Isolasi Dan Identifikasi Ekstrak Metanol Pada Akar Ketepeng Kecil (Cassia

tora, Linn) Dengan Metode Spektrofotometri

SKRIPSI
Diajukan Untuk Memenuhi Persyaratan Ujian Hasil Penelitian Jurusan
Farmasi

VICRYANTO R. HALID
NIM : 821 412 002

UNIVERSITAS NEGERI GORONTALO

FAKULTAS OLAHRAGA DAN KESEHATAN
JURUSAN FARMASI
PROGRAM STUDI S1 FARMASI
2016

i
ii
Isolasi Dan Identifikasi Ekstrak Metanol Pada Akar Ketepeng Kecil (Cassia
tora, Linn) Dengan Metode Spektrofotometri

SKRIPSI
Diajukan Untuk Memenuhi Persyaratan Ujian Hasil Penelitian Jurusan
Farmasi

VICRYANTO R. HALID
NIM : 821 412 002

UNIVERSITAS NEGERI GORONTALO

FAKULTAS OLAHRAGA DAN KESEHATAN
JURUSAN FARMASI
PROGRAM STUDI S1 FARMASI
2016

iii
 KEMENTERIAN PENDIDIKAN DAN KEBUDAYAAN
UNIVERSITAS NEGERI GORONTALO
FAKULTAS OLAHRAGA DAN KESEHATAN
Jl.Prof. DR. John Ario Katili No 44 Telp. (0435) 821698 Kampus III

SURAT PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan sesungguhnya bahwa skripsi yang saya susun
sebagai syarat untuk memperoleh gelar Sarjana dari Program Studi S1 Farmasi,
Fakultas Olahraga dan Kesehatan, Universitas Negeri Gorontalo seluruhnya
merupakan hasil karya saya sendiri.

Adapun bagian-bagian tertentu dalam penulisan skripsi yang saya kutip

dari hasil karya orang lain telah dituliskan sumbernya dengan jelas sesuai dengan
norma, kaidah, etika penulisan ilmiah dan buku pedoman penulisan karya ilmiah
Universitas Negeri Gorontalo.

Jika dikemudian hari ternyata ditemukan seluruh atau sebagian skripsi ini
bukan hasil karya sendiri atau terdapat plagiat dalam bagian-bagian tertentu, maka
saya akan bertanggung jawab sepenuhnya dan menerima sanksi yang dijatuhkan
oleh Universitas Negeri Gorontalo.

Gorontalo, Juni 2016

Vicryanto R. Halid

iv
v
 LEMBAR PENGESAHAN
Skripsi Yang Berjudul :
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI EKSTRAK METANOL PADA AKAR
KETEPENG KECIL (Cassia tora, Linn) DENGAN METODE
SPEKTROFOTOMETRI

Oleh :
VICRYANTO R. HALID
NIM : 821412002

Telah dipertahankan di depan dewan penguji

Hari/Tanggal : Selasa/26 Juli 2016
Waktu : 10.00 - 11.00 WITA
Penguji:

1. Dr. Weny J.A Musa M.Si ...................................................

NIP . 19660822 199103 2 002

2. Moh. Adam Mustapa S.Si.,M.Sc ...................................................

NIP . 197704222006041003

3. Dr. Widysusanti Abdulkadir, M.Si., Apt ...................................................

NIP. 19711217 200012 2 001

4. Dr. Teti Sutriyati Tuloli, M.Si.,Apt ...................................................

NIP. 19800220 200801 2 007

Gorontalo, Juli 2016

Dekan Fakultas Olahraga dan Kesehatan
Universitas Negeri Gorontalo

Dr. Lintje Boekoesoe, M.Kes

vi
 ABSTRAK

Vicryanto Halid, 2016. Isolasi dan Identifikasi Ekstrak Metanol Akar

Ketepeng Kecil (Cassia tora, Linn) Skripsi. Jurusan Farmasi Fakultas
Olahraga dan Kesehatan Universitas Negeri Gorontalo. Pembimbing I Dr.
Weny J.A Musa, M.Si dan Pembimbing II Moh. Adam Mustapa S.Si., M.Sc

