PRACTICA # 1

PREPARACION Y ESTERILIZACION DEL MATERIAL PARA USO EN LAS PRÁCTICAS DE

MICROBIOLOGÍA.

MICROBIOLOGIA

PROFESORA

Dra. SARA LUZ NAHUAT DZIB

ALUMNO

BERNA ROMERO MENA

OBJETIVO

El alumno aprenderá el procedimiento para empacar diversos materiales de uso en microbiología

así como el procedimiento de la esterilización

INTRODUCCION.

EMPACADO DEL MATERIAL

Antes de iniciar un empaque del material que se desea esterilizar, es necesario que todas las
prácticas que se realicen estén en condiciones de esterilidad y se debe, en primer lugar, limpiar el
área de trabajo con alguna sustancia desinfectante y encender el mechero.

Se emplearán distintos agentes germicidas y desinfectantes (soluciones de hipoclorito de sodio,

cloroxilenol, formaldehído, etc.) para desinfectar superficies.

El material a esterilizar se deberá de empacar correctamente con papel estraza, Una de las
razones de la importancia del papel es que se puede adaptar a diferentes usos como: Impedir el
ingreso de microorganismos al interior, Sellar en forma completa para evitar contaminación,
Soportar la tracción y manipulación habitual sin sufrir deterioro y hacer permeable al método de
esterilización seleccionado.

ESTERILIZACIÓN POR CALOR SECO

La muerte microbiana se produce por una esterilización, ya sea como consecuencia de

mecanismos de transferencia de energía, además de la oxidación. En la esterilización por Calor
seco existe una destrucción de los microorganismos oxidando sus constituyentes químicos,
desnaturalizando las proteínas y los ácidos nucleicos de las células así como fragmentando las
membranas celulares.

Para materiales que deben permanecer secos como ciertos instrumentos de vidrio de laboratorio
tales como: cajas de Petri, pipetas, así como aceites, polvos ( por ser impermeables al vapor), los
materiales que no se pueden esterilizar por calor seco son: Material textil (algodón, sedas, lino,
etc.), Gomas y Materiales sintéticosTodo material que se altere a la temperatura de trabajo se
dispone de hornos eléctricos por los que circula aire caliente, en vista ¡de que el calor es menos
eficaz en materiales secos, se acostumbra a aplicar una temperatura de 160·C a 170·C durante una
hora o más.
PROCEDIMIENTO

 EMPACADO DEL MATERIAL

l.- Lava el material de laboratorio, principalmente la cristalería con detergente enjuaga con
abundante agua de la llave y en seguida con agua destilada.

2.- Secar el material utilizando papel absorbente para acelerar el secado

3.-Empaca el material correctamente

MATERIAL

4 pipetas de 1 ml

1 pipeta de 10 ml.

2 cajas de Petri

DESARROLLO

A) CAJAS DE PETRI

Corta el papel estraza, en forma de rectángulos adecuados para la cantidad de 2 a 3 cajas.

Colócalas en la parte central y Envuélvelas, Se toman los extremos de Papel y se unen, Se hace un
nuevo doblez recargando ligeramente en la caja para marcarlo, Los extremos se doblan en forma
triangular .Ya en forma triangular se doblan hacia atrás quedando listas para esterilizar.

B) PIPETAS

Introduce una pequeña porción de algodón en el

cuello de la pipeta, procurando que quede lo suficientemente apretada. Con tiras de papel de 3
cm de ancho envuélvelas, comenzando por la punta y en forma de espiral gira hacia arriba hasta el
final de la pipeta.
 Listo para
meter al
horno a
esterilizar 

CONCLUSIONES

Al término de esta práctica

he aprendido que el
empacado del material de
laboratorio para su
esterilizado es de suma
importancia, ya que
debemos protegerlos de la
contaminación por
suciedad, polvo y bacterias
para que al emplearlos una
vez ya esterilizados
tengamos un óptimo
resultado en nuestros
trabajos de laboratorio

El paquete debe preservar

la esterilidad de su
contenido hasta el momento de su apertura, momento a partir del cual serán utilizados en área
estéril.

BIBLIOGRAFIA

http://www.codeinep.org/preparaciondematerialesenvoltoriosymetodos1.htm

PREPARACION DE NUESTRO MEDIO DE CULTIVO (AGAR NUTRITIVO)

INTRODUCCIÓN

Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su

crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio.

El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el

crecimiento de los microorganismos es el Cultivo.. Para que las bacterias crezcan adecuadamente
en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura,
grado de humedad y presión de oxígeno adecuado, así como un grado correcto de acidez o
alcalinidad.

Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe
estar exento de todo microorganismo contaminante. La mayoría de las bacterias patógenas
requieren nutrientes complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo
humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y
Peptona a la que se añadirán otros ingredientes. El Agar es un elemento solidificante muy
empleado para la preparación de medios de cultivo

PROCEDIMIENTO:

1- Primeramente se desinfecta el área de trabajo y se enciende el mechero

PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO SÓLIDOS

1.- Leer las instrucciones del fabricante para cada medio de cultivo y pesar la cantidad necesaria
según el volumen requerido.

2.- Colocar el medio en un vaso de precipitado que contenga el agua destilada en el volumen
requerido, agitar y calentar a ebullición para disolver el Agar. En el último paso se debe tener
cuidado ya que el recipiente se calienta en exceso y el producto tiende a hervir y proyectarse, lo
cual puede producir serias quemaduras. El Agar disuelto hace transparente al medio que
originalmente estaba turbio.

VACIADO EN CAJAS DE PETRI

3.- No destapar las cajas de Petri, sino hasta el momento que vayan a ser utilizadas. Es
conveniente colocarse un cubre bocas la persona que va a realizar el vaciado y evitar hablar en
todo momento para no contaminar el medio de cultivo.

4.- Es conveniente mantener el mechero encendido y trabajar cerca del área estéril al momento
del vaciado en las cajas de Petri. Levantar la tapadera de la caja Petri con la mano izquierda , sin
soltarla y sin retirarla demasiado de la base de la misma caja mientras que con la mano derecha
tomar el matraz que contiene el medio de cultivo y realizar el vaciado de aproximadamente 15 ml.
A 20 ml de Agar por caja procurando que no se forman burbujas, se procede a tapar la caja
inmediatamente

5.- Si se forman burbujas, tomar el mechero, flamear el medio de cultivo sobre la superficie de la
caja de Petri y de manera rápida. Se procede a tapar la caja.
6.- Esperar a que el medio solidifique, Se rotulan los medios de cultivo, anotando la fecha y con
iniciales el tipo de medio de cultivo. Si las placas no se van a utilizar el mismo día se sujetan con
cinta y se colocan en el refrigerador de manera invertida para evitar que el vapor condensado
caiga sobre el medio de cultivo y lo pueda contaminar


A clarificar Listo para el vaciado

Conclusiones

Preparar un medio de cultivo en el cual podamos cultivar nuestros microorganismos, es de suma

importancia saber sus propiedades y conocer el procedimiento ya que mediante su uso
podemos llegar a estudiar infinidad de microorganismos que crezcan es estos medios y así
poseer información de suma importancia.