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En el medio acuático, el cromo existe principalmente en forma de cromato [Cr(IV)]. Las formas
trivalentes [Cr(III)] se hidrolizan por completo en las aguas naturales, y el cromo se precipita como
hidróxido, quedando pequeñas cantidades en solución. Además, no hay evidencia que indique que
la forma trivalente sea letal para la salud humana. El cromo se usa extensamente en la industria
para hacer aleaciones, refractarios, catalizadores, oxido crómico y sales de cromato. El óxido
crómico tiene gran aplicación en la producción de ácido crómico en la industria del enchapado. La
sales de cromato se usan en pinturas y en la producción de “Solucion limpiadora” en los
laboratorios; la mayor parte de estas llega finalmente al sistema de alcantarillado. La intoxicación
por cromato causa enfermedades de la piel y lesión hepática. Hay algunas razones para pensar que
los cromatos son oncogénicos (carcinógenos); por esta razón, el nivel permisible en las aguas
potables ha sido restringido a 0.1 mg/l.
1. ocurrencia e importancia
romo (Cr) es el primer elemento en el grupo VIB en la tabla periódica; tiene un número atómico de
24, un peso atómico de 51.99 y valencias de 0 y 2 a 6. La abundancia promedio de Cr en la corteza
terrestre es de 122 ppm; en sólidos, el Cr oscila entre 11 y 12 ppm; en las corrientes promedia
aproximadamente 1 ug / L, y las aguas subterráneas en general son 100 ug / L. El cromo se encuentra
principalmente en el mineral de hierro y cromo (FeO-Cr2O3). El cromo se usa en aleaciones,
galvanoplastia y pigmentos. Los compuestos de cromato frecuentemente se agregan al agua de
refrigeración para controlar la corrosión.
En aguas naturales, el cromo trivalente existe como Cr3 +, Cr (OH) 2+ y Cr (OH) 4-; en la forma
hexavalente, el cromo existe como CrO42- y Cr2O72-. Se esperaría que Cr3 + forme complejos
fuertes con aminas, y sería adsorbido por minerales de arcilla.
El cromo se considera no esencial para las plantas, pero un oligoelemento esencial para los animales.
Los compuestos hexavalentes han demostrado ser carcinogénicos por inhalación y son corrosivos
para los tejidos. Las pautas de cromo para el agua natural están relacionadas con la dureza o la
alcalinidad del agua (es decir, cuanto más blanda es el agua, menor es el nivel permitido para el
cromo). La Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación recomienda
que el nivel máximo para las aguas de riego sea de 100 ug / L. El estándar de agua potable primaria
U.S.EPA MCL es 100 ug / L para el cromo total.
El método colorimétrico (B) es útil para la determinación de cromo hexavalente en agua natural o
tratada en el rango de 100 a 1000 ug / l. Este rango puede extenderse mediante la dilución o
concentración adecuada de la muestra y / o el uso de trayectos celulares más largos. El método de
cromatografía de iones con detección fotométrica (C) es adecuado para determinar el cromo
hexavalente disuelto en el agua potable, las aguas subterráneas y los efluentes de aguas residuales
industriales de 0,5 a 5000 ug / l. El método de espectrometría de absorción atómica electrotérmica
(3113B) es adecuado para determinar niveles bajos de cromo total (<50 ug / L) en agua y aguas
residuales, y los métodos de espectrometría de absorción atómica de llama (311B y C) y los métodos
de plasma acoplado inductivamente (3120 y 3125) son apropiados para medir concentraciones
totales de cromo hasta niveles de miligramos por litro.
3. Manejo de la muestra
Si se desea contenido de cromo hexavalente disuelto, entonces ajuste el pH del filtrado a entre 9.3
y 9.7 con solución tampón más 600 uL de NaOH 5N por cada 100 ml de muestra (3500-Cr.B.4b).
Algunas muestras pueden requerir más NaOH (5N o 1N). Alternativamente, utilice tampón sin NaOH
5N y agregue NaOH 1N según sea necesario dentro de las primeras 24 h para llevar el pH de la
muestra dentro del rango. Nunca diluya el volumen de muestra en más del 10%. Refrigere a <6 ° C.
Analizar con 28 d de colección. Si el pH no está dentro del rango apropiado, entonces analice la
muestra o ajuste su pH dentro de las 24 h.
