“AÑO DEL DIÁLOGO Y LA RECONCILIACIÓN NACIONAL”

“UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTOBAL DE

HUAMANGA”

ESCUELA DE PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

LABORATORIO DE INFECCIÓN E INMUNIDAD

=Práctica N° 13 EXAMEN DIRECTO CON HIDRÓXIDO DE POTASIO

AL 10 %

ALUMNA : AVILÉS SAAVEDRA, Bryan

HORA DE PRÁCTICA: Lunes 7- 9pm

AYACUCHO- PERÚ
2018
 UNSCH – MEDICINA HUMANA

EXAMEN DIRECTO CON HIDRÓXIDO DE POTASIO AL 10 %

Las escamas son laminillas formadas de

células epidérmicas que se desprenden
espontánea y mecánicamente de la piel; se
incrementan como respuesta a un proceso
infeccioso e inflamatorio.
♦ Los hongos productores de micosis
superficiales y cutáneas se encuentran
asociados al estracto córneo de la epidermis,
siendo necesario tratar las escamas para
eliminar el material queratínico y liberar las
estructuras micóticas, para su óptima
visualización.(1)
♦ Antes de tomar la muestra, interrogue al paciente sobre el uso de talcos o cremas en
el día del examen, para evitar la presencia de artefactos y dar resultados falsos
(negativos o positivos). (1)
♦ Igualmente, la muestra no debe tomarse cuando el paciente haya recibido tratamiento
antimicótico en los últimos 5-10 días, ya que los resultados pueden ser falsamente
negativos.
♦ Se recomienda limpiar el área afectada con gasa humedicida en alcohol o en agua
destilada estéril, con el fin de eliminar el polvo y los contaminantes ambientales
depositados en la piel.
♦ No se recomienda el uso de torundas de algodón, ya que las fibras del mismo pueden
interferir con el examen directo. (1)
♦ Las escamas suelen recolectarse por raspado con bisturí, en las márgenes de la
lesión, donde está el crecimiento activo del hongo. Se aconseja tomar muestras de
varias lesiones para obtener la mayor cantidad de escamas.(1)

FUNDAMENTO DEL MÉTODO:

El hidróxido de potasio al 10%, es una solución que disuelve la queratina y se utiliza

para muestras clínicas con abundantes células y restos celulares, sin afectar la
morfología de los elementos fúngicos, permitiendo su mejor visualización.(2)
Adicionalmente, se puede emplear colorante para pigmentar la pared de los hongos y
mejorar la visualización. La observación de hifas, permite sugerir la presencia de
invasión micótica.(3)
Tipo de muestra: Muestras clínicas de piel, uña y cabello.

MATERIALES:
Lámina portaobjeto 75 x 25 mm, limpia y desengrasada.
Lámina cubreobjeto 22 x 22 mm.
Pipeta de transferencia estéril de 2 mL.
Hidróxido de potasio al 10% (KOH10%)
Asa de siembra
Plumón marcador

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RECOLECIÓN DE LA MUESTRA Y OBSERVACIÓN

Recolección de piel seca o

algún cuerpo con queratina
que sirva de alimento para
los hongos.

Se le agrega la solución de
KOH al 10 % y se observa al
miscroscopio

Se observa en el
microscopio a 10X y luego a
40X. en esta muestra no hay
presencia de hifas o esporas

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Muestra con hongos ya

cultivados, con esta muestra
se va a trabajar

PROCEDIMIENTO:

Con un plumón marcador, escribir en el borde de la lámina portaobjeto el código de

la muestra clínica a examinar.
Colocar una gota del KOH al 10% en el centro de la lámina portaobjeto.

Esterilizar a la llama el asa de siembra.

Agregar con el asa de siembra, sobre la gota del KOH 10%, una porción de la
muestra clínica a examinar.

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Colocar una laminilla cubreobjetos encima de la preparación y dejar a temperatura

ambiente por tres minutos.
Observar al microscopio con objetivos de 10X y 40X.

OBSERVACIÓN:
Negativo: ausencia de elementos fúngicos
Positivo: se observa elementos fúngicos y se reporta de la siguiente manera:
● Presencia de hifas hialinas, tabicadas, o ambas.
● Presencia de levaduras.
● Presencia de hifas y levaduras.

Se observa la presencia de hifas hialinas

También observamos a las esporas

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Realizamos la tinción con Azul de Metilenos para observar mucho mejor

Con el objetivo 10 X Y
40X podemos observar
las hifas y esporas

ESPORAS

HIFAS

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BIBLIOGRAFÍA:
1. PDF | Técnicas de identificación. Available from:
https://www.researchgate.net/publication/266052838_Tecnicas_de_identificacion
2. http://bvs.minsa.gob.pe/local/minsa/2660-1.pdf
3. Guevara M, Urcia F, Casquero J. Manual de procedimientos y técnicas de laboratorio para
la identificación de los principales hongos oportunistas causantes de micosis humanas.
Lima: Instituto Nacional de Salud; 2007. Serie de Normas Técnicas N.º 44.

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