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CURSO : DETERMINACIÓN DE PERFILES

BIOQUÍMICOS EN MUESTRAS HUMANASII

DOCENTE : ROGELIO MELGAR PEREZ

INTEGRANTES :

 ARPASI BARTOLO ROY EDSON

 SOLORZANO CIRIACO YESSI
 ORDOÑEZ SANTAMARIA DEYSI
 TARAZONA GUTIERREZ LEYDI
 RAMIREZ CORNELIO ANDRES
 AYALA LOPEZ YACKELIN
 AMBICHO ARANDA SHEYLA
 INTRODUCCIÓN

Es un grupo de exámenes de sangre utilizados para medir los niveles de colesterol,

HDL, LDL y triglicéridos. El perfil puede ayudar a determinar su riesgo de cardiopatía.

El colesterol es una sustancia suave similar a la cera que se encuentra en todas las
partes del cuerpo. Su cuerpo necesita un poco de colesterol para funcionar
adecuadamente, pero demasiado colesterol puede taponar las arterias y llevar a que
se presente cardiopatía, accidente cerebrovascular y otros problemas.

Algunos tipos de colesterol se consideran "buenos" y algunos son considerados

"malos". Se necesitan exámenes de sangre diferentes para medir cada tipo de
colesterol.

Así pues el Colesterol Total es la medición más común de colesterol en sangre.

Representa la suma de todas las grasas en su sangre, lo que significa que esta
medición incluye C-LDL, C-HDL y triglicéridos. Por este motivo, es importante
centrarse en los tres niveles.
 OBJETIVOS

 Determinar los niveles de colesterol sanguíneo en sujetos aparentemente

sanos, empleando un método enzimático.

 Evaluar el control de los niveles circulantes de COLESTEROL, HDL, LDL Y

TRIGLICÉRIDOS en la sangre en sujetos jóvenes.

 Reconocer el método de diagnostico de COLESTEROL, HDL, LDL Y

TRIGLICÉRIDOS.

 Desarrollar habilidades para el procesamiento de COLESTEROL, HDL, LDL Y

TRIGLICÉRIDOS.

 Descartar el COLESTEROL, HDL, LDL Y TRIGLICÉRIDOS en los individuos

sometidos a la prueba.

 Dar a conocer la importancia de la prueba de COLESTEROL, HDL, LDL Y

TRIGLICÉRIDOS para la prevención y tratamiento preventivo de la
enfermedad
 PARTE TEÓRICA

EL COLESTEROL

El colesterol es el principal esterol del organismo humano y precursor de todos

los demás esteroides corporales. Se encuentra formando parte de membranas
celulares, lipoproteínas, ácidos biliares y hormonas esteroideas.

El colesterol es un importante constituyente de los cálculos biliares, pero su

principal función patológica, lo constituye la producción de aterosclerosis de
arterias vitales, causando enfermedad coronaria, cerebrovascular y vascular
periférica.

El origen del colesterol en el organismo tiene

dos fuentes, la externa y el que produce el
propio organismo. Debido a que el organismo
puede producir su propio colesterol, existe la
posibilidad que personas que no consuman
colesterol, tengan niveles sanguíneos elevados
por tener algún desorden genético –
metabólico que conlleva a dicha elevación. Estos desordenes son más común de
lo que se cree y son la principal causa de ateroma y de enfermedades vasculares,
entre ellas el infarto agudo al miocardio. Por esto la importancia de determinar
en forma precoz los niveles elevados de colesterol en los pacientes

El colesterol es sintetizado prácticamente por todas las células nucleadas del

organismo. El hígado es el principal órgano productor (10 % del total), siendo
otros órganos importantes en la producción el intestino, corteza suprarrenal,
testes y ovario. La síntesis del colesterol se halla regulada sobre todo por la
ingesta de colesterol en la dieta.

El colesterol por ser una grasa es poco soluble en agua, por lo que si se
transportara libre por la sangre sería en forma de gotas de colesterol y se vería
en nuestra sangre como gotas de grasa. Pero el caso, es que la naturaleza ha
ideado una manera de hacer soluble en agua al colesterol y transportarlo por la
sangre y esto es por medio de lipoproteínas.
Las lipoproteínas son complejos lipoproteicos mediante los cuales el colesterol,
ésteres de colesterol, los triglicéridos y fosfolípidos son transportados a través
de la sangre.

El colesterol asociado a las lipoproteínas de baja densidad se le denomina LDL –

colesterol, y se le conoce como "colesterol malo", ya que es la principal
lipoproteína que lleva el colesterol del hígado al resto del organismo.

Al colesterol asociado a la lipoproteína HDL se le denomina HDL – colesterol, y se

le conoce como "colesterol bueno" ya que su principal función es recoger el
colesterol de los tejidos, y llevarlo al hígado.

El aumento del LDL – colesterol a nivel sanguíneo lleva a un conjunto de proceso

que desembocan en la formación de placas inestables en las paredes de los
vasos sanguíneos, conocidos como ateromas. Estas placas reducen la luz de las
arterias y venas, y si una de estas placas se desprende puede producir ya sea un
infarto agudo al miocardio o en el cerebro un derrame.

FUNCIONES DEL COLESTEROL

El colesterol es imprescindible para la vida animal por sus numerosas funciones:

1° Estructural: el colesterol es un componente

muy importante de las membranas plasmáticas
de los animales (en general, no existe en los
vegetales). Aunque el colesterol se encuentra
en pequeña cantidad en las membranas
celulares, en la membrana citoplasmática lo
hallamos en una proporción molar 1:1 con
relación a los fosfolípidos, regulando sus
propiedades físico-químicas, en particular la
fluidez. Sin embargo, el colesterol se encuentra
en muy baja proporción o está prácticamente ausente en las membranas
subcelulares.
2° Precursor de la vitamina D: esencial en el metabolismo del calcio.

3° Precursor de las hormonas sexuales: progesterona, estrógenos y

testosterona.
4° Precursor de las hormonas corticoesteroidales: cortisol y aldosterona.

5° Precursor de las sales biliares: esenciales en la absorción de algunos

nutrientes lipídicos y vía principal para la excreción de colesterol corporal.

6° Precursor de las balsas de lípidos.