Si se desea contenido total de cromo hexavalente, entonces ajuste el pH de las muestras no filtradas
a 9 con solución tampón más 600 uL de NaOH 5N por 100 ml de muestra (3500-Cr.B.4b). Algunas
muestras pueden requerir más NaOH (5N o 1N). Alternativamente, use tampón con NaOH 5N y
añada NaOH 1N según sea necesario dentro de las primeras 24 h para que el pH de la muestra se
encuentre dentro del rango. Nunca diluya el volumen de muestra en más del 10%. Refrigere a <6 °
C. Analizar dentro de los 28 días de la colección. Si el pH no está dentro del rango apropiado,
entonces analice la muestra o ajuste su pH dentro de las primeras 24 h.
MÉTODO COLORIMÉTRICO
1. Discusión general
a. Principio: Este procedimiento mide solo el cromo hexavalente, Cr (VI). Para la determinación total
del cromo, digiera la muestra con ácido (ver sección 3030) y siga con una técnica de análisis
instrumental adecuada. El cromo hexavalente se determina colorimétricamente por reacción con
difenilcarbazida en solución ácida. Se produce un complejo rojo-violeta de composición
desconocida. La reacción es muy sensible, la absortividad molar basada en cromo es de
aproximadamente 40000 Lg-1cm-1 a 530 o 540 nm. NOTA: datos de validación para 3500-Cr. Fue
desarrollado a 530 nm.
c. Control de calidad (QC): las prácticas de control de calidad consideradas como parte integral de
cada método se pueden encontrar en la sección 3020.
2. Aparatos
1) Espectrofotómetro, para uso a 530 o 540 nm, con una trayectoria de luz de 1 cm o más.
2) Filtro de fotómetro, que proporciona una trayectoria de luz de 1 cm o más y está equipado con
un filtro de color amarillo verdoso que tiene la máxima transmitancia a 530 o 540 nm.
b. Utensilios de laboratorio: empape todos los elementos reutilizables (vidrio, plástico, etc.),
incluidos los recipientes de muestra, durante la noche en detergente de laboratorio, enjuague y
empape durante 4 horas en una mezcla de ácido nítrico (1 parte), ácido clorhídrico (2 partes) y agua
de reactivo (9 partes). Enjuague con agua del grifo y agua de reactivo. NOTA: nunca use una solución
limpiadora de ácido crómico.
c. Medidor de pH: Une cualquier medidor de pH comercial. Estandarice y calibre según las
instrucciones del fabricante. Preste especial atención a la compensación de temperatura y al
cuidado de los electrodos.
3. reactivos
Use agua de reactivo (consulte la sección 1080) para la preparación del reactivo y el procedimiento
analítico.
a. Solución madre de cromo: disuelva 141,4 mg de K2Cr2O7 en agua y diluya a 100 ml; 1.00 mL =
500 ug Cr. PRECAUCIÓN: el cromo hexavalente es tóxico y se sospecha que es carcinógeno. Tratar
con cuidado.
b. Solución de cromo estándar: diluir 1,00 ml de solución de cromo a 100 ml; 1.00 mL = 500 ug Cr.
Prepare estandares de calibración en el momento del análisis
mi. Ácido sulfúrico, H2SO4 0.2N: Diluir 17 mL de H2SO4 6N a 500 mL con agua.
F. Ácido fosfórico, H3PO4, conc.
h. Hidróxido de sodio, 1N: disuelva 40 g de NaOH de impurezas metálicas de bajo nivel en 1 litro de
agua. Almacenar en una botella de plástico. Se pueden preparar volúmenes más pequeños.
i. Hidróxido de sodio, 5N: disuelva 200 g de NaOH de impurezas metálicas de bajo nivel en 1 litro de
agua. Almacenar en una botella de plástico. Se puede preparar un volumen más pequeño.
4. Procedimiento
a. Preparación de la curva de calibración: Para compensar posibles pérdidas leves de cromo durante
las operaciones analíticas, trate los estándares y las muestras con el mismo procedimiento. De
acuerdo con esto, la pipeta midió volúmenes de solución de cromo estándar (5 μg / ml) que
oscilaban entre 2,00 y 20,0 ml, para proporcionar patrones de 10 a 100 μg de Cr. en vasos de
precipitados de 250 ml o matraces cónicos. Dependiendo del pretratamiento utilizado en b a
continuación, proceda con el tratamiento posterior de los estándares como si fueran muestras.
