Introducción

Este trabajo se realizó con el fin de tener conocimientos en la investigación

de contaminación en el agua por metales pesados teniendo en cuenta el
bioensayo como practica de efecto de un toxico a partir de las respuestas de
los organismo bilógicos con el fin de obtener resultados donde debemos
tener en cuenta el procedimiento para que la germinación de las semillas y el
bioensayo sea eficiente para obtener los resultados adquiridos por la
práctica. Donde podemos observar los efectos del de los agentes tanto físicos
como químicos y se pueden evaluar en la inhibición, magnificación son
evaluados en la reacción de los organismos debido a muerte, crecimiento,
proliferación, multiplicación cambios morfológicos y fisiológicos. Teniendo en
cuenta que estos bioensayos pueden indicar los niveles de peligrosidad en
los organismos que forman parte de los ecosistemas que nos permiten la
comparación de los resultados con la práctica realizada.

También se obtiene de conocimiento en la restauración ambiental aplicando

al caso de estudio por procesos de biorremediación donde debemos tener en
cuenta la sensibilidad de algunas especies frente al toxico y a su exposición.
 MATERIALES PARA EL BIOENSAYO

Preparación de los reactivos y materiales

Material biológico: 1 sobre de semillas de lechuga (Lactuca sativa L.), de

Máximo un año de antigüedad (ver fecha de lote).

 1 Litro de muestra de agua a evaluar, mínimo 500mL.

 1 L de agua destilada o potable (agua purificada, no de la llave)

 21 cajas de Petri (de vidrio o plástico, de 100 mm de diámetro, leer

más adelante otras opciones de recipientes)

 Papel de filtro Whatman No. 3 de 90mm de diámetro, deben ajustar

bien en las cajas de Petri (puede reemplazarse por papel absorbente
de cocina)

 3 Goteros o jeringas de 5mL que permitan medir 4mL.

 1 Probeta de 250mL o un recipiente que este graduado cada

100mL o 50mL (ver página 9 del presente documento con
indicaciones de cómo crearlo usted mismo).

 Pinzas o algo similar para coger las semillas.

 Sal de cocina.

 1 recipiente o botella de 1,5 L limpia.

 Papel aluminio (el suficiente para envolver sus 5 cajas de Petri).

 Cinta de enmascarar.

 Libreta de apuntes, formato para la toma de datos diseñado por usted

mismo.

 Regla.

 Guantes de látex.

 Bolsas Ziploc tamaño Sándwich

DIAGRAMA DE FLUJO DE LA PRÁCTICA
Toma de muestra contaminada la realice el día 20 de abril de 2018 a las
10: 00 am

DESCRIPCIÓN

N° Sitio de Muestreo Descripción del Sitio de Muestreo

Rio chicamocha parte a bajo empresa Fuente superficial aguas arriba de zonas
acerías paz del rio industriales, mineras y agrícolas Como,
minas de carbón, corredor industrial
Sogamoso, empresa acerías paz del rio,
argos, etc.

Fuente hídrica contaminada por metales

pesados proveniente de vertimientos
industriales

PH del agua está en 6

Olor muy fuerte a podrido

Color Amarillo oscuro

Temperatura del agua está 19°C

Materiales y procedimiento en el que realice el bioensayo

Lo primero que se hizo fue preparar la solución control (+) formula 200ml de
agua potable (bolsa) y le agregue 5g/L de sal la cual se tiene que disolver bien
Preparación de control (-)
Se realizó con agua potable sin ningún contamínate

Dilución al 100% se realizó con el agua de muestreo

Lo primero es colocar el papel filtro que cubra toda la caja de petri o platos
desechables luego se agrega 4ml de solución del 100% con la jeringa, luego
se procede a colocar las semillas en filas con ayuda de la pinza, luego las
tapamos y marcamos control negativo al 100% se cubren con papel aluminio
y se depositan en una bolsa de (Ziploc) y las traslade a un lugar oscuro y
temperatura ambiente
Dilución al 30% se utiliza 3 partes de la muestra del100% y 7 partes de la
muestra y luego se le agrego 3ml de agua al 100% y complete 10ml con
agua potable luego marque la solución al 30% tome las 5 cajas de petri o
platos desechables, se colocó el papel filtro y le agregue 4ml con la jeringa,
luego coloque las 20 semillas de lechuga en filas. Posteriormente tape, luego
envolví en papel aluminio las 5 réplicas, luego se depositaron en las bolsas
de (Ziploc) y las traslade a un lugar oscuro y temperatura ambiente.