NIVELES DEL COLESTEROL SANGUÍNEO Y SU RELACIÓN CON EL INFARTO

AGUDO AL MIOCARDIO

La medición de solamente el colesterol sérico

total tiene valor limitado. Sin embargo cuando
se mide en conjunto con las diferentes
lipoproteínas sobre todo las LDL y las HDL
ofrece un panorama más amplio sobre la
probabilidad de producción de ateroma y por
lo tanto de riesgo de coronariopatías.

Los niveles normales séricos de colesterol varían con la población y suelen

aumentar con la edad. Dichos niveles a diferencia de los niveles normales de
otros metabolitos séricos carecen de relevancia. Esto en el sentido que los
valores normales indican los rangos medios en los que se encuentra una
población, sin decirnos si esos niveles son de riesgo o no de formación de
ateroma.

Por eso, aunque en lípidos se puede hablar de niveles normales es mejor utilizar
los niveles recomendables ya que estos sí nos indican riesgo de formación de
ateroma.

Como se mencionó existen varios tipos de hiperlipidemias que son importantes

de diagnosticar, sobre todo en niños y jóvenes, pues sus niveles de colesterol
circulantes son muy altos y por lo tanto los riesgos son elevados, sobre todo en
la tipo II y III. Además, existen muchos factores ambientales como la dieta, y el
fumado que también inciden en aumento de los niveles de lípidos sanguíneos.
 COLESTEROL HDL O COLESTEROL "BUENO"

El colesterol HDL es en realidad una

lipoproteína de alta densidad (sus siglas son en
inglés), que se encarga de transportar el
colesterol desde los tejidos al hígado, para su
metabolización.

¿Cómo actúa el colesterol bueno?

El colesterol bueno o HDL actúa, como bien dije antes, transportando el colesterol
desde los tejidos al hígado. Esto es muy importante porque esta lipoproteína cumple
la función de barrer el exceso de colesterol de los tejidos, arterias, vasos, etc, para
ser primero metabolizado en el hígado y luego eliminado por el organismo.

Tener un colesterol bueno o HDL mayor a 45 mg/dl en mujeres y mayor a 35 mg/dl

en hombres, ayuda a prevenir enfermedades como la ateroesclerosis, ya que esta
lipoproteína “limpia” las paredes arteriales de posibles depósitos de colesterol y de
esta forma evita una posible isquemia o infarto de miocardio.

Para poder mantener el colesterol HDL dentro de los valores normales es necesario
tener en cuenta una serie de factores:

 La alimentación baja en grasas saturadas y rica en fibra.

 Actividad física en forma periódica y constante, es importante combinar
ejercicios aeróbicos con ejercicios localizados.
 No fumar.
 No beber en exceso.
 El nivel de estrés.

En definitiva, lo importante es llevar adelante una serie de hábitos, que te permitan

mejorar tu calidad de vida y de esta forma evitar futuras complicaciones.

No olvides realizarte un chequeo periódico, tu salud y tu vida se lo merecen.

 EL COLESTEROL LDL O COLESTEROL "MALO"

Cuando circula demasiado colesterol LDL (malo) en la sangre, se puede acumular

lentamente en las paredes internas de las arterias que irrigan el corazón y el
cerebro. Junto con otras sustancias, puede formar placa, un depósito duro y grueso
que puede estrechar las arterias y hacer que sean menos flexibles.

A esto se le llama aterosclerosis. Si se forma un coágulo y obstruye una arteria

estrecha, puede ocurrir un ataque al corazón o un ataque al cerebro.

Cuando demasiado colesterol LDL circula en la sangre, éste puede poco a poco ir
creando una capa en las paredes internas de las arterias que alimentan al corazón y
al cerebro. En conjunto con otras sustancias puede formar una placa, un depósito
duro y grueso que puede tapar esas arterias.
Este padecimiento se conoce como aterosclerosis. Si un coágulo se forma y bloquea
una arteria ya estrecha, éste puede provocar un ataque cardiaco o un accidente
cerebrovascular.

Los niveles de
colesterol HDL y LDL
en la sangre se miden
para evaluar los riesgos
de tener un ataque
cardiaco.
El colesterol LDL de
menos de 100 mg/dL
es el nivel ideal.
Menos de 130 mg/dL
es casi lo ideal para la
mayoría de las
personas. Un nivel alto
de LDL (más de 160
mg/dL o 130 mg/dL o
más si tiene dos o más
factores de riesgo de
una enfermedad cardiovascular) refleja un aumento en el riesgo de una enfermedad
cardiaca. Esa es la razón por la cual el colesterol LDL se denomina con frecuencia
colesterol "malo".
 LOS TRIGLICÉRIDOS

Los triglicéridos son ésteres de alcohol glicerol con tres ácidos grasos (saturados
o insaturados) de distinta longitud. La unión de tres ácidos grasos mediante una
esterificación produce el triglicérido.

Una vez unidos se almacenan en el tejido

adiposo del cuerpo, para su posterior
utilización, siendo un almacén de grasas
rápidamente utilizables. Al igual que el
colesterol, debido a su escasa solubilidad
enagua, son transportados en el plasma
unido a apolipoproteínas. Las
lipoproteínas ricas en triglicéridos son los
quilomicrones (triglicéridos exógenos
derivados de la dieta) y las lipoproteínas
de muy baja densidad VLDL (de síntesis hepática).

Los triglicéridos forman la mayor parte del

peso seco del tejido adiposo,
constituyendo, por lo tanto, una potente
forma de almacenamiento de energía.

Los triglicéridos son el principal tipo de

grasa transportado por el organismo.
Recibe el nombre de su estructura
química. Luego de comer, el organismo
digiere las grasas de los alimentos y libera triglicéridos a la sangre. Estos son
transportados a todo el organismo para dar energía o para ser almacenados
como grasa.

El hígado también produce triglicéridos y cambia algunos a colesterol. El hígado

puede cambiar cualquier fuente de exceso de calorías en triglicéridos.
 FUNCIÓN BIOLÓGICA DE LOS TRIGLICÉRIDOS

 Constituyen la principal reserva

energética del organismo
animal (como grasas) y en los
vegetales (aceites). El exceso de
lípidos se almacena en grandes
depósitos en los animales, en
tejidos adiposos.