Desarrolle el color en cuanto a las muestras, transfiera una porción adecuada de cada solución
coloreada a una celda de absorción de 1 cm y mida la absorbancia a 540 nm, usando como referencia
el agua de reactivo. Corrija las lecturas de absorbancia de los estándares restando la absorbancia de
un blanco de reactivo llevado a través del método. Construir una curva de calibración trazando los
valores de absorbancia corregidos contra microgramos de cromo en 102 ml de volumen final.
b. Tratamiento de la muestra: muestra de filtro a través de un filtro de 0,45 um. Use una porción de
muestra para enjuagar la unidad de filtro de la jeringa y el filtro, luego recoja el volumen requerido
de filtrado. Ajuste el pH entre 9,3 y 9,7 agregando 1 ml de tampón más 600 uL de NaOH 5N por cada
100 ml de muestra. Es posible que se requiera más NaOH (5N o 1N) para llevar el pH de la muestra
dentro del rango. Alternativamente, use el buffer sin el NaOH 5N, y agregue NaOH 1N según sea
necesario dentro de las primeras 24 horas para poner el pH de la muestra dentro del rango. Nunca
diluya el volumen de muestra en más del 10%. Envíe y almacene muestras a <6 ° C. Llevar a
temperatura ambiente antes del análisis. Analice las muestras dentro de los 28 días posteriores a la
recolección. Si el pH no está dentro de las primeras 24 horas. Las muestras de agua potable no
requieren filtración en el campo.
c. Desarrollo y medición del color: lleve las muestras a temperatura ambiente antes del análisis.
Agregue 0.25 mL (5 gotas) de H3PO4. Use 0.2N H2SO4 y un medidor de pH para ajustar la solución
a pH 2.0 + -0.5. Transfiera la solución a un matraz volumétrico de 100 ml, diluya a 100 ml y mezcle.
Agregue 2,0 ml de solución de difenilcarbazida, mezcle y deje reposar de 5 a 10 minutos para
obtener un desarrollo de color completo. Transfiera su absorbancia a 530 o 540 nm, usando agua
de reactivo como referencia. Corrija la lectura de absorbancia de la muestra restando la absorbancia
de una pieza en bruto realizada a través del método (consulte también la nota a continuación). A
partir de la absorbancia corregida, determine los microgramos de cromo presentes por referencia a
la curva de calibración. NOTA: Si la solución es turbia después de la dilución a 100 ml en c morada,
tome una lectura de absorbancia antes de agregar el reactivo carbazida y corrija la lectura de
absorbancia de la solución coloreada final restando la absorbancia medida previamente.
5. Cálculo
6. Precisión y parcialidad
Los datos de pruebas colaborativas de 16 laboratorios se obtuvieron en agua de reactivo, agua del
grifo, solución de NaCl al 10%, agua tratada de residuos industriales orgánicos sintéticos, lixiviados
de extracción EPA, agua de proceso, agua del lago y efluente de una planta de tratamiento de licor
de acero. Los datos de prueba arrojaron las siguientes relaciones:
1. Discusión general
Aunque este método se desarrolló utilizando un equipo comercial específico, el uso del equipo de
otro fabricante debería ser aceptable si se realizan ajustes apropiados.
b. Interferencias: las interferencias pueden provenir de varias fuentes. Use sales de grado analítico
para el tampón porque se pueden incluir trazas de cromo. Varias especies solubles de cromo
trivalente en la muestra se pueden oxidar a la forma hexavalente en medio alcalino en presencia de
oxidantes tales como peróxido de hidrógeno, ozono y dióxido de manganeso. La forma hexavalente
puede reducirse a la trivalente en presencia de especies reductoras en un medio ácido. La alta
concentración iónica puede causar sobrecarga de columna. Las muestras con alto contenido de
cloruro y / o sulfato pueden mostrar este fenómeno, que se caracteriza por un cambio en la
geometría de los picos. Los compuestos orgánicos que interfieren se eliminan por la columna de
protección.
