Paper No.

190

SUPERFICIE Caracterización de la interacción

con CALCOPIRITA
ferriphilum Leptospirillum
Gu Guohua 1, *, Hu KETING 2 Qiu y Guanzhou 3

ABSTRACTO
La alteración de las propiedades de superficie de calcopirita después del acondicionamiento biológica con ferriphilum Leptospirillum fue
estudiada por adsorción, potencial zeta, ángulo de contacto y las pruebas de biolixiviación. Las cepas de L. ferriphilum Se han usado utilizando
diferentes fuentes de energía cultivadas (ya sea ion ferroso soluble o calcopirita). La adhesión de las bacterias a la superficie de la calcopirita
fue un proceso rápido. Además, la adsorción de bacterias de sustrato-crecido fue mayor y más rápido que el de los líquidos cultivados. El
punto isoeléctrico (IEP) de calcopirita se acercó a la de la pura L. ferriphilum después del acondicionamiento con bacterias. Las curvas de
ángulo de contacto calcopirita señas de múltiples formas en la cultura 9K con y sin polvos de calcopirita. Los resultados de los patrones de
difracción de rayos X (XRD), microscopía electrónica de barrido (SEM) y el análisis de espectroscopia de rayos X de dispersión de energía
(EDS) indicaron que en el proceso de biolixiviación por L. ferriphilum, la superficie de la calcopirita se cubrió con azufre y jarosita. Además, la
fase de hierro disuelto preferentemente desde la superficie de la calcopirita durante la biolixiviación de detección EDS. La extracción de cobre
se baja resultante de la formación de una capa de pasivación. El componente principal de la capa de pasivación que bloqueó la extracción de
cobre continuo fue de azufre, no jarosita.

Palabras clave: calcopirita, ferriphilum Leptospirillum, propiedades de la superficie, capa de pasivación

INTRODUCCIÓN
Calcopirita (CuFeS 2) es el más extendido mineral de sulfuro de cobre. reservas de mineral que contiene calcopirita-que podrían ser explotados a través de
biolixiviación, sin embargo, la cinética de bajo rendimiento de cobre y de disolución lenta de biolixiviación calcopirita por mesófilos han limitado su aplicación a
escala comercial. En consecuencia, sus mecanismos de reacción subyacentes han sido objeto de una intensa investigación de análisis químico y la superficie
(Hackl et al., 1995, Stott et al., 2000, Klauber, 2003, Sasaki et al., 2009, Xia et al., 2010 ), así como la bioquímica y la biología molecular (Barreto et al., 2005,
Tyson et al., 2004, arena y Gehrke, 2006).

adsorción bacteriana en la superficie mineral es el paso inicial en bio-lixiviación (Brierley, 1982). La adhesión de microorganismos a los minerales resultados
en la alteración de la química de superficie de los minerales debido a la consecuencia de la formación de una biopelícula en la superficie o productos de
oxidación de superficie o de reducción de biocatalysed. Por lo tanto, el estudio de sus características químicas superficiales y las propiedades superficiales
resultantes de minerales también son de importancia fundamental para entender los mecanismos de reacción. Muchos estudios de propiedades de la
superficie mineral antes y después de la interacción con las células bacterianas se centran en flotación y floculación (Chandraprabha et al., 2005,
Chandraprabha y Natarajan, 2006b, PK Sharma, 1999). Sin embargo, hay pocos informes relevantes en el campo de la bio-lixiviación.

1. Escuela de Procesamiento de Minerales y Bioingeniería, Universidad Central del Sur, Sur de Lushan carretera 932 #, Changsha, China. Email: guyuan339@163.com

2. Escuela de Procesamiento de Minerales y Bioingeniería, Universidad Central del Sur, Sur de Lushan carretera 932 #, Changsha, China. Email: huketing0401@163.com

3. Escuela de Procesamiento de Minerales y Bioingeniería, Universidad Central del Sur, Sur de Lushan carretera 932 #, Changsha, China. Email:
414301271@qq.com

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En el presente trabajo, las acciones de biolixiviación ferriphilum Leptospirillum inicialmente crecido con se estudian diferentes fuentes de energía en la interfaz
de la solución mineral. El propósito es mostrar el cambio en las propiedades de superficie de calcopirita causados ​por la interacción bacteriana y para elaborar
el mecanismo de biolixiviación calcopirita en cierta medida.

