Comprensión cinética usando el perfil de reacción de RMN

La combinación de comprensión cinética y modelado de reacción se ha aplicado con éxito al

desarrollo de procesos desde el laboratorio hasta la planta de fabricación. Aunque ampliamente
utilizado en la química a granel, polímeros y la industria petrolera Lawrence Livermore Laboratorio
Nacional, no ha sido explotado en todo su potencial en industria farmacéutica. Presentamos una
metodología rápida y eficiente para el modelado cinético de reacciones químicas utilizando 1H
RMN monitoreo de reacción que se puede usar para el proceso de comprensión y desarrollo de
ingredientes farmacéuticos activos. Los parámetros que son importantes para el desarrollo de un
modelo bueno y confiable para la predicción y optimización de la reacción las condiciones son
discutidas. La hidrólisis del anhídrido acético se eligió para ilustrar la metodología porque es
mecánicamente y cinéticamente bien establecido.

El modelado de reacción usando datos de RMN ha sido el tema de múltiples trabajos de

investigación.5? 7 NMR junto con métodos in silico es una herramienta poderosa para el estudio
de la cinética de reacción. NMR espectroscopia proporciona datos estructuralmente ricos, de los
cuales es posible confirmar o dilucidar la estructura de los materiales de partida, productos
intermedios y productos.8 Es intrínsecamente cuantitativo, superando la necesidad de determinar
los factores de respuesta requeridos por otras técnicas como HPLC. No es intrusivo, y es
potencialmente capaz de detectar cada compuesto involucrado en el reacción proporcionada
núcleos activos de RMN están presentes y hay suficiente dispersión de la señal. A pesar de su
poder, la RMN no es la técnica de elección en el desarrollo de procesos farmacéuticos. Incluso en
las primeras etapas de desarrollo, el monitoreo de la reacción por La RMN tiende a ser usada
esporádicamente por RMN y / o especialistas en ingeniería química. Sin embargo, el producto
farmacéutico la industria está dando un mayor nivel de atención a la reacción comprensión como
una manera de garantizar la calidad de la actividad ingrediente farmacéutico (API) y proceso de
fabricación robustez a lo largo de todo su ciclo de vida. El mecanismo de la hidrólisis del anhídrido
acético ha sido ampliamente estudiado durante el siglo pasado.10 El intermedio el esquema
avanza a través de tres pasos irreversibles: adición de agua, eliminación y transferencia de
protones (Esquema 1), siendo la adición el paso limitante de velocidad.11

La reacción global se puede representar en una eq I. simplificada

La velocidad de hidrólisis,? D [Ac2O] / dt, se puede expresar como una función de la concentración
de ambos materiales de partida ([Ac2O]) y reactivo ([H2O]), eq II. El Arrhenius eq III da la
dependencia de la constante de velocidad (k) de hidrólisis en la temperatura (en Kelvin) y la
energía de activación (Ea), A siendo el factor de Arrhenius preexponencial y R el gas constante.

En las condiciones de un alto exceso de agua, la hidrólisis de anhídrido acético puede considerarse
pseudo primer orden, simplificando el cálculo de los parámetros cinéticos. El integrado la ley de
tasa se puede reordenar como la eq IV donde [Ac2O] 0 es la concentración inicial de anhídrido
acético. Trazando En [Ac2O] / [Ac2O] 0 contra el tiempo crea una línea recta con pendiente? k.
Esto puede repetirse para diferentes temperaturas. A partir de Arrhenius eq V, un gráfico en k
frente a 1 / T produce un línea recta donde Ea y In A se pueden determinar a partir del pendiente y
la intersección. Las reacciones de primer orden son raras en la industria farmacéutica. Por lo tanto,
en este estudio tratamos la hidrólisis del ácido acético anhídrido como un tipo de reacción de
segundo orden para demostrar nuestra metodología para una aplicación más general. En esta
contribución, los parámetros cinéticos A y Ea fueron calculado usando Dynochem12 a partir de
una serie de experimentos que incluyen variación de (1) concentraciones iniciales de reactivos y
(2) la temperaturas de reacción. Se usó 1H NMR para controlar el evolución del material de partida
y concentración del producto como función del tiempo