Dilución al 10% del control (-) negativo

Utilice de muestra 1una parte de la muestra del 100% y 9 partes de la

muestra y complete a 10 ml agua potable

En las 5 cajas de petri o platos desechables se coloca el papel filtro se le

agrega 4ml de la solución, luego coloque las 20 semillas de lechuga en filas
tape y envolví en papel aluminio deposite en las bolsas de (Ziploc) y las
traslade a un lugar oscuro y temperatura ambiente

Dilución al 3%

Utilice 1 parte de la muestra del 30% y 9 partes del agua potable y complete
a 10ml con agua potable
Luego coloque en 5 cajas de petri el papel filtro agregue 4ml de la solución,
luego coloque las 20 semillas de lechuga tape y envolví con papel aluminio
deposite en la bolsas de (Ziploc) y las traslade a un lugar oscuro y
temperatura ambiente

Dilución al 1% Utilice 1 parte de la muestra del 10% 9 partes de la

muestra (agua potable) a 10ml

Luego en los 5 platos desechables coloque papel filtro, luego agregue 4ml de
la solución, luego coloque las 20 semillas de lechuga posteriormente tape y
envolví en el papel aluminio, deposite en las bolsas de (Ziploc) y las traslade
a un lugar oscuro y temperatura ambiente
 RESULTADOS