 Son buenos aislantes térmicos

que se almacenan en los tejidos
adiposos subcutáneos de los
animales de climas fríos como,
por ejemplo, las ballenas, el oso polar, etc.

 Son productores de calor metabólico, durante su degradación. Un gramo de

grasa produce 9,4 kilocalorías. En las reacciones metabólicas de oxidación, los
prótidos y glúcidos producen 4,1 Kcal.

 Dan protección mecánica, como los constituyentes de los tejidos adiposos que
están situados en la planta del pie, en la palma de la mano y rodeando el riñón
(acolchándolo y evitando su desprendimiento).
 BIOSÍNTESIS DE TRIGLICÉRIDOS

La síntesis de triglicéridos tiene lugar en el retículo endoplásmico de casi todas

las células del organismo, pero es en el hígado, en particular en sus células
parenquimatosas, los hepatocitos y en el tejido adiposo (adipocitos) donde este
proceso es más activo y de mayor relevancia metabólica. En el hígado, la síntesis
de triglicéridos está normalmente conectada a la secreción de lipoproteínas de
muy baja densidad (VLDL, su acrónimo en inglés) y no se considera un sitio de
almacenamiento fisiológico de lípidos. Por tanto, toda acumulación de
triglicéridos en este órgano es patológica, y se denomina indistintamente
esteatosis hepática o hígado graso. Por el contrario, el tejido adiposo tiene por
principal función la acumulación de energía en forma de triglicéridos. Sin
embargo, la acumulación patológica de triglicéridos en el tejido adiposo
(obesidad) se asocia, aparentemente de forma causal, con una serie de
anormalidades endocrino-metabólicas, cuyas causas son actualmente motivo de
intensa investigación, dado el impacto de ellas en la mortalidad global de la
población contemporánea. Una mínima cantidad de triglicéridos son
normalmente almacenados en el músculo esquelético y cardíaco, aunque
solamente para consumo local.
 TRANSPORTE DE TRIGLICÉRIDOS

El movimiento de ácidos grasos entre los distintos compartimentos del organismo se

produce con gran rapidez en respuesta a diversos estímulos (dieta, actividad física,
estrés, edad). Los triglicéridos (uno de los más importantes vehículos para el
transporte de ácidos grasos) varían también su concentración en respuesta a estos
factores fisiológicos.

Los triglicéridos circulantes tienen un origen

exógeno (de la dieta) o endógeno (de la síntesis
hepática). La depuración de los mismos depende
de la actividad de lipoproteína lipasa y de la
captación hepática de moléculas remanentes. Esa
depuración, a la vez, determina la eficiencia en la
formación de HDL. En líneas entrecortadas son
resaltadas las fracciones aterogénicas.

Los ácidos grasos liberados ingresan al tejido adiposo, para su almacenamiento,

nuevamente en forma de triglicéridos, o bien son utilizados, dependiendo de la
disponibilidad de fuentes combustibles y de las necesidades del organismo.

Posteriormente a la hidrólisis de triglicéridos, elementos restantes de las

lipoproteínas como fosfolípidos, ésteres de colesterol y algunas apoproteínas
(elementos proteínicos de las lipoproteínas plasmáticas), son transferidos a las
moléculas de HDL (lipoproteínas de alta densidad, por sus siglas en inglés) nacientes.
Por tal razón la depuración plasmática de partículas ricas en triglicéridos se
acompaña, por lo general de formación de moléculas de HDL.

Los ácidos grasos de cadena larga aparecen en el conducto torácico transportados

como triglicéridos en los quilomicrones, mientras que los ácidos grasos de cadena
corta y media se transportan fijados a la albúmina en la circulación portal.
 Mientras que los quilomicrones y las VLDL son
partículas ricas en triglicéridos, las LDL
(lipoproteínasde baja densidad) son ricas en
ésteres de colesterol. El colesterol total es, en
realidad, el colesterol plasmático de
virtualmente todas las lipoproteínas, mientras
que los triglicéridos son, fundamentalmente,
indicadores de la cantidad de triglicéridos en
quilomicrones y en VLDL.

De acuerdo con la fórmula de Friedewald,

aplicable a concentraciones de triglicéridos inferiores a 400mg/dl, las partículas
lipoproteínicas ricas en triglicéridos, portan una cantidad de colesterol que es,
aproximadamente, una quinta parte la de triglicéridos. Por lo tanto, hay una relación
directa entre triglicéridos totales y colesterol no-LDL, no HDL.

HIPERTRIGLICERIDEMIA

El término hipertrigliceridemia se usa para denominar el exceso de concentración

sérica de triglicéridos. De este modo una cantidad de triglicéridos superior a 200
mg/dL en sangre es considerada hipertrigliceridemia. Esta afección no tiene por qué
estar asociada a un aumento significativo en los niveles de colesterol.

El origen puede ser genético, afectando a varios miembros de una misma familia,
secundario a una enfermedad o a unos hábitos alimentarios y de vida poco
saludables.

Un nivel alto de triglicéridos puede provocar ateroesclerosis, lo cual incrementa el

riesgo de problemas cardiovasculares.

Para la determinación del nivel de triglicéridos es necesario realizar un análisis

sanguíneo precedido de 12 horas de ayuno.

Las personas diagnosticadas de hipertrigliceridemia deben someterse a un

seguimiento y educación por parte del personal sanitario.
 EXAMEN DE PERFIL LIPÌDICO

Es un grupo de exámenes de sangre utilizados para medir los niveles de colesterol,

HDL, LDL y triglicéridos. El perfil puede ayudar a determinar su riesgo de cardiopatía.

El colesterol es una sustancia suave similar a la cera que se encuentra en todas las
partes del cuerpo. Su cuerpo necesita un poco de colesterol para funcionar
adecuadamente, pero demasiado colesterol puede taponar las arterias y llevar a que
se presente cardiopatía, accidente cerebrovascular y otros problemas.

Algunos tipos de colesterol se consideran "buenos" y algunos son considerados

"malos". Se necesitan exámenes de sangre diferentes para medir cada tipo de
colesterol.

FORMA EN QUE SE REALIZA EL EXAMEN

Se necesita una muestra de sangre. Para obtener información sobre la forma como
se hace esto, ver el artículo: venopunción.