Penelitian ini bermaksud untuk mengisolasi dan mengidentifikasi metabolit

sekunder yang terkandung di dalam Ekstrak metanol akar ketepeng kecil (Cassia
tora, L) yang memiliki efek farmakologi sebagai senyawa untuk obat anti tumor
dan berpotensi dikembangkan menjadi obat anti kanker. Sebanyak 325 gram
haksel akar ketepeng kecil di refluks dengan pelarut metanol menghasilkan
ekstrak metanol kental 46,11 gr yang sudah di evaporasi. Hasil skrining dengan
FeCl3 positif mengandung senyawa fenol. Hasil partisi dengan n-heksan
mengahasilkan ekstrak fraksi metanol 34,65 gr. Hasil pemisahan dengan
kromatografi kolom menghasilkan 186 fraksi namun hanya 78 fraksi yang diambil
dalam 5 penggabungan fraksi (K1-K5). Fraksi K4 No.40 diuji kemurnian isolat
menggunakan 4 eluen pelarut lalu dengan uji KLT dua dimensi dan menghasilkan
1 noda tunggal yang diduga sebagai isolat murni. Terhadap dugaan isolat murni
dilakukan analisis spektofotometer UV-Vis. Hasil analisis dengan
spektrofotometer, menunjukan serapan pada range panjang gelombang 200 nm
sampai 300 nm. Berdasarkan hasil spektra uv-vis tersebut dan dari hasil uji
fitokimia, diduga isolat murni merupakan senyawa fenol.

Kata Kunci : Akar Ketepeng Kecil (Cassia tora Linn), Isolasi, Identifikasi,
Metabolit Sekunder.

vii
 ABSTRACT

Vicryanto R. Halid. 2016. Isolation and identification of the methanol extract

of the roots of Ketepeng Kecil (Cassia tora, Linn) Thesis. Department of
Pharmacy Faculty of sports and health of the State University of Indonesia.
Supervisor I Dr. Weny J.A. Musa, M.Si and Supervisor II Moh. Adam
Mustapa S. Si., M.Sc

This research intends to isolate and identify the secondary metabolites contained
in the extract of the root of methanol ketepeng small (Cassia tora, L) which has
the effect of pharmacological compounds for anti tumor and potentially developed
into anti-cancer drugs. As many as 325 grams of haksel root ketepeng small reflux
with methanol solvent extracts of condensed methanol produces 46.11 gr already
evaporating. The results of the screening with positive contains phenol FeCl3. The
results of a partition with n-heksan mengahasilkan methanol fraction extract 34.65
Gr. Results separation with chromatography columns produce 186 faction but
only 78 fraction taken in 5 merger fractions (K1-K5). The fraction of K4 40 no.
40 tested isolates using 4 eluen purity solvent with a two-dimensional TLC test
and generate 1 alleged single stain isolate pure. Against the alleged pure isolates
conducted an analysis of the spektofotometer UV-Vis spectrophotometer with
analysis. results, shows absorption at a wavelength of 200 nm range up to 300 nm.
Based on the results of the uv-vis spectra and test results of phytochemicals,
supposedly pure isolates compound phenol.

Key words: Root Ketepeng kecil (Cassia tora Linn), isolation, identification,
secondary metabolites.

viii
 MOTTO DAN PERSEMBAHAN

“Sesungguhnya Allah, seluruh Malaikat_Nya, seluruh penghuni langit-langit dan

bumi, sampaipun semut yang berada didalam liangnya, dan sampaipun ikan,
senantiasa memuji an mendoakan kebaikkan untuk orang yang mengajarkan
kebaikkan kepada orang lain”
(HR. At Tirmizi dan dishahihkan oleh Al Albani)

