PROCEDIMIENTO PARA DETERMINACIÓN DE FIBRA DIETARIA

1. Etiquetar los vasos de precipitación, cápsulas, papel filtro y crisoles con el código
correspondiente para fibra dietaria total (FDTC, FDTP) así como para fibra dietaria
insoluble (FDIC, FDIP) incluidos un blanco para la total (FDTCB, FDTPB) y uno
para la insoluble (FDICB, FDIPB).

2. Pesar 1 ± 0.005g de muestra en cada vaso a excepción de los blancos

3. Adicionar a cada vaso 50 ml de buffer fosfato pH 6.0, ajustar el pH (6.0 ± 0.01) de

cada vaso adicionando ácido clorhídrico (5%) o hidróxido de sodio (5%) según se
necesite. Se agita la mezcla hasta que se disuelva completamente.

4. Añadir 50 µl de enzima α-amilasa, cubrir los vasos con papel aluminio y colocarlos
en baño maría a 95°C- 100°C por 30 minutos.

5. Sacar los vasos del baño maría para enfriarlos hasta los 60°C, lavar las paredes de
los vasos con 10ml de agua destilada para quitar cualquier adherencia de la muestra.

6. Ajustar la temperatura del baño maría a 60°C eliminando agua caliente y

adicionando agua fría.

7. Añadir a cada vaso 100 µl de enzima proteasa, cubrir con el papel aluminio e incubar
en el baño por 30 minutos.

8. Añadir 5ml de solución de ácido clorhídrico (0,561N) mientras se revuelve. Ajustar

el pH de cada vaso de 4.1- 4.8 adicionando ácido clorhídrico (5%) o hidróxido de
sodio (5%) según sea necesario. Es importante que los vasos permanezcan en el baño
a 60°C hasta que se ajuste el pH ya que la disminución de la temperatura puede
aumentar el pH.

9. Adicionar 200 µl de enzima amiloglucosidasa, agitar y cubrir el vaso con papel

aluminio luego colocar en el baño maría por 30 minutos.
 FIBRA TOTAL FIBRA INSOLUBLE

10. Adicionar a cada vaso 10. Filtrar lavando las paredes de los
aproximadamente 225ml de vasos dos veces con 10ml de agua
etanol al 95% precalentado a destilada pre-calentada a 70°C
60°C, cubrir con papel aluminio para desprender la muestra
y dejar precipitar por 1 hora a adherida, desechar el filtrado
temperatura ambiente.
11. Lavar secuencialmente los vasos
11. Filtrar el contenido de cada vaso con dos porciones de 15ml de
en el papel filtro, lavando las etanol al 95% y acetona, desechar
paredes de los vasos el filtrado
secuencialmente con dos
porciones de 15ml de etanol al 12. El papel filtro se dobla y coloca
78%, etanol al 95% y acetona, en la cápsulas o crisol según
desechar el filtrado corresponda

12. El papel filtro se dobla y coloca
en cápsula o crisol según
corresponda.
13. Colocar cápsulas y crisoles a
secar en la estufa a 103°C por 12
horas.
13. Colocar las cápsulas y crisoles en
la estufa a 103°C por 12 horas
para secarlos
14. Dejar enfriar en el desecador
luego registrar el peso.

14. Dejar enfriar en el desecador 15. De un residuo (cápsula) se

luego registrar el peso. determina proteína y del otro
(crisol) ceniza
15. De un residuo (cápsula) se
determina proteína y del otro
(crisol) ceniza.

Abreviaturas:

C= ceniza B= blanco
P= proteína