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U-2.

LIMPIEZA, DESINFECCION Y
ESTERILIZACION DE MATERIAL DE
LABORATORIO
U-2. LIMPIEZA, DESINFECCION Y ESTERILIZACION DE MATERIAL DE
LABORATORIO

Limpieza: Eliminación física de material orgánico o


partículas de los objetos. La limpieza no mata
microorganismos, sino eliminarlos de los objetos.
Desinfección: Procedimiento por el cual se destruyen
gérmenes patógenos que se encuentran en piel, mucosas,
ambiente etc… La desinfección de la materia viva se
llama antisepsia.
Esterilización: Procedimiento por el cual se destruye
formas de vida microbiana incluso sus formas
resistentes, como las esporas.

2.1- TIPOS DE LIMPIEZA

Limpieza a mano por frotación: Arrastre mecánico de la


suciedad con un cepillo, escobilla, esponja, agua y
detergente y posterior enjuagado con agua y/o destilada.
Limpieza a mano por inmersión: Colocar el material en
una solución de limpieza durante 20 o 30 min. sacar y
aclarar con agua y/o destilada.
Limpieza a máquina: Existen laboratorios con maquinaria
específica para lavado de material.
Limpieza de Trazas: Se emplean ácidos o bases para la
limpieza. Así las Trazas orgánicas (suero, sangre…) se
usan lejías o disolventes orgánicos y a continuación en
una solución de HC1 1N y aclarado con agua destilada.
Limpieza de vidrio:
Antes de empezar a limpiarlo:
En caso de material corrosivo, Vaciarlo y
enjuagarlo para evitar salpicaduras
En caso de contaminación biológica, debe
desinfectarse antes de proceder a la
limpieza mediante inmersión en agua con
lejía 20 – 30 min.
Casos Especiales:
Material con orgánicos resistentes: Se sumergen
24h en mezcla crómica, se enjuaga y se limpia.
Material con restos de tipo lipófilo: Eliminarlos
con papel y someterlo a la acción de un disolvente
orgánico, y después lavar con agua caliente y
detergente.
Material con manchas de colorante: Se limpia con
clorhídico 1N o mezcla crómica diluida y se
enjuaga con agua destilada.
Material con restos de agar solidificado: Se licua
previamente, se introduce al baño maría a 60º-70ºC
no verter en desagües.
Portaobjetos: Limpiar de forma habitual, aclarar
con agua destilada y se introduce en una solución
de alcohol etílico o alcohol etílico-éter etílico
1:1 para desengrasarlos. Secar con paño o en
estufa a 70ºC.
Pipetas: se enjuagan bajo el chorro y se colocan
dentro de un lavador de pipetas, de no tener se
meten en una probeta grande con agua y jabón con
la protección de proteger el fondo con algodón. De
no ser suficiente, sumergir en mezcla crómica
durante 24h y enjuagar con agua destilada.
Pipetas cuenta glóbulos: Enjuagar con agua
destilada y acetona, por último, se puede aspirar
con un secador.
Cámara cuenta glóbulos: Se sumergen en agua
destilada tibia y detergente con lejía diluida al
1/50, se enjuaga con agua destilada se seca con
secador o estufa y se les pasa un papel empapado
con alcohol-éter.
Limpieza de material diverso, aparatos y superficies
Material de plástico: Generalmente desechable,
limpiar igual que el vidrio pero teniendo en
cuenta que puede ser sensible a disolventes,
ácidos y mezclas crómicas.
Material óptico: Las lentes se limpian con cuidado
con papel para lentes, no usar otros materiales
por riesgo de rayar, una vez por semana pasar un
papel de lente empapado en xilol.
Material eléctrico: Desenchufar, con un paño
húmedo o con agua jabonosa o un algodón humedecido
en alcohol.
Superficies: Deberán estar cubiertas con papel de
filtro que actúa como aislante biológico. Se
limpiaran con un paño empapado en una solución de
lejía diluida.