El médico puede ordenar sólo un nivel de colesterol como primer examen, el cual
medirá los niveles de colesterol LDL y HDL. Usted posiblemente no necesite más
exámenes de colesterol si éste está en el rango normal.

A usted también le pueden realizar un perfil lipídico (o de riesgo coronario), el cual

incluye:

 Lipoproteína de baja densidad (LDL o colesterol "malo")

 Lipoproteína de alta densidad (HDL o colesterol "bueno")
 Colesterol total
 Triglicéridos
 Lipoproteína de muy baja densidad (colesterol VLDL [por sus siglas en inglés],
aunque a menudo esto se calcula a partir del nivel de triglicéridos)

Las personas que también tengan niveles altos de triglicéridos pueden hacerse un
examen llamado colesterol LDL directo. (LDL-C directo).

Se pueden agregar otros exámenes de sangre, como proteína C reactiva (PCR), al

perfil en algunos laboratorios.
PREPARACIÓN PARA EL EXAMEN

A menudo, si le van a analizar sólo el nivel de colesterol, puede comer con

anticipación.

Si le van a analizar el perfil lipídico, no debe comer ni beber nada, a excepción de

agua, durante 9 a 12 horas antes de tomarle la muestra de sangre.

LO QUE SE SIENTE DURANTE EL EXAMEN

Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor
moderado, mientras que otras sólo sienten un pinchazo o sensación de picadura.
Posteriormente, puede haber algo de sensación pulsátil.

RAZONES POR LAS QUE SE REALIZA EL EXAMEN

Los exámenes de colesterol en la sangre se hacen para ayudarle a usted y al médico

a entender mejor su riesgo de cardiopatía, accidente cerebrovascular y otros
problemas causados por el estrechamiento o bloqueo de las arterias.

Un perfil de riesgo coronario se puede hacer para:

 Examinar adultos y niños en busca de niveles altos de triglicéridos y colesterol

en la sangre.
 Examinar adultos y niños que tengan diabetes, hipertensión arterial,
cardiopatía, accidente cerebrovascular o problemas conexos.
 Hacerle seguimiento a personas que han tenido niveles altos de colesterol.

ADULTOS:
Algunas pautas nacionales recomiendan hacerse el primer examen de colesterol a la
edad de 20 años. Toda persona debe tener su primer examen de detección hacia la
edad de 35 años en los hombres y 45 en las mujeres.
Las personas a quienes se le haya diagnosticado diabetes, cardiopatía, accidente
cerebrovascular o hipertensión arterial siempre deben hacerse un examen de
colesterol sin importar su edad.
Los exámenes de control deben hacerse:

 Cada 5 años si los resultados fueron normales.

 Con más frecuencia (más o menos cada año) para personas con diabetes,
hipertensión arterial, cardiopatía, accidente cerebrovascular o problemas de
circulación a las piernas o a los pies.
 Cada año si está tomando medicamentos para control del colesterol alto.
NIÑOS:

No todos los expertos están de acuerdo sobre cuándo examinar primero los niveles
de colesterol en los niños.

 Algunos expertos recomiendan sólo examinar a los niños que tengan factores
de riesgo, como antecedentes familiares de colesterol alto o un antecedente
de ataques cardíacos antes de los 55 años en los hombres y antes de los 65 en
las mujeres.
 Otros recomiendan examinar a todos los niños, pero muchos expertos creen
que no existe suficiente evidencia a favor o en contra de los exámenes de
colesterol en niños.

VALORES NORMALES

Los valores ideales dependen de si usted tiene cardiopatía u otros factores de

riesgo. El médico le puede decir cuáles deben ser sus resultados ideales.

Los valores deseados en la mayoría de los adultos son:

 Colesterol LDL: menor a 130 mg/dL (lo deseable son valores menores)
 Colesterol HDL: superior a 40 - 60 mg/dL (lo deseable son valores mayores)
 Colesterol total: menos de 200 mg/dL (lo deseable son valores menores)
 Triglicéridos: 10 - 150 mg/dL (lo deseable son valores menores)
 VLDL: 2 - 38

Hable con el médico respecto a los niveles ideales en los niños.

Nota: mg/dL = miligramos por decilitro.

Nota: los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes
laboratorios. Hable con el médico acerca del significado de los resultados específicos
de su examen.

Los ejemplos anteriores muestran las mediciones comunes para los resultados de
estas pruebas. Algunos laboratorios usan diferentes medidas o podrían evaluar
diferentes muestras.

SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES

Los valores anormales pueden ser un signo de que usted está en mayor riesgo de
sufrir cardiopatía, accidente cerebrovascular y otros problemas causados por el
estrechamiento o bloqueo de las arterias.
Cualquier enfermedad activa, como una reagudización de la artritis, puede cambiar
sus números de colesterol total. Si usted ha tenido una enfermedad en los 3 meses
antes de realizarse este examen, debe hacérselo nuevamente en 2 o 3 meses.

RIESGOS

Las venas y las arterias varían en tamaño de un paciente a otro y de un lado del
cuerpo a otro, razón por la cual obtener una muestra de sangre de algunas personas
puede ser más difícil que de otras.

Otros riesgos asociados con la extracción de sangre son leves, pero pueden ser:

 Sangrado excesivo
 Desmayo o sensación de mareo
 Hematoma (acumulación de sangre debajo de la piel)
 Infección (un riesgo leve cada vez que se presenta ruptura de la piel)

NOMBRES ALTERNATIVOS

Análisis de lipoproteínas y colesterol; Perfil lipídico; Lipidograma; Examen de

hiperlipidemia; Curva de riesgo coronario.

SIGNIFICANCIA CLÍNICA
El colesterol se encuentra en la sangre, bilis y tejido cerebral. Es precursor de los
ácidos biliares, esteroides, y vitamina D. su determinación contribuye al diagnostico
y clasificación de las dislipidemias.

Los triglicéridos son lípidos que en parte se absorben de la dierta y que también sin
producidos por el organismo a partir de carbohidratos. Su evaluación es importante
para el diagnóstico y seguimiento de las hiperlipidemias ya sean de origen genético
o secundario a enfermedades. Valores elevados aumentan el riesgo de
arterioesclerosis y de enfermedad coronaria.

