Professional Documents
Culture Documents
INFORME DE LABORATORIO II
TEMA:
Salomé Paredes
Darwin Quilumbaquín
Andrea Tafur
Tatiana Wampash
29/05/2018
Quito- Ecuador
2
INTRODUCCIÓN:
Los medios de cultivo es uno de los procedimientos que realizamos en esta práctica de
microbiología
Un cultivo es una técnica de laboratorio que consta de un gel o una solución que contiene los
Según lo que se quiera hacer crecer, el medio requerirá unas u otras condiciones generalmente
se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados; ya preparados
Una solución acuosa en donde se encuentran disueltas sales minerales que aportan los
Zn, Cu, Mo, y Co). Normalmente es imprescindible una fuente de carbono, generalmente la
sacarosa, debido a la escasa actividad fotosintética de los tejido in vitro. Además, el medio
puede ser enriquecido con Aminoácidos, Vitaminas y Reguladores del Crecimiento. Los
Madre o Stock). En la solución madre se pueden mezclar varias sales minerales siempre que
OBJETIVOS
General
3
Realizar un medio de cultivo para el desarrollo de los microorganismos in vitro con los
ESPECIFICOS:
- Observar las diferencias morfológicas que existen entre las colonias bacterianas de la misma
- Conocer las diferentes condiciones en las que se cultivan las bacterias, dentro de esto, conocer
los diferentes tipos de medios de cultivos que se utilizarán en el transcurso del curso y entender
su aplicabilidad.
MARCO TEÓRICO
nutrientes requeridos por los microorganismos. Dentro de los requerimientos básicos están:
hidrógeno.
Los medios de cultivo utilizados en microbiología se los puede clasificar de acuerdo a las
siguientes características.
1. Consistencia:
extraído de algas rojas al 1.5% (Agar). Ejemplo: Agar Sangre, Agar McConkey, TSI.
4
Medio SIM.
• Medios de Cultivo líquidos: no contienen agar y son los llamados caldos nutritivos como
2. Selectividad de Crecimiento:
de microorganismos, tanto Gram positivos como Gram negativos. Ejemplo: Agar Mueller
sobre un grupo de bacterias. Ejemplo: Agar McConkey, en el cual la adición de sales biliares
y cristal violeta inhibe el crecimiento de bacterias Gram positivas, haciéndolo selectivo para el
aislamiento de Enterobacterias.
Disponibilidad de Oxigeno:
Clostridum botulinum
5
Sin embargo existen bacterias que logran un crecimiento óptimo a temperaturas mayores o
menores.
pH: Controlado en el mismo medio por sistemas tampón. Impiden que los productos del
1. Pesa en la balanza la cantidad exacta de medio requerido para el volumen que planeas
preparar.
2. Coloca el medio de cultivo en un erlenmeyer, y afora con agua destilada hasta llegar al
volumen deseado.
4. Recuerda que el volumen que prepares no debe exceder el 70% de la capacidad total del
envase.
6. Autoclava el medio
7. Una vez autoclavado, deja enfriar el medio hasta que sea tolerable al tacto.
12. Trabaja siempre junto al mechero y evita hablar cuando repartas medio.
es básica y se utiliza de rutina para preparar y mantener cultivos, así como para realizar
procedimientos microbiológicos.
laboratorio y pueden ser causa de contaminación externa de nuestros cultivos. Para evitar esto,
superficie del medio de cultivo sólido con ayuda de un asa de inoculación. Los
microorganismos son esparcidos y su concentración en el asa decrece, tanto que puede crecer
una sola colonia aislada en las últimas estriaciones. Durante la técnica de estriación, la densidad
celular disminuye, dando lugar a que células individuales se depositen de forma separada en la
superficie del medio del agar. Si las células que se han aisladas correctamente, crecen solo
muestran a menudo distintas morfologías, color y textura en medios de cultivo. Las categorías
básicas de crecimiento incluyen, forma de la colonia, forma del margen, elevación, color y
textura.
7
La forma de las colonias puede ser descritas como circulares, irregulares o puntiformes. El
margen puede ser entera (liso, sin irregularidades), ondular (ondulado), lobulada (lóbulos),
(muy convexa), y umbonate (elevada en el centro). La textura de la colonia puede ser húmedo,
mucoso, o seco. La producción de pigmentos es otra característica útil y se puede combinar con
MATERIALES
CANTIDAD
DESCRIPCION
POR CURSO POR GRUPO
Asa de siembra 10 2
Hisopos estériles 5 frascos (25 1 frasco
hisopos c/u)
Cetrimide agar (en caja petri) 10 2
Mueller Hinton Agar 10 2
MacConkey Lactosa Agar 10 2
Manitol Salado Agar 10 2
EMB Agar 5 1
Aspersor con alcohol al 70% 5 1
Cepa Pseudomona aeruginosa en caja con Agar 2
nutritivo.
Cepa Pseudomona aeruginosa en caja con Agar 2
Cetrimida.
Cepa S.aureus en caja con agar nutritivo 2
Cepa S.aureus en caja de Agar Manitol. 2
Cepa S.aureus en caja de Agar sangre 2
Cepa Klebsiella en caja con agar nutritivo 2
Agar
8
Lactosa Agar
salado
Cajas de fósforos 2
REACTIVOS
CANTIDAD
DESCRIPCION
POR CURSO POR GRUPO
Alcohol al 70% Necesario para Necesario para
los aspersores los aspersores
EQUIPOS
CANTIDAD
DESCRIPCION
POR CURSO POR GRUPO
Incubadora a 37C 1
9
PROCEDIMIENTO
Método de siembra
estriación (Ver figura 1). Utilizando este método realice la siembra desde los cultivos
continuación.
sangre
(MKL) (MH) (MS)
Pseudomona X
S.aureus X X X X
S.epidermidis X
Salmonella X X
Klebsiella X X
Observe detalladamente los cultivos bacterianos que se les proporcionarán así como los
medios estériles con los que va a trabajar (Mueller Hinton, MKL, Cetrimida, EMB y
Manitol Salado).
Marcar e identificar las cajas/tubos a los que va a transferir, poner número de grupo,
Tomar un hisopo estéril y realizar el inóculo primario, luego con el asa de metal estéril
Esterilizar el asa luego de casa inóculo y proceder a realizar la siembra según lo indicado
Asegúrate que las tapas de las cajas petri estén hacia abajo.
RESULTADOS ESPERADOS
Se identificará la diferencia entre los medios de cultivo utilizados, y el crecimiento o
medio de la identificación clara de cada uno de los inóculos realizados durante la siembra.
12
CONCLUSIONES
RECOMENDACIONES
Para conocer los diferentes tipos de cultivos de bacterias es necesario tener todos los
medios de cultivos, ya que por falta de cultivo no se pudo realizar una siembra, en este
caso la seudomona.
También es necesario hacer las practicas con sus debidos implementos para empezar la
Bibliografía
MURASHIGE, T. ; SKOOG, F. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with
Prescott, Lansing M. Harley, John P. Klein, Donald A. (2009). Microbiología. Mc Graw Hill
Interamericana. Madrid. España.
Madigan M., Martinko, J. Parker J. (2007). Brock Biología de los Microorganismos. ISBN:
84-486-0261-7. Pentice-Hall. Madrid. España.
Leboffe.J y Pierce.E. (2011). A photographic Atlas for the Microbiology Laboratory. 4th
edition. MORTON. USA.
Merck (2012). Microbiology Manual. 12th Edition.
14