MATERIALES Y MÉTODOS muestra

de calcopirita
Todas las pruebas se realizaron con biolixiviación de minerales de calcopirita de Daye, Hubei, provincia de China. Las muestras de menos de 0.074 mm se
utilizaron para experimentos de biolixiviación. Se usó el tamaño de menos de 5 micras para las pruebas de potencial zeta y adsorción. Los análisis químicos
mostraron la calcopirita contenía 30,74% Cu, 30,64% de Fe y
33,24% experimento S. Un XRD se realizó para determinar las fases presentes en la muestra (véase la Figura 1). Se puede observar que los ingredientes
principales para muestras fue de calcopirita y una pequeña cantidad de cuarzo.

Figura 1. patrón de XRD de la muestra de calcopirita

cristales de calcopirita sólido puro se cortaron en ciertas secciones delgadas, y luego pulidas a las caras expuestas. Las piezas de minerales, se lavó con
acetona y agua destilada sucesivamente, se utilizaron para medir el ángulo de contacto.

Microorganismos y medios de cultivo

Para este estudio una cepa de L. ferriphilum ( DQ343299), siempre desde el Laboratorio Clave de biometalurgia en la Universidad Central del Sur, se utilizó. Las
células de la especie L. ferriphilum se cultivaron aeróbicamente en 9K con pH inicial = 1,6 a 40 ℃ en un agitador rotatorio. El medio 9K constaba de (NH 4) 2 ASI
QUE 4 3,0 g / L, KCl0.1g / L, K 2 HPO 4 0,5 g / L, MgSO 4 • 7H 2 O 0,5 g / L, Ca (NO 3) 2 0,01 g / L. Fe 2+ adulto ion L. ferriphilum se cultivó en 9K más FeSO 4 • 7H 2 O (44,2
g / L) como fuente de energía. adulto calcopirita L. ferriphilum fue adquirida a través de repetidas sub-cultivo para las bacterias en medio libre de hierro 9K que
contienen aumento de la densidad de pulpa de calcopirita: 1%, 2%, 3%, 4% y 5%. Las células cultivadas en diferentes condiciones se obtuvieron a través de
filtración por papel de filtro Whatman que permiten que las células consiguieron a través de los materiales sólidos en suspensión. La suspensión que contiene
células era centrifugación sucesiva (10.000 xg) durante 20 min y el lavado en ácido sulfúrico diluido (pH 1,6) para eliminar los iones residuales de la media. Las
bacterias de la cosecha se suspendieron entonces en un medio 9K sin fuentes de energía para experimentos.

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medidas de adsorción
Las pruebas se realizaron en relación mineral-líquido constante (1: 100) en NaCl (1 x 10- 3 M) soluciones con concentración celular inicial de 1 x 10 8 células / ml.
Las células y los minerales (-5μm) se interactuaron juntos por 60 min por el acondicionamiento de la suspensión utilizando un agitador magnético. Después del
acondicionamiento, las poblaciones bacterianas restantes en la fase líquida se determinaron mediante cámaras de recuento de glóbulos bajo un microscopio
biológico. La cantidad de células unidas se calculó restando el planctónica a partir del número inicial de células.

pruebas de potencial zeta

El potencial zeta se midió con los DELSA440S ⅱ Tipo de instrumento electrocinética. La concentración de células fue 1 x 10 8 Se utilizaron células / ml y solución de
NaCl como electrolito para mantener la fuerza iónica a 1 × 10- 3 prostituta. El potencial zeta de la calcopirita (-5μm) antes y después de la interacción con las
células bacterianas se ensayó también por el instrumento. Minerales fueron pretratados con células durante 3 horas utilizando un agitador magnético. Todas las
pruebas se llevaron a cabo como una función de los valores de pH ajustado con soluciones de HCl y NaOH.