FUNDAMENTO DEL MÉTODO

 El colesterol se determina por acción de las enzimas Colesterol Ester

Hidrolasa y Colesterol Oxidasa. La primera libera el colesterol de los
ésteres de colesterol, y la segunda oxida el colesterol libre
produciéndose peróxido de hidrogeno, el cual en presencia de la
 enzima peroxidasa reacciona con el sistema cromogénico dando
origen a un compuesto coloreado que absorbe a 505 nm.

 Los triglicéridos son hidrolizados por una lipasa específica liberando

ácidos grasos y glicerol. El gliceroles fosforilado por la enzima
gliceroquinasa y posteriormente, el glicerol 1 – fosfato es oxidado a
dihidroxiacetona fosfato por la enzima gilicerol – fosfato oxidasa,
generándose peróxido de hidrogeno. Posteriormente en una reacción
del tipo Trinder, el peróxido de hidrogeno reacciona con 4 –
aminoantipirina y el ácido 3,5 – dicloro – 2 – hidroxi – bencesulfonico
para producir por medio de la enzima peroxidasa un compuesto
coloreado en cantidad proporcional a la concentración de triglicéridos
presente en la muestra, midiéndose la absorbancia a 520nm.
 MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS

Antes de realizar los métodos y procedimientos tendremos en cuenta como primer

punto el lavado de manos donde utilizaremos como materiales jabón liquido,
escobilla, toalla.

 Tener una buena ubicación frente al

lavadero para evitar salpicaduras.
 Retiramos de las manos reloj, pulsera y
anillos, giramos la perilla del grifo
haciendo contacto con las manos y
frote las palmas haciendo espuma.
 Coloque la palma derecha sobre la
izquierda y frótese y luego haga lo
mismo pero a la inversa.
 Frótese las palmas con los dedos
entrelazados luego use la escobilla para las uñas.
 Frótese la parte posterior de los dedos con la palma
de la mano derecha e izquierda respectivamente.
 Lávese cada dedo pulgar como movimiento rotatorio
dentro de la palma de la mano opuesta.
 Frótese cada muñeca con la mano opuesta y luego los antebrazos
cierre el caño del lavadero, enjuagase y séquese es preferible usar
toallas de papel para luego desecharlo.

BARRERAS PROTECTORAS DE BIOSEGURIDAD QUE SON:

o Guantes
o Guardapolvo
o Mascarilla
o Lente
o Gorro
o Zapatos cerrados
 MÉTODO Y PROCEDIMIENTO DE COLESTEROL

Pasos para la prueba de colesterol:

 Se alista los materiales requeridos, rotulando el tubo

con el nombre del paciente que se va hacer la prueba.

 Explicar al paciente el procedimiento que le vamos a realizar, seleccionar la

vena mediante el tacto. Desinfectar el punto de punción y pinchar la piel y
posteriormente la vena y extraer la sangre.

1 2 3 4

 La muestra recolectada ponerlo en una gradilla y

llevarlo a centrifugar 3,500 r.p.m. por 5 minutos.
 llevando el reactivo de trabajo a la temperatura que se usara prepara tres tubos
(blanco, estándard, desconocido) tal como se indica en el cuadro.

Blanco Standard Desconocido

Muestra ------- ------ 0.01

(ml)

Standard -------- 0.01 ------

(ml)

Reac. De 1.00 1.00 1.00

trabajo
(ml)

 Mezclar e incubar 5 minutos a 37°C o 10 a

temperatura ambiente (>20°C)

 Pasar a calibrar el espectrofotómetro.

 Técnica –punto final
 Unidades – mg/dL
 Longitud de onda – 505
 Blanco bajo- 0
 Blanco alto-2,3
 Normal bajo-140
 Normal alto- 200
 Concentración de estándar – 200
 Linealidad- 600
 Tiempo de retardo – 3”
 Tiempo de lectura – 3”
 Ya calibrado el espectrofotómetro pasar agua 6 veces para lavar, luego leer
la absorbencia del blanco llevando a cero en el espectrofotómetro en seguida
leer el estándar por ultimo el desconocido.
 Anotar los resultados obtenidos.
 MÉTODO Y PROCEDIMIENTO DE TRIGLICÉRIDOS

Se trabajara exclusivamente con suero, la metodología utilizada es Colorimétrica-

Enzimática. La muestra de elección es suero fresco, claro y no hemolizado. La
muestra debe recolectarse por la mañana después de un ayuno de 12 horas.

Pasos para la prueba de triglicéridos:

 Se alista los materiales requeridos, rotulando el tubo

con el nombre del paciente que se va hacer la prueba.

 Explicar al paciente el procedimiento que le vamos a

realizar, seleccionar la vena mediante el tacto.
Desinfectar el punto de punción y pinchar la piel y
posteriormente la vena y extraer la sangre.

 La muestra recolectada ponerlo en una gradilla y

llevarlo a centrifugar 3,500 r.p.m. por 5 minutos.
 llevando el reactivo de trabajo a la temperatura que se usara prepara tres tubos
(blanco, estándard, desconocido) tal como se indica en el cuadro.

Blanco Standard Desconocido

Muestra ------- ------ 0.01

(ml)

Standard -------- 0.01 ------

(ml)

Reac. De 1.00 1.00 1.00

trabajo
(ml)

 Mezclar e incubar 5 minutos a 37°C o

temperatura ambiente (20° a 25°C)

 Pasar a calibrar el espectrofotómetro.

 Técnica –punto final
 Unidades – mg/dL
 Longitud de onda – 520
 Blanco bajo- 0
 Blanco alto-2,3
 Normal bajo-25
 Normal alto- 160
 Concentración de estándar – 200
 Linealidad- 800
 Tiempo de retardo – 3”
 Tiempo de lectura – 3”
 Ya calibrado el espectrofotómetro pasar agua 6 veces para lavar, luego leer
la absorbencia del blanco llevando a cero en el espectrofotómetro en seguida
leer el estándar por ultimo el desconocido.
 Anotar los resultados obtenidos.
 MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO DE HDL-COLESTEROL

 Se alista los materiales requeridos, rotulando el

tubo con el nombre del paciente que se va hacer la
prueba.

