335x + 0.0313

R² = 0.9983
3

2.5
Absorbancia

1.5

0.5

0
0 20 40 60 80 100 120
Glucosa

Series1 AEROBICO ANAEROBICO DNP Linear (Series1)

DISCUSION
En el experimento se esperaba que el consumo de glucosa sea mayor para el caso de
anaerobiosis comparado con la aerobiosis, lo cual se corroboró porque en aerobiosis arrojo un
valor de 2.12 y en anaerobiosis, 6.83. Esto ocurre porque la cantidad de energía producida por
fermentación (anaerobiosis) es de solo 2 moles de ATP por mol de glucosa, mientras que para la
aerobiosis son 38 moles de ATP por glucosa, entonces en anaerobiosis necesitara más cantidad
de glucosa para generar los ATPs faltantes para su desarrollo.
 El efecto Pasteur también permite afirmar que la respiración celular es más eficiente en
cuanto a la producción de energía ya que la célula necesita metabolizar menos glucosa para poder
satisfacer sus requerimientos en comparación a la fermentación en la que hay mayor consumo de
glucosa para obtener la energía necesaria.
El DNP actúa como un desacoplante entre la cadena transportadora de electrones y la
fosforilación oxidativa porque genera un gradiente de Ph que provoca que los protones H+
difundan hacia la matriz mitocondrial eliminando el gradiente de protones necesario para el
funcionamiento de la ATP sintasa y por ende la formación de ATP. Al haber poco ATP producido,
la levadura tendrá que metabolizar más cantidad de glucosa y esto se comprueba porque llega a
un valor cercano de glucosa en anaerobiosis.

CONCLUSIONES

 El oxígeno puede detener la fermentación en microorganismos facultativos activando la

cadena respiratoria.
 El DNP funciona como un desacoplador
 Hay mayor consumo de glucosa en anaerobiosis que en aerobiosis.
 La cantidad de ATP sintetizado en anaerobiosis es mucho menor que en aerobiosis
 La respiración celular es más eficiente, en cuanto a energía, que la fermentación

CUESTIONARIO
1. ¿Por qué se producen los mismos niveles de consumo de glucosa en condiciones
aeróbicas con DNP que en anaerobiosis?
Se producen casi los mismos niveles de consumo de glucosa porque el DNP desacopla la
fosforilacion oxidativa y la cadena de electrones provocando que no se generen altas
cantidades de energía (ATP) producto del flujo de protones por la ATP sintasa en
condiciones aeróbicas. Solo se producirá 2 moles de GTP (análogo al ATP) en el ciclo de
Krebs por 1 mol de glucosa lo que provoca que la levadura tenga que metabolizar mayor
cantidad de glucosa para cubrir sus requerimientos, por lo que al comparar el consumo de
glucosa entre ambas condiciones arroja un valor similar.
2. Explique ¿Porque se gasta más glucosa en condiciones anaeróbicas que en condiciones
aeróbicas para satisfacer los requerimientos energéticos?
En condiciones anaeróbicas solo se producen 2 moles de ATP por cada molécula de
glucosa sin embargo en aerobiosis se producen 38 moles de ATP por molécula de glucosa.
Como hay menor cantidad de ATP producido en anaerobiosis, la levadura, necesitara más
moléculas de glucosa para tratar de equilibrar la cantidad de ATP que produciría si
estuviese en aerobiosis y para cubrir sus requerimientos. Esta es la razón por la cual hay
mayor gasto de glucosa en anaerobiosis que en aerobiosis.
BIBLIOGRAFIA
DONALD V., JUDITH G.( 2004). Bioquimica, Tercera edición. Editorial Medica
Panamericana. España.