mediciones del ángulo de contacto

El instrumento de medición del ángulo JJC-I humectantes, producido por Changchun Optics instrumento fábrica, se utilizó para medir el ángulo de contacto de
la superficie de la calcopirita. cupones de calcopirita pulido se esterilizaron con etanol al 75% y se enjuagaron con agua destilada antes de su uso. Los cupones
minerales se colgaron en matraces bajo dos condiciones de entorno diferentes. Algunas placas se incubaron en 100 ml de 9 K medios de comunicación con L.
ferriphilum ( 1 × 10 8 células / ml) solamente, no añadir ningún polvos de calcopirita. Los demás estaban bajo la condición de acuerdo con el entorno de
biolixiviación (la concentración de células de 1 x 10 7 células / ml, la concentración de pulpa del 2%) en matraces. De esta manera, los polvos de calcopirita se
utilizaron como fuente de energía. Antes de todas las pruebas, las muestras de minerales se lavaron con agua destilada para eliminar las células poco que
sostienen y polvos. Un inyector de líquido se utilizó para gotear verticalmente una gota de agua destilada sobre la superficie de la muestra. El tiempo de prueba
debe ser no más de 1 minuto con la temperatura ambiente a aproximadamente 25 ℃. Bajo cada condición, el resultado final fue el promedio de 10 veces
mediciones.

pruebas de biolixiviación

Todos los ensayos de lixiviación se llevaron a cabo en un agitador rotatorio con una velocidad de 170 rpm a 40 ℃. Los experimentos se llevaron a cabo en matraces de
250 ml Erlenmeyer con 150 ml de solución, que cubrió con película de sellado especial, así como a admitir oxígeno, mientras que la reducción de la pérdida de agua
por evaporación matraces Una densidad de pulpa del 2% (w / v) fue elegido, y la densidad celular era 1 × 10 7 células / ml. Periódicamente, se restauraron la
evaporación del agua, pH y potencial redox (frente a electrodo de calomelanos saturado) se registraron y muestras de 2 ml se retiró del líquido para obtener
información cinética sobre la disolución de metal. concentración de Cu se midió por espectrofotometría de absorción atómica (AAS).

morfología mineral y análisis de composición de

Los residuos de lixiviación se filtraron y se secaron al aire para XRD y SEM / EDS. XRD se realizó con un difractómetro de rayos X (XRD) (Modelo D /
Max2500PC) con radiación Cu Ka (λ = 1,54056 Å) en el rango de 2-Tetha de 10 ° a 80 °. Un microscopio electrónico de barrido, JSM-6360LV se utilizó para
determinar los cambios en la superficie de calcopirita durante biolixiviación. Además, los cupones de calcopirita también se hicieron análisis de SEM / EDS.

Resultados y discusión estudios de

adsorción
adsorción bacteriana en la superficie del mineral con el tiempo se muestra en la Figura 2. Adsorción a calcopirita fue un proceso rápido para los diferentes
tipos de L. ferriphilum y el equilibrio se alcanzó 20 min para células de calcopirita crecido, 25 min para Fe 2+ ion cultiva cepa. Sin embargo, la densidad celular de L.
ferriphilum crecido con minerales en la superficie de la calcopirita fue más que eso crecido con Fe 2+ ion, aproximadamente el 88% y el 76% de las células
iniciales para las células cultivadas en calcopirita y Fe 2+ ion, respectivamente. La adsorción de bacterias hacia minerales estaba relacionada con la fuente de
energía de la célula crecido. La adherencia de L. ferriphilum crecido con calcopirita a calcopirita fue mayor y más rápido que para las células cultivadas con Fe 2+ ion.It
ha informado (Harneit et al., 2006, Sharma, 2003) que las células de sustrato-crecido superficies contienen un mayor contenido de proteína de las cepas de
iones crecido ferrosos. Es decir sustrato

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Las células cultivadas tienen una hidrofobicidad relativamente mayor que las células de la solución crecido. En este documento, misma cepa crecido bajo diferentes condiciones puede
tener capacidad de adhesión diferente hacia minerales de sulfuro.

Figura 2. Curvas de adsorción de L. ferriphilum crecido en condiciones diferentes a calcopirita

mediciones de potencial zeta

La cepa de L. ferriphilum se acidófila, las pruebas de manera potencial zeta se llevaron a cabo en medio ácido (pH < 7) excepto para el experimento de
calcopirita pura. Los resultados de potencial zeta como una función del pH para L. ferriphilum cultivaron en diferente sustancia de energía se presentan en la
Figura 3. La cepa cultivan con Fe 2+ ion en todo el intervalo de pH está representada una carga negativa y exhibió un punto iso-eléctrico (IEP) de pH inferior a
2,0, mientras que el IEP de minerales cultivadas uno se encuentra en alrededor

3.6.