Cálculo del porcentaje de germinación y porcentaje de inhibición de

germinación. 25 de abril de 2018
 1. Cálculo del porcentaje de germinación

# semillas % %
DESVIACIÓN CV Promedios
germinadas Inhibición Inhibición
CAJA

C(+) R1
#¡DIV/0! ### #¡DIV/0! #¡DIV/0! #¡DIV/0!
C(+) R2

C(+) R3

C(-) R1 20
0,58 2,94 19,67 100,00 0,00
C(-) R2 19

C(-) R3 20

D100% R1 12
2,08 18,37 11,33 57,63 42,37
D100% R2 9

D100% R3 13

D30% R1 18
1,15 6,66 17,33 88,14 11,86
D30% R2 18

D30% R3 16

D10% R1 9
2,08 19,52 10,67 54,24 45,76
D10% R2 13

D10% R3 10

D3% R1 18
1,00 5,56 18,00 91,53 8,47
D3% R2 17

D3% R3 19

D1% R1 20
1,00 5,26 19,00 96,61 3,39
D1% R2 19

D1% R3 18
 2. Medida de elongación de hipocótilo (EH) en cada caja de Petri
PLÁNTULA CONTAR PROMEDIO DESVIACIÓN CV Promedios %
CAJA 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 CAJA Inhibición
C(+) R1 0 #¡DIV/0! #¡DIV/0! #¡DIV/0!
C(+) R2 0 #¡DIV/0! #¡DIV/0! #¡DIV/0! #¡DIV/0! #¡DIV/0!
C(+) R3 0 #¡DIV/0! #¡DIV/0! #¡DIV/0!
C(-) R1 30 31 33 30 33 28 34 33 28 31 35 32 32 30 30 33 31 29 30 29 20 31,06 1,91 6,16
C(-) R2 33 31 29 27 30 33 26 33 32 32 31 29 30 30 26 27 32 33 32 19 30,16 2,35 7,80 30,44 0,00
C(-) R3 31 30 28 31 33 31 27 32 32 28 26 31 32 30 31 31 30 30 28 31 20 30,11 1,86 6,17
D100% R1 14 10 12 13 9 11 12 20 16 10 11 13 12 12,53 2,86 22,80
D100% R2 16 11 14 11 13 10 9 11 12 9 11,98 2,25 18,79 12,30 59,60
D100% R3 9 10 12 14 11 12 16 17 11 15 8,2 13 10 13 12,31 2,82 22,90
D30% R1 10 11 9 14 7 14 11 9 8 10 12 13 10 11 11 9,9 11 12 18 10,81 1,95 18,01
D30% R2 13 11 12 16 12 10 13 11 15 10 13 11 12 11 14 11 10 13 18 12,14 1,72 14,14 11,41 62,53
D30% R3 12 12 11 10 14 11 9 11 11 11 10 9 11 13 14 11 16 11,26 1,55 13,73
D10% R1 9 8 9 11 13 10 9 13 9 9 10,09 1,80 17,84
D10% R2 10 11 10 9 12 9 11 13 11 12 14 13 11 13 11,33 1,59 14,02 10,84 64,40
D10% R3 11 13 8 10 10 11 13 11 10 11 10 10,87 1,48 13,66
D3% R1 2 20 17 15 14 22 24 21 24 29 19 23 26 2 21 17 2 27 18 18,05 8,39 46,48
D3% R2 26 2 19 25 26 28 2 19 27 3 27 26 23 27 29 28 29 17 21,53 9,61 44,65 19,12 37,18
D3% R3 2,7 2,9 3 2,7 2,5 2 22 24 25 25 24 25 26 24 25 26 25 26 29 19 17,99 10,80 60,03
D1% R1 27 30 28 31 32 33 27 29 26 28 29 30 32 31 30 32 29 30 31 30 20 29,75 1,89 6,35
D1% R2 30 33 32 31 30 32 30 32 31 32 29 28 31 30 32 29 31 28 29 19 30,53 1,47 4,81 30,07 1,23
D1% R3 30 32 31 30 29 30 30 30 29 29 30 30 30 29 28 30 32 30 18 29,94 1,00 3,33

3. Cálculo de porcentaje de inhibición de radícula

PLÁNTUL CONTAR PROMEDIO DESVIACIÓN CV Promedios %
A
CAJA 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 CAJA Inhibición

C(+) R1 0 #¡DIV/0! #¡DIV/0! #¡DIV/0!

#¡DIV/0! #¡DIV/0!
C(+) R2 0 #¡DIV/0! #¡DIV/0! #¡DIV/0!

C(+) R3 0 #¡DIV/0! #¡DIV/0! #¡DIV/0!