 Explicar al paciente el procedimiento que le vamos

a realizar, seleccionar la vena mediante el tacto.
Desinfectar el punto de punción y pinchar la piel y
posteriormente la vena y extraer la sangre.

 La muestra recolectada ponerlo en una gradilla y

llevarlo a centrifugar 3,500 r.p.m. por 5 minutos.

 Ya obtenida el suero realizar los siguientes: TUBO DE

Rotular un tubo de vidrio esteril y agregar con CENTRIFUGA
la micropipeta 0.5ml de reactivo precipitante. RVO.
Luego agregar con la micropipeta 0.2ml de PRESIPITANTE 0.5
(ml)
suero. Homogenizar y dejar reposar por 15
minutos a temperatura ambiente.
SUERO (ml) 0.2

 Pasado los 15 minutos llevar a centrifugar a 3,000 r.p.m por 15 minutos o

también puede se centrifugado por 10,000 r.p.m por 3 minutos.
 Ya obtenido el sobrenadante empezamos a procesar los siguientes pasos:
 Rotular tres tubos estériles blanco, estándar y desconocido
 Al blanco, al estándar y al desconocido agregar 1ml de reactivos de
colesterol.
 Al tubo standard agregar 0.01ml de estándar.
 Al tubo desconocido agregar 0.10ml de sobrenadante.

BLANCO ESTANDARD DESCONOCIDO

SOBRENADANTE --- --- 0.10

(ml)
ESTÁNDAR (ml) --- 0.01 ---
BLANCO (ml) 1.00 1.00 1.00

 Homogenizar cada tubo e incubar 10 minutos a 37° o 20 minutos a

temperatura ambiente (20° a 25°C).

 Pasar a calibrar el espectrofotómetro.

 Técnica –punto final
 Unidades – mg/dL
 Longitud de onda – 505
 Blanco bajo- 0
 Blanco alto-2,3
 Normal bajo-1
 Normal alto- 65
 Concentración de estándar – 76,5
 Linealidad- 600
 Tiempo de retardo – 3”
 Tiempo de lectura – 3”

 Ya calibrado el espectrofotómetro pasar agua 6 veces para lavar, luego leer

la absorbencia del blanco llevando a cero en el espectrofotómetro en seguida
leer el estándar por ultimo el desconocido.

 Anotar los resultados obtenidos.

 MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO DE LDL-COLESTEROL

 Se alista los materiales requeridos, rotulando el

tubo con el nombre del paciente que se va hacer la
prueba.

 Explicar al paciente el procedimiento que le vamos

a realizar, seleccionar la vena mediante el tacto.
Desinfectar el punto de punción y pinchar la piel y
posteriormente la vena y extraer la sangre.

 La muestra recolectada ponerlo en una gradilla y

llevarlo a centrifugar 3,500 r.p.m. por 5 minutos.

 Ya obtenida el suero realizar los siguientes: TUBO DE

Rotular un tubo de vidrio esteril y agregar con CENTRIFUGA
la micropipeta 0.5ml de reactivo precipitante. RVO.
Luego agregar con la micropipeta 0.05ml de PRESIPITANTE 0.5
(ml)
suero. Homogenizar y dejar reposar por 10
minutos a temperatura ambiente.
SUERO (ml) 0.05

 Pasado los 10 minutos llevar a centrifugar a 3,500 r.p.m por 15 minutos.

Extraer el sobrenadante dentro de los 10 minutos posteriores a la
precipitación.
 Ya obtenido el sobrenadante empezamos a procesar los siguientes pasos:
 Rotular tres tubos estériles blanco, estándar y desconocido
 Al blanco, al estándar y al desconocido agregar 1ml de reactivos de
colesterol.
 Al tubo standard agregar 0.01ml de estándar.
 Al tubo desconocido agregar 0.10ml de sobrenadante.

BLANCO ESTANDARD DESCONOCIDO

SOBRENADANTE --- --- 0.10

(ml)
ESTÁNDAR (ml) --- 0.01 ---
BLANCO (ml) 1.00 1.00 1.00

 Homogenizar cada tubo e incubar 10 minutos a 37°C o 20 minutos a

temperatura ambiente (20° a 25° C).

 Pasar a calibrar el espectrofotómetro.

 Técnica –punto final
 Unidades – mg/dL
 Longitud de onda – 505
 Blanco bajo- 0
 Blanco alto-2,3
 Normal bajo-1
 Normal alto- 129
 Concentración de estándar – 62,4
 Linealidad- 600
 Tiempo de retardo – 3”
 Tiempo de lectura – 3”

 Ya calibrado el espectrofotómetro pasar agua 6 veces para lavar, luego leer

la absorbencia del blanco llevando a cero en el espectrofotómetro en seguida
leer el estándar por ultimo el desconocido.

 Anotar los resultados obtenidos.

 MATERIALES Y EQUIPOS PARA LA PRUEBA DE COLESTEROL TOTAL

Tubo de ensayo Gradilla Guantes

Aguja Reactivo Centrifuga

Algodón alcohol al 70% Ligadura

Micorpipetas Tips Espectrofotómetro

Guardapolvo Gorro cloruro de sodio

REACTIVO DE COLESTEROL, TRIGLICERIDOS, HDL-COLETEROL Y LDL-COLESTEROL Y
SOLUCIÓN STANDARD
R
E
S
U
L
T
A
D
O
S
 CONCLUSIONES

 Determinar por medio de métodos tales como la espectrofotometría, la

concentración plasmática del colesterol total, colesterol HDL así como la del
colesterol LDL y trigliceridos.

 La determinación de un perfil lipidico tiene gran importancia clínica ya que se

puede emplear como un diagnostico primario de ciertas enfermedades, así
como también en el seguimiento de algunas enfermedades como: diabetes
mellitas, necrosis, obstrucción biliar y varias anormalidades metabólicas que
resultan de disturbios endocrinos

 El examen de colesterol total es un grupo de exámenes de sangre utilizados

para medir los niveles de colesterol. El perfil puede ayudar a determinar algún
riesgo de cardiopatía.

 Con frecuencia, este examen se hace para determinar los riesgos de

arteriopatía coronaria. El nivel alto de colesterol y triglicéridos en la sangre ha
sido asociado con ataque cardíaco y accidente cerebrovascular.