Figura 3. Los potenciales zeta de L. ferriphilum crecido bajo condiciones diferentes como función de pH

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Los zeta-potenciales de calcopirita antes y después de la interacción con las bacterias son retratados en la Figura 4. El IEP de calcopirita pura aparece a
aproximadamente pH 5,7. Después de la interacción con las bacterias, el IEP de la calcopirita se movió hacia la de las células, 4.4 después de interactuar con
Fe 2+ ion células cultivadas y 3.9 para el otro. Además, el movimiento de la calcopirita potencial zeta fue consistente con la adsorción.

Figura 4. los potenciales zeta de calcopirita antes y después de la interacción con L. ferriphilum crecido bajo diferente que es que cuanto más las células
de unión a los minerales, la marcadamente el movimiento. El IEP de la calcopirita se mueve hacia la de las células después de interactuar con bacterias indica
que la adsorción específica de las células en la surfaces.It mineral podría ser notado que en medio ácido (pH <2,7), los zeta-potenciales de calcopirita después
de la interacción con L. ferriphilum aumentado. Este fenómeno puede explicarse por la adsorción de Fe disuelto 3+ de la oxidación bacteriana de mineral. Aunque
hay varias afirmaciones sobre las reacciones en la superficie, pensamos que las reacciones relacionadas de la oxidación de calcopirita son tan ecuación
seguimiento. (1), la ecuación. (2) y la Ec. (3).

(1)

(2)

(3)

mediciones del ángulo de contacto

Los datos de ángulo de contacto de cupones de calcopirita lixivia en 9K solución se presentan en la Figura 5. Las curvas fueron tratadas de forma similar por
dos tipos de L. ferriphilum. Durante la prueba, no se observó ningún producto en la superficie de los cupones de calcopirita. El ángulo de contacto de la
calcopirita disminuyó durante todo el proceso, es decir hidrofilia de la superficie del mineral aumentado, que también prueba la adsorción específica de las
células en las superficies minerales. El medio sin polvos de calcopirita no puede apoyar el crecimiento de L. ferriphilum. Durante la prueba de siete días, los
ángulos de contacto de ambas de las muestras disminuyeron ligeramente, resultante de la unión de las células a la calcopirita. Las células unidas hacen que la
superficie hidrófila mineral debido a la superficie expuesta de las células de distancia

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de la superficie mineral (Harneit et al., 2006, Chandraprabha y Natarajan, 2006a, Devasia y Natarajan,
2010).

Figura 5. Los cambios de ángulo de contacto de la calcopirita en el cultivo sin polvos de calcopirita La figura 6 muestra el cambio en el ángulo de

contacto calcopirita en buenas condiciones de biolixiviación. Por el contrario, la cinética de ángulo de contacto fue muy diferente de las curvas anteriores en la

solución sin polvos minerales.

La Figura 6. Los cambios de ángulo de contacto de la calcopirita en el cultivo con polvos de calcopirita como fuente de energía Los ángulos de contacto de

superficie de calcopirita aumentaron en la etapa inicial de biolixiviación, pueden resultante de la formación de azufre elemental y sulfuros de cobre intermedios en

la superficie de la calcopirita (Ec. (1)). Después de un período de

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biolixiviación, los ángulos de contacto de superficie de calcopirita disminuido, lo que infiere vasta formación de precipitación de jarosita, un producto hidrófilo
formado (Ec. (4)). Además, los cupones de calcopirita bioleached por los minerales cultivan L. ferriphilum fueron sometidos a análisis SEM / EDS en el siguiente
contexto, que confirmó la generación de estos productos de reacción.