EXPERIMENTAL SECTION

La reacción se realizó en diferentes concentraciones y temperaturas (Tabla 1). Cada reacción fue
preparada por el adición de una cantidad apropiada de anhídrido acético y 750 μL de óxido de
deuterio (D2O) en un tubo de ensayo colocado en un aceite baño a la temperatura requerida.
Luego fueron mezclados en el tubo de ensayo, transferido a un tubo de RMN de 5 mm, también al
mismo temperatura, e inmediatamente colocado en el espectrómetro de RMN (Varian Inova 500
MHz equipado con una triple resonancia de 5 mm (1H / 15N / 13C) sonda), ajustado a la misma
temperatura que la del bañera. Una vez en el espectrómetro de RMN, la homogeneidad de el
campo magnético se ajustó mediante el ajuste gradiente en el eje z, y se adquirió una matriz de
experimentos 1H. La sonda tenía previamente ajustado y emparejado con una muestra de similar
composición. La demora entre el inicio de la reacción y la adquisición inicial se midió con precisión
para la mayoría de condiciones de reacción (Tabla 1). La duración del programa de pulso también
se tuvo en cuenta para obtener un valor de tiempo preciso. Los El curso de la reacción fue seguido
por 1H RMN. Parámetros clave están contenidos en la Tabla 1. Los datos se procesaron y
analizaron usando MestReNova, 6.1.1, construir 6384 (MestreLab Research). Las regiones de
interés fueron integrado, y los valores obtenidos se transfirieron a Dynochem (3.2.1.0) para
construir un modelo cinético.

RESULTS AND DISCUSSION

Los experimentos de RMN se adquirieron como se describe en el Experimental Sección. Los

experimentos fueron diseñados para cubrir una amplia rango de concentración de sustrato y de
temperatura para permitir una buena comprensión en un gran espacio de diseño. Dos picos
fueron observado en los espectros (Figura 1): uno que se agota y el otro aumentando con el
tiempo Corresponden a los protones de metilo de la anhídrido acético (2,19? 2,03 ppm) y ácido
acético (2,01? 1,886 ppm), respectivamente. Estas dos regiones fueron integradas, y el los valores
de las integrales se convirtieron en moles. Dynochem fue elegido para construir un modelo
cinético basado en tasa eq II, que describe la hidrólisis del anhídrido acético asumiendo una
cinética de primer orden para el ácido acético y el agua concentración. Ea y A son parámetros
cinéticos ajustables. Los experimentos resueltos en el tiempo (tiempo vs concentración) para
diferentes condiciones fueron importadas al programa y fueron utilizado para resolver la ecuación
de velocidad y calcular el valor óptimo para Ea y A. El algoritmo de ajuste de Levenberg?
Marquardt fue utilizado, que calcula diferentes perfiles de reacción teóricos por iterando Ea y A, y
busca la desviación mínima entre datos calculados y experimentales. Esto se expresa como la
suma de la desviación de cuadrados (SSQ) en la ecuación VI donde j es el experimento número, M
la cantidad de experimentos, i el número de punto y N la cantidad de puntos, (yij ? yjmod) es la
diferencia entre valores experimentales y calculados y wj un factor de peso para cada uno de los
diferentes experimentos.

El programa informa los mejores valores para Ea y A después de la convergencia o después de un

número máximo predefinido de iteraciones. Ea y A se informan con un intervalo de confianza
asociado, expresado como un porcentaje del valor del parámetro. En el caso de la hidrólisis del
anhídrido acético, se obtuvieron valores de ln A = 8,05 (1,02 s? 1 y Ea = 11,4 (0,4 kcal / mol)