c. Concentraciones mínimas detectables: Los niveles de detección del método obtenidos en un solo
laboratorio con un bucle de 250 uL fueron los siguientes:
d. Conservación de muestra y tiempo de retención: filtre la muestra a través de un filtro de 0.45 um,
use una porción de muestra para enjuagar la unidad de filtro de jeringa y el filtro, luego recoja el
volumen de filtrado requerido, ajuste el pH entre 9.3 y 9.7 agregando 1 ml de tampón más 600 uL
NaOH 5 N por 100 ml de muestra. Es posible que se requiera más NaOH (5N o 1N) para llevar el pH
de la muestra al rango. Alternativamente, use el buffer sin el NaOH 5N, y agregue NaOH 1N según
sea necesario dentro de las primeras 24 h para llevar el pH de la muestra al rango. Nunca diluya el
volumen de muestra en más del 10%. Envíe y almacene muestras a <6 ° C. Llevar a temperatura
ambiente antes del análisis. Analice las muestras dentro de los 28 días posteriores a la recolección.
Si el pH no está dentro del rango apropiado, analice la muestra o ajuste su pH a través de uno de los
métodos anteriores dentro de las primeras 24 h. Las muestras de agua potable no requieren la
finalización del campo. Envíe y almacene la muestra a 4 ° C. Llevar a temperatura ambiente antes
del análisis. analizar muestras dentro de las 24 h de la recolección.
2. Aparato
a. Cromatógrafo de iones equipado con una bomba capaz de entregar con precisión un flujo de 1 a
5 ml / min. Las partes metálicas de la bomba no deben contener muestras, eluyentes ni reactivos.
Los bucles de muestra deben estar disponibles, o el instrumento debe ser capaz de administrar de
50 a 250 uL inyecciones de muestra. La celda de absorción visible no debe contener partes metálicas
que entren en contacto con el flujo de muestra de eluyente. La celda debe ser utilizable a 530 nm.
Use recipientes presurizados de plástico para eliminar el eluyente y el reactivo posterior a la
columna. Use helio de alta pureza (99.995%) para presurizar el eluente y el recipiente reactivo
posterior a la columna.
c. Columna separadora, empaquetada con resina de intercambio aniónico de alta capacidad capaz
de resolver el cromato de otros constituyentes de la muestra.
d. Grabador, integrador o computadora para recibir señales del detector en función del tiempo.
e. Utensilios de laboratorio: empape todos los artículos reutilizables (vidrio, plástico, etc.)
incluyendo recipientes de muestra, toda la noche en detergente de laboratorio, enjuague y remoje
durante 4 horas en una mezcla de ácido nítrico (1 parte), ácido clorhídrico (2 partes) y agua de
reactivo (9 partes). Enjuague con agua del grifo y agua reactiva. NOTA: nunca use una solución
limpiadora de ácido crómico.
F. Jeringa, equipada con una conexión de tipo luer macho y una capacidad de al menos 3 ml.
g. pHmetro: use cualquier medidor de pH comercial. Estandarice y calibre de acuerdo con las
instrucciones del fabricante. Preste especial atención a la compensación de temperatura y al
cuidado de los electrodos.
3. reactivos
a. agua del reactivo: agua desionizada o destilada libre de interferencias a nivel de detección mínimo
de cada componente, se filtró a través de un filtro de membrana de 0,2 um y que tiene una
conductancia de menos de 0,1 uS / cm. Úselo para preparar todos los reactivos (ver sección 1080).
b. Solución madre de Cr (VI), 100 mg de Cr6 + / L: se prepara a partir de dicromato de potasio de
calidad estándar primaria. Disuelva 0.1414 g de K2Cr2O7 en agua y diluya a 500 ml en un matraz
aforado. El ajuste del pH no es requerido. Almacenar en plástico. PRECAUCIÓN: el cromo
hexavalente es tóxico y se sospecha que es carcinógeno, manipúlelo con cuidado.
tabla 1
F. Hidróxido de sodio, 5N: disolver 200 g de NaOH en 1 l de agua. Almacenar en una botella de
plástico. Se pueden preparar volúmenes más pequeños.
4. Procedimiento
b. Calibración: antes del análisis de la muestra, construya una curva de calibración utilizando un
mínimo de un blanco y tres estándares que marcan el rango de concentración de muestra esperado.