(4)

biolixiviación calcopirita

contenido de iones de cobre, potenciales redox y pH valores como función del tiempo lixiviado por diferentes tipos de L. ferriphilum
se muestra en la Figura 7 y 8, respectivamente. En la Figura 7, la extracción de cobre aumenta rápidamente desde el principio hasta el noveno para las
bacterias de calcopirita crecido y para el día 15 para Fe 2+ ion cultivar bacterias, en el cual veces las concentraciones de cobre en solución eran 1,68 g / L y 1,72
g / L, respectivamente. A partir de entonces, la velocidad de disolución de calcopirita se hizo muy lenta y después del día 21 de la concentración de cobre era
2,2 g / L y 2,02 g / L, que correspondía a 35,90% y 32,96% de cobre extracción. Obviamente, la tasa de lixiviación fue baja y la disolución de la calcopirita no
fue completa. Además, durante todo el proceso de biolixiviación, L. ferriphilum cultivadas por los minerales mostraron un efecto favorable sobre los rendimientos
de lixiviación. Los valores de pH de las soluciones de la biolixiviación por dos tipos de L. ferriphilum eran casi de la misma, con las dos curvas se superponen y
siguiendo uno al otro, así era el caso de potencial redox. El valor del pH aumentó rápidamente en la etapa inicial y alcanza aproximadamente 2,0 después de
15-18 días, y luego el pH se redujo, demostrando que la lixiviación de la calcopirita por L. ferriphilum era un proceso que consume ácido en la primera etapa de
biolixiviación y un proceso de producción de ácido más tarde. Los potenciales redox de las soluciones alcanzaron una meseta después de aproximadamente 9
o 15 días para la exposición a la calcopirita crecido cepa y Fe 2+ ion cultiva cepa, respectivamente. Obviamente, el cambio fue más rápido en la solución con la
calcopirita crecido cultivo de bacterias.

La Figura 7. concentración de iones de cobre como una función del tiempo durante la biolixiviación de calcopirita por L. ferriphilum crecido
en energía diferente

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Figura 8. pH y el potencial redox como una función del tiempo durante la biolixiviación

análisis XRD y SEM / EDS

Los patrones de difracción de rayos X (XRD) para los residuos de calcopirita, que han interactuado con Fe 2+ cultivado y cultiva calcopirita L. ferriphilum después de
8 días y 21 días, se muestran en la Figura 9.

se observó de azufre después de 8 días lixivian por adulto calcopirita L. ferriphilum. Por el contrario, ningún producto fue descubierto en la superficie de los residuos
llevado a cabo con el Fe 2+ Las células cultivadas. Al final de la biolixiviación, una gran cantidad de jarosita y azufre existía en los residuos después de la
biolixiviación con ambos dos tipos de L. ferriphilum.

La Figura 10 muestra los resultados de imágenes SEM y análisis EDS para los residuos lixiviados por calcopirita cultivan L. ferriphilum. Todas las muestras se
recubrieron con oro antes de la microscopía electrónica de barrido (SEM) y pruebas de espectroscopia de rayos X de dispersión de energía (EDS).

Antes de la lixiviación, las fracciones de masa de los elementos en calcopirita eran Cu 30,74%, Fe 30,64% y S 33,24% y la relación atómica de Cu, Fe a S fue
de 1 / 1,14 / 2,16, muy cerca de la estequiometría de la calcopirita. Después de la lixiviación por
L. ferriphilum durante 8 días, la superficie de la calcopirita fue suave y apretado imagen SEM de. En ese momento, las fracciones de masa de los elementos
eran Cu 32,92%, Fe 28,94% y S 38,13% y la relación atómica de Cu, Fe a S es de 1/1 / 2,30 debido a la formación de azufre en la superficie de la calcopirita.
Obviamente, la cantidad de elemento Fe disminuyó en la superficie de la calcopirita que estaba justo lo contrario de elemento de Cu. Se ha informado de que
la liberación de hierro en fases de electrolitos o oxihidróxido es generalmente más rápido que el del cobre, por lo que la formación de sulfuros de cobre, en
primer lugar covelita, CuS, y capas pasivas inestables o metaestables de Cu 1-x S o Cu 1-x Fe 1-y S 2 composición se asumió (Farquhar, 2003). Al final de la
lixiviación por L. ferriphilum, una gran cantidad de precipitaciones sueltos se pudo observar desde la imagen SEM, algunas de las cuales conseguir juntos y
caerse de la superficie de la calcopirita. Las fracciones de masa de elementos eran Cu

9,09%, Fe 53,02% y S 29,26% y la relación atómica de Cu, Fe a S fue de 1 / 6,63 / 6,38, lo que indicaba que la una gran cantidad de jarosita se generó y
azufre estaba constantemente enriched.Sulfur y jarosita formada durante la biolixiviación de calcopirita, lo que podría ilustrar los cambios de valor de pH
durante la biolixiviación por L. ferriphilum.

