Informe N° 3 de Laboratorio de Microbiología Ambiental

Díaz Navarrete, Ludwig

Góngora Curi, Paolo
Loayza Gonzales, Renato
Loayza Pastor, Daniella
Milla Luna, Deyanira
Pandal Piélago, Franze
Vicente Hidalgo, Vivian
Recepción: //2018
Resumen
En este tercer laboratorio del curso de microbiología ambiental, se trató el tema de
muestreo, siembra e inoculación de microorganismos. Se tomaron muestras de agua y suelo
en tres sectores de la laguna ubicada en el campus Villa I de la Universidad Científica del
Sur. En el presente informe, se desarrollará la metodología de dicho muestreo y siembra de
microorganismos encontrados en dos muestras de agua y una de suelo del primer sector de
la laguna. Se disolvieron las muestras en agua destilada, se agitaron y se sembraron en
placas Petri con agar nutritivo estéril.

Palabras clave: ​Muestreo, Inoculación de microorganismos, Siembra.

Introducción
El presente informe se refiere a el muestreo, siembra e inoculación de microorganismos, el
cual se basa en primer lugar en la técnica de toma de muestras del lugar de estudio; para la
toma de muestras de nuestro Laboratorio se tomó en cuenta la existencia de la infinidad de
microorganismos en cualquier ambiente es por ello por lo que se eligió la laguna de Los
Pantanos de Villa que se encuentra en la UCSUR. En segundo lugar, la siembra es el proceso
de transición de una población microbiana(inóculo) de un cultivo de bacterias a un medio
nutritivo para su crecimiento. Asimismo, es importante que para evitar la contaminación por
alguna bacteria al momento de inocular el medio de cultivo es necesario trabajo con un radio
de 10cm frente a la llama del mechero Bunsen, asimiento todos los materiales deben estar
esterilizado.
Además, para determinar la población microbiana se utilizó 4 diferentes técnicas de siembra,
entre las cuales para la siembra de agua se encuentra la siembra por estría, basada en el
aislamiento de microorganismos, pero no de manera total y siembra por diseminación. Para la
siembra de suelo incluye la siembra por puntura, con el fin de aislar un tipo de
microorganismo y la siembra por cuadrantes.
Finalmente, el informe de laboratorio tiene como objetivo la determinación de la población
microbiana que se encuentra en una muestra mediante diferentes técnicas basadas en su
crecimiento poblacional. Asimismo, la importancia de las técnicas de aislamiento y del
cultivo y cuál es el procedimiento para identificar bacterias. De la misma manera se realizó
una revisión bibliográfica para un mayor conocimiento del tema tratado.

Materiales y metodología
Materiales
● Pico ● Placa petri
● Pala ● Beaker
● Frasco ● Cinta especial para esterilización
● Pipeta ● Cápsula magnética estéril
● Tubos de ensayo
● Varillas
● Asa de siembra
Equipos
● Agitador magnético
● Balanza de precisión
● Mechero Bunsen
● Autoclave

Áreas de estudio
Se recolectaron muestras de agua de la laguna de Villa 1 de la UCSUR y suelo ubicado a 1
metro de la orilla del cuerpo de agua. Para las muestras de agua se sumergió un frasco boca
abajo a 10-30 centímetros de la superficie. Una vez lleno se invirtió y se tapó. Para las
muestras de suelo se retiró la capa superior de césped y se extrajo 1 kilogramo del suelo, se
colocó en una bolsa y se mezcló.
Procesamiento de las muestras
Muestras de agua. –Se diluyen las muestras con factor ¼ (20 ml de muestra, 80 ml de agua
destilada). Con un agitador magnético de mezcla por 5 minutos.
Muestras de suelo. –Se diluyen las muestras con factor 1/20 (5 gramos de muestra, 100 ml de
agua destilada). Con un agitador magnético de mezcla por 5 minutos.
Siembra e inoculación
La primera muestra de agua se siembra por estría en agar nutritivo utilizando un asa de
siembra y el alambre de nicrom. La segunda muestra de agua se siembra por diseminación.
Luego de colocar 6 asadas se esparce sobre el agar nutritivo con la espátula Drigalsky.
Sembrar una muestra de suelo por puntura con el asa de siembra y el alambre de nicrom.
Sembrar una muestra de suelo por estría en cuadrantes. Una vez finalizado este proceso se
dejan reposar las placas cerradas a temperatura ambiente durante 48 horas.

Resultados
La muestras se tomaron dentro del campus de la Universidad Científica del Sur en Villa 1 .
Ficha de observaciones Ficha de observaciones

-Fecha: 12/04/18 -Fecha:12/04/18

-Muestra : Suelo -Muestra: Agua
-Grupo: G1 -Grupo: G1
-Sector: 1 -Sector:1
-Características -Características
● Color: Marrón ● Color: Verdosa
● Olor : Tierra ● Olor : Materia Orgánica
● Textura : Franco arenoso ● Ambiente : Instrucción humana
● Ambiente: Instrucción humana

SIEMBRA
Con las muestra de aguas se realizó siembra: ESTRÍA y DISEMINACIÓN
Con la muestra de suelo se realizó siembra: PUNTURA y POR CUADRANTE

Siembra por cuadrante Siembra por diseminación

Siembra por estría Siembra por puntura

Discusión de resultados

Conclusiones
Luego de realizar correctamente el muestreo de agua y suelo en el campus de la Universidad
Científica del Sur y de haber realizado los diferentes tipos de siembra, para agua(estría y
diseminación) y para suelo(puntura y por cuadrante), se observó luego de 48 horas la
presencia de microorganismos, asimismo en esta práctica, se concluyó que es esencial
conocer los diferentes medios y técnicas de cultivo, para poder adaptar a las necesidades
microbianas y facilitar el conteo de microorganismos.
También se aprendió a describir la morfología de las colonias que obtuvimos y que la
inadecuada manipulación de las placas petri, lejos del rango de 10 cm radio frente a la llama
del mechero, altera la presencia microbiana, notando la presencia de microorganismos no
deseados e impidiendo un adecuado conteo.
Referencias bibliográficas