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Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas


Práctica: Reacción de Aminoácidos y proteínas

Objetivo: Identificar la presencia de aminoácidos concentrado y el grupo indólico del triptófano


con grupos R específicos que constituyen una produciendo un anillo color púrpura en la interface,
proteína mediante reacciones coloridas. las reacciones con peptona y albúmina fueron
positivas, indicando la presencia de triptófano en
Resultados: sus componentes, en la siguiente cantidad1:
-SH RN H-C RM RX RB
albúmina, 1.2 g/100 g de proteína y peptona, 1.35
Gelatina - + - + + +
g/100 g; las reacciones de gelatina , fenilalanina
Peptona - + + + + +
no reaccionaron lo que nos indica que no se
Albúmina + + + + +
encuentra presente el triptófano.
Aspartame + -
Tirosina + + + -
Triptófano + + + - En la realización de la reacción de Millón, al
agregar un poco del reactivo a diferentes
Fenilalanina + - - - -
muestras solo la tirosina dio positiva debido a que
Cisteína +
el reactivo de Millón contiene una mezcla de
Agua - - - - - - nitritos y nitratos mercúricos en ácido nítrico
concentrado la cual reacciona con los grupos
fenólicos de las muestras por lo cual la prueba
Discusión: solo dio positiva para la tirosina, sin embargo en la
En las pruebas de reacción del plomo para gelatina, la peptona y la albumina se observaron
cisteína, las muestras positivas fueron: cisteína diferentes tonos de rojo debido a que contienen en
(como referencia) y albúmina. La albúmina, menor proporción esta característica.
proteína encontrada en gran proporción en el
plasma sanguíneo, es rica en cisteína y presenta En la reacción xantoproteica se adicionó 1 ml de
grupos sulfhidrilos (-SH) lo anterior se comprobó ácido nítrico y se estratificó con 1 ml de hidróxido
de amino con el fin de que reaccionará con las
debido a la reacción realizada con (CH3COO)2Pb.
muestras que contienen al menos un anillo
Para esta reacción fue necesario añadir NaOH aromático activado en su estructura provocando
para favorecer una desprotonación y permitir el un color amarillo. Esta prueba dio positiva para la
grupo SH tener una mayor exposición, para así peptona, la albúmina, la tirosina, el triptofano y la
formar un precipitado color grisáceo o negro de fenilalanina dando diferentes tonos de amarillo
PbS. Fue necesario calentar; a temperatura (como se muestra en la imagen 5) debido a que
ambiente, la reacción fue poco notoria. algunas de las muestras contienen en mayor
proporción anillos aromáticos activados que otros.
La reacción de la ninhidrina dio positivo para todas
las muestras excepto para el agua la cual sirvió La reacción de biuret, como se esperaba, dio
solo como testigo en todas las pruebas para poder positivo para la gelatina, la peptona y la albúmina
comparar. Lo anterior se debió a que las debido a que al agregar NaOH al 10% y unas
muestras, al ser aminoácidos, péptidos o gotas del reactivo de biuret, este reaccionó con las
proteínas contienen al menos un grupo amino en muestras que contenían dos o más enlaces
su estructura provocando que al agregar peptídicos en su estructura dando un color azul en
ninhidrina en butanol, esta reaccionara con los algunos casos y violeta en otros (imagen 6). Las
grupos amino dando diferentes tonos de violeta a muestras en las cuales dio positivo son péptidos y
las muestras como se muestra en las imágenes. proteínas los cuales son la unión de varios
Durante esta prueba fue necesario calentar las aminoácidos.
muestras para que la reacción se llevara a cabo.
Conclusiones:
La prueba de Hopkins-Cole consiste en la reacción  Las proteínas están formadas por
del ácido glioxílico estratificado con H2SO4 enlaces entre diferentes aminoácidos
Instituto Politécnico Nacional
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
Práctica: Reacción de Aminoácidos y proteínas

 Las cadenas polipeptidas se identifican


en diferentes reaccionen dependiendo
su número de enlaces peptídicos y las
estructuras de los residuos
aminoacidicos.

Bibliografía:
 Plummer, D. (1981). Introducción a la
bioquímica práctica. McGraw-Hill
Latinoamericana. 1ª edición. Pp. 128-137
 Peña, A. (2002) Bioquímica 2° Ed. Ed Limusa.
México. Pp.303-304
 S.A (2014) Facultad de Química UNAM.
Fármacos y su unión a proteínas plasmáticas.
Laboratorio de biofarmacia. Pp. 7

Anexos:

Imagen 2. Reacción de
la ninhidrina

Imagen 3. Reacción de
Hopkins-Cole

Imagen 4. Reacción
de Millón

Imagen 5. Reacción
xantoproteica

Imagen 6. Reacción
de biuret

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