3.- DESINFECCION Y ESTIRILIZACION

Microorganismo o gérmenes: Organismos muy pequeños visibles


sólo con la ayuda de un microscopio. (Bacterias, virus, hongos
y parásitos)

Microorganismo patógeno: El que cuando está en el organismo


causa una enfermedad o infección. Se dice Infectante si se
halla sobre otro material.

Microorganismos saprófitos: Son aquellos que se albergan en el


organismo, sin producir enfermedad.

Desinfección: Técnica de saneamiento, utilizando diversos


medios cuya misión es la destrucción de gérmenes patógenos
causantes de enfermedades.

Esterilización: Técnica de saneamiento que destruye gérmenes


patógenos, saprófitos y esporas, es decir, todo microorganismo
vivo que se encuentre en el objeto.

Material séptico: Material contaminado con gérmenes patógenos


y saprofitos

Material aséptico: Material estéril libre de todo germen.

Antisepsia: Cuando la desinfección es sobre tejidos vivos.

3.2.- METODOS DE DESINFECCIÓN.

3.2.1.- Métodos físicos

Ebullición o hervido: Sumergir el material en agua a


100ºC durante 30 min. Elimina la mayoría de los
patógenos pero no elimina esporas.
Rayos ultravioletas: Impiden la reproducción de gérmenes
patógenos. Se usan en la reducción de microorganismos
en zonas estériles para envases y campanas de flujo
laminar (Zonas de Microbiología y preparación IV y
nutrición parenteral)

3.2.2.- Métodos químicos.

Desinfectantes de alto nivel: Elimina la mayoría de


gérmenes incluidos virus y esporas.
Desinfectantes de grado medio: Igual que el anterior
pero no elimina virus ni esporas.
Desinfectantes de bajo poder: Solo elimina gérmenes
patógenos.

La mayoría de los desinfectantes son productos de síntesis y


deben tener estas propiedades:

Poder germicida lo mas alto posible y de amplio espectro


a bajas concentraciones
No ser toxico para el hombre, animales y plantas, ni
corrosivo para el material.
Poseer alto poder de penetración, soluble al agua y
fluidos celulares.
Económico y de fácil adquisición.
Inerte al material a tratar
Estabilidad y homogeneidad de composición y difusión.

3.2.3.- Desinfectantes de uso frecuente:

Alcohol etílico de 70º y de isopropílico: nivel medio


(piel, instrumentos y superficies)
Peróxido de Hidrógeno o agua oxigenada: según
concentración puede ser de nivel bajo (3%) o nivel alto
(30%) o antiséptico.
Glutaraldehído al 2%: Desinfectante de alto nivel
Compuestos clorados: Al disolverse en agua liberan cloro
y tiene acción desinfectante. De nivel medio.
Derivados del amonio cuaternario: De bajo nivel,
detergentes para limpiar y se suelen emplear con otros
desinfectantes. Tienen un efecto antiséptico sobre la
piel.
Compuestos Fenólicos: Efectivos a bajas concentraciones
contra formas vegetativas de bacterias pero no contra
esporas.

3.2.4.- Métodos de desinfección.

Inmersión: Sumergir los materiales en desinfectante


Loción: Empapar bayetas, esponjas o fregonas y frotar
con ellas.
Pulverización: Proyectar finas gotas sobre superficies.

3.3.- Métodos de esterilización.

Físicos:
Térmicos.
Térmicos por calor seco (Horno Pasteur)
Térmicos por calor directo
Flameado
Incineración
Térmicos por calor Húmedo (Autoclave)
No Térmicos
Filtros de membrana
Químicos:
Óxido de etileno (muy tóxico)
Aldehídos

3.4.- Control de calidad de la esterilización.

3.4.1.- Control del proceso

Físicos: Se efectúan mediante indicadores gráficos de


presión y temperatura.
Químicos:
Tiras reactivas: impregnadas de un compuesto que
cambia de color
Tubos de Brown
Biológicos (test de esporas): Mediante cultivo y un
indicador de pH