Pendidikan merupakan senjata yang paling mematikan didunia, karena dengan

pendidikan mampu mengubah dunia.
(Nelson Mandela)

Kelemahan terbersar kita terletak pada keputusasaan, jalan yang paling pasti
meraih kesukseksan adalah untuk selalu mencoba sekali lagi bersama kekuatan
untuk sukses yang lebih besar dari pada ketakutan akan kegagalan
(Vicryanto R. Halid)

Alhamdulillahirabbil alamin.....
Dengan rasa syukur yang begitu besar kupanjatkan kepada Allah SWT,
kupersembahkan karya sederhana ini kepada kedua orang tuaku tercinta
yang selalu mendukung, memotivasi serta mendoakanku, ibunda tercinta
(Marjam J. Da’u, M.Pd) dan Ayahanda tercinta (Ramu Halid, Amd) serta
adik tersayang satu-satunya Nurindah Sari Halid. Terimakasih yang tak
terhingga atas segala doa, dukungan, nasehat, cinta, dan kasih sayang serta
pengorbanan dari ibu dan ayah sampai saat ini, sehingga bisa menempuh
pendidikan sampai pada tahap ini.

Teman-teman seperjuanganku Farmasi 2012 yang tidak bisa disebutkan satu per
satu, terkhususnya Farmasi B 2012 terimakasih untuk kalian semua karena telah
banyak membantu dalam penyelesaian skripsi ini.

Terimakasih Almamaterku Tercinta

Tempatku Menimba Ilmu
Universitas Negeri Gorontalo
2016

ix
 KATA PENGANTAR

Segala puja dan puji serta rasa syukur atas kehadirat Allah SWT karena
telah melimpahkan rahmat, berkah dan hidayah-Nya sehingga dapat
menyelesaikan penelitian ini dalam bentuk skripsi yang berjudul “Isolasi Dan
Identifikasi Ekstrak Metanol Pada Akar Ketepeng Kecil (Cassia tora, Linn)
Dengan Metode Sepktrofotometri Uv-Vis” sebagai salah satu syarat untuk
meraih gelar sarjana Farmasi di Fakultas Olahraga dan Kesehatan, Universitas
Negeri Gorontalo.
Pada kesempatan ini, dengan segenap rasa cinta dan hormat saya kepada
keluarga yaitu kedua orang tua Ibu Marjam J. Da’u dan Bapak Ramu Halid, serta
adik saya tercinta Nur Indah Sary Halid, mengucapkan terimakasih yang tak
terhingga karena telah menjadi sumber energi terbesar saya dalam belajar, bekerja
dan bertanggung jawab hingga dapat menyelesaikan skripsi ini. Dalam
penyusunan skripsi ini pastinya tidak lepas dari bantuan beberapa pihak yang
sangat bersahaja dan bertanggung jawab serta begitu sabar dalam membimbing
saya sehingga skripsi ini dapat terselesaikan tepat pada waktunya. Untuk itu
ucapan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada dosen pembimbing I saya Ibu
Dr. Weny J.A Musa, M.Si dan pembimbing II Bapak Moh. Adam Mustapa.,
M.Sc., atas waktu dan bimbingannya selama proses penyelesaian Skripsi ini. Tak
lupa pula ucapan terimakasih kepada pihak-pihak yang telah berpartisipasi dalam
penyusunan skripsi ini:
1. Bapak Prof. Dr. H. Syamsu Qamar Badu, M.Pd selaku Rektor Universitas
Negeri Gorontalo, terima kasih atas fasilitas yang telah diberikan selama
kuliah di Universitas Negeri Gorontalo.
2. Ibu Dr. Lintje Boekoesoe, M.Kes selaku Dekan Fakultas Olahraga dan
Kesehatan, terima kasih atas bantuan yang diberikan selama saya menempuh
pendidikan di Fakultas Olahraga dan Kesehatan Universitas Negeri
Gorontalo.
3. Ibu Risna Podungge, S.Pd., M.Pd selaku Wakil Dekan I, Ibu dr. Zuhriana K.
Yusuf, M.Kes selaku Wakil Dekan II dan Bapak Ruslan, S.Pd., M.Pd selaku
Wakil Dekan III yang telah memberikan bantuan selama saya menempuh