 Si bien esto es verdad hay que tener en cuenta también la importancia

biológica que tiene en el metabolismo y por lo tanto en nuestra salud.

 El colesterol es la materia prima para la formación de hormonas esteroideas,

como testosterona y estrógenos. Por otro lado le da fluidez a la membrana
celular, sin la cual muchas de las funciones celulares se verían seriamente
afectadas.

 Como pudo observarse durante la práctica, los valores de triglicéridos se

vieron afectados en gran parte por que algunos de los pacientes no habían
seguido el régimen de ingesta baja en grasas el día anterior a la práctica
además del ayuno necesario, sumado a ello, también hay que recalcar el
seguimiento de los pasos seguidos en la preparación de los reactivos.

 Es por ello que los valores obtenidos en cada una de las mesas de trabajo fue
variable (algunos con niveles altos y otros con niveles bajas).

 Según estudios recientes, los triglicéridos altos aumentan el riesgo de padecer

un accidente cerebro vascular. La hipertrigliceridemia sumada a una dieta
rica en grasas, a una vida sedentaria y otros factores como el estrés, el
cigarrillo y el alcohol trae como consecuencia, un aumento del riesgo de
padecer enfermedades coronarias.
 RECOMENDACIONES

1. Al entrar al laboratorio, el alumno deberá ponerse la bata y abotonarla

completamente, sólo podrá quitársela al salir de éste.

2. Las mesas deberán estar siempre limpias y desocupadas, las mochilas,

neceseres deberán ser colocadas en los cajones de las mesas de trabajo.

3. No comer en el laboratorio, no introducirse ningún objeto a la boca.

4. Limpiar y desinfectar el área de trabajo antes y después de usarla.

5. No pasear entre las mesas del laboratorio, el trabajo deberá efectuarse

sentado y en su equipo de trabajo.

6. Días antes de iniciar la práctica lea cuidadosamente que es lo que se va a

realizar, si no entiende pregunte al profesor.

7. Si hay necesidad de llevar material biológico para la realización de la práctica,

es necesario conseguirlo de lo contrario la práctica se suspenderá para todo
el equipo.
8. En caso de derramar reactivo, fluido corporal de aviso al profesor.
9. Lávese las manos con agua y jabón antes de salir del laboratorio.
10.Es obligación de cada grupo entregar todo el material que se a usado limpio y
sanos.

11.Realizarse un descarte de perfil lípido cada cierto tiempo.

12.Esterilizar siempre los tubos de ensayo para eliminar los microorganismos
para que no tengamos problemas con los exámenes a tratar, así no dar
resultados alterados.

13.Tener presente siempre el nivel de bioseguridad teniendo en cuenta la

conservación y la fecha de vencimiento del reactivo para que no haya
alteraciones en los resultados.

14.Se le recomienda estar en ayunas (12 horas) antes de realizarse la prueba del
perfil lípido.

15.La muestra con que se debe trabajar debe ser suero o plasma, y debe de estar
libre de hemólisis.

16.los anticoagulantes comunes como EDTA, heparina no producen interferencia.

17.Las determinaciones de los componentes lipídicos en suero o plasma se

realizan normalmente en sangre extraída de pacientes con ayuno de 12 a 16
horas. De lo contrario las muestras no son adecuadas ya que los resultados
elevados producidos por asimilación normal de los alimentos no se pueden
distinguir de los resultados elevados por metabolismo lipídico anormal o
errores congénitos del metabolismo.

18.si los triglicéridos no pueden analizarse dentro de las 25 horas, la muestra

debe congelarse a -20ºC.

19.La LDH puede encontrarse en todos los líquidos y tejidos orgánicos. Los
niveles sanguíneos más exactos se obtienen en suero más bien que en
plasma, dado que algunos anticoagulantes tales como el oxalato interfieren
en la reacción.

20.La hemólisis produce la liberación de la DHL (LDH) hacia el líquido orgánico,

dando posibles resultados falsamente elevados.

21.La muestra (suero) debe separarse del coagulo lo más pronto posible, ya que
los glóbulos rojos contienen 100 veces más LDH que el suero normal.
 CUESTIONARIO

1. ¿CUAL ES LA IMPORTANCIA BIOLOGICA DEL COLESTEROL?

El colesterol es una molécula compleja que generalmente se la ha asociado a los
peores riesgos cardiovasculares, por formación de ateromas o placa aterogénicas
en los vasos sanguíneos. Si bien esto es verdad hay que tener en cuenta también
la importancia biológica que tiene en el metabolismo y por lo tanto en nuestra
salud.

2. ¿DÓNDE SE FORMA EL COLESTEROL?

La mayor parte del colesterol que circula en la sangre se forma en el hígado
(70%) y la otra parte proviene de los alimentos que consumimos (30%).
La formación de colesterol por parte del hígado depende del tipo de grasa que se
consuma.
3. ¿QUE ES UNA DISLIPIDEMIA?
Las dislipidemias o dislipemias son una serie de diversas condiciones patológicas
cuyo único elemento común es una alteración del metabolismo de los lípidos,
con su consecuente alteración de las concentraciones de lípidos y lipoproteínas
en la sangre.

4. ¿QUÉ ES UNA MICROPIPETA?

La micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para succionar y
transferir pequeños volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las distintas
técnicas analíticas. Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear
distintos líquidos sin tener que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas
desechables, de plástico, que habitualmente son estériles. Existen varios tipos de
puntas: por ejemplo, las amarillas para pipetear volúmenes pequeños (por
ejemplo, 10 μl), y las azules para pipetear volúmenes grandes (por ejemplo, 800
μl).
5. ¿CÓMO SE PUEDE SOLUCIONAR EL PROBLEMA DE UNA MUESTRA
HEMOLIZADA?
Lo solucionamos bageteando nuevamente la muestra y lo llevamos a la
centrifuga.
Como evitar la hemolisis

6. ¿CUÁL ES LA IMPORTANCIA CLINICA DEL LDL?

El colesterol LDL es conocido como un factor de riesgo

independiente para las enfermedades coronarias. Aunque
la determinación de colesterol total haya sido utilizada
para el seguimiento de hipercolesterolemia, estudios
epidemiológicos recientes demostraron la importancia de
determinar los niveles sericos de LDL-C para la
identificación de pacientes de riesgo elevado.

