UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

ALUMNA: ESPINOZA RAFAEL CINTHIA

PRÁCTICA N°1: USO, MANEJO E IMPORTANCIA DEL MICROSCOPIO

PROFESOR: BIOLOG. CESAR CRUZ

CURSO: SANIDAD ACUÍCOLA

HORARIO: JUEVES DE 2PM A 4 PM

2018
INTRODUCCION

El microscopio es el elemento más importante en cualquier laboratorio. Nos permite,

ver células, microorganismos y bacterias, lo cual es imposible de observar a simple
vista.

Con el microscopio hemos descubierto infinidades de cosas que nos han ayudado a
evolucionar como por ejemplo hemos descubierto enfermedades que serían imposible
de detectar sin la ayuda del microscopio, también hemos descubierto las cura para
esas y muchas más enfermedades.

El microscopio cuenta con un sistema óptico que es el encargado de reproducir y

aumentar las imágenes mediante el conjunto de lentes que lo componen. Está
formado por los oculares y los objetivos. Los oculares: están constituidos
generalmente por dos lentes, dispuestas sobre un tubo corto. Los oculares
generalmente más utilizados son los de: 8X, 1OX, 12.5X, 15X. La X se utiliza para
expresar en forma abreviada los aumentos.

Este método se basa en calibrar el ocular micrométrico (sin medidas), con la lámina
patrón (con medidas establecidas), hasta obtener una equivalencia con una simple
regla de tres. Para cada lente objetivo se tendrá que hallar un nuevo rango de medida.

Con este método se pueden medir los parásitos observados en el laboratorio, los
diámetros de los glóbulos rojos (para la curva de Prince Jones), etc.
OBJETIVOS

- Identificar las partes de un microscopio compuesto y de un microscopio de

disección para poder usarlos correctamente.
- Reconocer las diferencias entre un microscopio compuesto y el estereoscopio.
- Preparar láminas simples para observar bajo el microscopio y aprender a enfocarlas
a diferentes magnificaciones (ampliaciones del objetivo).
- Conocer cuándo se debe usar el objetivo de inmersión.

REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA

PARTES DEL MICROSCOPIO

1. OBJETIVOS
Son los grupos de lentes principales, es decir, los que determinan el aumento
máximo y el poder de resolución del microscopio. Cada objetivo lleva una
inscripción formada por dos números separados por una barra.
Los objetivos de mayor aumento (40x y 100x habitualmente) tienen el extremo
retráctil para protegerlos es caso de choque contra la preparación, ya que para
enfocarlos hay que acercarlos mucho a la misma. Los objetivos de gran aumento
sólo pueden ser utilizados si se interpone entre el objetivo y la preparación una
gota de un líquido que tenga el mismo índice de refracción que el vidrio
(generalmente aceite de cedro) por lo que se denominan objetivos de inmersión.

2. OCULAR
Es el otro grupo de lentes del microscopio. Aumenta la imagen formada por el
objetivo. En su parte superior lleva una inscripción que indica el aumento que
produce.

3. ESPEJO
Sirve como fuente de luz al reflejar la de un foco externo. Tiene dos caras, una
plana y otra cóncava para concentrar más la luz.

4. PORTAFILTROS
Soporte que admite filtros de vidrio de diversos colores. Estos filtros se utilizan
para suavizar la luz o para aumentar el contraste.
5. DIAFRAGMA
Está formado por un conjunto de laminillas que dejan un orificio en su centro.
El diámetro del orificio puede ser variado mediante una palanca, con lo que se
regula la cantidad de luz que llega a la preparación.
6. CONDENSADOR Es un sistema de lentes situado debajo de la platina que
concentra la luz sobre la preparación, consiguiéndose así una iluminación más
intensa.
7. BRAZO Sirve de soporte a los otros elementos del microscopio. Está
articulado con el pie para poder inclinarlo y hacer así más cómoda la
observación.
8. PIE
Soporte sobre el cual se apoya el microscopio.
9. CHARNELA
Es el punto de articulación entre el brazo y el pie. Permite inclinar
el microscopio para hacer más cómoda la observación.
10. TUBO
Es un tubo hueco que separa los dos grupos de lentes (ocular y objetivo).
11. REVÓLVER PORTAOBJETIVOS
Permite colocar en posición de trabajo a los distintos objetivos con que cuenta
el microscopio. Presenta unas ranuras que facilitan la fijación del objetivo en la
posición correcta.
12. TORNILLO DE ENFOQUE(MACROMÉTRICO)
Acerca o aleja rápidamente el objetivo a la preparación para hacer un enfoque
aproximado. Se usa sólo con los objetivos de menor aumento.
13. TORNILLO MICROMÉTRICO
Permite enfocar con precisión, moviendo muy lentamente el objetivo.
14. PLATINA
Es la superficie sobre la cual se colocan las preparaciones. Tiene un orificio en
su centro para permitir el paso de la luz. En algunos microscopios está dotada
de un sistema con dos tornillos que permiten el desplazamiento preciso de la
preparación.
15. PINZAS
Sirven de sujeción de la preparación sobre la platina.
16. TORNILLO DEL CONDENSADOR
Permite subir o bajar el condensador respecto a la platina para mejorar la
iluminación.

