UNIVERSIDAD POLITÉCNICA SALESIANA

INFORME DE LABORATORIO I

INTEGRANTES:

Fabian Quito

Tamara Hurtado

Yosselyn Tipán

Rade Upiales

Jenny Criollo

Tatiana Wampash

GRUPO#5

NIVEL: 3º
 1. TEMA: Fotosíntesis

2. OBJETIVO GENERAL: Establecer la importancia de los elementos de la

fotosíntesis y comparar morfológicamente las plantas con el proceso fotosintético

CAM, C3, y C4.

3. OBJETIVOS ESPECIFICOS:

1. Determinar la cantidad de clorofila total y de clorofila a y b presentes en una muestra

de hoja

2. Identificar las diferencias en la anatomía de plantas C3, C4 y CAM.

3. MARCO TEÓRICO

Todos los organismos que habitan la biosfera dependen de las plantas como fuente de energía,

debido a su capacidad de fijar dióxido de carbono por medio de la fotosíntesis para constituir

moléculas más complejas. Entre estas moléculas encontramos la glucosa, azúcar simple

precursor de compuestos orgánicos. La capacidad de las plantas para fijar carbono a través

del proceso fotosintético depende en gran medida de la cantidad de radiación disponible.

La fotosíntesis es un proceso biológico de foto-absorción de energía y foto-asimilación de

elementos esenciales. Durante la fase de foto-absorción de energía, la luz visible del espectro

radioactivo electromagnético incidente es absorbida diferencialmente por las moléculas de

los pigmentos vegetales, logrando que la energía lumínica sea transformada en energía
electroquímica. Esta energía es almacenada en dos biomoléculas estables NADPH (fuente de

poder reductor) y ATP (poder de enlace), necesarias para la fase siguiente. Durante la fase

de foto-asimilación de elementos esenciales, se asimilan los elementos constitutivos de la

materia orgánica a partir de fuentes minerales inorgánicas y se incorporan en biomoléculas

orgánicas metabolizables. Por ejemplo, la energía de la primera fase es usada en la conversión

de CO2 y agua en azúcares.

Existen diferentes tipos de pigmentos fotosintéticos que se encuentran en mayor o menor

proporción en las diversas especies; estos comprenden las clorofilas a y b, algunas xantofilas

y carotenos. Para su identificación y valoración se hace necesario un proceso de extracción

en el que se macera el tejido vegetal en presencia de un solvente orgánico

Plantas C3

Una planta "normal" —que no tiene adaptaciones fotosintéticas para reducir la

fotorrespiración— se llama planta C3. El primer paso del ciclo de Calvin es la fijación de

dióxido de carbono mediante la rubisco, y las plantas que utilizan solo este mecanismo

"estándar" de fijación de carbono se llaman plantas C3 el compuesto de tres carbonos (3-

PGA) que produce la reacción. Casi 85% de las especies de plantas del planeta son C3, como

arroz, trigo, soya y todos los árboles.

Plantas C4

En las plantas C4, las reacciones dependientes de la luz y el ciclo de Calvin están separadas

físicamente: las reacciones dependientes de la luz se producen en las células del mesófilo
(tejido esponjoso en el centro de la hoja) y el ciclo de Calvin ocurre en células especiales

alrededor de las venas de la hoja. Estas células se llaman células del haz vascular.

Un ejemplo de la fotosíntesis C4 en acción: Primero, CO2 atmosférico se fija en las células

del mesófilo para formar un ácido orgánico simple de 4 carbonos (oxaloacetato). Este paso

se lleva a cabo mediante una enzima no rubisco, PEP carboxilasa, que no tiende a unirse

al O2. Después, el oxalacetato se convierte en una molécula similar, malato, que puede

transportarse hacia las células del haz vascular. Dentro de estas, el malato se descompone y

libera una molécula de CO2. Luego, la rubisco fija el CO2 y lo convierte en azúcares a través

del ciclo de Calvin, exactamente como en la fotosíntesis C3.