C(-) R1 25 22 29 21 20 21 17 13 18 19 18 20 14 15 17 15 14 16 15 18 20 18,35 3,98 21,67

17,41 0,00
C(-) R2 24 18 14 19 16 26 15 18 16 18 17 16 20 18 21 12 13 15 15 19 17,42 3,53 20,28

C(-) R3 18 14 16 14 17 16 15 20 17 17 16 15 16 19 16 19 14 16 18 16 20 16,45 1,70 10,34

D100% R1 4 9 8 10 7 9 10 10 11 9 8 9 12 8,67 1,83 21,07

9,00 48,30
D100% R2 11 8 10 9 9 8 10 9 9 11 7 11 9,18 1,25 13,62

D100% R3 9 11 8 9 8 10 11 9 8 9 9,22 1,20 13,03

D30% R1 5 7 10 12 10 9 11 13 11 10 14 13 13 11 10 13 11 9 18 10,67 2,28 21,33

10,54 39,46
D30% R2 11 12 10 7 11 10 9 10 11 12 13 10 12 13 13 12 9 8 18 10,72 1,74 16,25

D30% R3 8 10 11 12 10 9 13 11 10 9 11 12 9 10 9 9 16 10,19 1,38 13,52

D10% R1 19 20 28 22 20 24 21 24 20 9 22,00 2,87 13,06

21,63 -24,23
D10% R2 24 20 23 19 18 21 22 19 24 26 17 22 20 13 21,15 2,64 12,48

D10% R3 20 19 20 24 23 21 19 26 26 21 10 21,90 2,69 12,26

D3% R1 16 20 21 22 19 19 22 17 24 26 21 22 27 22 16 20 25 19 18 21,00 3,16 15,06

20,57 -18,20
D3% R2 15 20 17 23 21 19 17 20 23 21 27 22 18 20 21 24 20 17 20,47 2,90 14,15

D3% R3 20 22 24 17 19 15 27 22 26 16 15 25 23 16 18 26 15 19 20 19 20,26 4,08 20,14

D1% R1 31 30 28 26 21 25 27 27 24 22 26 27 24 27 20 27 28 24 23 25 20 25,60 2,82 11,00

25,26 -45,11
D1% R2 30 29 26 27 22 20 19 31 24 21 19 22 27 21 24 27 23 20 20 19 23,79 3,84 16,13

D1% R3 22 29 29 24 27 24 25 27 21 27 28 29 30 30 29 27 22 26 25 19 26,37 2,79 10,59

 4. Calcule el MATC, incluyendo los datos de NOEC y LOEC en la
tabla inferior, en las celdas amarillas

Tabla NOEC, LOEC, MATC

Concentración (%) F Experimental F teórica (0,05)
Todos 233,75 3,11
1% 69,53 7,71 Atención: Si "F Experimental" es mayor
3% 28,81 7,71 que "F teórica (0,05)", significa que sí
10% 49,17 7,71 existen efectos tóxicos sobre las
30% 143,64 7,71 semillas, a esa concentración.
100% 211,14 7,71

Concentración Promedio Radícula Incluya en estas celdas la

NOEC 3,00% 20,57 concentración NOEC y LOEC, con sus
LOEC 10,00% 21,63 respectivos promedios de elongación
MATC 6,59% de la radícula (columna Z)

La gráfica Dosis-Respuesta se presenta en escala logarítmica

(método Pro bit). Debe identificar el % de concentración que
genera el 50% de la inhibición del crecimiento del hipocótilo
CI50/CE50
 Datos de la Gráfica Dosis - Respuesta
Abscisa (X) Ordenada (Y)
Concentración (%) % de inhibición
1 1,23
3 37,18
10 64,40
30 62,53
100 59,60

Tabla NOEC, LOEC, MATC

Concentración (%) F Experimental F teórica (0,05)
Todos 278,44 3,11
1% 0,90 7,71
3% 86,45 7,71
10% 1.710,18 7,71
30% 1.461,08 7,71
100% 2.726,79 7,71

Concentración Promedio Radícula

NOEC 1,00% 30,07
LOEC 3,00% 19,12
MATC 1,78%

ANÁLISIS DE RESULTADOS

1. ¿Qué significa cada indicador obtenido?

El indicador nos indica que NOE Y LOEC que existen efectos tóxicos en las
semillas a esas concentraciones

 NOEC es la concentración sin efectos tóxicos detectables

 LOEC es la menor concentración con efectos tóxicos detectables

2. ¿En qué parte de la planta tuvo más efecto la posible presencia
de tóxicos en la muestra?
La radícula se observa menos crecimiento y es notoriamente el efecto
tóxico y que esta agua contaminada es altamente toxica ya que su
germinación fue menor

3. ¿Hubo inhibición o exaltación? ¿A qué se le puede atribuir este

resultado?

Hubo inhibición .Teniendo en cuenta la práctica realizada en el hogar con las

21 cajas de petri, al cabo de 5 días notamos que a medida que los % de
contaminación aumentaban en el agua ocurría un menor desarrollo de la
radícula e hipocótilo inhibiendo el crecimiento natural de la planta. Además
en el control positivo hubo una inhibición total en el crecimiento de la
radícula y el hipocótilo.

4. ¿Hay riesgo de toxicidad en la muestra tomada? Argumente su

respuesta utilizando términos de la toxicología ambiental?

Si hay riesgo ya que algunas plántulas no germinaron y algunas presentan

un menor crecimiento en la radícula como también presentan un color café
en su proceso de germinación en cambio en la muestra de agua pura su
radícula obtuvo un crecimiento mayor a 33,7(mm) y un color verde en su
cotiledones. Quiere decir que esta agua contaminada realmente es toxica
para los seres vivos y que no sirve para el consumo humano

RESTAURACIÓN AMBIENTAL

una de las alternativas de restauración se puede realizar con especies

nativas por lo tanto se debe tener en cuenta la cobertura y el tiempo que ha
estado en exposición se debe tener en cuenta el área silvestre donde debe
contar con un monitoreo constante durante los 3 primeros años esta plantas
deben ser de tal manera que realicen el proceso de fitorremediación donde
se debe buscar un diseño que ellas realicen el proceso de adsorción de los
metales pesados y se deben realizar las pruebas para verificar que este
proceso es efectivo para su descontaminación y proporcionar la restauración
en varios sitios dejando algunos intervalos para su plantación