La Figura 11 muestra los resultados del análisis de SEM y EDS de cupones de calcopirita realizadas por mineral cultivan
L. ferriphilum después de 8 y 21 días durante los experimentos de ángulo de contacto. Se observó evidencia de la formación de un pequeño número de apretado de
azufre después de 8 días. Mientras tanto, una gran cantidad de hierro fase de óxido y la fase de azufre ha sido depositado en la superficie de nudo en el extremo. La
característica de precipitación en la superficie de la placa de calcopirita

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(Ver imagen ampliada en la esquina superior derecha) fue misma que en los residuos lixiviados, lo que indica, además, que se produjo mismo producto suelto.

De biolixiviación ensayos mencionados anteriormente, se puede observar que la disolución de calcopirita no es completa, y el contenido de iones de cobre es
muy baja durante la biolixiviación. La tasa de lixiviación bajo puede tener una gran relación con la capa de pasivación formada durante la lixiviación, lo que
puede dificultar la biolixiviación de calcopirita (Hackl et al., 1995, Rodríguez, 2003, Stott et al., 2000, Tercera et al., 2000, Zeng et al., 2011, Klauber et al.,
2001). De XRD y análisis SEM / EDS de residuos de calcopirita y cupones, azufre y precipitaciones jarosita se forman durante el proceso de lixiviación. En la
etapa inicial de biolixiviación por bacterias calcopirita crecido, el azufre del producto es suave y apretado, lo que indica que puede ser la razón de pasivación
calcopirita. Es consistente con la extracción de cobre (véase la Figura 7), la tasa de lixiviación se redujo de alrededor de 9 días. 2+ crecido L. ferriphilum, por lo
que la tasa de lixiviación aumentó sin bloque. En el período posterior, una gran cantidad de jarosita suelta formada que no sería un laico para inhibir la difusión
de los microorganismos, nutrientes y productos de reacción hacia y desde la superficie del mineral. Por lo tanto, una capa de pasivación apretado que contiene
principalmente el azufre en la superficie mineral puede bloquear la extracción de cobre continuo durante biolixiviación. Aunque la cantidad de jarosita es
enorme en el final, es suelta y empieza a caer fuera de la superficie de la calcopirita no puede causar pasivación.

La Figura 9. patrones de XRD para los residuos de calcopirita lixiviadas por Fe 2+ crecido L. ferriphillum [( a), (b)] y calcopirita
crecido L. ferriphillum [( c), (d)] en momentos diferentes: (a), (c) 8 días; (B) (d) 21 días

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La Figura 10. vistas SEM y análisis EDS de residuos de lixiviados por calcopirita cultivan L. ferriphillum: ( a) 8 días; (segundo)
21 días

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La Figura 11. imágenes de SEM y análisis EDS de cupones lixiviados realizados por mineral cultivan L. ferriphilum durante
los ensayos de ángulo de contacto: (a) 8 días; (B) 21 días

CONCLUSIONES
La curvas de ángulo de contacto de movimiento de múltiples formas en la cultura 9K con y sin polvos de calcopirita: la superficie de la calcopirita muestra una
propiedad de adsorción bacteriana, mientras que los otros presentes evolución de componentes de la superficie. sustrato de crecimiento tiene una estrecha
relación con las propiedades de superficie de las bacterias y su comportamiento interacción con la calcopirita. bacterias Calcopirita crecido tienen una afinidad
más fuerte para la calcopirita en comparación con el Fe 2+ ion cultivar bacterias. Durante la biolixiviación de calcopirita por L. ferriphilum, formas de azufre en la
edad temprana y enriquece en la superficie de los minerales en todo el proceso, jarosita suelta genera al final de la biolixiviación. La tasa de extracción de
cobre baja en la etapa final de la biolixiviación es debido a la pasivación de la superficie de la calcopirita, que inhibe el transporte electroquímica entre la
solución de biolixiviación y la superficie mineral. El componente de la capa de pasivación es azufre, no jarosita.

EXPRESIONES DE GRATITUD

Este trabajo fue apoyado por el Programa Nacional de Investigación Básica de China (Nº 2010CB630903).

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