x
 pendidikan di Fakultas Olahraga dan Kesehatan Universitas Negeri
Gorontalo.
4. Seluruh staf di lingkungan Fakultas Olahraga dan Kesehatan, terima kasih
atas segala bantuannya selama ini.
5. Ibu Dr. Widysusanti Abdulkadir, S.Si., M.Si., Apt selaku ketua Jurusan
Farmasi dan selaku penguji skripsi saya, terima kasih atas bimbingan dan
arahan sehingga skripsi ini bisa terselesaikan dengan baik.
6. Ibu Dr. Teti Sutriyati Tuloli, M.Sc., Apt., selaku dosen penguji saya, terima
kasih telah memberikan ilmunya dan meluangkan waktunya serta
membimbing saya dalam proses penyelesaian skripsi ini.
7. Ibu Nur Ain Thomas., S.Si., M.Si., Apt selaku dosen pembimbing akademik,
terima kasih telah memberikan ilmunya dan meluangkan waktu untuk
membimbing saya dalam perkuliahan dan penyelesaian skripsi ini.
8. Bapak Moh. Adam Mustapa., M.Sc., sebagai dosen terbaik selaku
pembimbing II, terima kasih untuk segala ilmunya, dan bantuan pikiran serta
materi juga motivasi, saran dan solusi disetiap permasalahan perkuliahan.
9. Staf dosen-dosen Farmasi UNG yang juga telah banyak memberikan ilmunya
serta dukungan kepada saya.
10. Staf Tata Usaha di lingkungan jurusan farmasi, Ibu Wiwin dan Kak Rionaldi
Yahya serta Laboran Farmasi UNG, Kak Wiji Iswandiyanto dan Kak Ayu
Anggrita yang telah memberikan banyak bantuan selama ini.
11. Keluarga besar saya yang selama ini telah memberikan dukungan, motivasi
dan bantuan baik secara moril maupun materil
12. Teman-teman sebimbingan Fitokimia Arifin Oputu (Finop/Ipin), Asri
Aristianto Nuke, Moh. Usman Nur (Andi), Suyadi, Fadly Abd. Rahman, Sitty
Hardianty Amirudin (Dian), Nurfatmawati A.H (Upa), Fitri Rahmayanti, dan
Nurhayati Arsyad serta teman-teman jurusan kimia sebimbingan lainnya
Widy, Ainun, Ningsi, Andres, Nunu, dan Sinta. Terimakasih atas bantuannya,
saran dan motivasinya selama masa penelitian hingga pada tahap
penyelesaian skripsi ini.