Prepare estándares de calibración a partir del estándar estándar (3b) mediante la dilución apropiada
con agua de reactivo en matraces aforados. Ajuste a pH 9 a 9.5 con solución tampón (3e) antes de
la dilución final. Los volúmenes de inyección de estándares deben ser aproximadamente 10 veces
el volumen del bucle de inyección para asegurar el enjuague completo del bucle.
c. Análisis de muestra: lleve la muestra enfriada y ajustada al pH a temperatura ambiente. Llene una
jeringa limpia con la muestra, coloque un filtro de jeringa de 0.45 um e inyecte 10 veces el volumen
del bucle de muestra en el instrumento. Diluya cualquier muestra que tenga una concentración más
alta que el estándar de calibración más alto.
5. Cálculo
Determine el área o la altura del pico de Cr (VI) en los cromatogramas estándar de calibración.
Establezca una curva de calibración realizando un análisis de regresión de la altura del pico o el área
del pico contra la concentración estándar en mg / L. Si el coeficiente de correlación es menor a
0.995, no use estos datos. Verifique el proceso analítico.
Para las muestras, mida el área (o la altura) del pico de Cr (VI) en el cromatograma de muestra,
según lo determinado por el tiempo de retención. Se calcula la concentración Cr (VI) mediante la
interpolación de la línea de calibración. Se corrigen los datos de cualquier dilución hecha. La
instrumentación actualmente disponible automatiza todo el proceso de medición (medición
máxima, calibración, y mediciones y cálculos de muestra). Debe asegúrese de analizar suficientes
muestras de control de calidad para monitorear los procesos instrumentales.
Tabla 2
6. Control de calidad
Las prácticas de control de calidad que se consideran parte integral de cada método se pueden
encontrar en la sección 3020.
a. Demostración inicial del rendimiento: antes del análisis de la muestra, configure el instrumento y
analice suficientes muestras conocidas para determinar las estimaciones del nivel de detección del
método y el rango de calibración lineal. Utilice la demostración inicial del rendimiento para
caracterizar el rendimiento del instrumento, es decir, los niveles de detección del método (MDL) y
el rango de calibración lineal.
c. Análisis del reactivo en blanco: analizar un reactivo de laboratorio en blanco con cada lote de
muestras. Cr significativo (VL) detectado en el reactivo en blanco es un signo de contaminación.
Identificar la fuente y eliminar la contaminación.
d. Análisis de matriz fortificada con laboratorio (también conocida como punta de matriz): a un
porcion de una muestra, agregue una cantidad conocida de Cr (VI). Después del análisis, calcule el
porcentaje de recuperación de la adición conocida. Si la recuperación cae fuera de los límites de
control (típicamente del 75 al 125%), la matriz puede estar interfiriendo con el análisis. Si se piensa
que hay interferencias de matriz, utilice el método de adiciones estándar, si corresponde, para
minimizar el efecto de las interferencias. NOTA: hay situaciones en las que se pueden superar
recuperaciones bajas de adiciones de analito, o en las que los resultados del analito no detizado se
pueden validar aún más mediante la aplicación del método de tres puntos de adición estándar. La
decisión de aplicar el método de adiciones estándar debe ser una función del logro de los objetivos
de calidad de datos deseados.
Analice muestras de matrices fortificadas tan frecuentemente como lo dicten los objetivos del
proyecto y la similitud anticipada de las matrices en el conjunto de muestras.
e. Muestra de control de laboratorio: analice una muestra de control de laboratorio (LCS) de una
fuente externa con cada lote de muestra. Procese el LCS y las muestras de forma idéntica, incluido
el filtrado y el ajuste del pH. Criterios básicos de aceptación para la recuperación de LCS en los
objetivos del proyecto para precisión y sesgo. Los valores típicos para la recuperación aceptable van
del 90 al 110%.
7. Precisión y parcialidad
Las condiciones de operación del instrumento y los datos de una única prueba de laboratorio del
método se muestran en las tablas 1 y 2, respectivamente.
Tabla 3
Las once muestras de agua consistieron en un reactivo de agua en blanco y cinco pares de agua. Las
nueve muestras de aguas residuales consistían en un blanco de agua residual y cuatro pares de
youden.