ENVIRONMENTAL RESTORATION

One of the alternatives of restoration can be done with native species

therefore you should take into account the coverage and the time you have
been in exhibition should take into account the wilderness area where you
must have constant monitoring during the first 3 years these plants must be
such that they carry out the phytoremediation process where a design must
be sought for them to carry out the heavy metals adsorption process and the
tests must be carried out to verify that this process is effective for their
decontamination and to provide the restoration in several places leaving some
intervals for planting

BIOENSAY

Descripción of the sample

For the bioassay procedure, we took a simple sample of water from the
Chicamocha River, to evalúate the posible efecto of toxic substancies such as
heavy metals in it, respecting the microbiológica composition of the water
collected to ensure reliable results.
Methodology

The sample to be analyzed should always be a simple sample, considering as

such the one obtained at the sampling point for our case is punctual without
being able to obtain composite or integrated samples. For the sampling,
neutral and plastic containers were used, very clean and sterilized, the
sample volume was 1L. We used gloves, mouths and boots.

The sample was taken on Monday, April 20 at 10:00 a.m. taking into account
that the sample must not have more than 24 hours to run the bioassay.

And then we transferred the sample in a refrigerator to later make the

assembly of the bioassay

Results

We proceeded to assemble the bioassay taking into account that for the
germination of the seed should be taken into account 5 days that
corresponded to 120 hours where the assembly of the bioassay was made on
april 20 at 2:45 in the afternoon and culminated on april 25 where we
obtained the following results through the recursive simulator for the
environmental toxicology course where we obtained the following data from
the following sample to analyze

Control (+) where the seeds did not germinate taking into account that they
are sensitive to the toxic with which the solution was made

Control (-) obtained a result of 100% germination of seeds, radicle,

hypocotyl. Since therefore the solution that was applied for it, was drinking
water therefore there was no presence of any toxic.

Dilution of 100% could be defined that there is risk because some seedlings
did not germinate and some have a lower growth in the radicle as they also
have a brown color in the process of germination, the opposite of pure water
sample, their radicle obtained a greater growth 33.7 (mm) and a green color
in its cotyledons. It means that this contaminated water is really toxic for
living beings and that it is not for human consumption

Therefore it can be said that the higher the concentration, the lower the
germination, the lower growth of the radicle and the hypocotyl.
 SEGUIMIENTO Y MONITOREO A LA
RESTAURACIÓN
Objetivo
Realizar seguimiento a la cuenca hídrica rio chicamocha con el fin de recuperar
y conservar el recurso hídrico de nuestros municipios, donde realizaremos la
intervención y la sensibilidad de cada uno de los pobladores y usuarios de
los ecosistemas o paisajes a restaurar.
Descripción de la Problemática actual de fuente hídrica
Contaminación en el agua por metales pesados por lo tanto la fuente hídrica requiere
de una restauración ecológica ya que estos vertimientos causan un gran impacto en
los ecosistemas y en la salud de la población provocando una toxicidad en los
seres vivos y deteriorando la calidad de vida en cada uno de ellos
Metales pesados :cromo, cadmio, plomo, cobre, níquel, mercurio, cobalto
provenientes de la fuente fija
Meta
 Dar cumplimiento a la normatividad ambiental legal vigente
para los requerimientos estipulados
Por la autoridad ambiental.
 Cumplir al 100 % con la plantación del número de individuos programados
para plantar por la tasa
de mortalidad
Tipo de medida
control x prevención x Mitigación x Compensac x
ión
Impactos a manejar
 Perdida del recurso hídrico.
 Alteración de la cobertura vegetal.
 Alteración en la calidad de salud humana.
 Conflictos con la comunidad e Instituciones.
 Afectación fauna y flora
 control sobre metales pesado encontrado en el agua
Acciones a ejecutar
Los monitoreos de seguimiento y control deben evaluar la evolución de la cuenca
hídricos presente en el área de estudio, con el fin de realizar seguimiento a la
permanencia de la misma y controlar la no afectación de los ejemplares
vegetales, para así determinar las acciones y medidas que se deben ejecutar
 Controlar los vertimientos en la fuente hídrica por metales pesados
 Planeación y demarcación: Con el fin de no entorpecer otras actividades se
tendrán en cuenta la
Señalización adecuada durante la ejecución, el control de contaminación, la
disposición adecuada de residuos y programación adecuada para el retiro.
 Establecimiento de medidas de seguridad: presentar los procedimientos de
trabajo seguros para el desarrollo de las mismas, en el que se incluya la
señalización a implementar.
 Adecuada dirección técnica: esta labor estará a cargo de un ingeniero forestal
quien dirigirá la ejecución de las distintas fases del proceso de trasplante, así
como de resolver situaciones especiales.
Las siembras por compensación deberán efectuarse bajo los lineamientos
establecidos en los manuales y lo estipulado en las fichas de Aprovechamiento y
de Compensación.