xi
13. Teman-teman seperjuangan dikelas C yang sempat menjadi penyesuaian diri
masuk kuliah pertama, Upik, La medi, Jojo, Prisca, Bebi, Kia, Ayu
Wulandari, Yulin, Mbak Zulia, Rya Latif, Rosma dan Niar atau Rosmaniar,
Widy Pontoh, Intan Ibrahim, Intan Nono, dan masih banyak lagi, terima kasih
untuk waktu singkat yang pernah sama-sama berjuang diawal perkuliahan
14. Teman-teman kelas B seperjuangan sampai akhir untuk saat ini Megawati,
Arif Arbie, Nur Rismayani, Nanan, Nangsi/Nugget, Widyastuti, Sakinah,
Tary, Nia, Ayu, Dian Dalu, Tutri dan lainnya yang sudah tidak bisa
disebutkan semua, terima kasih karena telah saling memberikan pentunjuk
dan motivasi sampai akhir perkuliahan.
15. Sahabat-sahabat terdekat sehidup dari lahir mungkin yang saling memotivasi
dan menyemangati dalam proses pengerjaan skripsi ini dan selama kuliah
Yusuf Kasim dan Nuriman Ismail terimakasih atas waktu yang telah
diluangkan.
16. Teman-teman kampus Universitas Negeri Gorontalo dalam hal ini teman-
teman KKS pengabdian di Desa Titidu, Kwandang Kab. Gorontalo Utara
Fadli Himran, (Ade), Iyam Pakaya, Bebi dan Nizma terima kasih telah
memberikan pengalaman dan ilmu bermanfaat dalam perkuliahan dan
kelancaran penyelesaian skripsi ini.
17. Saudara sepupu selaku master teknisi komputer Utam Pane’o terima kasih
untuk bantuan paling berarti selama pengerjaan skripsi sampai selesai.
18. Seluruh staf perangkat Kantor Desa Tabongo Barat, Ibu Massi, Anis, Bapak
Sa’i, ibu Tity, Mila, pak Sekdes dan tak lupa pula Bapak Roman Umar selaku
Ayahanda Desa Tabongo Barat terima kasih atas bantuanya dan kerja sama
serta pengertianya terhadap saya sebagai mahasiswa akhir dalam penyesaian
skripsi ini.
19. Kuda besi ninja hatori kilat biru yang selalu setia menemani kemanapun,
dalam cuaca apapun dan sangat membantu dalam kegiatan kuliah sampai
pegerjaan dan penyelesaian sksripsi ini.
20. Adik-adik farmasi yang tidak bisa disebutkan satu persatu, trimakasih atas
bantuannya selama ini.

xii
21. Semua pihak yang telah membantu penulis baik secara langsung maupun
tidak langsung sehingga dapat menyelesaikan skripsi ini.
Semoga Allah swt memberikan balasan kebaikan dunia dan akhirat atas
segala bantuan yang telah diberikan kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan
skripsi ini.
Saya menyadari keterbatasan dan kekurangan dalam penulisan skripsi ini,
maka penulis mengharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari
semua pihak. Akhir kata, semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi
penulis khususnya dan pembaca pada umumnya, aamiin.

Gorontalo, Juni 2016

Vicryanto R. Halid

DAFTAR ISI

Halaman
Halaman Sampul ........................................................................................... i
Halaman Logo ............................................................................................... ii

xiii
Halaman Judul .............................................................................................. iii
Surat Penyataan ............................................................................................ iv
Lembar Persetujuan Pembimbing .............................................................. v
Lembar Pengesahan ...................................................................................... vi
ABSTRAK ...................................................................................................... vii
ABSTRACT .................................................................................................... viii
MOTTO DAN PERSEMBAHAN................................................................. ix
KATA PENGANTAR .................................................................................... x
DAFTAR ISI .................................................................................................. xiv
DAFTAR TABEL ......................................................................................... xvii
DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... xviii
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xix
BAB I PENDAHULUAN ................................................................. 1
1.1 Latar Belakang ................................................................ 1
1.2 Rumusan Masalah ........................................................... 3
1.3 Tujuan Penelitian ............................................................. 3
1.4 Manfaat Penelitian ........................................................... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ....................................................... 4
2.1 Uraian Umum Tanaman .................................................. 4
2.1.1 Klasifikasi Tanaman ........................................... 4
2.1.2 Morfologi Tanaman ........................................... 4
2.1.3 Kandungan Kimia dan Efek Farmakologi .......... 5
2.1.4 Kegunaan ............................................................ 6
2.2 Ekstraksi .......................................................................... 7
2.2.1 Definisi ................................................................ 7
2.2.2 Prinsip kerja ........................................................ 7
2.2.3 Tujuan ekstraksi .................................................. 8
2.2.4 Metode ektraksi .................................................. 8
2.3 Kromatografi Lapis tipis ................................................. 10
2.4 Fraksinasi ........................................................................ 13
2.5 Spektrofotometri Uv-Vis ................................................. 14