Este proceso tiene su precio energético: se debe gastar ATP para que la molécula de tres

carbonos “ferry” regrese a la célula del haz vascular y quede lista para recoger otra molécula

de CO2 atmosférico. Sin embargo, dado que las células del mesófilo constantemente

bombean CO2 hacia las células del haz vascular vecinas en forma de malato, siempre hay

una alta concentración de CO2 en comparación con O2 alrededor de la rubisco. Esta

estrategia reduce al mínimo la fotorrespiración.

La vía C4 se utiliza en cerca del 3%, de todas las plantas vasculares; algunos ejemplos son

caña de azúcar y maíz. Las plantas C4 son comunes en hábitats cálidos, pero son menos

abundantes en zonas más frescas. En condiciones cálidas, los beneficios de una menor

fotorrespiración probablemente superan el costo en ATP de pasar CO2 de la célula del

mesófilo a las células del haz vascular.

Plantas CAM

Algunas plantas adaptadas a ambientes secos, como las cactáceas y piñas, utilizan la vía

del metabolismo ácido de las crasuláceas (CAM) para reducir al mínimo la

fotorrespiración. Este nombre proviene de la familia de las plantas crasuláceas en las cuales

los científicos descubrieron por primera vez esta vía.

En vez de separar las reacciones dependientes de la luz y el uso de CO2 en el ciclo de Calvin

en el espacio, las plantas CAM separan estos procesos en el tiempo. Por la noche, abren sus

estomas para que el CO2 se difunda en las hojas. Este CO2 se fija en el oxaloacetato

mediante la PEP carboxilasa (el mismo paso que usan las plantas C4), que luego se convierte

en malato o un ácido orgánico de otro tipo.

El ácido orgánico se almacena dentro de vacuolas hasta el día siguiente. Durante el día, las

plantas CAM no abren sus estomas, pero todavía pueden llevar a cabo la fotosíntesis. Eso se

debe a que los ácidos orgánicos se transportan fuera de las vacuolas y se descomponen para

liberar CO2, que entra en el ciclo de Calvin. Esta liberación controlada mantiene una alta

concentración de CO2 alrededor de la rubisco.

La vía CAM necesita ATP en varios pasos (no se muestran), así que, al igual que la

fotosíntesis C4 no es un "regalo" energético. Sin embargo, las especies de plantas que usan

la fotosíntesis CAM no solo evitan la fotorrespiración, sino que también usan el agua de

forma muy eficiente. Sus estomas solo se abren por la noche, cuando la humedad tiende a

subir y la temperatura a bajar, y ambos factores reducen la pérdida de agua de las hojas. Las

plantas CAM suelen predominar en zonas muy cálidas y secas, como los desiertos
Comparaciones entre plantas C3, C4 y CAM

Las plantas C3, C4 y CAM utilizan el ciclo de Calvin para formar azúcares a partir de CO2.

Estas vías para fijar CO2 tienen varias ventajas y desventajas y permiten que las plantas estén

aptas para diferentes hábitats. El mecanismo de las plantas C3 funciona bien en ambientes

frescos, mientras que las plantas C4 y CAM están adaptadas a climas cálidos y secos.

Las vías C4 y CAM han evolucionado independientemente muchas veces, lo cual indica que

pueden dar a las especies de plantas en climas cálidos una ventaja evolutiva considerable.