Fig. 1. Partes del microscopio.

 MATERIALES Y METODOS

 Microscopio simple o estereoscopio

 Microscopio compuesto
 Aceite de inmersión
 Recortes de periódico
 Porta y cubre objeto

PROCEDIMIENTO

Reconocer cada parte del microscopio y

estereoscopio

Fig. 2: Estereoscopio

Poner un recorte de periódico en el porta objeto

Agregar gotas de Fig. 3: porta

aceite de inmersión objeto con aceite
de inmersión

Observar y tomar fotos Observar en diferentes

aumentos

Fig. 4: alumna
observando la
muestra
RESULTADOS

Fig. 4: Vista en el estereoscopio

Podemos visualizar la nitidez de la figura más no las partes más pequeñas de este,
pero se observa la imagen diferenciada. Esto se debe a que el lente ocular no
presenta diferentes aumentos.

Fig.5: Vista del microscopio compuesto: ocular 10x - objetivo 4x

Es esta vista se puede apreciar una mayor nitidez así como los detalles de la letra
(tinta) forma y textura pequeñas discontinuidades propias de la tinta

Fig.6: Vista del microscopio compuesto: ocular 10x -objetivo 10x

Es esta vista se puede apreciar una mayor nitidez y mayor amplitud la letra “e”, así
como la evidencia de más las discontinuidades de la tinta en el papel.
CUESTIONARIO

1. ¿Cuál es la diferencia entre un microscopio estereoscópico y un microscopio

compuesto

El área observad esta ampliamente iluminada y los objetos que se estudian aparecen
mas oscuros que en el fondo. Pueden llegar a hasta uno 1000 aumentos, aunque en
mejores oculares puede llegar a incrementarse llegando hasta 2000 de aumento, esto
se debe al poder de resolución, encendido como la capacidad de distinguir todos los
puntos adyacentes como distintos y separados.

a. Estereoscopio: Se utiliza para ofrecer una imagen estereoscópica (3D) de la

muestra. Para ello es necesario que los dos ojos observen la imagen con ángulos
ligeramente distintos. Todos los microscopios estereoscópicos deben ser
binoculares. El microscopio estereoscópico es apropiado para observar objetos de
tamaños relativamente grandes, por lo que no es necesario modificar los objetos a
ver, ni tampoco lo es que la luz pase a través de la muestra.

b. Microscopio compuesto: se utiliza especialmente para examinar objetos

transparentes, o cortados en láminas tan finas que se transparentan. Se emplea para
aumentar o ampliar las imágenes de objetos y organismos no visibles a simple vista.
Para ello cuenta con el sistema óptico, mecánico y de iluminación, ya que mediante
estos, se puede modificar la muestra y manipularla mejor, además la visualización
depende de la luz que atraviese la muestra. Este microscopio tiene mayor poder de
resolución y mayor aumento que el estereoscopio.

2. ¿Qué función cumple el diafragma y el condensador?

- Diafragma: Esta situada debajo de la plataina y del condensador, siendo el

encargado de regular la entrada de luz al codensador. En algunos modelos se
acciona por medio de una palanca y en otros mediante unra rueda con orificios de
distintos diámetros.

- Condensador: esta situado debajo de la platina. Se encuentra formado por un

sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de
la preparación, formando un cono de luz con el mismo ángulo que el del campo del
objetivo. El lente superior es generalmente planoconvexa, quedando la cara superior
plana en contacto con la preparación cuando se usan objetivos de gran abertura (los
de mayor ampliación

3. ¿Para que sirve el aceite de inmersión?

Los objetivos de mayor aumento, tienen una distancia focal muy pequeña y además
la primera lente del objetivo es de pequeño diámetro.
 Los rayos que desde la muestra se dirigen al objetivo atraviesan el vidrio del
cubreobjeto y al pasar al aire se separan de la normal. Algunos rayos incluso sufren
reflexión total en la interfase vidrio-aire
Solo llega al microscopio una pequeña parte de la luz que parte de la muestra, con el
problema que conlleva para la visión. Al intercalar, entre el objetivo y el
cubreobjeto una gota de aceite de cedro, de índice de refracción casi igual al vidrio,
los rayos emergentes ya no se apartan de la normal, sino que continúan su camino
sin desviación, consiguiendo así que una mayor cantidad de luz llegue al objetivo,
mejorando notablemente la visión.