Recomendaciones
 El ingeniero ambiental deberá realizar un seguimiento y monitoreo ambiental
permanente, que incluyan análisis comparativos de los impactos ambientales
previstos y los que se han presentado en la ejecución del proyecto.
 la eficiencia y resultados de la restauración ambiental
 presentar las evidencias de la eficiencia de la restauración en el lugar o área
de estudios (fotos ,videos)
 medidas correctivas que se deben tomar frente a la problemática
 presentar una información detallada frente a la cuenca hídrica antes de
restáurala
 logros alcanzados a corto y a largo plazo
 presentar un informe de los metales encontrados en la fuente hídrica

Etapas de aplicación
Lugar de aplicación Responsable de la ejecución
Rio chicamocha
Área de estudio
Fuente superficial aguas arriba de zonas
industriales, mineras y agrícolas Como,
minas de carbón, corredor industrial
Sogamoso,
empresa acerías paz del rio, argos, etc.
Cronograma de ejecución
Descripci Actividad/recursos Período de ejecución (años)
ón
Seguimiento y eficiencia de las áreas Pre-const
intervenidas
Construcci Operación
y recuperadas
monitoreo ala rucción ón
restauración
de la cuenca
hídrica rio 1 año 2 años 3 años
chicamocha Visitas de
verificación y
mantenimiento a plantaciones de las especies

Costos
Teniendo en cuenta estos solo requiere de costos de personal para plantación y
especies ya que no requiere de equipos por lo tanto esta alternativa es de bajo
costo
Indicador Descripcion Tipo de Periodicid Registro de
del indicador indicad ad de cumplimient
or evaluación o
Áreas de la Contaminantes Cuantitati Semestral Seguimiento a la
cuenca encontrados vo intervención de
interveni (metales acuerdo con el
das pesados) avance
Mortalidad (Número de Cuantitati Mensual Registro de
individuos vo seguimiento a
plantados por la las actividades
tasa de mortalidad de y
/ Número de seguimiento
individuos resiembra
programados para
plantar por la tasa
de mortalidad.)
*100
(mes)
 CONCLUSIONS

• We obtained knowledge of how toxics have opposite effects on organisms

• Knowledge was obtained on how to make a bioassay to analyze samples of water

contaminated by some pollutants

• Learned how to make and use the simulator to perform calculations

• How is the methodology that must be taken into account to carry out a bioassay

• Knowledge of water sample is obtained by toxic effect on seeds, radicle, and hypocotyl

• Taking into account that it is not necessary for possible analyzes to go to a laboratory
since by means of the measurement of radicle, germination, hypocotyl in the assembly
of the bioassay it could be analyzed

• For our case the water is being analyzed by heavy metals where it was found that its
analysis and result is positive
 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

CONSULTORIA ESPECIALIZADA PARA LA ESTRUCTURACIÓN INTEGRAL DE

LOS CORREDORES VIALES. (2017). FICHAS DE SEGUIMIENTO Y
MONITOREO. 24/11/2017,
de consorcio estructuración vial Sitio web:
ftp://ftp.ani.gov.co/Tercera%20Ola/Sogamoso%20Aguazul%20Mani/E/EII/E
II2/EII22/12
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