xiv
 2.5.1 Definisi ................................................................ 14
2.5.2 Instrumen spektroofotometri Uv-Vis .................. 16
2.5.3 Prinsip kerja ........................................................ 18
2.5.4 Hal-hal yang perlu diperhatikan ......................... 19
BAB III METODE PENELITIAN .................................................... 20
3.1 lokasi dan waktu penelitian ............................................. 20
3.2 desain penelitian ............................................................. 20
3.3 Alat dan bahan ................................................................. 20
3.3.1 Alat ...................................................................... 20
3.3.2 Bahan ................................................................... 20
3.4 Prosedur penelitian .......................................................... 20
3.4.1 pengambilan sampel ........................................... 20
3.4.2 pengolahan sampel ............................................. 20
3.4.3 pembuatan ekstrak metanol akar ketepeng kecil. 21
3.4.4 Skrining fitokimia .............................................. . 21
3.4.5 proses fraksinasi .................................................. 22
3.4.6 kromatografi kolom gravitasi .............................. 23
3.4.7 kromatografi lapis tipis ........................................ 23
3.4.8 spektrofotometri uv-vis ....................................... 23
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN............................................. 45
4.1 ekstraksi .......................................................................... 24
4.2 skrining fitokimia ........................................................... 25
4.3 fraksinasi ......................................................................... 27
4.4 analisis KLT hasil fraksinasi ............................................ 28
4.5 pemisahan dan pemurnian ............................................... 29
4.6 uji kemurnian ................................................................... 31
4.7 hasil analisis uv-vis ......................................................... 33
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN............................................. 35
5.1 Kesimpulan ...................................................................... 35
5.2 Saran ............................................................................. 35
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................... . 36

xv
LAMPIRAN ......................................................................................... . 39
CURICULUM VITAE......................................................................... 50

xvi
 DAFTAR TABEL

Halaman

1. Tabel Pelarut dan golongan kandungan kimia yang terlarut .................. 14

2. Tabel Analisis Perhitungan Berat Ekstrak Yang Diperoleh ..................... 25
3. Tabel Hasil uji skrining fitokimia ekstrak metanol akar Cassia tora ....... 26
4. Tabel Hasil Fraksinasi Ekstrak Ketepeng Kecil ....................................... 28
5. Tabel Hasil Uji Fitokimia Isolat Murni .................................................... 33
6. Tabel Hasil spektra penggabungan fraksi 1 spektrum Uv-Vis ................. 34

xvii
 DAFTAR GAMBAR
Halaman
1. Tanaman ketepeng kecil (Cassia tora Linn) ......................................... 4
2. Struktur Senyawa Fenol ............................................................................ 5
3. Prinsip Kerja Spektrofotometri Uv-Vis .................................................... 18
4. Uji KLT hasil fraksinasi............................................................................ 29
5. Hasil KLT Kolom Eluen Pertama ............................................................. 30
6. Hasil KLT Kolom Eluen Kedua ............................................................... 31
7. Hasil KLT isolat fraksi nomor 40 ............................................................. 32
8. Hasil KLT dua dimensi ............................................................................. 33
9. Hasil spektra penggabungan fraksi 1 spektrum Uv-Vis ........................... 34

xviii
 DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
1. Surat Keterangan Meneliti ......................................................... 43
2. Surat keterangan Telah melakukan penelitian. .............................. 45
3. Surat keterangan bebas plagiat ..................................................... 47
4. Skema Kerja penelitian ............................................................................. 49
5. Dokumentasi penelitian ............................................................................ 52
6. Hasil Skrining fitokimia ekstrak fraksi metanol ....................................... 55
7. Hasil Kromatografi kolom grafitasi .......................................................... 59
8. Hasil uji KLT fraksi-fraksi kromatografi kolom grafitasi ......................... 38
9. Hasil uji KLT kemurnian isolat ................................................................. 39
10. Hasil Uji fitokimia isolat murni ............................................................... 40
11. Hasil analisis spektrofotometri uv-vis ....................................................... 41

xix