4. ¿A qué se llama objetivo seco y objetivo húmedo?

A. Objetivo Seco.- Son aquellos en los que entre objetivo y la preparación solo hay
aire,
B. Objetivo Húmedo.- También llamado objetivo de inmersión. Cuando es necesario
colocar entre la lente y la preparación un elemento liquido, lo cual permite una
mayor luminosidad.

5.- ¿En qué medidas de aumento se dan los microscopios simples y los microscopios
electrónicos?
Microscopio electrónico
La potencia amplificadora de un microscopio óptico está limitada por la longitud de
onda de la luz visible. El microscopio electrónico utiliza electrones para iluminar un
objeto. Dado que los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que la de la
luz pueden mostrar estructuras mucho más pequeñas. La longitud de onda más corta de
la luz visible es de alrededor de 4.000 angstroms (1 angstrom es 0,0000000001 metros).
La longitud de onda de los electrones que se utilizan en los microscopios electrónicos es
de alrededor de 0,5 angstroms.
Hay dos tipos básicos de microscopios electrónicos: el microscopio electrónico de
transmisión (Transmission Electron Microscope, TEM) y el microscopio electrónico de
barrido (Scanning Electron Microscope, SEM).Los microscopios electrónicos de
transmisión pueden aumentar un objeto hasta un millón de veces. Los microscopios
electrónicos de barrido pueden ampliar los objetos 200.000 veces o más.
Microscopio óptico
El tipo de microscopio más utilizado es el microscopio óptico, que se sirve de la luz
visible para crear una imagen aumentada del objeto. El microscopio óptico más simple
es la lente convexa doble con una distancia focal corta. Estas lentes pueden aumentar un
objeto hasta 15 veces. Por lo general se utilizan microscopios compuestos, que
disponen de varias lentes con las que se consiguen aumentos mayores. Algunos
microscopios ópticos pueden aumentar un objeto por encima de las 2.000 veces.
6.- ¿Por qué se emplean metales pesados para observar las muestras en el microscopio
electrónico?
Para la preparación de muestras utilizadas en el microscopio electrónico se emplean
técnicas similares a las del microscopio óptico.
1.- Fijación: consiste en ocupar glutaraldehído en vez de formol, ya que consigue una
mejor preservación de los tejidos, luego se aplica osmio el que permite que se produzca
un contraste en la muestra al chocar los electrones.
2.- Inclusión: se realiza en resinas plásticas, que proporciona una mayor dureza.
3.- corte: se utiliza un instrumento llamado ultra micrótomo que realiza cortes
extremadamente finos, este instrumento utiliza cuchillos especiales muy afilados que
pueden ser vidrio o diamantes.
4.- Contraste: como no se utiliza colorante o tintas aquí se emplean átomos de metales
pesados, como el plomo y el uranio que acentúan el contraste proporcionado por el
osmio. Para favorecer y remarcar estas diferencias de coloración, se pueden usar:
TINCIONES, con metales pesados (acetato de plomo). Se fijan a diferentes estructuras
celulares, y estos metales pesados no permiten el paso de los electrones, por lo tanto,
tenemos un mayor contraste.
7.- Con un ejemplo claro y entendible diferencie el Poder de Resolución del Límite de
Resolución.

Poder resolutivo y límite de resolución:

El poder resolutivo es la capacidad que tiene un microscopio (o el ojo humano, etc.) de

percibir por separado dos puntos pequeños, adyacentes y cercanos. Vale decir, es la
capacidad para percibir detalles. El poder resolutivo aumenta a medida que disminuye
la distancia que separa dichos puntos. Es decir, si dos puntos distan 1cm uno del otro y
yo los veo como un solo punto borroso (aparte de necesitar urgente un oculista) tendré
menor poder resolutivo que alguien que los distingue por separado o que distingue
perfectamente puntos que distan de 0,5cm entre sí.

Si definimos ahora límite de resolución como la distancia mínima que debe existir entre
dos puntos para que sean distinguidos por separado, comprenderemos fácilmente la
relación inversa que se establece entre poder resolutivo y límite de resolución: cuanto
menor sea la distancia que debe separar a dos puntos para que se distingan por
separado, mayor será el poder resolutivo necesario para observarlos.

El poder resolutivo del microscopio no guarda relación alguna con el aumento del
mismo. Depende principalmente de la apertura numérica de la lente y de la longitud de
onda de la luz utilizada. Sin abocarnos demasiado a definir "apertura numérica"
podemos decir que es un valor determinado, entre otras cosas, por el diámetro de la
lente.