4. MATERIALES

CANTIDAD
DESCRIPCION POR CURSO POR GRUPO
Mortero y pistilo 1
Probeta (20 ml) 1
Embudo de decantación 1
Pipeta (20 ml) 2
Cubeta cromatográfica 1
Soporte universal 1
Erlenmeyer 1
Pinzas para sostener el embudo al soporte universal 1
Equipo de disección (tijera, pinzas, bisturí, aguja de disección) 1
Pisetas con agua destilada 1
bandejas para tintura 1
Contenedor para desechar tinturas 1
Placas porta y cubreobjetos 50

REACTIVOS
CANTIDAD
DESCRIPCION
POR CURSO POR GRUPO
acetona al 80% 125 ml 25 ml
Éter de petróleo 100 ml 20 ml
Carbonato de calcio 1g 0.2
Cloruro de sodio (10%) 600 ml 120 ml
Tetracloruro de carbono (fase móvil) 300 ml 60 ml
Safranina 5 goteros
Alcohol 70º 3 atomizadores
Glicerol:agua 1:3 5 goteros
Etanol 70% 5 goteros

EQUIPOS
Descripción Cantidad
Microscopio 1/grupo
Fotocolorímetro 1

5. REGISTRO DE RESULTADOS ESPERADOS

o Resultados:
Anatomía de las plantas c3, c4 y cam

La mayoría de las plantas son c3 y no tienen características especiales para combatir la

fotorrespiración.

Las plantas c4 reducen al mínimo la fotorrespiración separando la fijación inicial de CO

2 y el ciclo de Calvin en el espacio al realizar estos pasos en tipos de células diferentes.

Las plantas con metabolismo ácido de las crasuláceas (CAM) reducen al mínimo la foto

rrespiración y ahorran agua mediante la separación de estos pasos en el tiempo, entre el

día y la noche.

Lo que se observo fue que en las plantas c4 hubo fijación de mesófilos y haces vascula

res, mientras que en la c3 y la cam no hibo ningun tipo de fijación a pesar de haber reali

zado bien el procedimiento.

Obtención de la clorofila

La clorofila sabemos que es se componen de una cola hidrófoba (que le teme al agua) qu

e se inserta en la membrana del tilacoide y una cabeza de anillo de porfirina (un grupo c
ircular de átomos que rodean a un ion magnesio) que absorbe la luz.

La clorofila a se encuentra en todos los organismos fotosintéticos como plantas, ciertos

protistas, proclorobacterias y cianobacterias. Los pigmentos accesorios absorben energía

que la clorofila es incapaz de absorber. Los pigmentos accesorios incluyen clorofila b

(amarilla) y caroteno, anaranjado como el beta caroteno, un precursor de la vitamina A .

La clorofila a absorbe las longitudes de ondas violeta, azul, anaranjado- rojizo, rojo y

pocas radiaciones de las longitudes de onda intermedias ( verde-amarillo-anaranjado ), y

lo que obtuvimos fue un color amarillo indicando que hay mas presencia de clorofila b.

Clorofila a = (12,7x4.22)-(2,69x4,34) x 0.23/ 1000 x 3

Clorofila a= 0.1696

Clorofila b = (22,8x4,34)-(4,48x4,22) x 0,23 / 1000 x W

Clorofila b= 0.3153

Clorofila total = (20,2x4,34)+(8,02x4,22) x 0,23 / 1000 x W

Clorofila T: 0.31

Tasa del flujo

Rf: Distancia Recorrida por la sustancia/ Distancia Recorrida por el solvente

Interpretación
 Nombre Científico: Nombre Científico: Nombre Científico

Aloe vera Taraxacum officinale

Nombre Común: Nombre Común Nombre Común

Sábila Diente de león

Familia: Familia: Familia:

Xanthorrhoeaceae Asteraceae

Estructura estudiada: Estructura estudiada: Estructura estudiada:

Orientacion del corte: Orientacion del corte: Orientacion del corte:

Transversal Transversal Transversal

Preparación: Preparación: Preparación:

1. Realizar un corte fino de 1. Realizar un corte fino de 1. Realizar un corte fino

manera transversal a manera transversal a mano de manera transversal a mano

mano alzada en la parte alzada en la parte central de la alzada en la parte central de la

central de la hoja hoja hoja

2. Colocar en agua para 2. Colocar en agua para 2. Colocar en agua para

que no se deshidrate que no se deshidrate que no se deshidrate

3. Colocar sobre las placas Colocar sobre las placas de 3. Colocar sobre las placas de

de tinción tinción tinción

Tinción: Tinción Tinción

1. Colocar safranina en la 1. Colocar safranina en la 1. Colocar safranina en

placa con la muestra placa con la muestra la placa con la

2. Con agua eliminar el 2. Con agua eliminar el muestra

exceso de colorante exceso de colorante

3. Con el cuenta gotas se 3. Con el cuentagotas se 2. Con agua eliminar el

debe enjuagar con debe enjuagar con exceso de colorante

etanol, dejar por tres etanol, dejar por tres 3. Con el cuentagotas se

minutos, se debe repetir minutos, se debe repetir debe enjuagar con

tres veces este tres veces este etanol, dejar por tres

enjuague. enjuague. minutos, se debe

4. Luego de realizar los 4. Luego de realizar los tres repetir tres veces este

tres enjuagues con enjuagues con etanol, se enjuague.

etanol, se procede a procede a enjuagar con 4. Luego de realizar los

enjuagar con glicerina,de igual manera tres enjuagues con

glicerina,de igual se deja por tres minutos etanol, se procede a

manera se deja por tres y se vuelve a enjuagar se enjuagar con glicerina,

minutos y se vuelve a debe repetir tres veces. de igual manera se deja

enjuagar se debe repetir 5. para observar por el por tres minutos y se

tres veces. microscopio se debe vuelve a enjuagar se

5. para observar por el colocar una gota de debe repetir tres veces.

microscopio se debe glicerina y un 5. para observar por el

colocar una gota de cubreobjetos para microscopio se debe

glicerina y un observar. colocar una gota de

cubreobjetos para glicerina y un

observar. cubreobjetos para

observar.
Conclusiones

 Luego de colocar los diferentes tinciones se pudo observar de acuerdo a las

diferentes especies de plantas

 En la sábila se pudo observar gran cantidad de parénquima ya que son plantas que

almacenan gran cantidad de agua , ya que estas se desarrollan en ambientes secos

 En el diente de león se pudo observar que tiene gran cantidad de cloroplastos ya que

son los encargados de producir la fotosíntesis

 Las diferentes vías de fotosíntesis dependen a las condiciones ambientales en las

que se desarrolle o se adapte la planta

 Esto depende también de la estructura de cada una ya que los organelos y las vías

por las cuales la fotosíntesis se realice son diferentes.

Recomendaciones:

 Siempre macerar bien las hojas y dependiendo si las hojas o flor es dura o no ag

regar bastante o poco alcohol para tener una buena extractaron.

 No es recomendable que se le agregue mucho alcohol, mejor que vaya bien conc

entrada la mezcla para tener mejores resultados.

 La cromatografía en cajas Petri es bastante fácil y un buen método, más sin emb

argo la cromatografía en un vaso precipitado y una tira de papel filtro no es tan

buena o hay que tener mejores parámetros para que se realiza con éxito.

 no hay que dejar las muestras varias días porque pierde efectividad cuesta más
 obtener los resultados deseados en mejor las muestras al instante.

 siempre en necesario lavar bien los recipientes para tomar otra muestra ṕorqu

e puede ir residuos de la muestra anterior y darnos datos erróneos como result

ados.

Bibliografía
R, H. (03 de 2007). Libro Botánica Online. Obtenido de Realaciones hiricas en las plantas :
http://www.forest.ula.ve/~rubenhg/relahid/
Cátedra de Fisiología Vegetal, FAUBA. 2004. Las Plantas y el Agua. CEABA

Loomis R.S. y Connor D.J. 1992. Crop Ecology. Ed. Cambridge University Press -

Salisbury F.B. y Ross, C.W. 1985. Plant physiology. Wadsworth Publ. Co.