7. ¿CUÁL ES LA COMPOSICION QUIMICA DEL LDL?

Transportadora de colesterol esterificado y lipasa

hepática. Se determinaron los siguientes factores
emergentes: homocisteína, fosfolipasa A2, ferritina,
PCR-hs (alta sensibilidad) y fibronectina proveniente
de la matriz extracelular.
8. ¿CUÁL ES LA FUNCION DEL LDL?
Transportar el colesterol desde el hígado al resto del cuerpo, para que sea
utilizado por distintas células.

9. ¿MENCIONES 4 DIFERENCIAS ENTRE SUERO Y PLAMA?

SUERO PLASMA

El suero se obtiene al extraer la El plasma se obtiene al extraer la

sangre sin anticoagulantes, luego
que la sangre se coagula ese líquido
amarillento que queda es el suero.
El suero no tiene proteínas de la
coagulación.
sangre con anticoagulantes (EDTA,
heparina, etc.).
El plasma tiene las proteínas de la
coagulación.

El suero carece de fibrinógeno El plasma contiene fibrinógeno.

El suero es la parte liquida que El plasma en un liquido de la sangre

queda de liquido orgánico, como en el que "se encuentran las células
sangre, leche, etc. sanguíneas, contiene principalmente
proteínas.

10.¿CUAL ES LA IMPORTANCIA DE LOS GUANTES?

Los guantes nos ayudan a protegernos de los

agentes patógenos y evita que tengamos
contacto con la sangre y otras muestras
biológicas humanas.
11.¿ CUAL ES LA IMPORTANCIA CLINICA DEL HDL

El HDL colesterol alto ayuda a contrarrestar al LDL colesterol ya que el LDL esta
asociado con un alto riesgo de la enfermedad cardiaca. Por este motivo La
determinación de HDL es una herramienta útil para el control de nuestra salud.

12.¿CUAL ES LA COMPOSICION QUIMICA DEL HDL?

HDL están compuestas por 45-55% de proteínas, 3-5% de

colesterol libre, 15-20% de colesterol esterificado, 2-7%
de triglicéridos, 26-32% de fosfolípidos.

13.¿CUÁL ES LA FUNCION DEL HDL?

La principal función del HDL es ayudar a absorber el exceso de colesterol de las

paredes de los vasos sanguíneos y llevarlo al hígado, donde es descompuesto y
eliminado del cuerpo a través de la bilis.

14.¿QUÉ ES LA CENTRIFUGA?

Una centrífuga o centrifugadora es una máquina que pone en rotación una

muestra para acelerar por fuerza centrífuga la decantación o sedimentación de
sus componentes o fases (generalmente una sólida y una líquida), en función de
su densidad. Existen diversos tipos de estos, comúnmente para objetivos
específicos.
15.¿QUÉ ES LA HEPARINA?
La heparina, un glicosaminoglicano altamente sulfatado, se utiliza
ampliamente como un anticoagulante inyectable, y tiene la mayor densidad
de carga negativa de cualquier molécula biológica conocida. También se
puede utilizar para formar una superficie anticoagulante interior en varios
dispositivos experimentales y médicos, tales como tubos de ensayo y
máquinas de diálisis renal.

16.¿DÓNDE SE ALMACENAN LOS TRIGLICERIDOS?

La acumulación de grasa corporal se mide a través de los niveles de colesterol

sanguíneo. Y si uno quiere saber de qué colesteroles se trata, aquí es donde entran
los triglicéridos. Los triglicéridos son un tipo de grasa, que, al igual que el colesterol,
se pueden medir en la sangre. La mayoría de la grasa del cuerpo son triglicéridos, y
son almacenados para ser convertidos en energía cuando hace falta. En conclusión
los triglicéridos se almacenan en el tejido adiposo.
17.¿CUÁL ES LA FUNCION DE LOS TRIGLICERIDOS?
Los triglicéridos son el principal tipo de grasa transportado por el organismo.
Luego de comer, el organismo digiere las grasas de los alimentos y la libera en
forma de triglicéridos a la sangre. Estos son transportados a todo el
organismo para dar energía o para ser almacenados como grasa. El hígado
también produce triglicéridos y cambia algunos a colesterol. El hígado puede
cambiar cualquier fuente de exceso de calorías en triglicéridos.

18.¿QUÉ SIGNIFICA 520NM?

Es la absorbancia de la luz que va a medir el rango variable de la longitud de

onda que sirve como el sistema de ajuste para una prueba de bioquímica.

19.¿QUÉ ES LA LIPASA?
La lipasa es una enzima ubicua que se usa en el organismo para disgregar las
grasas de los alimentos de manera que se puedan absorber. Su función principal
es catalizar la hidrólisis de triglicéridos a glicerol y ácidos grasos libres. Las lipasas
se encuentran en gran variedad de seres vivos.
20.¿QUÉ ES LA FOSFORILACION?

La fosforilación es la adición de un grupo fosfato inorgánico a cualquier otra

molécula. Su papel predominante en la bioquímica lo convierte en un importante
objeto de investigación sobre todo en la fosforilación de proteínas y de fructosa.
 BIBLIOGRAFÍA

 James Lar combe, pruebas en el área de bioquímica.

 Jesús Kumate, Onofre Muñoz. Manual de bioquímica. Decimosexta edición,

2001. Méndez Editores. Páginas 59-65.

 Sister LaurineGraff, prueba de triglicéridos, Editorial Médica Panamericana,

Editorial Buenos Aires 2009.

 TÉCNICAS Y MÉTODOS DE LABORATORIO CLÍNICO

José Manuel González de Buitrago Ed. Elsevier
 LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO CLÍNICO
Díaz Martín, Gustavo A.
 LA CLINICA Y EL LABORATORIO
Alfonso Balcells Ed. Elsevier
 MANUAL DE PRACTICAS DE LABORATORIO
Instituto Daniel AlcideS Carrion
 BIOQUÍMICA CLÍNICA Y PATOLOGÍA MOLECULAR
X Fuentes Arderiu Ed. Reverte
 http://www.pulevasalud.com/ps/contenido.jsp?ID=60315&TIPO_CONTENI
DO=Articulo&ID_CATEGORIA=47
ANEXOS